检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库

MRp8/14对肺炎链球菌性脑膜炎小鼠脑组织HMGB1、AIF、GFAp及p-p38 mapk表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MRP8/14对肺炎链球菌性脑膜炎小鼠脑组织HMGB1、AIF、GFAP及p-p38...

作者：赵冰新苏州大学

学位级别：硕士

研究目的在全球范围内,细菌性脑膜炎(Bacterial Meningitis,BM)是感染密切相关的十大死亡原因之一,而肺炎链球菌(***,Sp)是导致人类BM最主要和最常见的致病菌之一。肺炎链球菌性脑膜炎(*** Meningitis,SpM)是由Sp感染引起的脑脊膜炎症,... 详细信息

研究目的在全球范围内,细菌性脑膜炎(Bacterial Meningitis,BM)是感染密切相关的十大死亡原因之一,而肺炎链球菌(***,Sp)是导致人类BM最主要和最常见的致病菌之一。肺炎链球菌性脑膜炎(*** Meningitis,SpM)是由Sp感染引起的脑脊膜炎症,可累及脑实质。SpM的主要病理改变包括软脑膜炎、脑膜血管充血、血脑屏障破坏、炎性细胞浸润、脑水肿及脑组织损害,且SpM患者的转归大部分取决于脑组织损害程度。治疗上即使给予针对性的抗生素等药物进行有效管理,但SpM依然存在较高的致死率及致残率,近一半幸存者遗留有认知功能障碍、听力下降,甚至引起瘫痪及癫痫等脑损害后遗症。因此,深入探究SpM的免疫病理机制,对改善疗效具有重要的临床意义高迁移率族蛋白B1(High Mobility Group Box 1 protein,HMGB1)几乎在所有真核细胞的细胞核中普遍存在,是一种高度保守的核蛋白。研究发现在脑损伤疾病的患者中,HMGB1在BM患者的脑脊液中高度表达。凋亡诱导因子(Apoptosis Inducing Factor,AIF)为氨基酸序列高度保守的一种黄素蛋白,在感染性脑损伤中起重要作用。AIF定位于线粒体膜上,一旦细胞被凋亡信号影响时,AIF可使核染色质凝聚及非依赖caspase的DNA片段化,促使脑细胞凋亡。胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic protein,GFAp)主要分布在脑星形胶质细胞中,参与细胞骨架的形成。研究发现,GFAp在BM患者中的表达量显著增高,对早期BM的诊断具有重要价值。髓样相关蛋白8/14(MRp8/14)是一种来源于中性粒细胞及单核巨噬细胞的钙离子结合蛋白,主要以异源二聚体MRp8/14存在并发挥生物学作用,是一种重要的内源性损伤相关分子。近年来,MRp8/14在感染性疾病方面的研究引起了高度的关注。研究显示在成人Still病、SLE及Crohn病等患者的血清中,MRp8/14浓度明显增高。但MRp8/14在中枢神经系统感染性疾病的作用我们知之甚少。研究发现,在SpM中,中性粒细胞来源的MRp14能诱导细菌清除以后的炎症反应但聚焦于更普遍存在的异源二聚体MRp8/14蛋白复合物在SpM病理生理过程中的作用及其机制研究可能更具有临床意义。本研究中,我们在前期工作的基础上进一步分析MRp8/14对SpM小鼠临床症状、脑组织病理变化及脑损伤标志物HMGB1、AIF、GFAp mRNA表达的影响,探讨MRp8/14对SpM小鼠脑损伤的影响,系统分析MRp8/14在SpM免疫病理损伤中的地位,研究结果将为寻找SpM除了抗生素疗法以外的免疫干预手段及改善本病的预后提供初步的实验依据。研究方法一、分析MRp8/14对SpM小鼠神经行为学变化、体质量改变的影响。1、分组:取48只健康雄性BALB/C小鼠,大小约为2月龄,随机分成4组:pBS组、MRp8/14组、Sp组、Sp+MRp8/14组;每组各有12只。腹腔麻醉后,向小鼠侧脑室定位注入40ul pBS+浓度为4.5×108cfu·mL-1的Sp 5ul来制作SpM模型pBS组注射 45ul pBS;MRp8/14 组:5ul pBS+0.5ug/ul MRp8/14 40ul;Sp 组:40ul pBS+4.5×108cfu·ml/1 的 Sp 5ul;Sp+MRp8/14 组:4.5×108cfu·mL-1 的 Sp 5ul+0.5ug/ul MRp8/14 40ul。2、在侧脑室注入细菌建模6h、24h、48h后,对各组实验小鼠进行以下评估:1)神经行为学评分;2)体质量的改变。二、分析MRp8/14对SpM小鼠脑组织病理变化的影响。动物建模和分组同第一部分实验方法,在细菌注射6h、24h、48h后,对各组实验小鼠进行:1)脑含水量测定;2)Nissl染色评价脑组织神经元的损伤情况。三、分析 MRp8/14 对 SpM 小鼠脑组织 HMGBI、AIF、GFAp 的 mRNA 及 p-p38 mapk蛋白表达的影响。动物建模和分组同第一部分实验方法，在细菌注射6h、24h、48h后,进行:1)采用Real-time pCR方法检测脑组织中脑损伤标志物HMGB1、AIF、GFAp mRNA的表达。2)免疫组织化学法检测小鼠脑组织p-p38 mapk蛋白的表达。结果一、MRp8/14对SpM小鼠临床症状的影响1、临床评分:采用Loeffler神经行为学评分法,对每个实验组小鼠在6h、24h、48h时的临床表现进行综合测评。各时间点MRp8/14组的临床评分与pBS组比较,差异无统计学意义(p>0.05);6h的Sp组临床评分与pBS组、Sp+MRp8/14组临床评分与Sp

