检索结果-南通市图书馆

作者：王文韬山东大学

学位级别：硕士

目的:肝细胞癌（HCC）是世界第五大最常见的癌症,每年超过一半的新病例和死亡病例都发生在中国。Clusterin（CLU）基因是一个单拷贝基因,其中的分泌型蛋白（sclu）可以通过调节多个通路在肿瘤中发挥凋亡抵抗作用。通过对临床数据进行的... 详细信息

目的:肝细胞癌（HCC）是世界第五大最常见的癌症,每年超过一半的新病例和死亡病例都发生在中国。Clusterin（CLU）基因是一个单拷贝基因,其中的分泌型蛋白（sclu）可以通过调节多个通路在肿瘤中发挥凋亡抵抗作用。通过对临床数据进行的生物信息学分析,得出sclu蛋白在HCC组织中呈现高表达状态,且sclu在HCC中的表达量明显影响患者的生存率（p=0.035）。本研究旨通过结合生物信息学调查临床病例与细胞机制研究,探讨sclu蛋白在肝细胞癌发生及进展过程中的作用及其相关分子机制。通过探索肝细胞癌在各种应激状态下的保护性机制,对提高HCC患者对靶向药物或化疗药物的敏感性从而延长患者长期生存率有所启发。方法:1.运用生物信息学技术预测sclu与肝细胞癌的临床相关性。运用ONCOMINE、TCGA、GEPIA等数据库,对临床样本进行分析,预测sclu蛋白在HCC中的表达。2.验证sclu蛋白在HCC细胞系中的表达情况。培养常见的 HCC 细胞系 Huh-7、SK-Hep-1、Hep3B。通过 Western Blot、PCR 等方法检测sclu在HCC细胞中表达量的高低。3.构建sclu过表达及sclu-RNAi载体。设计sclu过表达及sclu-RNAi小干扰序列,将其转染至HCC细胞系中,并通过荧光显微镜、Western Blot检验sclu干扰病毒的表达效率。4.探索sclu与下游蛋白关系通过生信分析及查阅最新文献推测,在衣霉素（TN）诱导条件下,sclu可通过内质网应激关键蛋白GRP78调控细胞凋亡抵抗。且GRP78与AKT可能通过TRIB3存在联系。通过构建sclu过表达及sclu-RNAi模型,进而通过Western Blot等方法探究在sclu表达差异时,各通路蛋白的表达量变化,从而探究sclu与下游蛋白的关系。5.探索GRP78与下游蛋白的关系为了进一步探究GRP78是否与TRIB3有直接联系,构建GRP78-RNAi,并通过Western Blot等实验探索GRP78的表达差异对上下游蛋白的影响。6.探索sclu在HCC细胞中发挥凋亡抵抗的作用为了验证HCC细胞中的sclu起凋亡抵抗作用,通过流式细胞仪检测sclu表达差异对HCC细胞的凋亡是否有影响。其次,分别下调GRP78、TRIB3,通过流式检测凋亡,探究sclu对下游蛋白的调控是否与下游蛋白对凋亡抵抗的影响一致,进而推测sclu-GRP78-TRIB3 通路的成立。结果:1.运用生物信息学预测到CLU在肝细胞癌中的表达高于正常组织,且CLU蛋白在肝细胞癌的各病理分期中都有高表达。生存分析表明CLU低表达的患者相对于CLU高表达的患者预后较差（p=0.035）。2.筛选的肝细胞癌细胞系中,三株细胞系Huh-7、Sk-hep-1、Hep3B皆存在sclu蛋白高表达。衣霉素可以引起内质网关键蛋白GRP78和CHOP的上调,通过MTT实验选取50 μM衣霉素处理细胞,在衣霉素诱导条件下,HCC细胞中sclu、GRP78、TRIB3的表达量都明显升高。3.将sclu-RNAi和GRP78-RNAi转染至Huh7细胞系,分别用50μM衣霉素进行处理48h,使用Western Blot检测sclu、GRP78、TRIB3的表达。对sclu-RNAi组,衣霉素诱导后sclu、GRP78、TRIB3表达明显增加,其中sclu-RNAi+TN组sclu、GRP78表达小于NC+TN组的表达,而TRIB3表达较NC+TN组上调,但上调不明显。在GRP78-RNAi组中,诱导后的GRP78-RNAi+TN组中GRP78较NC+TN组表达减少,但TRIB3表达较NC+TN组略上调,sclu表达无明显变化。4.流式细胞仪检测凋亡实验表明,sclu和GRP78表达下调可以增加HCC细胞的凋亡率,在衣霉素诱导条件下sclu-RNAi+TN和GRP78-RNAi+TN组的凋亡率明显较NC+TN组升高。而在衣霉素诱导前提下,TRIB3的表达下调可以回调细胞的凋亡。在sclu表达下调的基础上下调TRIB3的表达可以减轻sclu降低带来的凋亡反应。结论:1.本研究通过生信分析预测了 sclu蛋白在肝细胞癌中存在高表达。并在多种HCC细胞系中通过分子生物学技术验证其表达情况。2.在HCC细胞中,下调sclu蛋白表达可以抑制GRP78的表达和促进TRIB3的表达升高。调控三种蛋白表达后,可以介导HCC细胞的凋亡抵抗。3.在衣霉素诱导条件下,sclu可能通过GRP78-TRIB3轴介导HCC细胞的凋亡抵抗,在HCC细胞中发挥保护机制。

关键词：肝细胞癌生存率 sclu GRP78 TRIB3 凋亡抵抗信号通路

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

血清CyPA、sclu、HO-1与新生儿窒息复苏后发生脑损伤的关系研究

引用

现代生物医学进展 2024年第6期24卷 1150-1154,1134页

作者：向垚林吴素英刘兆敏方超策周玉彭芬湖北民族大学附属民大医院新生儿科湖北恩施445000

目的:探讨血清亲环素A(CyPA)、丛生蛋白(sclu)、血红素氧化酶-1(HO-1)与新生儿窒息复苏后发生脑损伤的关系。方法:选择2020年6月至2023年3月湖北民族大学附属民大医院收治的172例窒息新生儿,根据复苏后是否发生脑损伤分为脑损伤组(80例... 详细信息

目的:探讨血清亲环素A(CyPA)、丛生蛋白(sclu)、血红素氧化酶-1(HO-1)与新生儿窒息复苏后发生脑损伤的关系。方法:选择2020年6月至2023年3月湖北民族大学附属民大医院收治的172例窒息新生儿,根据复苏后是否发生脑损伤分为脑损伤组(80例)和无脑损伤组(92例),复苏治疗前检测并对比两组血清CyPA、sclu、HO-1水平。多因素Logistic回归分析新生儿窒息复苏后发生脑损伤的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CyPA、sclu、HO-1预测新生儿窒息复苏后发生脑损伤的价值。结果:脑损伤组血清CyPA、sclu、HO-1水平高于无脑损伤组(Psclu、高水平HO-1是新生儿窒息复苏后发生脑损伤的危险因素(Psclu、HO-1预测新生儿窒息复苏后发生脑损伤的曲线下面积为0.797、0.832、0.779,联合预测的曲线下面积为0.941,高于各指标单独预测。结论:新生儿窒息复苏后发生脑损伤的危险因素包括胎盘早剥、母体妊娠高血压疾病、重度窒息、CyPA升高、sclu升高、HO-1升高,联合检测血清CyPA、sclu和HO-1对新生儿窒息复苏后发生脑损伤具有较高的预测价值。

关键词：新生儿窒息脑损伤 CyPA sclu HO-1 预测价值

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：