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Extract of Cycas revoluta Thunb. enhances the inhibitory effect of 5-fluorouracil on gastric cancer cells through the AKT-mTOR pathway

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World Journal of Gastroenterology 2019年第15期25卷 1854-1864页

作者： Xing-Liang Cui Ke-Ji Li Hai-Xia Ren Yong-Jian Zhang Xiao-Dong Liu Bao-Guo Bu Lei Wang Department of Gastroenterology Affiliated Hospital of Hebei University of Engineering Department of Surgery Affiliated Hospital of Hebei University of Engineering Department of Pathology Medical College of Hebei University of Engineering

BACKGROUND Gastric cancer is one of the most common and deadly malignancies *** recent medical progress, the 5-year survival rate of gastric cancer is still unsatisfactory. 5-fluorouracil(5-Fu) is one of the first-line antineoplastic treatments for gastric cancer, as it can effectively induce cancer cell ***, the effect of 5-Fu is limited due to drug resistance of the malignant tumor. Previous studies have reported that Sotetsuflavone from Cycas revoluta Thunb. can markedly suppress lung cancer cell proliferation by apoptosis,though its effect on gastric cancer remains *** To investigate the inhibitory effect of Cycas revoluta Thunb. and to determine whether it can overcome gastric cancer cell drug resistance to *** Cell viability was examined to determine whether the natural extract of Cycas revoluta Thunb. induced gastric cancer cell death. The half-maximal effective concentration and the half-maximal lethal concentration were ***-healing and transwell assays were performed to examine gastric cancer cell motility. Clonogenic assays were performed to investigate the synergistic effects of Cycas revoluta Thunb. with 5-Fu, and apoptotic bodies were detected by Hoechst staining. Western blotting was performed to examine the expression of related proteins and to investigate the molecular mechanism of Cycas revoluta Thunb.-induced cancer cell apoptosis. The expressions of proteins, including mammalian target of rapamycin(mTOR) and p-AKT, were detected in different combinations of treatments for 48 h, then analyzed by ECL *** Gastric cancer cells were more sensitive to the natural extract of Cycas revoluta Thunb. compared to normal gastric epithelial cells, and the extract effectively inhibited gastric cancer cell migration and invasion. The extract improved the anti-cancer effect of 5-Fu by enhancing the chemosensitization of gastric cancer cells. Extract plus 5-Fu further reduced the expression of

关键词： Gastric cancer 5-fluorouracil Cycas revoluta Thunb. Apoptosis

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利用CRISPR/Cas9系统研究revoluta参与烟草叶芽发育的调控

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生物技术通报 2023年第10期39卷 197-208页

作者：王兵赵会纳余婧陈杰骆梅雷波贵州省烟草科学研究院烟草行业分子遗传重点实验室贵阳550081 贵州医科大学生物与工程学院(健康医药现代产业学院) 贵阳550025

作物叶芽受到分生组织调控,调控叶芽是作物增产的有效措施之一。目前关于烟草分生组织调控的分子机理研究偏少,可用于株型改良的种质资源缺乏。本研究通过CRISPR/Cas9编辑系统靶向突变烟草revoluta(REV)基因,分别构建两个不同REV单靶点... 详细信息

作物叶芽受到分生组织调控,调控叶芽是作物增产的有效措施之一。目前关于烟草分生组织调控的分子机理研究偏少,可用于株型改良的种质资源缺乏。本研究通过CRISPR/Cas9编辑系统靶向突变烟草revoluta(REV)基因,分别构建两个不同REV单靶点序列C15NtREV和C16NtREV,通过农杆菌介导的叶盘转化方法获得再生苗,利用PCR测序鉴定转基因阳性单株,测序结果表明Ko-C15Ntrev突变体在NtREV氨基酸第26位置之后发生移码突变,而Ko-C16Ntrev突变体在NtREV氨基酸第60位置之后发生移码突变。此外,借助扫描电镜分别观测两个单靶点纯合突变体顶芽表型,结果表明烟草Ko-C15Ntrev双拷贝同源突变体出现顶芽缺失和叶片畸形的表型,而Ko-C16Ntrev单拷贝同源突变体未表现出顶芽缺失,但顶芽发育迟缓。相较于野生型烟草,Ko-C16Ntrev突变体自然株高较野生型增加3.76%,Ko-C16Ntrev突变体叶片数和腋芽鲜重分别较野生型减少21.47%和23.41%,且均达到极显著差异,说明NtREV参与烟草顶端分生组织发育,进而调节叶和腋芽发育。这些突变体为后续研究烟草的叶芽发育分子机理提供了重要研究材料。