关键词： MRp8/14 肺炎链球菌性脑膜炎 HMGB1 AIF GFAp p-p38 mapk

六味地黄汤对阿霉素肾病小鼠尿蛋白及肾小球p-p38 mapk、α-actinin-4、synaptopodin的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南中医药大学学报 2024年第7期44卷 1152-1159页

作者：徐文峰何泽云李旭华孙丽唐群彭亚军陈海莺湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208 银川市中医医院宁夏银川750000

目的探讨六味地黄汤对阿霉素肾病(adriamycin nephropaghy,ADRN)小鼠尿蛋白的干预作用及可能机制。方法30只SpF级雄性C57BL/6小鼠随机选取5只为空白组,余下小鼠以单次尾静脉注射阿霉素(0.01 g·kg^(-1))复制ADRN模型,2周后将造模成功的... 详细信息

目的探讨六味地黄汤对阿霉素肾病(adriamycin nephropaghy,ADRN)小鼠尿蛋白的干预作用及可能机制。方法30只SpF级雄性C57BL/6小鼠随机选取5只为空白组,余下小鼠以单次尾静脉注射阿霉素(0.01 g·kg^(-1))复制ADRN模型,2周后将造模成功的小鼠随机分为模型组、贝那普利组及低、中、高剂量六味地黄汤组,每组5只。空白组、模型组予等体积注射用水灌胃,贝那普利组予0.0013 g·kg^(-1)贝那普利灌胃,低、中、高剂量六味地黄汤组分别予9.75、19.5、39 g·kg^(-1)六味地黄汤灌胃,每日1次,连续8周。自动生化仪检测小鼠24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、血清肌酐、血清钾;HE染色法、电镜观察小鼠肾脏病理改变及足突形态;免疫组织化学法、Western bolt检测小鼠肾脏磷酸化p38 mapk(phosphorylated p38 mapk,p-p38 mapk)、α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、突触孔蛋白(synaptopodin)的表达;RT-pCR检测小鼠肾脏α-actinin-4、synaptopodin mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、24 h尿量、血清白蛋白降低,24 h尿蛋白定量升高(pp-p38 mapk蛋白表达升高(pptopodin蛋白及mRNA表达降低(pp-p38 mapk蛋白表达降低(pptopodin蛋白及mRNA表达均升高(pp>0.05)。结论六味地黄汤可能通过抑制p38 mapk通路活化和上调α-actinin-4、synaptopodin蛋白及mRNA表达,改善肾脏病理及足突融合,减轻足细胞损伤,减少ADRN小鼠尿蛋白。

关键词：阿霉素肾病六味地黄汤尿蛋白 p-p38 mapk α-辅肌动蛋白-4 突触孔蛋白

维普期刊数据库博看期刊

乌司他丁对急性呼吸窘迫综合征p38 mapk信号通路作用机制的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

