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myostatin、MyoD、Myogenin基因对金华猪和长白猪肉质影响的比较研究

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Myostatin、MyoD、Myogenin基因对金华猪和长白猪肉质影响的比较...

作者：单立莉延边大学

学位级别：硕士

本课题采用半定量RT-PCR法,检测了不同生长阶段金华猪和长白猪(35d、80d、125d)背最长肌中肌肉生长抑制素(myostatin、MSTN)、生肌调节因子(MyoD)和肌肉成肌素(Myogenin、MyoG)的mRNA水平,探讨了他们的基因表达随动物体重增加的变化规律... 详细信息

本课题采用半定量RT-PCR法,检测了不同生长阶段金华猪和长白猪(35d、80d、125d)背最长肌中肌肉生长抑制素(myostatin、MSTN)、生肌调节因子(MyoD)和肌肉成肌素(Myogenin、MyoG)的mRNA水平,探讨了他们的基因表达随动物体重增加的变化规律,以及在肌肉沉积过程中的调控作用。根据Genebank登陆的MSTN、MyoD、MyoG和内标β-actin基因序列设计引物,分别以背最长肌组织RNA为模板,经反转录和PCR,克隆得到的相应基因片段(登录号分别为NM 214435、SSU12574和NM01012406)同源性分别为97.0%、97.8%和93.6%。在此基础上,进一步探讨了PCR体系中适宜的退火温度、MgCl浓度和循环次数,构建了适合于相应基因序列的优化半定量RT-PCR法,用于不同生长阶段金华猪和长白猪背最长肌组织MSTN、MyoD和MyoG基因mRNA水平的测定。试验所用的金华猪和长白猪由浙江省东阳市金华猪保种场提供,按照品种分两个组,每组18头(28日龄断奶)预试期7天;正试期90天,金华与长白猪在相同的条件下饲养。分别于35,80和125日龄时采集背最长肌样品,测定瘦肉率,探讨MSTN、MyoD和MyoG基因表达与肌肉沉积的关系。试验结果表明,猪背最长肌组织中MSTN、MyoD和MyoG基因表达均呈现一定的生物学发育规律: (1)在两种猪的不同生长阶段(35日龄,80日龄,125日龄)MSTN mRNA都被检测到,其表达量在出生后35日龄时水平较高,而后,随着年龄体重的增加而显著减少(P＜0.05)。但是,在整个试验期间,品种间无显著差异(P＜0.05)。 (2)在两种猪的不同生长阶段(35日龄,80日龄,125日龄)MyoD mRNA都被检测到,MyoD基因在金华猪背最长肌中的表达量随着年龄体重的增加而增加,80日龄到125日龄阶段增加平缓。而MyoD基因在长白猪背最长肌中的表达量则与金华猪的恰恰相反,长白猪在出生后35日龄时水平较高,而后,随着年龄体重的增加而减少(P＜0.05)。在整个试验期间,品种间差异显著(P＜0.05)。35日龄时品种间差异极显著(P＜0.01)。 (3)在两种猪的不同生长阶段(35日龄,80日龄,125日龄)MyoG mRNA都被检测到,金华猪背最长肌中MyoG基因的表达35日龄时较低,而后随着年龄和体重的增加而增加,但不同年龄阶段MyoG基因表达差异不显著。长白猪背最长肌中基因的表达则与金华猪相反,35日龄时较高,而后随着年龄和体重的增加而减少;同样,不同年龄阶段MyoG基因表达差异不显著。但是,在整个试验期间,35日龄品种间差异显著(P＜0.05)。本试验探讨了MSTN、MyoD和MyoG基因与肌肉沉积的关系,结果表明,MSTN基因表达水平与胴体瘦肉率呈反比;MyoD基因表达水平在金华猪背最长肌中随着年龄和胴体瘦肉率的增加而增加呈正比变化,而长白猪背最长肌中的表达恰好相反;MyoG基因变化规律与MyoD基因变化规律相似。从而MSTN、MyoD和MyoG基因对猪肌肉沉积具有显著影响。 MSTN、MyoD和MyoG基因mRNA水平随着猪日龄的变化和显著变化,其中80日龄到125日龄阶段表达量变化平缓,表明在猪的整个生长阶段中肌细胞在不断的分化,在生长后期分化程度减缓。

关键词： myostatin MyoD Myogenin mRNA丰度金华猪长白猪背最长肌

myostatin基因突变提高牛肌肉抗氧化能力的机制研究

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Myostatin基因突变提高牛肌肉抗氧化能力的机制研究

作者：朱琳内蒙古大学

学位级别：硕士

肌肉生长抑制素(myostatin,Mstn)影响肌肉生长与发育,并且能够通过PIk-AKT、AMPK等多条信号通路调节肌肉葡萄糖代谢。本研究以13月龄鲁西黄牛比目鱼肌为材料,分析了MT牛与对照牛比目鱼肌转录组,检测了MT牛与对照牛比目鱼肌的葡萄糖代谢... 详细信息

