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Cloning and characterization of the gene encoding an ubiquitin-activating enzyme E1 domain-containing protein of silkworm, Bombyx moil

引用

Insect Science 2010年第2期17卷 75-83页

作者： Ping Wu Mu-Wang Li Yun-Feng Jiang Zi-Sheng Wang Xi-Jie Guo Sericultural Research Institute Chinese Academy of Agricultural Sciences College of Biotechnology and Environmental Engineering Jiangsu University of Science and Technology Zhenjiang Jiangsu Province China

Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus （BmCPV） is one of the major viral pathogens for the silkworm. To date, the molecular mechanism of BmCPV invasion has been unclear. We cloned the full length complementary （c）DNA which encodes the ubiquitin-activating enzyme El-domain containing proteinl （UbE1DC1） ofBombyx mori by using suppression subtraefive hybridization （SSH） and rapid amplification of com- plementary （c）DNA ends （RACE）. The full-length edna of UbE1DClgene is 1 919 bp, consisting of a 100 bp 5＇ untranslated region, a 637 bp 3＇ untranslated region and an 1 182 bp open reading frame （ORF）, encoding a 393 amino acid protein. The protein contained the THiF_MoeB_hesA_family domain, an adenosine triphosphate binding site, which belongs to the family of ubiquitin-activating enzyme El. Reverse transcription - polymerase chain reaction analysis from the silkworm tissues, namely silk gland, hemo- cyte, fat body, gonad and midgut revealed that UbE1DC1 was expressed in all the five tissues. The real-time quantitative polymerase chain reaction analysis indicated that the relative expression of UbE1DC1 in the normal midgut was approximately 9.78-fold of that in the BmCPV-infected midgut. It is implicated that UbEIDCI may play an important role in the interaction between the host and BmCPV invasion.

关键词： Bombyx mori Cytoplasmic polyhedrosis virus midgut quantitative real-time PCR rapid amplification of edna ends suppression subtractive hybridization

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