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pten基因转染的子宫内膜癌细胞对阿霉素诱导凋亡的敏感性

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中华肿瘤杂志 2005年第9期27卷 513-515页

作者：万小云毛愉燕横山康宏浙江大学医学院附属妇产科医院杭州310006 日本岐阜大学医学部妇产科

目的探讨pten基因是否增强子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞对阿霉素的敏感性。方法将pten基因转染前、后的Ishikawa细胞分别暴露于系列浓度的阿霉素,以MTT法测定这些细胞对阿霉素的敏感性,并通过Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡... 详细信息

目的探讨pten基因是否增强子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞对阿霉素的敏感性。方法将pten基因转染前、后的Ishikawa细胞分别暴露于系列浓度的阿霉素,以MTT法测定这些细胞对阿霉素的敏感性,并通过Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况。同时,以免疫沉淀Westernblot法观察阿霉素对Bad和Akt/PKB蛋白磷酸化的影响。结果阿霉素以剂量依赖方式诱导全部细胞系的细胞凋亡,但对表达pten的克隆细胞所诱导的凋亡比对亲本株Ishikawa细胞更明显。低浓度阿霉素(0.1μmol/L)不引起pten蛋白缺失的Ishikawa细胞凋亡,但却能诱导表达pten蛋白克隆细胞凋亡;高浓度阿霉素(1μmol/L)诱导全部细胞系的细胞凋亡,但凋亡的发生率在表达pten的克隆细胞中明显高于亲本株Ishikawa细胞。在表达pten的克隆细胞中,磷酸化Akt/PKB和磷酸化Bad(Ser-136)的水平均下降。阿霉素降低了全部细胞系的磷酸化Akt/PKB和磷酸化Bad(Ser-136)水平,但在表达pten的克隆细胞中降低最明显。结论pten基因转染明显地增强了Ishikawa细胞对阿霉素的化学敏感性,阿霉素可能是通过下调PI3k/Akt/PKB信号途径而与pten蛋白共同发挥凋亡诱导作用。

关键词： pten基因子宫内膜肿瘤阿霉素凋亡 pten基因转染化学敏感性癌细胞系诱导凋亡子宫内膜 Hoechst33258

pten基因对慢性粒细胞白血病Survivin、Xiap、Smac调控的研究

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中华医学杂志 2011年第40期91卷 2868-2872页

作者：成志勇万建设王亚丽梁丽青梁文同穆敬芦希潘崚河北省保定市第一医院血液科 071000 河北省保定市第一医院骨科 071000 河北医科大学第二医院血液科四川大学华西医院血液科

目的探讨肿瘤抑制基因pten对人慢性粒细胞白血病（CML）中生存素（Survivin）、X连锁凋亡抑制蛋白（Xiap）、线粒体促凋亡蛋白（Smae）调控的作用。方法（1）将携带有野生型pten和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-pten—GFP）及对照载体腺病毒... 详细信息

目的探讨肿瘤抑制基因pten对人慢性粒细胞白血病（CML）中生存素（Survivin）、X连锁凋亡抑制蛋白（Xiap）、线粒体促凋亡蛋白（Smae）调控的作用。方法（1）将携带有野生型pten和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-pten—GFP）及对照载体腺病毒（Ad—GFP）转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562，四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞增殖抑制率；流式细胞仪检测转染效率、细胞周期及凋亡率；荧光定量PCR（FQ-PCR）检测pten、Survivin、Xiap、Smacm RNA水平变化，Western印迹检测pten蛋白表达水平的变化。（2）研究10例慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）、10例慢性粒细胞白血病急变期（CML-BC）及10名健康人（NC）骨髓单个核细胞内pten、Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平变化。结果以感染复数（MOI）=200转染K562细胞后，Ad—pten-GFP组K562细胞最大增殖抑制率为38．6％，转染3d后Ad—pten—GFP组K562细胞内Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平（0．0700±0．0059、0．0089±0．0006、0．0600±0．0039）均明显低于Ad-GPF组（0．4370±0．0790、0．0661±0．0072、0．1580±0．0078）和未转染组（0．4530±0．0810、0．0700±0．0079、0．1770±0．0085）。转染Ad—pten—GFP组与转染Ad—GFP相比Survivin mRNA表达水平降低6．14倍、Xiap降低7．44倍，而Smac mRNA降低2．95倍（均P〈0．01）。CML—BC患者中pten mRNA表达水平低于CML-CP及健康对照组，而Survivin、Xiap、Smac mRNA在CML—BC患者中均高于CML—CP及健康对照组（均P〈0．01）。结论Survivin、Xiap、Smac基因可能在pten介导的慢性粒细胞白血病细胞凋亡通路中参与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。

