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黄条鰤npy基因克隆及其对饥饿再投喂的应答特性

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渔业科学进展 2023年第4期44卷 74-83页

作者：邱夏君王滨徐永江崔爱君姜燕上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所、青岛海洋科学与技术试点国家实验室深蓝渔业工程联合实验室山东青岛266071

为探究神经肽Y(neuropeptide Y,npy)在黄条鰤(Seriola aureovittata)摄食调控中的作用及机制,本研究采用同源克隆的方法获得了黄条鰤npy基因的开放阅读框(ORF)序列,并利用实时荧光定量PCR技术分析了npy基因的组织分布以及其对饥饿再投... 详细信息

为探究神经肽Y(neuropeptide Y,npy)在黄条鰤(Seriola aureovittata)摄食调控中的作用及机制,本研究采用同源克隆的方法获得了黄条鰤npy基因的开放阅读框(ORF)序列,并利用实时荧光定量PCR技术分析了npy基因的组织分布以及其对饥饿再投喂的应答特性。黄条鰤npy基因ORF序列长度为300bp,编码99个氨基酸的前体蛋白,其中包括28个氨基酸的信号肽、36个氨基酸的成熟肽。氨基酸序列同源性比对发现,黄条鰤npy编码的氨基酸序列与斑马鱼(Daniorerio)等其他硬骨鱼高度保守(>90%);系统进化树分析表明,黄条鰤npy与高体鰤(Serioladumerili)的关系最近。npymRNA在所检测的12种组织中均有表达,其中,在脑组织表达量最高,在垂体和胃中表达量次之。在饥饿再投喂实验中,饥饿刺激了npymRNA的表达,特别是饥饿21d时,实验组垂体npy mRNA表达量显著高于对照组,再投喂7 d后恢复到对照组水平。上述结果表明,npy可能参与了黄条鰤的摄食调控,在饥饿代谢补偿机制中发挥了重要作用。

关键词：黄条鰤 npy 克隆组织表达摄食

以肠道菌群为靶点的HIIT干预效果与npy基因多态性研究

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北京体育大学学报 2022年第10期45卷 61-74页

作者：聂晶刘才响周多奇徐山茸杨慧林江西师范大学江西南昌330022 安庆师范大学安徽安庆246133

目的:研究高强度间歇训练(HIIT)对18~24岁汉族人群肠道菌群、体成分的影响,及与npy基因rs16123多态性的关联,以期将肠道菌群为靶点为不同遗传特征人群提供个体化的运动健身指导方案。方法:选取55名健康汉族大学生为研究对象,进行为期12... 详细信息

目的:研究高强度间歇训练(HIIT)对18~24岁汉族人群肠道菌群、体成分的影响,及与npy基因rs16123多态性的关联,以期将肠道菌群为靶点为不同遗传特征人群提供个体化的运动健身指导方案。方法:选取55名健康汉族大学生为研究对象,进行为期12周HIIT干预,每周训练3次,每次28 min,跑走交替,强度分别为80%~90%、50%~55%V·O_(2)max。干预前抽取静脉血、收集粪便并测试体成分;干预后再次收集粪便及测试体成分相关指标。提取粪便DNA经扩增后在Illumina HiSeq平台进行高通量测序分析肠道菌群。npy基因rs16123基因分型采用Illumina CGA基因芯片完成。结果:(1)npy基因rs16123多态性各基因型分布频率均符合H-W平衡。(2)12周的HIIT干预后,npy基因rs16123多态性各基因型者骨骼肌质量、骨骼肌质量百分比、去脂体重均显著性增加,体脂百分比显著降低(Pnpy基因rs16123多态性与体脂百分比变化率有关联,即AA基因型体脂百分比降低幅度显著高于AG+GG基因型。(3)12周的HIIT干预后,AA基因型者OTU数目增加,且α多样性中ACE指数、Chao1指数均显著上升(P0.05);在菌目分类水平中Actinomycetales相对丰度显著降低(P0.05);在菌门、纲、目分类水平上,不同基因型者肠道菌群相对丰度无显著性差异;但在菌科、菌属分类水平中,AG+GG基因型者Lactobacillaceae及Lactobacillus相对丰度显著高于AA基因型者(Pnpy基因rs16123多态性存在关联。结论:12周HIIT干预可以改善18~24岁汉族人群的体成分及肠道菌群的丰富度,且npy基因rs16123多态性可解释18~24岁汉族人群肠道菌群及体脂百分比HIIT干预效果的个体差异。

关键词：肠道菌群 npy 基因多态性 HIIT 体成分

HIIT对大学生体成分、肠道菌群的影响及与npy基因多态性的关联研究

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HIIT对大学生体成分、肠道菌群的影响及与NPY基因多态性的关联研究