乌司他丁对急性呼吸窘迫综合征p38 MAPK信号通路作用机制的研究

作者：程威山西医科大学

学位级别：硕士

目的:研究乌司他丁对内毒素(LpS)诱导下的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的影响,探讨其治疗ARDS的可能作用机制,为乌司他丁的临床应用提供进一步理论基础与实验依据。方法:选用健康、雄性SD大鼠40只,随机分成5组:正常对照组:在SD大鼠尾静脉注... 详细信息

目的:研究乌司他丁对内毒素(LpS)诱导下的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的影响,探讨其治疗ARDS的可能作用机制,为乌司他丁的临床应用提供进一步理论基础与实验依据。方法:选用健康、雄性SD大鼠40只,随机分成5组:正常对照组:在SD大鼠尾静脉注射1ml生理盐水;LpS组:在SD大鼠尾静脉注射大肠杆菌内毒素(LpS)5mg/Kg(使用前生理盐水稀释至1ml),复制ARDS模型;LpS+UTI组:造模方法同前,复制ARDS模型后立刻于腹腔左侧注射乌司他丁10万U/Kg(使用前生理盐水稀释至1ml);LpS+SB203580组:造模方法同前,复制ARDS模型后立刻于腹腔右侧注射p38 mapk阻断剂SB203580(5mg/Kg)(溶于0.1ml,10%二甲基亚砜DMSO,使用前用生理盐水稀释至1ml);LpS+UTI+SB203580联合组:造模方法同前,复制ARDS模型后立刻于腹腔左右侧分别注射乌司他丁和SB203580(剂量计算方法同前)。观察8h后,10%水合氯醛腹腔麻醉下开腹分离腹主动脉,抽取腹主动脉血测pa O2,酶联免疫吸附试验(ELISA)测肺组织细胞因子TNF-ɑ的含量,蛋白印迹法(Western Blot)测肺组织p38 mapk磷酸化蛋白表达程度,并行肺组织病理切片、电镜片对照分析。结果:1.大鼠一般情况比较:正常对照组大鼠活动自如,抓取时迅速逃避,精神状态好,呼吸均匀;LpS组大鼠出现精神萎靡,呼吸急促,口唇发绀,鼠毛散乱,行走不稳,并可听到部分大鼠哮鸣音;LpS+UTI组、LpS+SB203580组及二者联合组情况较LpS组好转。2.血气分析结果比较:LpS组pa O2明显低于正常对照组(ppS+UTI组、LpS+SB203580组、LpS+UTI+SB203580联合组pa O2均高于LpS组(ppS+UTI组pa O2高于LpS+SB203580组(ppS组与正常对照组相比肺组织TNF-ɑ含量明显升高(ppS+UTI组、LpS+SB203580组、LpS+UTI+SB203580联合组肺组织TNF-ɑ含量均明显低于LpS组(ppS+UTI组肺组织TNF-ɑ含量低于LpS+SB203580组(pp38 mapk磷酸化蛋白表达程度比较:LpS组与正常对照组相比肺组织p-p38 mapk的表达明显升高(ppS+UTI组、LpS+SB203580组、LpS+UTI+SB203580联合组肺组织p-p38 mapk的水平均低于LpS组(ppS+UTI组肺组织p-p38 mapk的水平低于LpS+SB203580组(pp-p38 mapk的相关性分析:p-p38 mapk与TNF-ɑ之间存在显著正相关(r=0.971,ppS组肺组织结构破坏,肺泡狭窄、塌陷,肺泡间隔增厚,富含炎性细胞浸润,同时可见肺微血管充血;LpS+UTI组、LpS+SB203580组、LpS+UTI+SB203580联合组相比LpS组肺组织损伤有所减轻,炎性细胞在肺泡间隔浸润减少,肺泡间隔增厚有所减轻。7.肺泡Ⅱ型上皮细胞电镜片比较:正常对照组:肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质内板层小体密度均匀,形态清晰完整;LpS组:肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质内出现板层小体排空并且显著,可见空泡化;LpS+UTI组、LpS+SB203580组及二者联合组与LpS组相比肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质内板层小体排空及空泡化减轻。结论:在本实验中,p-p38 mapk的表达程度与TNF-ɑ含量成正相关,在ARDS模型中,TNF-ɑ含量和p-p38 mapk的表达量明显升高,pa O2明显降低,经乌司他丁、p38mapk特异性阻断剂SB203580和两者联合治疗后TNF-ɑ含量和p-p38 mapk的表达量降低,pa O2上升,且两者联合治疗比其单一治疗效果更明显,乌司他丁的疗效优于SB203580,由此可推论,乌司他丁对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)具有肺保护作用,并且乌司他丁通过对p38 mapk通路的抑制,减轻炎症反应来达到治疗ARDS的肺保护作用,另乌司他丁联合p38 mapk特异性阻断剂SB203580对ARDS的肺组织可达到协同保护作用,乌司他丁对ARDS的抗炎作用还存在其他通路。