关键词：白血病基因肿瘤抑制 pten基因 Survivin Xiap Smac

pten基因编码产物与子宫内膜癌发生发展的相关性研究

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癌症 2003年第6期22卷 640-644页

作者：高庆蕾叶飞李静邢辉卢运萍马丁华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科湖北武汉430030

背景与目的:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(phosphataseandtensionhomologydeletedonchromosometen,pten)是迄今发现的第一个具有磷脂酶活性的抑癌基因,该基因突变或缺失及蛋白表达异常与多种肿瘤的发生、发展密切相关。... 详细信息

背景与目的:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(phosphataseandtensionhomologydeletedonchromosometen,pten)是迄今发现的第一个具有磷脂酶活性的抑癌基因,该基因突变或缺失及蛋白表达异常与多种肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨抑癌基因pten与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)方法测定24例子宫内膜癌组织、10例子宫内膜非典型增生组织、10例子宫内膜增生组织和10例正常子宫内膜组织的ptenmRNA表达水平;SP免疫组化法测定73例子宫内膜癌组织(其中腺癌57例)、25例子宫内膜非典型增生组织、71例子宫内膜增生组织和31例正常子宫内膜组织的pten蛋白表达水平,并将结果与各病例的组织学类型、组织学分级、肌层浸润深度和临床分期等生物学行为进行相关性分析。结果:在转录水平和蛋白水平,子宫内膜腺癌组和癌前病变组中pten的表达均明显低于内膜增生症组和正常子宫内膜组,各组组织中ptenmRNA相对含量分别为0.35±0.13、0.46±0.11、2.32±0.32、2.45±0.51;pten蛋白表达缺失率分别为66.67%(38/57)、76.00%(19/25)、5.63%(4/71)和0%(0/31)。pten蛋白表达缺失率与其组织学类型和组织学分级有关(P均<0.01),?

关键词： pten基因子宫内膜癌相关性肿瘤生物学 RT-PCR 临床分期免疫组织化学

pten基因对K562细胞增殖、凋亡及对Bcl-2和Caspase家族的影响

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四川大学学报（医学版） 2009年第4期40卷 679-683页

作者：成志勇梁文同牛志云薛芳姚丽潘崚河北医科大学第二医院血液内科石家庄050000 保定市第一医院血液内科

目的探讨肿瘤抑制基因pten对人慢性粒细胞白血病K562细胞系的增殖、凋亡及对凋亡相关基因Bcl-2及Caspase-3/7及-9的影响。方法将携带有野生型pten及绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒(Ad-pten-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血... 详细信息

目的探讨肿瘤抑制基因pten对人慢性粒细胞白血病K562细胞系的增殖、凋亡及对凋亡相关基因Bcl-2及Caspase-3/7及-9的影响。方法将携带有野生型pten及绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒(Ad-pten-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病K562细胞系。通过MTT检测细胞生长曲线,流式细胞仪分析转染效率、细胞凋亡率和细胞增殖指数,同时观察光镜、电镜下细胞形态,DNA ladder、荧光染色等方法检测细胞凋亡,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测pten及Bcl-2 mRNA水平变化,Western Blotting检测pten及Bcl-2蛋白变化,应用试剂盒检测Caspase-3/7及-9蛋白活性。结果以感染复数为200的Ad-pten-GFP转染K562细胞后,最大生长抑制率为37.1%,早期和中晚期凋亡率均高于转染Ad-GFP组和未转染组(Ppten基因3d后Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平分别是Ad-GFP组的0.27倍和0.58倍,Caspase-3/7及-9蛋白活性在转染pten基因后3d内呈时间依赖性升高。结论过表达pten基因可能通过抑制抗凋亡分子Bcl-2表达,增强Caspase-3/7及-9活性从而抑制K562细胞系增殖,促进细胞凋亡。

