检索结果-南通市图书馆

N-端加flag标签增加p21^(cip1/waf1)蛋白质稳定性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

癌变．畸变．突变 2006年第2期18卷 119-121页

作者：鲁凤民李雅娟庄辉北京大学医学部病原生物学系北京100083

背景与目的已知细胞分裂周期抑制因子p21通过蛋白酶体通路降解,其氨基端的泛素化可能参与了这一过程。Flag为一蛋白标签,常用于标记重组蛋白质,以便对靶蛋白进行生物学功能分析。本文旨在研究N-端加flag对p21蛋白质稳定性的影响。材料... 详细信息

背景与目的已知细胞分裂周期抑制因子p21通过蛋白酶体通路降解,其氨基端的泛素化可能参与了这一过程。Flag为一蛋白标签,常用于标记重组蛋白质,以便对靶蛋白进行生物学功能分析。本文旨在研究N-端加flag对p21蛋白质稳定性的影响。材料与方法建立稳定表达外源flag-p21蛋白质的NIH3T3细胞株,应用蛋白印迹法(WB)检测NIH3T3细胞表达的flag-p21,并比较其与内源p21蛋白质半衰期的差异;确定阻断蛋白酶体水解通路对其降解过程的影响。结果NIH3T3细胞表达的内源p21蛋白质半衰期约30min,而同一细胞表达的flag-p21融合蛋白半衰期则明显延长;用抑制剂MG-132阻断蛋白酶体水解通路后,p21蛋白质的量明显增加,但同一细胞内表达的flag-p21量却无明显改变。结论N-端加flag标签可增加p21蛋白质的稳定性。在对p21蛋白质的生物学功能进行研究时,应考虑N-端加flag对p21泛素化-蛋白酶体依赖的降解过程的影响。

关键词： p21^cip1/waf1 Flag标签蛋白酶体降解

人前列腺癌中p21^(cip1/waf1),Rb的表达意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第四军医大学学报 2001年第12期22卷 1108-1110页

作者：杨力军邵国兴刘荣福王禾陈宝琦第四军医大学西京医院泌尿外科陕西西安710033 第四军医大学唐都医院泌尿外科

目的　研究 p2 1cip1 /waf 1 及 Rb在人前列腺癌标本中的表达以及两者的相关性 ,以阐述它们与前列腺癌的病理分级及临床分期的关系 .方法　应用免疫组化 SABC法染色技术对 36例前列腺癌标本进行检测 ,观察 p2 1cip1 /waf 1 及 Rb在前列... 详细信息

目的　研究 p2 1cip1 /waf 1 及 Rb在人前列腺癌标本中的表达以及两者的相关性 ,以阐述它们与前列腺癌的病理分级及临床分期的关系 .方法　应用免疫组化 SABC法染色技术对 36例前列腺癌标本进行检测 ,观察 p2 1cip1 /waf 1 及 Rb在前列腺癌各病理分级 ,临床分期中的表达及相关性 .结果　在 36例人前列腺癌标本中 ,p2 1cip1 /waf 1和 Rb免疫组化阳性染色为棕黄色或棕褐色 ,分别定位于细胞质和细胞核 ,其中p2 1cip1 /waf 1阳性 19例 ,阳性率 5 2 .8% .Rb阳性 17例 ,阳性率47.2 % .在不同病理分级、临床分期之间差异均有显著性 ,但实验结果未发现 p2 1cip1 /waf 1 与 Rb有显著相关性 .结论　p2 1cip1 /waf 1 ,Rb的表达与前列腺癌组织的病理学分级、临床分期呈负相关性 ,在前列腺癌分子发病机制中可能涉及到p2 1cip1 /waf 1 。

关键词：前列腺肿瘤 p21^cip1/waf1 视网膜母细胞瘤免疫组织化学前列腺癌

Effect on Survivin Regulation of Transcription Level by p21^(waf1) Overexpression in HepG2 Hepatocellular Carcinoma Cells

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2008年第3期28卷 308-313页

作者：熊娟胡丽华李一荣窦丽芳蔡鹏程汤兆明王琳 Department of Clinical Laboratory Union HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology

The effect of cyclin-dependent kinase inhibitors cip1/wafl （p21） on regulatory expression of survivin transcription in human hepatocellular carcinoma cell HepG2 was observed and the related mechanisms explored. Doxorubicin （DOX） was used to treat HepG2. Eukaryotic vector pEGFp-C2-p21 was transfected into HepG2 by lipofectamine and positive clones were screened out by G418. The mRNA expression of p21 and survivin was detected by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction （RQ-pCR）. Flow cytometry was used to examine the cell cycle, and reverse transcription polymerase chain reaction （RT-pCR） was used to measure the levels of E2F-1 and p300. The results showed that：（1） After treatment with DOX, the expression of p21 was increased, whereas that of survivin was reduced during 24 h of treatment; （2） After transfection of pEGFp-C2-p21 into HepG2, p21 level was significantly enhanced to 2100.11-folds or 980.89-folds in comparison to HepG2 or HepG2-C2 group, and survivin level was markedly down-regulated to 0.54% or 0.59% relative to the control groups; （3） Overexpressed p21 resulted in GI/G0 phase arrest （F=31.59, p〈0.01）, meanwhile E2F-1 mRNA and p300 mRNA were reduced as compared with those of controls （FE2F-1=I25.28, p〈0.05; Fp300= 46.01, p〈0.01）. It was suggested that p21 could be a potential mediator of survivin suppression at transcription level in HepG2 cell, which might be through the block at G1/G0 phase and down-regulation of transcription factors E2F-1 and p300.

