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正义ssrna病毒侵染寄主植物的病生理学研究

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电子显微学报 2006年第S1期 229-230页

作者：洪健周雪平浙江大学分析测试中心浙江大学生物技术研究所浙江大学生物技术研究所浙江杭州310029

一种适合于马铃薯病毒ssrna快速提取技术

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中国生物工程杂志 2004年第6期24卷 103-106页

作者：袁青谭万忠黄振霖殷幼平王中康西南农业大学植保学院北碚400716 重庆市植保植检站重庆400020 重庆大学基因工程研究中心生物力学与组织工程教育部重点实验室重庆400044

针对马铃薯病毒ssrna制样过程中产生色素、多酚物质抑制RT PCR反应的问题 ,通过确定多酚氧化酶抑制剂Na2 SO3 的最适浓度 ,筛选核酸快速浸提的表面活性剂 ,研制出马铃薯病毒简易浸提制样技术 ,可以从植物组织中快速释放ssrna并减少PCR... 详细信息

针对马铃薯病毒ssrna制样过程中产生色素、多酚物质抑制RT PCR反应的问题 ,通过确定多酚氧化酶抑制剂Na2 SO3 的最适浓度 ,筛选核酸快速浸提的表面活性剂 ,研制出马铃薯病毒简易浸提制样技术 ,可以从植物组织中快速释放ssrna并减少PCR反应抑制物质的析出。此法简便有效 ,可以从马铃薯叶片 ,叶柄 ,茎和块茎中快速提取PVY、PVX ,PLRV、PVA、PVS等多种马铃薯病毒ssrna 。

关键词：马铃薯病毒 ssrna 提取表面活性刺植物组织

正义ssrna病毒侵染寄主植物的病生理学研究

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电子显微学报 2006年第B8期25卷 215-216页

作者：洪健周雪平浙江大学生物技术研究所

用ssrna探针检测水中的甲型肝炎病毒和其他肠道病毒

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国际生物制品学杂志 1992年第2期 78-78页

作者：曹凤芹

检测饮用水和食物中的甲型肝炎病毒(HAV)和其他肠道病毒需要敏感而特异的方法。将编码HAV和柯萨奇病毒B3(CB3)基因组5′端1个Kb的cDNA克隆亚克隆到T7/SP6 RNA转录载体上,从T7启动子转录的

关键词：肠道病毒饮用水 ssrna 细胞培养培养(生物) 甲型肝炎病毒

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TLR7在结核分枝杆菌感染中的作用研究

中国人兽共患病学报 2014年第12期30卷 1223-1226页

作者：李瑞芳管志玉付玉荣伊正君山东省潍坊医学院病原生物学教研室潍坊261053 山东省潍坊医学院附属医院检验科/临床检验诊断学省级重点实验室潍坊261031

目的将TLR7激活基序ssrna加入结核分枝杆菌感染的小鼠巨噬细胞,研究TLR7被激活后在结核分枝杆菌感染中的作用。方法结核分枝杆菌感染RAW264.7细胞,感染后加入化学合成的TLR7激活基序ssrna,RT-PCR法检测感染不同时间之后细胞对细菌的吞噬... 详细信息

目的将TLR7激活基序ssrna加入结核分枝杆菌感染的小鼠巨噬细胞,研究TLR7被激活后在结核分枝杆菌感染中的作用。方法结核分枝杆菌感染RAW264.7细胞,感染后加入化学合成的TLR7激活基序ssrna,RT-PCR法检测感染不同时间之后细胞对细菌的吞噬率;无菌TritonX-100裂解细胞,罗氏培养基培养计数活细菌;电镜观察细胞内自噬小体;ELISA检测细胞上清中IL-12、TNF-α与IL-4的含量。结果感染3h后RAW264.7细胞吞噬率最高(P>0.05);处理3h后电镜观察,ssrna组细胞状态明显好于对照组;36h后ssrna组IL-12(Pssrna组低于对照组(Pssrna可以用于治疗结核分枝杆菌感染。

关键词： TLR7 ssrna 小鼠巨噬细胞结核分枝杆菌

Investigation of cytimidine-based amphiphile interaction with peptide conjugated single-stranded RNA for gene delivery

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Investigation of cytimidine-based amphiphile interaction wit...

第十届全国化学生物学学术会议

作者： Yuan Ma Wenting Zhao Shuang Liu Chao Wang Zhenjun Yang State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs School of Pharmaceutical SciencesPeking University

Nucleic acid drug is challenging for their delivery efficiency, and cationic lipid is generally cytotoxic. In this paper, we described a novel cytimidine-based amphiphile（DNCA） particularly bound to single-stranded RNA（ssrna） and obviously enhanced the cellular uptake of the nanoparticles in serum with low cytotoxicity. In addition, the peptide conjugation regulated the self-assembly process of ssrna encapsulated by DNCA, which promoted the formation of suitable nanoparticles and enhanced the antiproliferative activity. These data demonstrated that the peptide-conjugated ssrna encapsulated by neutral DNCA vector exhibits a bright application prospects.

