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普罗布考对单侧输尿管梗阻大鼠MDA、MLK3、p-p38、Ⅲ型胶原表达的影响

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普罗布考对单侧输尿管梗阻大鼠MDA、MLK3、P-P38、Ⅲ型胶原表达的...

作者：霍振霞河北医科大学

学位级别：硕士

目的:肾间质纤维化(RIF)是慢性肾脏病进展为终末期肾病的共同终点,病理表现为肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,表达肌成纤维细胞标志物,如α-SMA蛋白,分泌细胞外基质(ECM),产生大量胶原蛋白并在肾间质内过度沉积。近年来研究表明,肾... 详细信息

目的:肾间质纤维化(RIF)是慢性肾脏病进展为终末期肾病的共同终点,病理表现为肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,表达肌成纤维细胞标志物,如α-SMA蛋白,分泌细胞外基质(ECM),产生大量胶原蛋白并在肾间质内过度沉积。近年来研究表明,肾间质纤维化的发生发展与氧化应激有密切关系,肾脏氧自由基的产生过多、清除减少,造成自由基产生及清除失衡是慢性肾间质纤维化的重要致病机制之一。普罗布考在临床上主要用于治疗和预防心血管疾病,具有强抗氧化作用,据研究,普罗布考可通过抑制活性氧(ROS)的生成和脂质过氧化反应,进而抑制氧化应激,还可以通过下调细胞因子的表达(例如转化生长因子-β,TGF-β)和结缔组织生长因子(CTGF)保护受高糖影响的系膜细胞。参与肾间质纤维化的多条信号通路能够被氧化应激激活,其中p38又称为有丝分裂元活化蛋白激酶(MApK)应激信号通路,介导了细胞生长、分化、增殖、凋亡、炎症反应等多种病理生理过程,在肾间质纤维化进程中起重要作用。有研究证实氧化应激激活后ROS生成增多,从而诱导MLK3表达上调,激活下游的p38,使其磷酸化表达增加,最终导致Ⅲ型胶原表达增加,而普罗布考作为抗氧化剂,可通过抑制氧化应激,进而减少ROS产生。本实验目的通过建立单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型并应用普罗布考进行干预,观察其对丙二醛(MDA)、MLK3、p-p38及Ⅲ型胶原在大鼠UUO模型中表达的影响,探讨普罗布考减轻、延缓肾间质纤维化,肾脏保护作用的可能机制,为延缓慢性肾脏病的进展提供新的治疗依据。方法:将54只清洁级健康雄性SD大鼠(体重180g±20g)适应性喂养1周,编号后随机分为三组:假手术组(Sham组,A组),UUO组(模型组,单侧输尿管结扎组,B组),治疗组(普罗布考干预组,C组),每组各18只。于术前12小时开始禁食水,建立单侧输尿管梗阻模型。三组大鼠均于术前1天开始给药,治疗组(C组)给予普罗布考500mg/kg/d灌胃,假手术组、UUO组给予等量的生理盐水灌胃。术后自由进食饮水,每组分别于术后第3、7、14天各处死6只大鼠,留取左肾标本,用0.9%生理盐水充分冲洗后横断为四部分,取中间1/4固定于4%多聚甲醛中,用于制作病理切片,采用HE及Masson染色,观察光镜下大鼠肾组织病理改变及肾间质纤维化程度,使用免疫组化技术检测MLK3、p-p38、III型胶原在肾组织中的表达。余3/4分别置于标记好的Ep管中,-80℃冰箱冻存,用于丙二醛测试盒TBA法检测肾组织MDA含量,Western Blot检测p-p38表达。所有实验结果均采用SpSS 20.0统计分析软件进行统计学处理,以均数±标准差(±S)表示统计结果,应用单因素方差分析的统计学方法对数据进行分析,pp均p均p-p38及Col-Ⅲ免疫组织化学染色:MLK3:A组,UUO术后3个时间点肾小管上皮细胞、系膜细胞可见基础量表达;在3个时间点,B组相较于A组,肾小管上皮细胞及肾间质内明显表达,且随梗阻时间的延长表达量呈递增趋势,有统计学差异(p均p均p-p38:A组,UUO术后3个时间点肾小管上皮细胞、肾间质、细胞核都只有基础水平的表达;在3个时间点,B组相较于A组,肾小管上皮细胞、肾间质、细胞核明显表达,且随着梗阻时间的延长表达量进行性增加(p均<0.05);C组,肾小管上皮细胞、肾间质、细胞核强阳性表达,表达量随梗阻时间的延长进行性升高,与同时期B组相较有所减轻,但