作者：刘才响江西师范大学

学位级别：硕士

研究目的:本文通过研究高强度间歇训练(HIIT)对大学生体成分与肠道菌群的影响,及与npy基因多态性的关联,从而探寻体成分、肠道菌群表型及训练敏感性的遗传学标记,为不同遗传特征人群体成分及肠道菌群改善提供个性化的运动健身指导方案... 详细信息

研究目的:本文通过研究高强度间歇训练(HIIT)对大学生体成分与肠道菌群的影响,及与npy基因多态性的关联,从而探寻体成分、肠道菌群表型及训练敏感性的遗传学标记,为不同遗传特征人群体成分及肠道菌群改善提供个性化的运动健身指导方案。研究对象与方法:本研究选取55名健康汉族大学生为研究对象,进行为期12周HIIT干预,每周训练3次,每次28分钟,跑走交替,强度分别为80-90%、50-55%VOmax。干预前抽取静脉血、收集粪便并测试体成分;干预后再次收集粪便及测试体成分。npy基因RS16123、RS3779477多态位点的基因分型采用Illumina CGA基因芯片完成;粪便DNA提取后检测合格的文库采用Illumina Hi Seq平台进行高通量测序分析肠道菌群;体成分采用inbody测试。研究结果:(1)通过12周的HIIT干预,npy基因rs16123多态性各基因型者训练后骨骼肌、骨骼肌百分比、去脂体重均显著性增加,体脂百分比显著降低(Pnpy基因RS3779477多态性各基因型者训练后骨骼肌百分比显著增加、体脂百分比显著降低,其中骨骼肌、去脂体重在GG基因型人群中显著增加(Pnpy基因rs16123多态位点AA基因型Gammaproteobacteria、Enterobacteriales、Pasteurellales、Lactobacillus、Enterobacteriaceae、Pasteurellaceae、Peptostreptococcaceae丰度显著降低;Lachnospiraceae丰度显著增加(Pnpy基因rs16123多态性与体脂百分比变化率有关联,AA基因型体脂百分比变化率显著高于AG基因型;npy基因rs3779477多态性与骨骼肌、体脂百分比、去脂体重有关联,其中AA基因型骨骼肌、去脂体重显著高于AG基因型,体脂百分比显著低于AG基因型。(4)npy基因rs16123多态性AG基因型Lactobacillaceae、Lactobacillus丰度显著高于AA基因型(Pnpy基因RS3779477多态性AG基因型Pasteurellales、Pasteurellaceae、Rikenellaceae、Haemophilus丰度显著高于GG基因型,Prevotellaceae、[Paraprevotellaceae]、Prevotella、Oscillospira丰度显著低于GG基因型。结论:(1)12周HIIT可以改善大学生体成分,并增加了部分大学生肠道菌群的丰富度。(2)npy基因rs16123多态性可作为汉族大学生体成分训练敏感性的遗传学标记;RS3779477多态性可作为解释汉族大学生体成分部分指标个体差异性的遗传学标记。(3)npy基因rs16123多态性可作为汉族大学生肠道菌群训练敏感性的遗传学标记;RS3779477多态性可作为解释汉族大学生肠道菌群个体差异性的遗传学标记。

关键词：肠道菌群 npy 基因多态性 HIIT 体成分

黄条鰤npy、orexin及ox2r基因的克隆与摄食调控作用研究

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黄条鰤npy、orexin及ox2r基因的克隆与摄食调控作用研究

作者：邱夏君上海海洋大学

学位级别：硕士

本研究以黄条鰤(Seriola aureovittata)为研究对象,利用同源克隆的方法获得了npy、orexin及受体ox2r基因的开放阅读框(ORF)序列,揭示了其组织分布特征以及在早期发育过程中的时空表达模式,探究了npy、orexin及受体ox2r对饥饿再投喂以及... 详细信息