关键词： ssrna peptide conjugation DNCA antiproliferative activity

来源： cnki会议评论

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实时荧光RT-PCR技术检测南瓜花叶病毒

植物保护学报 2010年第6期37卷 571-572页

作者：孙宁邓丛良郑雪明陈继峰郑州大学生物工程系郑州450001 北京出入境检验检疫局北京101312 烟台出入境检验检疫局烟台265000

南瓜花叶病毒Squash mosaic virus(SqMV)属ssrna的豇豆花叶病毒属Comovirus.病毒颗粒为球形,主要危害葫芦科植物,可通过种子,汁液和昆虫介体传播.在黄瓜,甜瓜,西葫芦,哈密瓜等葫芦科植物上能引起较为严重的系统侵染症状,严重危害葫芦科... 详细信息

南瓜花叶病毒Squash mosaic virus(SqMV)属ssrna的豇豆花叶病毒属Comovirus.病毒颗粒为球形,主要危害葫芦科植物,可通过种子,汁液和昆虫介体传播.在黄瓜,甜瓜,西葫芦,哈密瓜等葫芦科植物上能引起较为严重的系统侵染症状,严重危害葫芦科植物的生长发育

关键词：南瓜花叶病毒荧光RT-PCR 技术检测实时 mosaic ssrna 葫芦科植物病毒颗粒

ART-PCR方法的建立及扩增低拷贝RNA的初步研究

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药物生物技术 2013年第6期20卷 475-479页

作者：李铁军周宋峰陆毅祥朱远源江苏莱芙时代生物科技有限公司百奥迈科生物技术有限公司南通大学小核酸技术与应用研究所中国药科大学

建立依赖反义RNA和核糖核酸酶T1(RNase T1)的PCR方法,称为ART-PCR,用于扩增高拷贝RNA和复杂RNA样本中的低拷贝RNA。首先,设计待检低拷贝RNA的反义RNA分子,在高拷贝和复杂RNA样本中与待检低拷贝RNA退火后用RNase T1消化,反转录后用PCR扩... 详细信息

建立依赖反义RNA和核糖核酸酶T1(RNase T1)的PCR方法,称为ART-PCR,用于扩增高拷贝RNA和复杂RNA样本中的低拷贝RNA。首先,设计待检低拷贝RNA的反义RNA分子,在高拷贝和复杂RNA样本中与待检低拷贝RNA退火后用RNase T1消化,反转录后用PCR扩增。进一步,用ARPE-19细胞中低表达基因干扰素γ(IFNG)作为实例,用ART-PCR和常规实时定量PCR(RT-qPCR)检测。结果显示,用ART-PCR可以很好地消除常规RT-qPCR中低拷贝RNA的PCR抑制效应。研究结果初步表明ART-PCR可以作为检测低拷贝RNA的理想工具,这对于RNA功能的基础研究以及基于多重PCR的临床复合病毒感染的基因诊断方法的优化、推广具有重要的参考价值。

关键词：依赖反义RNA的核糖核酸酶T1 PCR 低拷贝高拷贝基因 RNase T1 dsRNA ssrna 病毒

马铃薯种苗复合感染病毒多重RT-PCR同步快速检测

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植物病理学报 2005年第2期35卷 109-115页

作者：王中康夏玉先袁青谭万忠殷幼平重庆大学基因工程研究中心西南农业大学植保学院重庆400716

基于马铃薯病毒ssrna的快速制备方法,根据马铃薯病毒CP基因序列设计PVX、PVS、PVY和PLRV特异性引物对、P1基因序列设计PVA特异性引物对,建立了多重RT-PCR快速检测体系,可以同步检出复合侵染马铃薯种苗主要病毒,灵敏度比传统的ELISA至少... 详细信息

基于马铃薯病毒ssrna的快速制备方法,根据马铃薯病毒CP基因序列设计PVX、PVS、PVY和PLRV特异性引物对、P1基因序列设计PVA特异性引物对,建立了多重RT-PCR快速检测体系,可以同步检出复合侵染马铃薯种苗主要病毒,灵敏度比传统的ELISA至少高100倍.结合生物活性稳定剂研制的固相化检测试剂盒,已用于四川和重庆等省区的15个县市田间与苗圃248个马铃薯显症或无症样品的实际检测,表明四川和重庆地区2～3种马铃薯病毒往往复合侵染(PVX、PVA和PVS三种病毒复合侵染或PLRV和PVY二种病毒复合侵染).

关键词：多重RT-PCR 检测马铃薯种苗 ssrna