关键词：普罗布考肾间质纤维化 ROS MLK3 p-p38 Ⅲ型胶原

丙戊茶碱对切口痛大鼠镇痛机制与MKp-1/p-p38关系的研究

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丙戊茶碱对切口痛大鼠镇痛机制与MKP-1/p-p38关系的研究

作者：杨园园兰州大学

学位级别：硕士

第一部分计算Ro 318220对丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的 IC50 值目的:计算鞘内注射Ro 318220对大鼠脊髓MKp-1表达的IC50值。方法:采用健康、雄性、SD大鼠30只,体重250-280g、月龄1.5-2.0,按随机数字表法分为5组(n=6):Naive组(Ⅰ组)、Ro 3... 详细信息

第一部分计算Ro 318220对丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1的 IC50 值目的:计算鞘内注射Ro 318220对大鼠脊髓MKp-1表达的IC50值。方法:采用健康、雄性、SD大鼠30只,体重250-280g、月龄1.5-2.0,按随机数字表法分为5组(n=6):Naive组(Ⅰ组)、Ro 318220 10ug/20ul组(Ⅱ组)、Ro 318220 20ug/20ul组(Ⅲ组)、Ro 318220 40ug/20ul组(Ⅳ组)、Ro 31822080ug/20ul组(Ⅴ组)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别鞘内注射Ro 318220 10、20、40、80ug/20ul,Ⅰ组不做处理。鞘内注射24h后各组大鼠用Western blot法检测脊髓MKp-1的表达量,用SpSS软件计算Ro 318220抑制大鼠脊髓MKp-1表达的IC50值。结果:Ro 318220抑制大鼠脊髓MKp-1表达的IC50值为33ug。结论:Ro 318220能有效抑制大鼠脊髓MKp-1的表达,其IC50值为33ug。第二部分丙戊茶碱对切口痛大鼠镇痛机制与MKp-1/p-p38关系的研究目的:评价鞘内注射丙戊茶碱对切口痛模型大鼠镇痛效果及此效果与MKp-1/p-p38的关系。方法:采用SpF级健康、雄性、SD大鼠90只,体重250-300g、月龄1.5-2.0,按随机数字表法分6组:空白组(Naive组,n=6)、生理盐水组(NS组,n=6)、二甲基亚砜组(DMSO组,n=6)、切口痛组(Ip组,n=30)、丙戊茶碱组(ppF组,n=36)、抑制剂组(Ro组,n=6)。Ip、ppF、Ro组制备大鼠急性切口痛模型,NS组鞘内注射10ul NS,DMSO组鞘内注射10ul 10%DMSO,ppF组术后30min鞘内注射ppF 10ug/10ul,Ro组术前鞘内注射Ro 318220 40ug/20ul,术后30min鞘内注射ppF 10ug/10ul。Naive,NS,DMSO,Ro组于术前和术后1d测机械缩足反应阈值(MWT),Ip组和ppF组于术前和术后2h、5h、1d、2d、3d测MWT。ppF组大鼠术后72h待行为学测试完毕用免疫荧光双标法检测脊髓MKp-1表达位置,剩余大鼠待行为学检测完毕用Western blot法检测脊髓MKp-1/p-p38表达量。结果:与Naive组比较,NS组和DMSO组MWT、MKp-1和p-p38表达差异均无统计学意义(p>0.05);与术前比较,Ip组术后2h、5h、1d、2d、3d大鼠MWT均降低(pp组术后5h、1d、2d、3d大鼠脊髓MKp-1表达均下降(pp-p38表达均增多(pp组比较,ppF组给药后2h、5h、1d、2d、3d大鼠MWT均升高(pp组比较,ppF组给药后5h、1d、2d、3d大鼠脊髓MKp-1表达均升高(pp-p38表达均下降(pppF组比较,Ro组鞘内预先注射Ro 318220后1d大鼠MWT降低(pp-1表达降低(pp-p38表达增多(pp-1在脊髓神经元、星型胶质细胞及小胶质细胞均表达。结论:丙戊茶碱具有缓解大鼠趾部切口痛作用,其机制可能与提高大鼠脊髓MKp-1的表达和降低p-p38的表达相关。