本研究以黄条鰤(Seriola aureovittata)为研究对象,利用同源克隆的方法获得了npy、orexin及受体ox2r基因的开放阅读框(ORF)序列,揭示了其组织分布特征以及在早期发育过程中的时空表达模式,探究了npy、orexin及受体ox2r对饥饿再投喂以及五羟甲基糠醛(5-HMF)(饲料添加)的应答特性,为揭示这三个基因的生理功能积累了理论知识。1.黄条鰤npy、orexin及受体ox2r基因的克隆、系统进化分析及组织分布特征黄条鰤npy基因的ORF长度为300 bp,编码99个氨基酸组成的前体多肽,包括一段28个氨基酸组成的信号肽,36个氨基酸组成的成熟肽,32个氨基酸组成的C端未知功能肽段和1个GKR蛋白水解位点,预测的蛋白质分子量和等电点分别为11.24 k Da,5.02。orexin基因的ORF长度为450 bp,编码149个氨基酸。包括一段46个氨基酸组成的信号肽,orexin的成熟肽分为43个氨基酸组成的orexin A成熟肽和28个氨基酸组成的orexin B成熟肽两部分,26个氨基酸组成的C端未知功能的肽段和两个GKR蛋白水解位点。预测的蛋白质分子量和等电点分别为16.57 KDa,9.46。orexin受体ox2r基因的ORF长度为1269 bp,编码422个氨基酸组成的受体蛋白,属于G蛋白偶联受体,具有7个跨膜结构。预测的蛋白质分子量和等电点分别为48.29 KDa,8.97。黄条鰤npy编码的氨基酸序列与其他硬骨鱼npy编码的氨基酸序列高度保守(>90%),同样orexin(>70%)和ox2r(>80%)与其他硬骨鱼的orexin、ox2r也高度保守。系统发育分析表明,黄条鰤的npy、orexin、ox2r基因均与高体鰤中相对应的基因亲缘关系最近,彼此聚为一支。黄条鰤的npy、orexin和ox2r mRNA主要在脑中显著高表达(Pnpy mRNA表达水平呈现显著性差异(Pnpy和orexin基因具有性别二态性。2.黄条鰤npy、orexin和ox2r在早期生长发育过程中的表达特征检测了黄条鰤npy、orexin和ox2r mRNA在配子和早期发育过程中的表达特征,结果发现,在精子和卵子中都能检测到三种基因的表达,表明三个基因的遗传物质来源于亲本双方。npy mRNA在原肠胚早期显著高表达(Pnpy、orexin和ox2r mRNA在胚体形成后的高表达模式表明其可能参与了黄条鰤早期胚胎生长过程中器官的发育。在黄条鰤仔稚幼鱼阶段,npy mRNA相对表达量在5dph和7dph显著上调(Pnpy mRNA表达水平显著升高至60 dph达到最大(Pnpy、orexin和ox2r mRNA在5 dph上调表达,表明其可能参与了仔鱼由内源性营养向外源性营养转换的过程。3.黄条鰤npy、orexin和ox2r对饥饿-再投喂的应答特性检测了饥饿再投喂实验对黄条鰤npy、orexin和ox2r基因表达的影响,结果发现黄条鰤脑、垂体和胃中npy、orexin和ox2r mRNA对饥饿再投喂的应答规律一致,在饥饿时期三个基因的表达水平均升高,恢复投喂后表达水平恢复正常。垂体组织中的npy mRNA表现为更为敏感的应答特性。orexin和ox2r mRNA表达水平在三种组织中的变化相似但略有差异。在饥饿21 d后,实验组脑组织中的orexin和ox2r mRNA显著高表达(Pnpy、orexin、ox2r基因对饲料中添加五羟甲基糠醛(5-HMF)的应答特征饲料中添加不同浓度的5-HMF的饲料投喂黄条鰤后,终末均重、增重率、特定生长率显著增加(Pnpy、orexin、ox2r mRNA相对表达水平的影响,结果发现

关键词：黄条鰤 npy orexin ox2r 组织表达摄食调控

鸭生长曲线、npy和npy5R序列分析、多态性和表达水平与RFI关联分析

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鸭生长曲线、NPY和NPY5R序列分析、多态性和表达水平与RFI关联分析

作者：江洪峰安徽农业大学

学位级别：硕士

现代肉鸭生产中,生长和饲料效率是人们重点关注的两个重要经济性状。饲料成本约占生产总成本70%,近年来饲料价格居高不下,因此提高饲料效率将大幅降低生产成本。采食量和能量代谢是影响饲料效率的重要因素。前期研究发现,npy和npy5R是... 详细信息