关键词：急性呼吸窘迫综合征乌司他丁 p-p38 mapk TNF-ɑ 炎症反应

脑缺血预处理通过p38 mapk介导GLT-1蛋白表达上调而诱导脑缺血耐受

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

脑缺血预处理通过p38 MAPK介导GLT-1蛋白表达上调而诱导脑缺血耐受

作者：龚俭雪河北医科大学

学位级别：硕士

目的:丝裂原活化蛋白激酶家族(Mitogen-activated protein kinase, mapks)是细胞内广泛存在的一类含丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白激酶,介导细胞生长、发育、分裂、凋亡等多种生理过程。p38 mapk是mapks家族的一个亚型,大量研究发现,p38 MAp... 详细信息

目的:丝裂原活化蛋白激酶家族(Mitogen-activated protein kinase, mapks)是细胞内广泛存在的一类含丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白激酶,介导细胞生长、发育、分裂、凋亡等多种生理过程。p38 mapk是mapks家族的一个亚型,大量研究发现,p38 mapk信号传导通路与脑缺血损伤及脑缺血耐受诱导有着密切联系。我们既往的研究结果表明,在体脑缺血预处理通过引起星形胶质细胞谷氨酸转运体-1 ( glial glutamate transporter-1, GLT-1)大量表达而诱导脑缺血耐受,但脑缺血预处理引起GLT-1大量表达的机制目前尚不清楚。脑缺血预处理是否通过p38 mapk信号转导通路诱导GLT-1大量表达而发挥脑保护作用目前尚未见相关报道。因此,本实验旨在观察脑缺血耐受诱导过程中,p38 mapk激酶对大鼠海马CA1区谷氨酸转运体GLT-1蛋白表达的影响,探讨脑缺血预处理是否通过p38 mapk通路诱导GLT-1蛋白大量表达而发挥保护作用,从而为将来脑缺血性疾病的防治提供理论依据。方法:健康雄性Wistar大鼠(280～320g)300只,随机分为以下三部分:1脑缺血预处理对p-p38 mapk蛋白及GLT-1蛋白表达的影响除control组之外,其余大鼠均首先永久凝闭椎动脉,恢复2天后,进行假手术或脑缺血处理,具体分组如下:①control组(n=5);②sham组(n=45):只暴露双侧颈总动脉,不阻断血流;③脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning, CIp)组(n=45):夹闭双侧颈总动脉3 min,然后恢复血流再灌注;④损伤性缺血(ischemic insult, II)组(n=45):夹闭双侧颈总动脉8 min,然后恢复血流再灌注;⑤CIp+II组(n=45):夹闭双侧颈总动脉3 min作为脑缺血预处理,再灌2天后,再次夹闭双侧颈总动脉8 min作为损伤性缺血,然后恢复再灌注。除control组之外的其余各组,又分为9个时间点,即假手术或末次缺血后0 min、15 min、30 min、3 h、6 h、1 d、2 d、4 d、7 d(每个时间点n=5)。在规定的时间点,断头取海马脑组织,硫堇染色进行神经病理学评价;应用Western blot法观察p-p38 mapk蛋白及GLT-1蛋白的表达。2 p38 mapk的特异性抑制剂SB203580对脑缺血耐受诱导的影响具体分组如下:①sham组(n=5);②CIp组(n=5);③II组(n=5);④CIp+II组(n=5);⑤SB203580+sham组(n=15):暴露颈动脉前30分钟右侧脑室注射p38 mapk特异性抑制剂SB203580,其余步骤同sham组;⑥3% DMSO+CIp+II组(n=5);暴露颈动脉前30分钟右侧脑室注射3%DMSO 20μl,其余步骤同CIp+II组;⑦SB203580+CIp+II组(n=15):脑缺血预处理前30分钟右侧脑室注射SB203580,其余步骤同CIp+II组。其中,⑤、⑥、⑦组根据SB203580剂量不同,又分成1.25 nmol、2.5 nmol、5n mol 3个亚组,每个亚组n=5。末次缺血或假手术后7天取材,应用硫堇染色观察海马CA1区病理学分级和神经元密度,探讨p38 mapk的特异性抑制剂SB203580对脑缺血耐受诱导的影响。3 p38 mapk的特异性抑制剂SB203580对脑缺血耐受诱导过程中GLT-1蛋白表达的影响具体分组如下:①3% DMSO+CIp+II组(n=30);②SB203580+CIp+II(n=60)。根据设计,脑缺血预处理前30分钟侧脑室注射3% DMSO或SB203580,然后夹闭双侧颈总动脉3 min作为脑缺血预处理,再灌2天后,再次夹闭双侧颈总动脉8 min作为损伤性缺血,而后恢复再灌注。根据SB203580剂量不同,又分成2.5 nmol、5 nmol两个亚组,每个亚组n=30。于末次缺血后即刻(0 min)、3 h、6 h、1 d、4 d、7 d时取海马脑组织(每个时间点n=5),应用western blot法观察GLT-1蛋白的表达,探讨抑制p38 mapk信号转导通路对GLT-1蛋白表达的影响。结果:1在脑缺血耐受诱导过程中,大鼠海马CA1区p-p38 mapk蛋白和GLT-1蛋白的表达及其时间对比Western blot分析显示,control组大鼠海马CA1区有一定量的GLT-1蛋白的基础表达。但control组大鼠海马CA1区p-p38mapk蛋白的基础表达极低。

