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研究背景:ussing chamber系统是上世纪四五十年代由Hans ussing发明首先应用于上皮细胞的离子转运。由于能比较真实地反映各种上皮细胞在体内的实时状态,到目前已经应用到药学、生理学、病理学等多门学科。ussing chamber是一种研究离子转运的有效方式,因此可以反映肠上皮的药物吸收的机制、黏膜的通透性、肠道微生物的作用及内毒素的移位等。目的:探讨参苓白术散及其主要成分对正常大鼠黏膜的上皮离子转运的作用。方法:应用ussing chamber技术,取正常大鼠的远端结肠黏膜,在两侧灌流室加入5mlKHS液,按照不同浓度分别加入50、100、200、400、600、800、1000μL不同药物,观察不同浓度的白术、茯苓、党参、山药、莲子、扁豆对远端结肠黏膜的离子通道所产生的电流影响,比较它们之间的所产生效果的异同。结果:白术能够抑制大鼠远端结肠的短路电流,使其产生一个向下的电流,与正常大鼠的基础电流10.00±5.38μA比较,200、400、600、800μL的白术使电流下降了232.4%、273.4%、45.3%、111.7%。而茯苓、党参、山药、莲子、扁豆则能够刺激大鼠远端结肠的短路电流,使其产生一个向上的电流,加入茯苓后,与正常大鼠的基础电流1.98±1.71μA比较,200、400、600、800、1000μL的茯苓使电流下降了310.1%、489.6%、717.2%、1038.4%、343.9%;加入党参后,与正常大鼠的基础电流5.47±4.77比较,50、200、400、600、800、μL的党参使电流下降了153.8%、1633.6%、1 139.12%、755.4%、504.8%、100.9%;加入山药后,与正常大鼠的基础电流8.65±4.25μA比较,200、400、600、800μL的茯苓使电流下降了177.2%、446.8%、299.8%、359.7%;加入莲子后,与正常大鼠的基础电流4.75±3.86μA比较,100、200、400、600、800、1000μL的茯苓使电流下降了578.9%、821.1%、989.5%、1278.9%、2465.2%、1368.4%:加入扁豆后,与正常大鼠的基础电流7.20±4.22μA比较,200、400、600、800μL的茯苓使电流下降了183.3%、256.7%、331.9%、39.6%。结论:参苓白术散及其主要成分能够影响上皮细胞的离子转运,而且可能是通过影响不同的离子通道发生作用的。

关键词：参苓白术散结肠离子转运 ussing chamber 短路电流

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黄芪多糖的体外抗炎活性研究

黄芪多糖的体外抗炎活性研究

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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第七届中国饲料营养学术研讨会

作者：王筱霏武圣儒李世召李玉龙姚军虎杨小军西北农林科技大学动物科技学院

黄芪多糖(APS)是中药黄芪的重要提取成分,具有广泛的生物学活性,如免疫调节、抗炎、抗菌、抗寄生虫、抗癌、抗氧化和抗辐射等。近年来,APS因副作用小,已经被广泛用于兽医临床中。本试验采用脂多糖(LPS)刺激建立的Caco2细胞体外炎症模型... 详细信息

黄芪多糖(APS)是中药黄芪的重要提取成分,具有广泛的生物学活性,如免疫调节、抗炎、抗菌、抗寄生虫、抗癌、抗氧化和抗辐射等。近年来,APS因副作用小,已经被广泛用于兽医临床中。本试验采用脂多糖(LPS)刺激建立的Caco2细胞体外炎症模型,研究不同的添加方式和剂量对APS抗炎效果的影响,以期为在生产中利用APS调节家禽免疫性能提供理论依据。试验选取Caco2细胞系经脂多糖(LPS)刺激后建立的细胞

关键词：黄芪多糖体外炎症模型抗炎活性 Caco2细胞 ussing chamber

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仔猪小肠钠离子依赖性的氨基酸转运

仔猪小肠钠离子依赖性的氨基酸转运

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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会

作者：王斌王薇薇刘闯戴兆来武振龙伍国耀中国农业大学动物营养国家重点实验室

本文旨在利用ussing chamber技术研究哺乳仔猪空肠对六种氨基酸的钠离子依赖转运机制,探讨不同浓度氨基酸在空肠转运的差异和特点。选取16头16天哺乳仔猪,平均体重为3.26kg,液体代乳料饲喂2周。试验期末,于采食后2h屠宰,打开腹腔,取空... 详细信息