现代肉鸭生产中,生长和饲料效率是人们重点关注的两个重要经济性状。饲料成本约占生产总成本70%,近年来饲料价格居高不下,因此提高饲料效率将大幅降低生产成本。采食量和能量代谢是影响饲料效率的重要因素。前期研究发现,npy和npy5R是影响采食量和能量代谢的重要候选基因。但目前关于纯系肉鸭生产曲线拟合、npy和npy5R基因多态性及表达水平与饲料效率关联性有待进一步研究。因此,本研究拟通过以下四方面试验对鸭生长、npy和npy5R的序列信息、多态性及相对表达规律进行研究:1、以强英鸭Q1为试验材料,用三种曲线拟合方法分析Q1系肉鸭0～66周龄生长曲线。结果表明,对Q1系鸭体重与周龄拟合效果均较好,拟合度R都在0.99以上,但从整体拟合效果看,无论对于是公鸭还是母鸭,Bertalanffy是最佳拟合模型。2、采用生物信息相关软件分析npy与npy5R蛋白理化性质、氨基酸序列、结构和功能,结果表明,禽类npy蛋白和npy5R蛋白保守性较高,皆为不稳定蛋白,且npy存在一个PAH结构域,而npy5R蛋白不存在结构域,两蛋白内含均含有大部分磷酸化位点,与信号传导、代谢等功能相关。上述结果为进一步探索npy和npy5R功能提供重要参考。3、以Q1系肉鸭为素材,测定400只肉鸭21～42日龄日采食和日增重,并计算饲料转化率（FCR）和剩余采食量（RFI）,并采用PCR-SSCP和测序方法进行npy和npy5R基因分型,并与饲料效率性状进行关联分析。结果表明,检测出npy基因2个SNP和npy5R基因1个SNP,且均处于Hardy-weinberg平衡状态（P>0.05）。显著性分析表明,npy基因T557C与RFI显著相关（Pnpy基因G8090C与FI和FCR显著相关（Pnpy基因G8090C与RFI呈极显著相关（Pnpy5R基因T782C与FI和RFI显著相关（Pnpy和npy5R基因在鸭下丘脑和垂体中的表达量及其与饲料效率性状的相关性。结果显示,无论在下丘脑中还是垂体中,npy基因和npy5R基因在高RFI组的表达量都显著高于低RFI组（Pnpy基因在下丘脑中表达水平与RFI呈极显著相关（Pnpy基因表达水平与RFI和FCR呈极显著相关（Pnpy5R基因在下丘脑中表达水平与RFI和FCR呈极显著相关（Pnpy5R基因表达水平与RFI呈极显著相关（Pnpy基因T557C和G8090C位点以及npy5R基因T782C位点均与RFI相关,npy基因和npy5R基因均在高RFI组中高表达量且与RFI显著相关,该研究结果将为提高鸭饲料效率及其分子遗传育种提供重要技术支持。

关键词：鸭 npy npy5R 生物信息学生长曲线拟合剩余采食量

npy及YWHAH基因多态性与精神分裂症的关联分析

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Acta Genetica Sinica 2005年第12期32卷 1235-1240页

作者：王红声段世伟邢清和杜晶李兴旺徐一峰张治洲王玉炯冯国鄞贺林上海交通大学BioX生命科学研究中心上海市精神卫生中心上海200030

调查了583例精神分裂症患者及372例健康人,对npy(neuropeptideY)及YWHAH(1433etachaingene)基因中几个已报道过的阳性关联位点进行了检测。YWHAH基因上的-134(GCCTGCA)2～4位点因扩增失败未能考察,npy基因上的T1128C位点在样本中则不存... 详细信息

调查了583例精神分裂症患者及372例健康人,对npy(neuropeptideY)及YWHAH(1433etachaingene)基因中几个已报道过的阳性关联位点进行了检测。YWHAH基因上的-134(GCCTGCA)2～4位点因扩增失败未能考察,npy基因上的T1128C位点在样本中则不存在。重点对-485C>T(npy)和G753A(YWHAH)两个位点进行了分析,各相匹配组间比较均未发现等位型频率(P值分别是0.696和0.743,OR值分别是1.041和0.962)和基因型频率(P值分别是0.45和0.75,χ2值分别是1.51和0.58)的显著性差异。对两个基因之间的基因型相对风险分析表明,它们也不能协同导致疾病风险(P>0.05)。结果提示,在中国汉族人群中-485C>T(npy)和G753A(YWHAH)两个多态性位点与精神分裂症的遗传易感性不存在关联。

关键词： npy YWMH 精神分裂症多态性关联分析

电针“梨状二穴”对腰椎间盘突出症大鼠npy、SP及神经节的影响

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云南中医中药杂志 2022年第5期43卷 66-70页

作者：朱笑举潘锋陈妍蓓陈致宏郑永仁尹梅芳刘正云南省曲靖市中医医院云南曲靖655000 云南中医药大学云南昆明650500

目的观察电针“梨状二穴”对腰椎间盘突出症模型大鼠的神经肽npy、SP及背根神经节的影响。方法将32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针1组和电针2组,每组8只。治疗6 d后,腹主动脉采血取各组大鼠血清,采用ELISA法检测各组血清中神经肽... 详细信息