关键词： pten基因腺病毒 K562细胞系 Bcl-2 Caspase-3/7 Caspase-9

pten基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

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中国组织工程研究 2015年第41期19卷 6590-6594页

作者：陈毅陆晓东刘丹平屠冠军浙江大学金华医院浙江省金华市321000 辽宁医学院附属第一医院辽宁省锦州市121001 中国医科大学附属第一医院辽宁省沈阳市110001

背景:脊髓损伤后脊髓自身的修复和再生能力有限,细胞移植治疗脊髓损伤具有很强的临床应用价值和前景。目的:探讨pten基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,以期为组织工程提供更优良的种子细胞。方法:采用脂质体法转染pten基因... 详细信息

背景:脊髓损伤后脊髓自身的修复和再生能力有限,细胞移植治疗脊髓损伤具有很强的临床应用价值和前景。目的:探讨pten基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,以期为组织工程提供更优良的种子细胞。方法:采用脂质体法转染pten基因特异的si RNA沉默pten基因,RT-PCR检测pten基因的表达,通过细胞生长曲线、细胞周期、Transwell实验观察pten基因修饰后细胞生物学特性的变化。结果与结论:pten基因在骨髓间充质干细胞中高表达并且siR NA成功干扰了pten基因的表达,pten基因沉默后的细胞具有更强的存活、增殖、迁移能力,更适合作为组织工程的种子细胞。

关键词：骨髓间质干细胞 pten磷酸水解酶 RNA干扰组织工程干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞 pten基因国家自然科学基金

pten基因和血管内皮生长因子表达与肝癌浸润转移的关系

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中华肝脏病杂志 2004年第12期12卷 759-760页

作者：李学锋邹益友周明欢湖南湘西自治州人民医院消化科吉首416000 中南大学湘稚医院消化内科

肿瘤生长及转移有赖于血管的形成,血管内皮生长因子(VEGF)是肿瘤新生血管生成的一个重要调控因素,VEGF过表达与肿瘤浸润转移及不良预后密切相关;pten是一新的抑癌基因,其抑癌机制尚不清楚,在肝癌中pten与VEGF的关系尚未阐明.我们检测了3... 详细信息

肿瘤生长及转移有赖于血管的形成,血管内皮生长因子(VEGF)是肿瘤新生血管生成的一个重要调控因素,VEGF过表达与肿瘤浸润转移及不良预后密切相关;pten是一新的抑癌基因,其抑癌机制尚不清楚,在肝癌中pten与VEGF的关系尚未阐明.我们检测了37例肝癌中pten、VEGF表达,并探讨其与临床病理学特征的关系.

关键词：肝癌血管内皮生长因子 pten基因癌浸润转移 VEGF 过表达临床病理学特征调控因素生成

pten基因的沉默对骨髓间充质干细胞体外生物学特性和体内移植治疗心肌梗死的影响

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临床心血管病杂志 2011年第4期27卷 307-312页

作者：雷莹陈杭许红陈毅金华市中心医院心血管内科二科浙江金华321000 中国医科大学附属第一医院

目的:研究pten基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学性状的影响,并观察其在心肌梗死区域的存活和增殖情况。为干细胞移植治疗心肌梗死提供更优良的种子细胞。方法:通过脂质体法将pten基因特异的siRNA转染入骨髓间充质干细胞。RT-PCR法和Wes... 详细信息