本文旨在利用ussing chamber技术研究哺乳仔猪空肠对六种氨基酸的钠离子依赖转运机制,探讨不同浓度氨基酸在空肠转运的差异和特点。选取16头16天哺乳仔猪,平均体重为3.26kg,液体代乳料饲喂2周。试验期末,于采食后2h屠宰,打开腹腔,取空肠中段约10cm,用预冷的Krebs-Henseleit缓冲液洗去肠内容物。迅速将空肠分为长度约lcm的6个肠段,分别安装在ussing chamber检测仪的6个通道上,小肠在灌流室中的暴露面积是0.5cm。分别检测小肠对不同浓度(0mmol/L.0.5mmol/L.1.0mmol/L,2.0mmol/L,5.0mmol/L)的羟脯氨酸(OH-Pro)、甘氨酸(Gly)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)和谷氨酸(Glu)的空肠转运能力,记录短路电流值Isc。实验表明:(1)空肠初始短路电流Isc为25.8μA/cm。(2)不同氨基酸,不同浓度所引起的短路电流变化倍数=(某一浓度氨基酸引起的短路电流除以0mmol/L浓度时的短路电流)存在极显著差异(P<0.01)。其中Glu引起的短路电流变化倍数(0.5mmol/L,1.0mmol/L,2.0mmol/L,5.0mmol/L时分别为1.10,1.9,2.01,2.01)最大,其次为Thr(1.41,1.90,1.86,1.92)、Ser(1.38,1.55,1.68,1.70)、Gly(1.14,1.26,1.33,1.35)、OH-Pro(1.15,1.19,1.26,1.27)和Arg(1.09,1.21,1.29,1.29)。氨基酸转运能力可以反映肠道对氨基酸的吸收能力,另外,氨基酸的转运载体的离子依赖性会影响水分的吸收。(3)无氧条件下,Isc显著下降(p<0.01),处理10min,AIsc=(某一浓度氨基酸引起的短路电流减去0mmol/L浓度时的短路电流)为-12.53μA/cm;通入氧气后,Isc显著回升(P<0.01),△Isc为2.77μA/cm;继续通氧,Isc又显著下降,1 h后,△Isc为-27.25μA/cm。氨基酸转运是耗能的主动运输过程,缺氧就会造成供能不足,原发性的Na-K-ATP酶泵无法启动,Na耦联协同运输和反向转运都无法进行。从而引起氨基酸转运受阻,短路电流下降。氧气恢复会短期提高氨基酸转运,但由于充氧后引起的氧化应激和组织损伤,最终造成了肠道转运能力不可逆转的下降。综上所述,氨基酸的转运是耗能的主动运输过程;哺乳仔猪空肠对Glu的转运能力很强,其次为Thr、Ser和Gly,这些氨基酸的转运载体多为Na依赖性的,而OH-Pro和Arg的转运主要不是通过离子性依赖系统进行。

关键词：哺乳仔猪氨基酸转运 ussing chamber

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辣椒素的最佳吸收部位是结肠

辣椒素的最佳吸收部位是结肠

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2010年广东省药师周大会

作者：段炼李国锋孙亚彬周望梅李科南方医科大学南方医院

目的研究辣椒素经大鼠空肠、回肠和结肠黏膜的区段透过特性。方法应用体外ussing chamber法,评价100μg·ml-1辣椒素经空肠、回肠和结肠黏膜的经时吸收方向的累计透过量,并计算表观渗透系数(Papp),辣椒素在接收池中的浓度用HPLC法测定... 详细信息

目的研究辣椒素经大鼠空肠、回肠和结肠黏膜的区段透过特性。方法应用体外ussing chamber法,评价100μg·ml-1辣椒素经空肠、回肠和结肠黏膜的经时吸收方向的累计透过量,并计算表观渗透系数(Papp),辣椒素在接收池中的浓度用HPLC法测定。结果辣椒素经结肠和回肠的透过性显著高于空肠,在结肠的透过性也显著高于回肠。结论辣椒素在大鼠肠黏膜中的透过性存在区段性差异,在空肠部位吸收最差,结肠部位吸收最好,可考虑将其制成结肠定位肠溶片。

关键词：辣椒素 ussing chamber 肠黏膜透过性

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应用尤斯灌流法测定断奶后羔羊胃肠道消化吸收能力

应用尤斯灌流法测定断奶后羔羊胃肠道消化吸收能力

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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会

作者：贺志雄吴端钦乔君毅王芃芃谭支良中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室中国科学院研究生院

本实验将胃肠道消化、吸收、分泌以及其抵御抗原物质等功能整合进行研究,旨在观察断奶后浏阳黑山羊胃肠道上皮的分泌吸收功能变化情况。选用日龄在42天(6周,断奶期向断奶过渡期转变)、84天(12周,断奶过渡期向育成前期转变)和154天(22周... 详细信息

本实验将胃肠道消化、吸收、分泌以及其抵御抗原物质等功能整合进行研究,旨在观察断奶后浏阳黑山羊胃肠道上皮的分泌吸收功能变化情况。选用日龄在42天(6周,断奶期向断奶过渡期转变)、84天(12周,断奶过渡期向育成前期转变)和154天(22周,育成前期向育成中期转变)正常浏阳黑山羊各3头,利用ussing chamber(尤斯灌流仪)实施监测胃肠道(瘤胃、空肠和回肠)电生理参数。结果表明,空肠22周时短路电流(short-circuit curTent,ISC)显著高于6周和12周时ISC(P<0.000 1),瘤胃和空肠上皮6周时电阻(resistance,R)显著高于12周和22周时R(瘤胃,P=0.041 8;空肠,P=0.000 2),回肠上皮12周时R显著高于22周时R(P=0.007 2),回肠12周时△ISC显著高于22W时△ISC(P=0.009 4)。结果表明,动物体生命早期不同时期瘤胃、空肠和回肠有着不同的分泌、屏障及吸收特征;12周(断奶过渡期)肠道结构和功能发生紊乱,可能导致动物产生腹泻,生产实践中应加强断奶过渡期的饲养管理,预防腹泻。

关键词：消化吸收能力 ussing chamber 短路电流山羊

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