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Combination of Chinese and Western Medicine to Prevent and Reverse Resistance of Cancer Cells to Anticancer Drugs

Chinese Journal of Integrative Medicine 2020年第4期26卷 251-255页

作者： SUI Xin-bing XIE Tian Holistic Integrative Pharmacy Institutes and Comprehensive Cancer Diagnosis and Treatment Center the Affiliated Hospital of Hangzhou Normal UniversityCollege of MedicineHangzhou Normal UniversityHangzhou(311121)China Key Laboratory of Elemene Class Anti-cancer Chinese Medicine of Zhejiang Province and Engineering Laboratory of Development and Application of Traditional Chinese Medicine from Zhejiang Province Hangzhou Normal UniversityHangzhou(311121)China

Resista nee to anticancer drugs is a major problem in on cology,which causes the failure of an titumor treatme nt.A variety of factors con tribute to drug resistance,in eluding drug efflux and metabolism,tumor cell heteroge neity,tumor microenvironment stress-induced genetic or epigenetic alterations in the cancer cells and so on.However,how to circumvent this resista nee to improve antican cer efficacy remains to be determined.To circumvent chemotherapeutic resista nee,many reversal agents have been developed,but most of them fail in clinical trials due to severe adverse effects.Recently,several natural products have been reported to augme nt sen sitivity or overcome resista nee of an ticancer chemotherapeutic drugs,including elemene,curcumin,Shenqi Fuzheng Injection(参芪扶正注射液),PHY906,etc.Thus,understand!ng the novel function of Chinese medicine may allow us to develop a promising therapeutic approach to enhance the effects of anticancer strategies and preve nt or overcome their resista nee in the treatment of can cer patie nts.

关键词： Chinese medicine Western medicine integrative Chinese and Western medicine resistance an tica ncer drugs

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柑橘中性神经酰胺酶基因ncer2在丛枝菌根共生中的作用研究

柑橘中性神经酰胺酶基因NCER2在丛枝菌根共生中的作用研究

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作者：郑紫君华中农业大学

学位级别：硕士

柑橘根系根毛稀少,主要依靠与丛枝菌根真菌形成菌根来吸收水分和矿质营养。丛枝菌根共生还能够提高柑橘在生物和非生物胁迫下的抵抗能力,因此研究柑橘菌根共生形成的分子机制具有重要意义。实验室前期转录组研究发现柑橘常用砧木枳的神... 详细信息

柑橘根系根毛稀少,主要依靠与丛枝菌根真菌形成菌根来吸收水分和矿质营养。丛枝菌根共生还能够提高柑橘在生物和非生物胁迫下的抵抗能力,因此研究柑橘菌根共生形成的分子机制具有重要意义。实验室前期转录组研究发现柑橘常用砧木枳的神经酰胺酶基因Csncer2在接种丛枝菌根真菌后显著上调表达,说明该基因可能参与丛枝菌根共生。本课题旨在通过生物信息学,启动子-GUS,RNAi等技术手段研究Csncer2基因及其苜蓿同源基因Mtncer2在丛枝菌根共生过程中的表达及功能,为下一步柑橘菌根功能研究奠定基础。论文研究结果如下:1.ncer基因家族系统进化分析表明,Csncer2在进化树中与苜蓿等菌根植物的同源基因聚在同一分支上,且该分支上没有非菌根植物,表明该菌根植物特异分支可能与菌根共生相关。不同植物的ncer氨基酸序列比对结果表明,植物中ncer的GDVSPN六肽功能结构域在进化上是高度保守的。而菌根植物特异分支中的ncer蛋白中该保守结构域的丝氨酸位点发生了改变,推测保守位点的改变可能影响了ncer的部分功能,使菌根植物特异分支中的ncer蛋白区别于非特异分支的ncer蛋白,从而在菌根共生中发挥作用。2.实验室前期转录组数据分析表明Csncer2基因在接种丛枝菌根真菌后表达量显著上调,而另外两个同源基因表达水平无明显变化。本研究通过qRT-PCR检测出蒺藜苜蓿中的同源基因Mtncer2也在接种丛枝菌根真菌后显著上调表达。通过苜蓿瞬时转化体系对Mtncer2进行启动子-GUS分析,表明GUS活性在不接种丛枝菌根真菌时不表达,接种丛枝菌根真菌后GUS活性富集于根系内皮层的丛枝细胞中,具有组织特异性。3.本课题利用已建立的苜蓿瞬时转化体系对Mtncer2进行快速的RNAi功能分析。qRT-PCR检测发现,相比对照组,干涉植株中Mtncer2表达量下降了约75%,与菌根侵染和丛枝形成与发育相关的Marker基因MtPT4、MtEXO70I、RiEF均显著下调。结果表明Mtncer2干涉效率较高,干涉Mtncer2基因可能影响了菌丝生长发育及丛枝形成。进一步的观察及共生情况统计表明,干涉Mtncer2基因导致丛枝菌根真菌的侵染率(F%)降低,但菌丝在根内的生长和丛枝形态发育均不受影响。本研究推测Mtncer2基因作用于共生形成的早期阶段,参与根外菌丝在根系表面的附着或入侵过程。

关键词：丛枝菌根共生 ncer 柑橘瞬时转化苜蓿

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