目的:研究pten基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学性状的影响,并观察其在心肌梗死区域的存活和增殖情况。为干细胞移植治疗心肌梗死提供更优良的种子细胞。方法:通过脂质体法将pten基因特异的siRNA转染入骨髓间充质干细胞。RT-PCR法和Western blot法检测pten基因RNAi前后的mRNA和蛋白表达的变化。体外实验采用MTT法描绘细胞生长曲线,流式细胞仪(PI单染法)检测细胞周期,制备细胞缺血缺氧模型,流式细胞仪(Annexin V和PI双染法)检测各组细胞对缺血缺氧的耐受情况。体内实验通过制备动物心肌梗死模型,移植骨髓间充质干细胞,采用荧光显微镜观察细胞的存活和增殖情况。结果:RNAI组的pten基因的mRNA和蛋白表达均明显下降,pten基因被明显抑制。体外实验:MTT法显示RNAI组的细胞生长活力明显增强。RNAI组的细胞周期向右偏移。RNAI组对缺血缺氧的耐受能力明显增强。体内实验:荧光显微镜显示RNAI组移植的骨髓间充质干细胞在心肌梗死区域的数量明显增多。结论:pten基因的沉默能有效地促进骨髓间充质干细胞的增殖,使细胞周期向右偏移,同时能抑制细胞凋亡,增强细胞对缺血缺氧的耐受能力。体内实验也证实,pten基因的沉默后的骨髓间充质干细胞更容易在心肌梗死区域存活和增殖,为干细胞移植治疗心肌梗死提供新的思路。

关键词：心肌梗死 pten基因 RNAi 骨髓间充质干细胞

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pten基因与肿瘤耐药

中国新药杂志 2008年第15期17卷 1291-1294页

作者：吴新刚闾四平湖南省岳阳职业技术学院医学基础部岳阳414000

肿瘤对抗肿瘤药物产生耐受性是肿瘤内科治疗失败的主要原因。pten是一种具有双特异性磷酸酶活性的抑瘤基因,其失活与多种肿瘤的发生发展密切相关。近年来的研究表明,pten在肿瘤耐药中发挥着重要作用。pten失活可介导肿瘤对表皮生长因子... 详细信息

肿瘤对抗肿瘤药物产生耐受性是肿瘤内科治疗失败的主要原因。pten是一种具有双特异性磷酸酶活性的抑瘤基因,其失活与多种肿瘤的发生发展密切相关。近年来的研究表明,pten在肿瘤耐药中发挥着重要作用。pten失活可介导肿瘤对表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂、抗Her-2/ErbB2人源化单克隆抗体曲妥珠单抗(trastuzumab)、抗EGFR人/鼠嵌合型单克隆抗体西妥昔单抗(cetuximab)、NOTCH1抑制剂、顺铂、阿霉素和紫杉醇等的耐受性,其机制与pten对PI3K-AKT信号途径的抑制有关。现综述pten基因的生物学特性及其在近年研究较多的几种肿瘤靶向药物耐药中的作用特征。

关键词： pten基因化疗肿瘤多药耐药

pten基因突变及mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的关系

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中国肿瘤临床 2004年第7期31卷 365-367,371页

作者：陈颖郑华川杨雪飞赵雨杰侯伟健汪桂兰辛彦沈阳市妇婴医院中国医科大学2001级中国医科大学附属第一医院肿瘤所第四研究室沈阳市110001 中国医科大学基础医学院生物芯片中心沈阳市妇婴医院

目的:研究抑癌基因pten突变和mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法:利用PCR-SSCP方法检测正常卵巢(n=5)、上皮性卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)、卵巢癌(n=60)中pten外显子5的突变,采用RT-PCR检测这些组织中mRNA表达,比较PTE... 详细信息

目的:研究抑癌基因pten突变和mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用。方法:利用PCR-SSCP方法检测正常卵巢(n=5)、上皮性卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)、卵巢癌(n=60)中pten外显子5的突变,采用RT-PCR检测这些组织中mRNA表达,比较pten基因突变和mRNA表达与卵巢癌临床病理特征的关系。结果:仅在上皮来源的卵巢癌中发现5例(7.1%)pten基因外显子5突变,pten基因mRNA在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中的表达水平低于正常卵巢和卵巢囊肿(Ppten基因mRNA表达与卵巢癌的临床病理分期呈负相关(Ppten基因mRNA表达在卵巢内膜样癌中表达最低,显著低于浆液性或粘液性卵巢囊腺癌(Ppten基因外显子5突变及mRNA表达下调。pten基因mRNA表达下调与卵巢上皮性恶性肿瘤,特别是内膜样腺癌的发生和病理生物学行为关系密切。因此,pten基因有望作为反映卵巢癌病理生物学行为的客观分子指标。

关键词：卵巢肿瘤 pten基因突变基因表达