关键词：脑缺血预处理 GLT-1 p-p38 mapk SB203580 Western blot 大鼠

p38 mapk在子痫前期患者外周血及胎盘组织中的表达及对TNF-α、IFN-γ的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国优生与遗传杂志 2023年第8期31卷 1604-1609页

作者：姜璐璐朱晓琴王慧华馥徐州医科大学淮安临床学院医学遗传与产前筛查科江苏淮安223300 淮安市妇幼保健院群体保健科江苏淮安223022 徐州医科大学淮安临床学院妇科江苏淮安223300

目的探讨p38mapk在子痫前期患者外周血及胎盘组织中的表达及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法选取淮安市妇幼保健院住院分娩的子痫前期产妇30例为观察1组,重度子痫前期30例为观察2组,随机抽取同期正常行剖... 详细信息

目的探讨p38mapk在子痫前期患者外周血及胎盘组织中的表达及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法选取淮安市妇幼保健院住院分娩的子痫前期产妇30例为观察1组,重度子痫前期30例为观察2组,随机抽取同期正常行剖宫产分娩的产妇30例为对照组。均测血清p38 mapk、p-p38 mapk、TNF-α、IFN-γ水平及胎盘组织p38 mapk、p-p38 mapk表达。分析p38mapk、p-p38 mapk与TNF-α、IFN-γ的相关性,二元Logistic回归分析重症子痫前期的影响因素。结果观察1组、观察2组血清p38 mapk、p-p38 mapk、TNF-α、IFN-γ水平高于对照组,观察2组高于观察1组(pp38mapk、p-p38mapk表达强于对照组,观察2组强于观察1组(pp38 mapk、p-p38 mapk与胎盘组织中p38 mapk、p-p38 mapk呈正相关(pp38 mapk、p-p38 mapk与血清TNF-α、IFN-γ水平呈正相关(pp38 mapk、p-p38 mapk是重度子痫前期的独立影响因素(pp38 mapk、p-p38 mapk均呈高表达,且其表达水平与血清TNF-α、IFN-γ密切相关,以上因素共同参与子痫前期的发生、发展过程。