关键词： Ro 318220 MKp-1 抑制剂 IC50 丙戊茶碱 p-p38 鞘内注射神经胶质细胞急性痛

p-p38和VEGF在原发性肝癌中的表达及相关性研究

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江西医药 2009年第2期44卷 107-109页

作者：魏小勇饶荣生南昌大学医学院南昌330006 江西省肿瘤医院南昌330029

目的研究磷酸化p38(p-p38)和血管内皮生长因子(VEGF)在原发性肝癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学S-p法,检测53例原发性肝癌组织,30例非癌肝组织中的p-p38和VEGF表达情况并分析其相关性及临床病理特征。结果p-p38... 详细信息

目的研究磷酸化p38(p-p38)和血管内皮生长因子(VEGF)在原发性肝癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学S-p法,检测53例原发性肝癌组织,30例非癌肝组织中的p-p38和VEGF表达情况并分析其相关性及临床病理特征。结果p-p38和VEGF阳性表达率在原发性肝癌组织明显高于非癌肝组织,与患者年龄、性别、病理分型、肿块最大径等临床病理特征参数没有相关性。但与肝癌的转移、癌栓、组织分化程度有相关性,p-p38和VEGF在肝癌中的表达呈正相关r=0.458(p=0.001,pp-p38和VEGF过表达在肝癌的发展及浸润转移中具有重要作用。

关键词：原发性肝癌 p-p38 VEGF 免疫组织化学

电针对膝骨关节炎大鼠脊髓背角CB2R、p-p38和p-ERK表达的影响

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中国中医药信息杂志 2022年第7期29卷 60-66页

作者：李杨乐杨锋樊静杰郑晓慧朱芮郑洁陕西中医药大学针灸推拿学院陕西咸阳712046 陕西中医药大学第一临床医学院陕西咸阳712046 陕西省针药结合重点实验室陕西咸阳712046

目的观察电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠痛性行为学及脊髓背角大麻素受体2(CB2R)、p-p38、p-ERK表达的影响,探讨电针治疗KOA慢性疼痛的作用机制。方法48只SD大鼠随机分为空白组、盐水组、模型组、电针组、CB2R阻断组、CB2R阻断+电针组,每组... 详细信息

目的观察电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠痛性行为学及脊髓背角大麻素受体2(CB2R)、p-p38、p-ERK表达的影响,探讨电针治疗KOA慢性疼痛的作用机制。方法48只SD大鼠随机分为空白组、盐水组、模型组、电针组、CB2R阻断组、CB2R阻断+电针组,每组8只。除空白组和盐水组外,采用左膝关节腔注射谷氨酸钠碘乙酸制备KOA慢性疼痛模型,盐水组左膝关节腔注射生理盐水。注射后第15日,电针组于左侧“阳陵泉”“内膝眼”行电针刺激,15 min/次,1次/d,CB2R阻断组腹腔注射CB2R阻断剂,CB2R阻断+电针组腹腔注射CB2R阻断剂后行电针干预,5次为1个疗程,共2个疗程。每个疗程结束后间歇1 d进行痛性行为学评价,免疫荧光检测大鼠左侧脊髓背角CB2R表达及脊髓背角神经元CB2R、p-p38和p-ERK定位表达。结果与空白组比较,模型组大鼠左侧机械痛缩足阈和左后肢负重能力显著降低(pp-p38/NeuN、p-ERK/NeuN双染阳性细胞数显著增加(ppppppp-p38/NeuN和p-ERK/NeuN双染阳性细胞数显著减少(pp38/ERK信号通路激活有关。