目的观察电针“梨状二穴”对腰椎间盘突出症模型大鼠的神经肽npy、SP及背根神经节的影响。方法将32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针1组和电针2组,每组8只。治疗6 d后,腹主动脉采血取各组大鼠血清,采用ELISA法检测各组血清中神经肽(npy、SP)含量,并在各组中随机取2只大鼠的背根神经节进行HE染色观察其病理改变。结果模型组血清npy、SP含量较空白组、电针1组、电针2组均升高,且差异具有统计学意义(Pnpy、SP含量均低于空白组,差异具有统计学意义(Pnpy、SP含量低于电针2组,差异具有统计学意义(Pnpy、SP在外周的含量,促进了背根神经节的细胞组织形态的修复,从而减轻炎症反应,降低疼痛程度,消除疼痛症状。

关键词：梨状二穴腰椎间盘突出症 npy SP 神经节

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清npy、HSP-70、GABA与睡眠结构参数的相关性及其认知功能障碍的影响因素分析

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现代生物医学进展 2023年第2期23卷 390-395页

作者：王骥陈海兵章传利魏新民郑俊南通大学附属南京江北医院耳鼻咽喉-头颈外科江苏南京210044 江苏省人民医院耳鼻咽喉-头颈外科江苏南京210029 南通大学附属南京江北医院呼吸内科江苏南京210044

目的:探讨不同病情阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清神经肽Y(npy)、热休克蛋白70(HSP-70)、γ-氨基丁酸(GABA)水平的差异,分析其与睡眠结构参数的相关性以及OSAHS患者认知功能障碍的危险因素。方法:选择2019年3月至2022年... 详细信息

目的:探讨不同病情阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清神经肽Y(npy)、热休克蛋白70(HSP-70)、γ-氨基丁酸(GABA)水平的差异,分析其与睡眠结构参数的相关性以及OSAHS患者认知功能障碍的危险因素。方法:选择2019年3月至2022年3月南通大学附属南京江北医院和江苏省人民医院收治的122例OSAHS患者,根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)和夜间最低血氧饱和度(SPO2)将OSAHS患者分为轻度组32例、中度组54例、重度组36例,根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)将其分为认知功能障碍组(npy、HSP-70、GABA水平,Pearson相关分析血清npy、HSP-70、GABA与OSAHS患者睡眠结构参数的相关性。单因素和多因素Logistic回归分析OSAHS发生认知功能障碍的危险因素。结果:重度组血清npy、HSP-70水平、快波睡眠次数、入睡后觉醒次数、快波睡眠百分比高于中度组、轻度组(Pnpy、HSP-70水平与快波睡眠次数、入睡后觉醒次数、快波睡眠百分比呈正相关(Pnpy(升高)、HSP-70(升高)是OSAHS患者认知功能障碍的危险因素(Pnpy、HSP-70水平升高,GABA水平下降与OSAHS患者睡眠结构紊乱和认知功能障碍有关,检测血清npy、HSP-70、GABA可以辅助评估患者的睡眠情况和认知功能。

关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 npy HSP-70 GABA 睡眠结构认知功能障碍影响因素

脑苷肌肽联合NGF治疗脑出血的疗效及对血清HCgp-39、npy水平的影响研究

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华北理工大学学报:医学版 2023年第5期25卷 360-364页

作者：贾丹刘瑞崔子玉南阳市中心医院神经内科二病区河南南阳473000

目的研究脑苷肌肽联合神经生长因子(NGF)治疗脑出血的疗效及对血清人软骨糖蛋白-39(HCgp-39)、血清神经肽Y(npy)水平的影响。方法以我院2020年11月~2021年11月诊断治疗的脑出血患者80例作为研究对象,按照随机分组原则,分为观察组、对照... 详细信息

目的研究脑苷肌肽联合神经生长因子(NGF)治疗脑出血的疗效及对血清人软骨糖蛋白-39(HCgp-39)、血清神经肽Y(npy)水平的影响。方法以我院2020年11月~2021年11月诊断治疗的脑出血患者80例作为研究对象,按照随机分组原则,分为观察组、对照组,两组患者均采取常规治疗,观察组患者在此基础上联合采取脑苷肌肽和NGF进行治疗,两组患者均治疗4周。比较两组患者的治疗总有效率、脑水肿量、脑血肿量、NIHSS、GCS评分、血清HCgp-39、npy水平之间的差异。结果观察组总有效率为95%,对照组为80%,二组比较差异有统计学意义(Pnpy治疗前后的差值有统计学意义(Pnpy水平,治疗效果显著。

关键词：脑苷肌肽神经生长因子脑出血 HCgp-39 npy