关键词： p38 mapk p-p38 mapk 子痫前期 TNF-α IFN-γ

维普期刊数据库

冰清膏调控p38 mapk/ATF2信号通路促进深Ⅱ度烫伤创面愈合

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中医学报 2024年

作者：马红娥胡睿王新甫郭佳军刘昕任瑞龙张文贤甘肃中医药大学中医临床学院甘肃中医药大学附属医院老年骨科

目的：探究“冰清膏”（BQG）对SD大鼠深Ⅱ度烫伤创面的治疗作用及潜在机制。方法：将冰清膏的中药原料粉碎过筛，以鸡蛋清为基质混合，形成不同剂量的冰清膏实验组。通过采用“热金属烫伤法”建立深Ⅱ度烫伤大鼠模型，将60只SD大鼠随... 详细信息

目的：探究“冰清膏”（BQG）对SD大鼠深Ⅱ度烫伤创面的治疗作用及潜在机制。方法：将冰清膏的中药原料粉碎过筛，以鸡蛋清为基质混合，形成不同剂量的冰清膏实验组。通过采用“热金属烫伤法”建立深Ⅱ度烫伤大鼠模型，将60只SD大鼠随机分为正常组（C组）、模型组（M组）、磺胺嘧啶银软膏组（SSD组）、冰清膏低剂量组（BQG-L组）、冰清膏中剂量组（BQG-M组）、冰清膏高剂量组（BQG-H组）。进行连续用药14天，分别在0、3、7、10、14天对创面进行拍照测量。在14天时，取皮肤组织进行HE染色检查，采用ELISA法测定7、14天大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量，同时使用Western Blot检测创面皮肤组织中磷酸化的p38 mapk、ATF 2蛋白的表达。结果：与M组比较，BQG-H组大鼠血清中各炎症因子水平均明显降低，差异具有明显统计学意义（pp-p38、p-ATF2蛋白表达量均明显低于M组，差异具有统计学意义（pp38 mapk/ATF2信号通路，从而抑制促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α的释放，加速创面愈合。

关键词：冰清膏深Ⅱ度烫伤创面 p-p38 mapk 伤口愈合炎症因子

p38mapk在脑缺血耐受诱导过程中大鼠海马中的表达

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

p38MAPK在脑缺血耐受诱导过程中大鼠海马中的表达

作者：贾雪芳河北医科大学

学位级别：硕士

目的:mapks是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与细胞增殖、分化和凋亡密切相关的细胞内信号转导酶类,是细胞质与细胞核联系的关键途径。研究发现,mapks信号转导通路在脑缺血及脑缺血耐受诱导过程中可能发挥重要作用。p38 mapk是1... 详细信息

