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多囊卵巢综合征患者血浆TNFα、stnfr2水平与胰岛素抵抗的相关性

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中山大学学报（医学科学版） 2004年第3期25卷 268-271,280页

作者：王竹晨顾熊飞杨冬梓邝健全中山大学附属第二医院妇产科中山大学生物化学教研室广东广州510080

【目的】探讨血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)?可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(stnfr2)与多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗和血清雄激素(T)水平的相互关系?【方法】 PCOS患者和对照者根据体重指数(BMI)分为PCOS肥胖组(21例)?PCOS非肥胖组(25例... 详细信息

【目的】探讨血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)?可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(stnfr2)与多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗和血清雄激素(T)水平的相互关系?【方法】 PCOS患者和对照者根据体重指数(BMI)分为PCOS肥胖组(21例)?PCOS非肥胖组(25例)? 肥胖对照组和非肥胖对照组,各25例,采用ELISA法测定血浆TNFα ?stnfr2水平,化学发光法测定血清性激素6项,已糖激酶终点法测定血清葡萄糖浓度,时间分辨免疫分析法测定血清胰岛素浓度,按Cederholm的方法计算胰岛素敏感指数(ISI)?【结果】 ①PCOS肥胖组血浆TNFα和stnfr2水平及PCOS非肥胖组血浆stnfr2水平均较非肥胖对照组明显升高,且以肥胖者升高更为明显?②血浆TNFα与其ISI在PCOS肥胖组和肥胖对照组均呈负相关(Pstnfr2与其ISI在PCOS肥胖组?PCOS非肥胖组和肥胖对照组均呈负相关(Pstnfr2水平及PCOS非肥胖组血浆stnfr2水平均较非肥胖对照组明显升高,且与其ISI呈负相关,提示二者可能与PCOS患者发生胰岛素抵抗有关?

关键词：多囊卵巢综合征血浆 TNFα 细胞因子 stnfr2 胰岛素抵抗相关性 ELISA法

糖尿病肾脏病患者血清stnfr1、stnfr2表达及其与内热证的相关性分析

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中国中西医结合肾病杂志 2021年第5期22卷 388-392页

作者：王梦迪赵文景刘梦超沈存王耀献首都医科大学附属北京中医医院北京100010 北京中医药大学北京100029

目的:分析糖尿病肾脏病(DKD)各期患者血清可溶性肿瘤坏死因子1型受体(stnfr1)、可溶性肿瘤坏死因子2型受体(stnfr2)的表达差异及其临床意义,并研究二者与中医内热证之间的相关性。方法:收集209例DKD患者的临床资料及中医证候,检测其血清... 详细信息

目的:分析糖尿病肾脏病(DKD)各期患者血清可溶性肿瘤坏死因子1型受体(stnfr1)、可溶性肿瘤坏死因子2型受体(stnfr2)的表达差异及其临床意义,并研究二者与中医内热证之间的相关性。方法:收集209例DKD患者的临床资料及中医证候,检测其血清stnfr1、stnfr2等炎症因子的水平,进行统计分析。结果:较健康对照及糖尿病患者,血清stnfr2水平在DKD早期即出现显著升高,且随着DKD病情加重而逐渐升高,早、中、晚各期之间差异具有统计学意义;在各内热证之中,湿热证患者的血清stnfr2水平显著高于其他类型内热证患者,且与湿热积分呈明显的正相关关系(r=0.278)。结论:与血清stnfr1相比,DKD患者肾功能进展可能与血清stnfr2的关系更为密切,当患者出现湿热证时,血清stnfr2水平可能更高,提示预后不佳。

关键词：糖尿病肾脏病 stnfr1 stnfr2 内热证

TNFR2 expression on non-bone marrow-derived cells is crucial for lipopolysaccharide-induced septic shock and downregulation of soluble TNFR2 level in serum

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Cellular & Molecular Immunology 2011年第2期8卷 164-171页

作者： Lijie Rong Jingjing Deng Xiaopu Zhao Xiaoman Liu Xia Xu Zhihai Qin National Laboratory of Biomacromolecules China-Japan Joint Laboratory of Structural Virology and ImmunologyInstitute of BiophysicsChinese Academy of SciencesBeijingChina Graduate University of Chinese Academy of Sciences Institute of BiophysicsBeijingChina

Persistently high serum levels of soluble tumor-necrosis factor(TNF)receptor 2(stnfr2)have been observed in septic shock and many inflammatory ***,its origin and regulation during these pathological processes are still largely *** this study,murine bone marrow(BM)chimeras selectively expressing TNFR2 on either BM-derived or non-BM-derived cells were generated and challenged with lipopolysaccharide(LPS).The results show that TNFR2 expression on non-BM-derived cells is crucial for both the sensitivity of mice to LPS and the downregulation of stnfr2 in *** importantly,stnfr2 was released from both BM-and non-BM-derived ***-BM TNFR1 expression influenced the sensitivity of mice to LPS challenge but not the level of serum *** results provide the first in vivo evidence for the origin and regulation of stnfr2 in serum and could aid in the development of novel anti-TNF strategies against septic shock.

