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Rapid Generation of selectable marker-free transgenic Rice with Three Target Genes by Co-Transformation and Anther Culture

引用

Rice science 2007年第4期14卷 239-246页

作者： ZHU Li FU Ya-ping LIU Wen-zhen HU Guo-cheng SI Hua-min TANG Ke-xuan SUN Zong-xiu State Key Laboratory of Rice Biology China National Rice Research Institute Hangzhou 310006 China Plant Biotechnology Research Center School of Agriculture and Biology Shanghai Jiaotong University Shanghai 200030 China

The ＇double T-DNA＇ binary vector p13HSR which harbored two independent T-DNAs, containing hygromycin phosphotransferase gene （hpf） in one T-DNA region and three target genes （hLF, SB401, RZ10） in another T-DNA region, was used to generate selectable marker-free transgenic rice by Agrobacterium-mediated transformation. The regenerated plants with both the three target genes and the selectable marker gene hpt were selected for anther culture. RT-PCR analysis indicated that target genes were inserted in rice genomic DNA and successfully transcribed. It took only one year to obtain double haploid selectable marker-free transgenic plants containing the three target genes with co-transformation followed by anther culture technique, and the efficiency was 12.2%. It was also noted that one or two target genes derived from the binary vector were lost in some transgenic rice plants.

关键词： anther culture co-transformation selectable marker-free transgenic plants rice double T-DNA binary vector

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