关键词： p21^cip1/waf1 survivin hepatocellular carcinoma gene expression regulation

Selective inhibition of cell growth by activin in SNU-16 cells

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

World Journal of Gastroenterology 2006年第19期12卷 3000-3005页

作者： Young Il Kim Hee Joo Lee Inkoo Khang Byung-Nam Cho Ha Kyu Lee East-West Medical Research Institute Kyung Hee University SeoulSouth Korea Department of Laboratory Medicine Kyung Hee University College of MedicineSeoulSouth Korea School of Biological Sciences Seoul National University SeoulSouth Korea Department of Life Sciences The Catholic University of Korea PuchonSouth Korea

AIM： To investigate whether activin regulates the cell proliferation of human gastric cancer cell line SNU-16 through the mRNA changes in activin receptors, Smads and p21^cip1/waf1. METHODS： The human gastric cancer cell lines were cultured, RNAs were purified, and RT-pCRs were carried out with specifically designed primer for each gene. Among them, the two cell lines SNU-5 and SNU-16 were cultured with activin A for 24, 48 and 72 h. The cell proliferation was measured by MTT assay. For SNU-16, changes in ActRIA, ActRIB, ActRIIA, ActRIIB, Smad2, Smad4, Smad7, and p21^cip1/waf1 mRNAs were detected with RT-pCR after the cells were cultured with activin A for 24, 48 and 72 h. RESULTS： The proliferation of SNU-16 cells was down regulated by activin A whereas other cells showed no change. Basal level of inhibin/activin subunits, activin receptors, Smads, and p21^cip1/waf1 except for activin βB mRNAs was observed to have differential expression patterns in the human gastric cancer cell lines, AGS, KATO III, SNU-1, SNU-5, SNU-16, SNU-484, SNU-601, SNU-638, SNU-668, and SNU-719. Interestingly, significantly higher expressions of ActR IIA and IIB mRNAs were observed in SNU-16 cells when compared to other cells. After activin treatment, ActR IA, IB, and IIA mRNA levels were decreased whereas ActR IIB mRNA level increased in SNU-16 cells. Smad4 mRNA increased for up to 48 h whereas Smad7 mRNA increased sharply at 24 h and returned to the initial level at 48 h in SNU-16 cells. In addition, expression of the p21^cip1/waf1 the mitotic inhibitor, peaked at 72 h after activin treatment in SNU-16 cells. CONCLUSION： Our results suggest that inhibition of cell growth by activin is regulated by the negative feedback effect of Smad7 on the activin signaling pathway, and is mediated through p21^cip1/waf1 activation in SNU-16 cells.

关键词： Human gastric cancer cell lines, Activin A Cell proliferation Activin receptors Smads p21^cip1/waf1

p21^(cipl/wafl)基因在C57BL/6N系小鼠腭突发育中对细胞增殖周期的调控作用

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

实用口腔医学杂志 1999年第1期15卷 57-59页

作者：李鑫金岩董绍忠朱萧玲西安第四军医大学口腔医学院病理科

目的：探讨腭裂形成过程中腭突间充质细胞的增殖周期的变化及其调节基因Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因表达的意义。方法：用原位杂交、ＴＵＮＥＬ染色检测两组小鼠腭突间充质细胞增殖周期调控基因Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因的表达及... 详细信息

目的：探讨腭裂形成过程中腭突间充质细胞的增殖周期的变化及其调节基因Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因表达的意义。方法：用原位杂交、ＴＵＮＥＬ染色检测两组小鼠腭突间充质细胞增殖周期调控基因Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因的表达及细胞程序性死亡的发生。结果：在腭突发育的垂直生长期、上抬期，实验组中ＴＵＮＥＬ阳性指数明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。同时，Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因ｍＲＮＡ的转录水平也比同期对照组腭突间质细胞中Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因的表达增高（Ｐ＜０．０５）。结论：在腭突发育时期，实验组小鼠腭突间充质未分化细胞增殖周期抑制。

关键词： p21^cip1/waf1 细胞凋亡鄂突发育基因调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

妇产科概论解剖、生理和组胚学

中国医学文摘（计划生育妇产科学） 2006年第5期25卷 333-339页

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

白藜芦醇诱导人成骨肉瘤细胞凋亡及其机制

河北医药 2007年第4期29卷 293-296页

作者：颉玉欣刘燕张进贵李亚郭晓华赵萌河北医科大学第三医院实验中心石家庄市050051 中国医学科学院血液病研究所

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)诱导人成骨肉瘤细胞株MG63的凋亡作用及其分子机制。方法应用不同浓度的白藜芦醇作用于MG63细胞,利用透射电镜观察细胞形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的增殖抑制率;流式细胞术(FCM)... 详细信息

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)诱导人成骨肉瘤细胞株MG63的凋亡作用及其分子机制。方法应用不同浓度的白藜芦醇作用于MG63细胞,利用透射电镜观察细胞形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞周期分布;反转录聚合酶链反应(RT-pCR)检测p21cip1/waf1 mRNA、Survivin mRNA的表达。结果白藜芦醇能明显抑制MG63细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。经白藜芦醇处理MG63细胞后,透射电镜下可见到凋亡细胞,FCM分析发现,10、20μg/ml的白藜芦醇处理细胞72h后,凋亡率分别为(11.9±0.6)%、(19.7%±0.9)%(ppCR检测到p21cip1/waf1表达升高,Survivin表达降低(pp21cip1/waf1表达、抑制Survivin的表达有关。

关键词：白藜芦醇 MG63 细胞凋亡 Survivin p21^cip1/waf1