关键词： LPS non-BM-derived cells stnfr2

药用蛋白分子原核表达与分离纯化：stnfrⅡ、rhG-CSF、***-1

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药用蛋白分子原核表达与分离纯化：sTNFRⅡ、rhG-CSF、***-1

作者：李佳睿山西大学

学位级别：硕士

随着生物原研药专利的不断到期,生物仿制药(Biosimilar)以研发成本低为优势在全球范围内迅速发展。目前,生物制药的主驱动力有四大类：基因工程蛋白因子类药物、单抗药物、受体类药物和基因工程类疫苗。受体类药物II型重组人肿瘤坏死因... 详细信息

随着生物原研药专利的不断到期,生物仿制药(Biosimilar)以研发成本低为优势在全球范围内迅速发展。目前,生物制药的主驱动力有四大类：基因工程蛋白因子类药物、单抗药物、受体类药物和基因工程类疫苗。受体类药物II型重组人肿瘤坏死因子(stnfr II)的研发难点在于二硫键多,原核表达的错配率高,而真核表达生产成本高。本文中工程菌BL21(DE3)/pET28a/his-Cel-TNFR II-CH3经过原核发酵,采用金属螯合亲和层析法,从盐浓度,咪唑浓度,低浓度尿素添加与否这三个方向出发,对亲和层析的上样条件进行了优化,得到了经SDS-PAGE凝胶电泳和反相高效液相色谱(RPLC)验证的纯品。蛋白因子类药物重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的中试生产经历了高密度原核表达发酵、高压匀浆破菌,离心收集包涵体,包涵体变复性,阳离子交换,SDS凝胶电泳结合高效液相色谱检验纯度和收率。基因工程类疫苗的设计趋势是多表位和通用性,恶性疟原虫多表位疫苗(***-1)采用原核表达的策略,发酵破菌后在小试阶段加入蛋白酶抑制剂PMSF,得到了较为理想的纯度,然而在中试纯化过程中,不添加蛋白酶抑制剂的技术路线确无法得到纯品,这是由蛋白结构不稳定引起的。本文中三例药物的技术开发过程提示了从源头做起的QbD(Quality by design,质量源于设计)是提高生物药产业化成功率的关键。

关键词： stnfr2 rhG-CSF M.RCAg-1 下游纯化条件优化

TNF system in eutopic endometrium from women with endometriosis

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Open Journal of Obstetrics and Gynecology 2013年第2期3卷 271-278页

作者： María Angélica Boric Marisa Torres Claudio Pinto Maricela Pino Paulina Hidalgo Fernando Gabler Ariel Fuentes María Cecilia Johnson Institute of Maternal and Child Research Faculty of Medicine University of Chile Santiago Chile

The role of the tumor necrosis factor (TNF) system in endometriosis is not completely clear and therefore was the focus of this study. In eutopic endometria obtained from women with (n = 41) and without (controls;n = 34) endometriosis during laparoscopy, the subcellular location and the percentages for TNF, TNFR1, TNFR2 and CD45 positive-cells were determined (immunohistochemistry);the protein concentration (ELISA) of the soluble receptors (stnfr1 and stnfr2) were measured in 4h-explants culture media and the TNF concentration was performed in ex vivo endometrial homogenates. The TNF, TNFR1 and TNFR2 mRNAs were analyzed by real-time PCR. In control endometria, TNF, TNFR1 and stnfr1 proteins increased during the late secretory phase. In endometriosis endometria, the protein highest level of TNFR1 was reached during the early and the mid secretory phases and of stnfr1 concentration during the proliferative phase;however, during the late secretory phase, both TNFR1 and stnfr1 protein levels were reduced compared to the control endometria (p stnfr2 concentrations, and TNF and TNFR2 mRNAs were similar in control and endometriosis endometria. Although TNFR1 mRNA was highly expressed, no significant differences were found between control and endometriosis endometria. In summary, this study establishes that TNF and TNFR1 protein expressions and the stnfr concentrations in eutopic endometria from women with and without endometriosis are dependent on the menstrual cycle. The differences on the TNFR1 and stnfr1 protein pattern between both groups, mainly during the mid and late secretory phases may play a role in the lower implantation rates observed in women with endometriosis, and also could be related to the altered cell death, which favor the augmented cell viability facilitating the characteristic endometrial implantation and growth outside the uterus in this disease.

关键词： Endometriosis Eutopic Endometrium TNF stnfr1 stnfr2

TNF-α系统在HCV感染中的临床意义及其与病毒基因型的关系

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TNF-α系统在HCV感染中的临床意义及其与病毒基因型的关系

作者：王琰山西医科大学

学位级别：硕士

目的:丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球重大课题之一,是输血后肝炎的主要病因,急性HCV感染者约50%～85%会转为持续性感染,且是引起肝硬化及肝癌的重要因素。HCV感染人体后,宿主免疫系统活化,产生并释放各种细胞因子,其中最重要的因子之一是... 详细信息

