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Screening large numbers of recombinant plasmids:modifications and additions to alkaline lysis for greater efficiency

引用

Progress in Natural Science:Materials International 2006年第11期16卷 1231-1232页

作者： N.V.CHANDRASEKHARAN Daniel L.SIMMONS Department of Chemistry and Biochemistry Brigham Young UniversityProvoUtah 84602USA

Selecting bacteria transformed with recombinant plasmid is a laborious step in gene cloning experiments. This selection process is even more tedious when large numbers of clones need to be screened. We describe here modifications to the ultra fast plasmid preparation method described previously by Law and Crickmore. The modified method is coupled to an efficient PCR step to rapidly determine orientation of the inserts. Compared to traditional methods of analysis requiring growth of overnight cultures, plasmid isolation and restriction enzyme digestion to determine orientation this procedure allows for the analysis and storage of a large number of recombinants within a few hours.

关键词： plasmid preparation polymerized chain reaction

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