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Cloning and Sequence Analysis of a Novel Cold-Adapted Lipase Gene from Strain lip35 (Pseudomonas sp.)

Agricultural Sciences in China 2008年第10期7卷 1216-1221页

作者： WANG Cai-hong GUO Run-fang YU Hong-wei JIA Ying-min Department of Biology Engineering Agricultural University of Hebei Baoding 071000 P.R.China

A combination method of the usual-pcr and reverse-pcr for the cloning of a novel lipase gene directly from the total genomic DNA of strain lip35 （Pseudomonas sp.） is described, whereby a lipase gene （lip） was cloned directly from genomic DNA. The sequence data have been deposited in the GenBank and EMBL data bank with the accession number EU414288. The nucleotide sequence showed a major open reading frame encoding a 59-kDa protein of 566 amino acid residues, which contained a lipase consensus sequence GXSXG. The lipase lip had 74 and 70% homologies with the lipases of an uncultured bacterium and P. fluorescens PfO-1, respectively, but it did not show any overall homology with lipases from other origins. The functional lipase was obtained when the lip gene was expressed in Pichia pastoris GS115.

关键词： pcr reverse-pcr lipase gene clone sequence analysis

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