目的:丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球重大课题之一,是输血后肝炎的主要病因,急性HCV感染者约50%～85%会转为持续性感染,且是引起肝硬化及肝癌的重要因素。HCV感染人体后,宿主免疫系统活化,产生并释放各种细胞因子,其中最重要的因子之一是肿瘤坏死因子α(TNF-α),它不仅可以直接诱导肝细胞的凋亡,引起肝细胞炎性反应,还可以诱导淋巴细胞产生IL-2、IL-6、IL-12、IFN-γ等,因此肝组织中出现大量的细胞因子,形成细胞因子网络的活化,这些细胞因子促进肝内炎症反应,介导肝细胞损伤,从而使肝脏慢性炎症持续存在。同时由于HCV RNA聚合酶缺乏校对功能,整个基因组呈现高度的基因异质性,致使HCV容易形成准种变异。新的变种影响抗体和T细胞的识别能力,破坏宿主的体液免疫和细胞免疫功能,影响细胞因子的产生和释放,逃避宿主的免疫清除。本文首先分析了HCV感染中血清TNF-α及可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(stnfr)在不同病情丙型肝炎中的水平。同时采用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)对HCV进行基因分型,探讨丙型肝炎在我省的基因分布特点,分析基因型与TNF-α、stnfr的关系,为临床制定治疗方案及判断预后提供了参考依据。方法:(1)病历选择和血清收集:慢性丙型肝炎患者62例,清晨空腹肘静脉采血。收集患者一般资料、肝功能、HCV RNA定量等临床资料。选择20例正常人作为对照。(2)分别测定样本及对照血清TNF-α及stnfr,结合临床资料,分析TNF-α系统在HCV感染中所起的作用。(3)提取各样本HCV RNA,逆转录后设计引物扩增5’非编码区(5’NCR)。以5’NCR为目的基因,分别用内切酶HaeⅢ、Bsh1236Ⅰ进行酶切得到不同长度基因片段,分析结果,确定基因型。(4)分析TNF-α、stnfr水平与基因型的相关性,探讨基因型致病轻重不同的部分机制。结果:(1)62例丙型肝炎患者,中重度组TNF-α、stnfr及stnfr/TNF水平高于轻度组,均高于对照组,三组之间两两比较均具有统计学意义(P＜0.001)。(2)TNF-α、stnfr及stnfr/TNF水平与ALT、TBIL水平均呈正相关,P＜0.001;并与HA、ⅣC水平呈正相关性,P＜0.05。(3)HCV RNA在80～、10～、10～、10～四个等级时TNF-α、stnfr和stnfr/TNF无统计学差异,但在10～时,TNF-α、stnfr及stnfr/TNF均较高,与前四个等级比较均有显著性差异(P＜0.05)。(4)基因分型结果显示,1b型43例(69.4%),2a型14例(22.6%),1b/2a混合型1例,1a型1例,3a型1例,未分型2例。基因1b型患者TNF-α、stnfr及stnfr/TNF水平较高,与2a型相比,两组之间有显著性差别(P＜0.001)。结论:丙型肝炎患者血清TNF-α系统与病情轻重有明显相关性。TNF-α系统反映机体强烈的免疫反应和肝细胞损伤,可作为动态观察免疫反应状况及判断预后的指标。HCVRNA载量较高时,TNF-α、stnfr及stnfr/TNF水平也相应升高。HCV可作为TNF-α的强烈诱导剂,直接刺激巨噬细胞释放TNF-α。基因1b型患者血清TNF-α及stnfr水平高于2a型。不同基因型致病轻重与TNF-α系统有一定关系。本组丙型肝炎患者仍以1b型和2a基因型为主,其他基因型及混和型少见。

关键词：肝炎病毒,丙型 TNF-α stnfr2 基因分型基因亚型基因变异

血压正常的1型糖尿病患者血清肿瘤坏死因子-α与脉压水平的相关性研究

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右江医学 2008年第5期36卷 546-547页

作者：叶慧芬潘顺文广西贵港市人民医院广西贵港537100 中山大学附属第三医院广东广州510630

目的测定1型糖尿病患者中脉压与血清炎性细胞因子水平,并探讨两者的关系。方法测定112名血压正常的1型糖尿病患者体重指数、腰臀比、收缩压、舒张压、脉压、平均动脉压、吸烟否、酒精摄入量、胰岛素剂量、HbA1c、stnfr1、STN-FR2I、L-6... 详细信息

目的测定1型糖尿病患者中脉压与血清炎性细胞因子水平,并探讨两者的关系。方法测定112名血压正常的1型糖尿病患者体重指数、腰臀比、收缩压、舒张压、脉压、平均动脉压、吸烟否、酒精摄入量、胰岛素剂量、HbA1c、stnfr1、STN-FR2I、L-6、CRP水平。结果112名受试者各项指标只有TNF-α受体与脉压之间存在显著性差异(stnfr1与PP:r=0.215,P=0.030;stnfr2与PP:r=0.238,P=0.020)。结论血压正常的1型糖尿病患者,TNF-α的激活与脉压水平存在相关性,提示TNF-α可能在1型糖尿病患者心血管疾病发病过程中起到一定的作用。

关键词： 1型糖尿病 TNF-a 脉压 stnfr1 stnfr2