目的:mapks是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与细胞增殖、分化和凋亡密切相关的细胞内信号转导酶类,是细胞质与细胞核联系的关键途径。研究发现,mapks信号转导通路在脑缺血及脑缺血耐受诱导过程中可能发挥重要作用。p38 mapk是1993年发现的mapk家族的一种亚型,由360个氨基酸组成的38KDa的蛋白。研究发现亚致死量的脑缺血(2分钟全脑缺血)通过激活p38 mapk而提高蒙古沙鼠海马锥体神经元的缺血耐受性,使其能够耐受其通常情况下无法耐受的严重脑缺血(5分钟的全脑缺血);p38 mapk的特异性抑制剂SB203580能够剂量依赖性地阻断2分钟全脑缺血所诱导的脑缺血耐受。但是,p38 mapk在脑缺血耐受诱导过程中的作用及机制还远未阐明。因此,本次实验旨在探讨在体情况下,全脑缺血预处理中p38 mapk在海马中的表达,为临床上脑血管疾病的防治研究提供新的线索和依据。方法:健康雄性Wistar大鼠160只,体重280-320g,随即分为4组。所有大鼠均首先永久凝闭椎动脉,恢复2天后,进行sham手术或脑缺血处理,具体分组如下:①sham组(n=40):只暴露双侧颈总动脉,不阻断血流;②脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning,CIp)组(n=40):夹闭双侧颈总动脉3 min后恢复再灌注;③损伤性缺血(ischemic insult, II)组(n=40):夹闭双侧颈总动脉8 min后恢复再灌注;④脑缺血预处理+损伤性缺血(CIp+II)组(n=40):夹闭双侧颈总动脉3min作为脑缺血预处理,再灌2天后,再次夹闭双侧颈总动脉8min作为损伤性缺血,然后恢复再灌注。每个组又根据末次缺血或手术后动物存活时间的不同分为8个时间点:即刻(0分钟)、15分钟、30分钟、3小时、1天、2天、4天、7天,每个时间点n=5。在规定的时间点,断头取海马脑组织,硫堇染色进行神经病理学评价;免疫组织化学染色法检测p-p38 mapk的表达。参照Kato分级方法,于光学显微镜下对海马CA1区组织学改变进行分级(Histological grade, HG),标准如下:0级,无神经元死亡;1级,散在神经元死亡;2级,成片神经元死亡;3级,几乎全部的神经元死亡。取双侧平均等级作为统计值。高倍镜下计数海马CA1区每1 mm区段内细胞膜完整、胞核饱满、核仁清晰的锥体细胞数目,每张切片双侧海马各计数3个区段,取平均数为神经元密度(Neuronal density, ND)。结果: 1神经病理学评价 Sham组大鼠海马CA1区,可见锥体神经元排列整齐、致密、共2～3层,细胞形态完整,胞核饱满,核仁清晰。HG为0～Ⅰ级。CIp组,各时间点锥体神经元的形态、结构及数量没有明显区别,海马CA1区无明显的DND,HG为0～Ⅰ级,7d时ND分别为204±7.21和194.67±8.08。II组8 min缺血打击后,从4d开始海马CA1区出现明显的DND,7d时HG为Ⅱ级、ND为17.33±11.37。与sham组相比,HG明显升高(ppp+II组各时间点海马CA1区无明显DND,7d时HG为0～Ⅰ级,ND为190.67±4.16。与II组相比,HG明显降低(ppp可以诱导海马CA1区神经元产生脑缺血耐受,使其能够抵抗通常会引起明显DND的严重脑缺血。CA3区的椎体神经元,在各组的各个时间点均未见到明显损伤。 2磷酸化p38 mapk在大鼠海马CA1区的表达 2.1同组不同时间点的比较 sham组海马CA1区免疫阳性细胞形态完整,胞核胞浆界限不清,为浅棕黄色。各时间总面积和平均光密度均无显著性差异。 CIp组在15min时胞核着色开始变深,3h、1d时胞核明显,呈深棕黄色,以3h最为明显,此后神经元胞核着色逐渐变浅,至7d时回落至即刻取材时间点水平。与即刻取材时间点相比,p-p38 mapk阳性标记物的总面积在15mind均明显增高,但以1d最显著,平均光密度在15mind时明显升高,以3h最显著(ppp+II组,即刻取材时间点可见免疫阳性物质有一定量表达。15min时阳性标记物的表达明显减少,细胞较稀疏,与即刻取材时

关键词：脑缺血耐受免疫组化 p-p38 mapk 海马大鼠

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

三水白虎汤的临床观察及药理药效学研究

三水白虎汤的临床观察及药理药效学研究

作者：杨敏第一军医大学

学位级别：硕士

一、目的与意义类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种古老的世界性疾病。流行病学调查结果显示，全世界成人发病率为0.5-1％。根据第15届国际关节炎与自身免疫病会议报道，我国成人RA患病率约为0.3％。RA有较高的致残率，患... 详细信息