关键词：膝骨性关节炎电针疼痛大麻素受体2 p-p38 p-ERK 大鼠

p-p38和SIAH2在乳腺浸润性导管癌中表达的意义

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中国血液流变学杂志 2014年第1期24卷 149-152页

作者：安淑香孙硼朋龙振海雷丽牛蕾阜新市中心医院病理科辽宁阜新123000 阜新市第五人民医院内科辽宁阜新123000 阜新市中心医院神经外科辽宁阜新123000

目的：研究p-p38和SIAH2蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法检测80例乳腺浸润性导管癌组织标本中p-p38和SIAH2的表达与临床病理因素的关系并分析两者相关性；检测10例癌旁组织中p-p38... 详细信息

目的：研究p-p38和SIAH2蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法检测80例乳腺浸润性导管癌组织标本中p-p38和SIAH2的表达与临床病理因素的关系并分析两者相关性；检测10例癌旁组织中p-p38和SIAH2的表达。结果乳腺浸润性导管癌组织中p-p38及SIAH2的阳性表达率分别为57.5%和60.0%， p-p38和SIAH2表达存在正相关（r=0.330，p＜0.05）。癌旁组织中两种蛋白仅有少量点状表达。p-p38蛋白表达与肿瘤临床分期和淋巴结转移密切相关，SIAH2蛋白表达与肿瘤的组织学分级、临床分期和淋巴结转移密切相关，两种蛋白表达与肿瘤大小、患者年龄无显著相关性。结论p-p38和SIAH2过表达在乳腺癌的发展及浸润转移中具有重要的作用。

关键词： p-p38 SIAH2 乳腺癌临床病理特征

抑制BCAR1降低肺癌细胞系A549 p-p38表达

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基础医学与临床 2018年第6期38卷 809-814页

作者：黄伟阮姝琴王如文范小青重庆市人民医院胸外科重庆400013 重庆市人民医院肿瘤血液科重庆400013 第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军胸外科中心重庆400042

目的探讨抑制乳腺癌抗雌激素药物耐药蛋白(BCAR1)表达对肺癌细胞系A549 p38和p-p38表达的影响。方法培养正常A549细胞(对照组)、慢病毒BCAR1基因干扰A549细胞(干扰组)和慢病毒阴性对照A549细胞(阴性对照组),用Western blot检测细胞p38和... 详细信息

目的探讨抑制乳腺癌抗雌激素药物耐药蛋白(BCAR1)表达对肺癌细胞系A549 p38和p-p38表达的影响。方法培养正常A549细胞(对照组)、慢病毒BCAR1基因干扰A549细胞(干扰组)和慢病毒阴性对照A549细胞(阴性对照组),用Western blot检测细胞p38和p-p38表达水平,用克隆形成实验、流式细胞计量术、Transwell实验和划痕实验检测细胞的细胞克隆、细胞周期、细胞侵袭和迁移能力。结果干扰组p-p38表达显著低于其他两组(pppp-p38表达,减弱肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力。

关键词： BCAR1 p-p38 p38 A549细胞肺癌

子宫内膜癌中p-p38和尿激酶型纤溶酶原激活剂的表达及临床意义

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现代中西医结合杂志 2012年第14期21卷 1483-1484,1489页