关键词： CRISPR/Cas9 revoluta 叶芽株型侧生分生组织烟草

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CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥revoluta基因突变体的鉴定

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分子植物育种 2021年第3期19卷 867-873页

作者：杨雪孙雅佩王政博于茹恩李雪萍李红英河南科技大学林学院洛阳471023

CRISPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的工具。HD-ZipⅢ家族成员revoluta(REV)是植物发育过程中的关键转录因子。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对拟南芥REV进行特异性定点编辑,构建REV基... 详细信息

CRISPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的工具。HD-ZipⅢ家族成员revoluta(REV)是植物发育过程中的关键转录因子。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对拟南芥REV进行特异性定点编辑,构建REV基因编辑表达载体,并利用农杆菌介导的花序浸染法将其转入拟南芥。经潮霉素抗性平板筛选和PCR扩增及测序鉴定,获得7棵转基因株系。对转基因植株REV基因的测序结果显示,有3株均成功在靶点1处产生编辑,且其中1株在靶点2处也成功编辑。该基因编辑突变体的获得为后续深入研究REV基因在拟南芥形态发育过程中的作用提供了新的遗传材料。

关键词： CRISPR/Cas9 基因编辑 revoluta 载体构建突变体

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Homeodomain leucine-zipper proteins and their role in synchronizing growth and development with the environment

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Journal of Integrative Plant Biology 2014年第6期56卷 518-526页

作者： Ronny Brt Marc Cabedo Yakun Xie Stephan Wenkel Center for Plant Molecular Biology University of Tübingen Germany Leibniz Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research GaterslebenGermany

The Arabidopsis （Arabidopsis thaliana L.） genome encodes for four distinct classes of homeodomain leucinezipper （HD-ZIP） transcription factors （HD-ZIPI to HD-ZIPIV）, which are all organized in multi-gene families. HD-ZIP transcription factors act as sequence-specific DNA-binding proteins that are able to control the expression level of target genes. While HD-ZIPI and HD-ZIPII proteins are mainly associated with environmental responses, HD-ZIPIII and HD- ZIPIV are primarily known to act as patterning factors. Recent studies have challenged this view. It appears that several of the different HD-ZlP families interact genetically to align both morphogenesis and environmental responses, most likely by modulating phytohormone-signaling networks.

关键词： Transcription factors homeodomain leucine zipper auxin light signaling water stress abscisic acid leaf development revoluta KANADI microRNA

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拟南芥as2突变体增强子krt1的遗传分析及KRT1基因的克隆

拟南芥as2突变体增强子krt1的遗传分析及KRT1基因的克隆

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作者：张振桢上海交通大学

学位级别：硕士

植物叶片的极性发育对于其行使正常的功能是必需的。在叶片进行极性发育的过程中,主要存在着三个基本的发育轴向:近-远轴、基-顶轴、中-侧轴,其中以近-远轴的发育最为关键和突出。一系列“极性基因”参与调控了近-远轴的极性建成,其中... 详细信息

植物叶片的极性发育对于其行使正常的功能是必需的。在叶片进行极性发育的过程中,主要存在着三个基本的发育轴向:近-远轴、基-顶轴、中-侧轴,其中以近-远轴的发育最为关键和突出。一系列“极性基因”参与调控了近-远轴的极性建成,其中拟南芥的AS2基因会促进叶片的近轴面发育,在as2突变体中叶片的近轴面发育会受到一定程度的阻碍,这使得as2的叶片表现出远轴面化叶片的表型。为了进一步了解AS2基因调节叶片极性发育的分子机理,我们对as2突变体进行了EMS化学诱变,试图筛选能改变as2表型的突变体。在这篇文章中,我们分析了as2增强子krt1。krt1能增强as2叶片近轴面特征部分缺失的表型,使得as2 krt1双突变产生比as2表型更强的远轴面化叶片。KRT1编码着26S蛋白酶体上的RPN2a亚基,krt1突变可能影响了26S蛋白酶体对某些调控蛋白的降解,这说明叶片的极性发育受到了蛋白翻译后的调控。 krt1除了能增强as2之外,它还能增强一些其他极性发育存在缺陷的突变体,像ago1。AGO1是RNA干扰沉默复合体RISC中的重要组成部分,ago1突变可能通过干扰了miRNA165/166的分布而影响了叶片的极性发育。krt1对ago1-37表型的增强与在as2背景下

关键词：叶片极性 26S蛋白酶体 ASYMMETRIC LEAVES2 ARGONAUTE1 revoluta

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