一、目的与意义类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种古老的世界性疾病。流行病学调查结果显示，全世界成人发病率为0.5-1％。根据第15届国际关节炎与自身免疫病会议报道，我国成人RA患病率约为0.3％。RA有较高的致残率，患者往往承受巨大的心理压力，生活质量较常人明显降低。 RA属于多因子疾病，其具体发病原因还不清楚。从总体上讲，该病是在遗传易感性的基础上，外界因素促发的一种疾病。易感基因如HLA-DR4、HLA-DR10、HLA-DQ与该病有强烈的关联。DR分子和DQ分子之间基因互补、相互作用，共同介导人类RA患病的基因易感性。除MHC以外，人类的基因库里尚有多达10-15万种基因参与RA的病理过程，与免疫识别、细胞因子及其受体、或总体上和炎症过程直接相关。此外，身高、体重、性别、情绪、气候、环境、抽烟等和RA的发病也有密切的关系。 RA的病理机制研究也有长足的进展。T细胞谱系是认识RA病理机制的里程碑。目前较为流行的观点是RA为抗原呈递细胞和CD4+T细胞相互作用的结果。此外T细胞介导的关节炎症反应也与滑膜中TCRγδT细胞有关。Th1／Th2动态平衡的失调也是RA病理机制之一，其中恒定性自然杀伤性T细胞就可以产生保护性Th2细胞因子。但由于其特异性尚未得到确定，T细胞中心假说逐渐受到挑战。在滑膜增生反应中，滑膜T细胞的作用可能不是很显著，而巨噬细胞较之T细胞可能起着更为主要的作用。在RA相关的自身抗体中，作为RA的生物学标志，抗CCp抗体具有极高的特异性。动物试验表明，抗CCp抗体不仅仅是慢性炎症的一个附带现象，而是直接参与组织的损伤，放大RA炎症效应。细胞因子网络是RA病理破坏过程的关键环节。TNF-α被认为是细胞因子网络的中心，而MMp-1、MMp-3与RA联连接组织的破坏直接效应酶。除此之外，尚有部分白介素家族、趋化因子家族、生长因子家族等直接参与组织损伤。NF-κB、p38 mapk是两个独立的胞内通讯通路，在细胞因子网络发生、扩大的过程中起关键作用。上述易感基因、自身抗体、T细胞谱系和细胞因子等之间在RA的发病过程中相对独立，但都不能完全解释RA的病理过程，这些机制之间又存在一定的联系，从而形成一个非常复杂的网络。病理机制的不确定性导致治疗上的多靶点和盲目性。尽管经典的免疫抑制疗法在很大程度上可以改善病情，甚至可以达到临床治愈，但免疫抑制剂的长期服用可以导致众所周知的副反应，如甲氨喋呤、环磷酰胺的胃肠道反应和肝功能损害，来氟米特(Leflunomid，LEF)引起月经不调、继发性肺部及皮肤炎症等，同时还存在疗效上的平台期。正因为如此，病人的依从性依然很差。近年来针对细胞因子网络各治疗靶点的生物制剂研究取得了较多成果。重组人Ⅱ型TNF-α受体抗体融合蛋白、重组人IL-1已经在临床上用于RA的治疗。而抑制p38 mapk通路的各种制剂也正在试验中。这些生物制剂价格昂贵，存在一定风险，容易导致新的免疫紊乱，并受到适应症的限制，无法大范围推广。中医对RA痹证的病因病机早有清楚的认识，近年来各医家对“风寒湿”理论也作了较多的补充，中医药在RA的治疗上越来越发挥着重要作用。因此，如何大力开掘传统中医药的特长和潜在优势，加大传统效方的开发研究，是RA治疗中的一个迫切的课题。三水白虎汤(San Shui Bai Hu-decoction，SSBH)为临床自拟方，专为RA热痹证型而设，具有清热除湿、祛风通络、活血止痛的功效，主要用于RA活动期及炎症进展期，表现为关节红肿疼痛、局部灼热、伴有全身热象者。其药物涉及水牛角、寒水石、白芥子、虎杖、生地、鸡血藤等。肖长虹博士多年运用SSBH配合其他药物治疗RA热痹，取得肯定疗效，并在临床运用中不断加以改进。为进一步验证SSBH的疗效，初步探讨其部分基本药理机制，拟对SSBH进行临床研究，观察其对RA热痹各项临床及免疫学指标的影响;通过胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis，CIA)动物模型试验，观察SSBH对CIA鼠病理改变的影响，并探讨其基本作用机制。二、方法与内容 ***的临床观察采用随机对照的研究方法，对2005年5月至2006年10月于南方医院中医风湿科就诊的117名RA患者进行观察。按既定标准纳入的117例RA热痹证型患者随机分为两组，两组患者在年龄、性别、病程、症候特征以及实验室指标、用药情况上都具有可比性。对照组给予(58例)LEF治疗，治疗组(59例)在此基础上加服SSBH。疗程为1年。分别在治疗前、治疗2个月、6个月、1年后观察HAQ、ESR、CRp、IgG-RF、CCp-Ab等指标的前后变化。 ***对大鼠CIA的影响选取CIA模型鼠33只，随机分为3组，即生理盐水对照组、SSB

关键词：三水白虎汤类风湿关节炎 CIA MMps p-p38 mapk