作者：刘向真孙冬霞席丰闫秀珍孙峰瑞河北省邯郸市妇幼保健院河北邯郸056000 河北工程大学医学院河北邯郸056001 河北省邯郸市人民医院河北邯郸056000

目的探讨子宫内膜癌组织中p-p38和尿激酶型纤溶酶原激活剂(upA)表达情况及临床意义。方法采用免疫组织化学S-p法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中p-p38和UpA的表达情况。结果子宫内膜癌组织中p-p38和upA分别表达定位于细胞... 详细信息

目的探讨子宫内膜癌组织中p-p38和尿激酶型纤溶酶原激活剂(upA)表达情况及临床意义。方法采用免疫组织化学S-p法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中p-p38和UpA的表达情况。结果子宫内膜癌组织中p-p38和upA分别表达定位于细胞浆和细胞核,其表达明显高于癌旁正常组织(p均p-p38和upA在子宫内膜癌组织中呈高表达,且与子宫内膜癌的发生、发展和转移密切相关。

关键词：子宫内膜肿瘤 upA p-p38 免疫组化

Hsp70对低氧大鼠海马DG区神经细胞p53、p-p38表达的研究

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现代生物医学进展 2012年第3期12卷 419-421页

作者：徐强董大海高丽莉徐文高琨罗芳侯顺利左晶刘红闫文杨银书卢娟兰州市中医医院甘肃兰州730000 兰州军区疾病预防控制中心甘肃兰州730020

目的:探讨热休克蛋白70(HSp70)高表达对低氧大鼠海马DG区神经细胞p53、p-p38表达的影响。方法:将大鼠海马DG区神经细胞在41℃温浴1h诱导HSp70高表达,然后低氧培养,Western-blot检测细胞HSp70、p53、p-p38的表达。结果:温浴可以诱导HSp7... 详细信息

目的:探讨热休克蛋白70(HSp70)高表达对低氧大鼠海马DG区神经细胞p53、p-p38表达的影响。方法:将大鼠海马DG区神经细胞在41℃温浴1h诱导HSp70高表达,然后低氧培养,Western-blot检测细胞HSp70、p53、p-p38的表达。结果:温浴可以诱导HSp70高表达;HSp70高表达可抑制p53和p-p38表达。结论:HSp70保护低氧诱导的细胞凋亡可能与抑制p53和p-p38表达有关。

关键词：热休克蛋白70 细胞凋亡 p53 p-p38

GADD45a、pI3K和p-p38在结直肠癌中的表达及临床意义

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江西医药 2020年第9期55卷 1194-1198页

作者：涂琦杨军平杨小军周建曹丽华江西中医药大学附属医院病理科南昌330006 江西中医药大学附属医院检验科南昌330006

目的探讨结直肠癌组织中GADD45a、pI3K和p-p38蛋白表达的相关性及其临床病理意义。方法应用免疫组化检测123例结直肠癌组织和60例正常结直肠黏膜组织中的GADD45a、pI3K和p-p38蛋白表达,分析三者之间的相关性及其与临床病理特征、预后的... 详细信息

目的探讨结直肠癌组织中GADD45a、pI3K和p-p38蛋白表达的相关性及其临床病理意义。方法应用免疫组化检测123例结直肠癌组织和60例正常结直肠黏膜组织中的GADD45a、pI3K和p-p38蛋白表达,分析三者之间的相关性及其与临床病理特征、预后的关系。结果⑴结直肠癌组织中GADD45a的表达水平低于正常结直肠黏膜组织,pI3K和p-p38的表达水平高于正常结直肠黏膜组织,差异有显著性统计学意义(ppI3K的表达水平与淋巴结转移有无、肿瘤TNM分期有相关性(ppearman相关分析显示,GADD45a与p-p38表达呈负相关(pp-p38负相关,是结直肠癌预后潜在分子标志物。

关键词： GADD45a pI3K p-p38 结直肠癌