检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=shuttle plasmid vector"

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作者：贾艳华宋福平李国勋黄大昉张杰中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室莱阳农学院植保系中国农业科学院生物技术研究所中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

＜正＞Eukaryotic fluorescent proteins are being used increasingly as bacterial markers in microbial e-cology, particularly for monitoring genetically engineered bacteria in environment. Red fluorescent protein （RFP） expressed in bacteria can be detected under either daylight or UV/blue light. In this study, two marker systems were constructed. The rfp gene was introduced into the Pseudomonas fluorescens strain P303 by a multi-copies shuttle plasmid vector and integrated into the chromosome via single copy mini-Tn5 transposon, yielding respectively, the recombinant 12P303 and the conjugant 8’ P303. Sodium dodecyl sulfate polyacryamide gel electrophoresis （SDS-PAGE） showed that the quantity of RFP expressed in the multi-copies recombinant 12P303 was greater than that in the single copy conjugant 8’ P303. The copy number of the marker gene was very important but decisive. The stability of the marked rfp gene in P303 was outstanding, and the beneficial anti - fungal qualities of the host strain P303 were not affected by expression of the foreign gene rfp. The test of the marked 12P303 and 8’ P303 in the soil of a greenhouse indicated that the marked strains were safe for the environment and did not affect the indigenous bacteria in the soil. As a marker gene for P. ftuorescens, the rfp gene exceeds the gfp gene in a number of ways. A simple and sensitive tool, the confocal scanning laser microscope （CSLM）, should be considered for the detection of marked microorganisms. Construction of two different marker systems provides researchers with a wide-range of potential applications for engineered microorganisms.

关键词： red fluorescent protein Pseudomonas fluorescens Mini-Th5 transposon shuttle plasmid vector

来源： cnki会议评论

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