肌肉生长抑制素(myostatin,Mstn)影响肌肉生长与发育,并且能够通过PIk-AKT、AMPK等多条信号通路调节肌肉葡萄糖代谢。本研究以13月龄鲁西黄牛比目鱼肌为材料,分析了MT牛与对照牛比目鱼肌转录组,检测了MT牛与对照牛比目鱼肌的葡萄糖代谢、抗氧化体系和活性氧,并探讨了可能的抗氧化调控机制。结果表明,(1)MSTN突变导致比目鱼肌转录组显著变化;(2)MSTN突变影响比目鱼肌葡萄糖代谢,增强磷酸戊糖途径,G6PD水平升高,产生更多的NADPH;(3)MSTN突变能够使比目鱼肌产生更多还原性谷胱甘肽,减弱活性氧对肌肉的损伤,提高了比目鱼肌抗氧化能力;(4)MSTN突变下调Smad通路,上调AMPK信号通路;(5)AMPK可以促进G6PD的磷酸化,从而提升磷酸戊糖途径的效率。上述结果表明,与对照组牛相比,MT牛比目鱼肌的葡萄糖代谢发生显著变化,磷酸戊糖途径增强,导致肌肉的抗氧化能力增强,产生这种变化的机制可能是MSTN的突变增强了AMPK的活性,从而促进磷酸戊糖途径关键限速酶G6PD的磷酸化。

关键词：比目鱼肌磷酸戊糖途径 AMPK 抗氧化 myostatin

myostatin不同突变体牛肌肉蛋白质组学研究

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Myostatin不同突变体牛肌肉蛋白质组学研究

作者：李欣内蒙古大学

学位级别：硕士

肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）属于转化生长因子β（TGF-β）超家族,是骨骼肌生长负调节因子,参与肌细胞的生长分化以及糖代谢等通路。MSTN蛋白功能的缺失引起骨骼肌过度发育,呈现双肌表型。本论文中通过Co IP以及Pull down技术对M... 详细信息

肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）属于转化生长因子β（TGF-β）超家族,是骨骼肌生长负调节因子,参与肌细胞的生长分化以及糖代谢等通路。MSTN蛋白功能的缺失引起骨骼肌过度发育,呈现双肌表型。本论文中通过Co IP以及Pull down技术对MSTN互作蛋白进行研究;并对MSTN不同突变体编辑牛（WT,6bp,115bp）肌肉进行蛋白质组学以及磷酸化蛋白质组学研究,深入探讨了MSTN的作用机制;同时将MSTN不同结构域融合蛋白添加到培养基中检测了其对C2C12成肌细胞增殖的影响。试验结果表明:（1）我们首次通过Co IP和Pull down技术对MSTN相互作用蛋白进行系统分析,两种方法共同鉴定到的蛋白有45个,补充了MSTN蛋白相互作用网络,并且将肌肉收缩、肌纤维类型以及钙离子信号通路与肌肉生长发育联系起来;（2）MSTN编辑牛与对照牛相比肌肉蛋白质组以及磷酸化蛋白质组发生显著变化,部分快肌相关蛋白显著上调,慢肌相关蛋白显著下调,同时上调蛋白主要参与钙离子转运、TCA循环、糖酵解过程以及AMPK等信号通路;（3）蛋白互作、蛋白质组学、Western bolt以及q PCR实验结果表明MSTN基因编辑牛的MSTN蛋白表达量下调,通过与肌肉收缩相关蛋白作用,使肌纤维由慢肌转向快肌、有氧型转为糖酵解型,影响糖原合成,加强了糖酵解和TCA循环,为肌肉发育提供更多能量。而且不同位点的MSTN编辑均会引起以上的改变,但是对各通路的影响程度存在差异,导致了表型的不完全相同。（4）将体外原核表达纯化获得的MSTN不同结构域蛋白（全长、前肽以及成熟肽）添加到细胞培养基中均对C2C12成肌细胞的增殖具有抑制作用,但是抑制程度不同。综上所述,本论文补充了MSTN的相互作蛋白网络,推测MSTN通过改变肌纤维类型抑制糖原合成、调控糖酵解和TCA循环,且各通路被影响的程度因MSTN基因被编辑位点的不同而存在差异。通过对MSTN基因编辑位点的选择使其功能在合适的时刻发挥到恰当的水平,对实现肉牛分子育种的精确调控具有重要意义。

关键词： myostatin 肌肉增殖调控机制肉牛分子育种蛋白互作蛋白质组学

myostatin调节关节软骨细胞功能的初步研究

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Myostatin调节关节软骨细胞功能的初步研究

作者：崔银星广州医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在尝试检测myostatin在骨关节炎软骨细胞中的表达,初步探究myostatin在骨关节炎疾病中的功能。研究方法:我们收集了骨折患者的股骨头标本和膝关节炎患者的膝关节软骨标本,分离培养人关节软骨细胞,并通过细胞形态观察、甲... 详细信息

目的:本研究旨在尝试检测myostatin在骨关节炎软骨细胞中的表达,初步探究myostatin在骨关节炎疾病中的功能。研究方法:我们收集了骨折患者的股骨头标本和膝关节炎患者的膝关节软骨标本,分离培养人关节软骨细胞,并通过细胞形态观察、甲苯胺蓝染色、COL2A1免疫荧光染色进行鉴定;采用q PCR检测myostatin及其受体Act RIIB在正常关节软骨细胞和骨关节炎软骨细胞中的差异表达;采用细胞计数、结晶紫染色、CCK-8试剂盒检测在不同浓度梯度（0、5、10、100、500 ng/m L）myostatin处理软骨细胞不同时间（24h、48h、72h）后,对软骨细胞增殖活性的影响;采用q PCR、Western Blot和免疫荧光染色的方法检测100 ng/m L myostatin对软骨细胞炎症因子、基质金属蛋白酶、COL2A1表达的影响;利用高通量RNA测序技术对myostatin处理的软骨细胞样本进行转录组测序,筛选出基于myostatin处理软骨细胞引起的差异表达基因,通过GO聚类、KEGG信号通路分析揭示myostatin调控软骨细胞功能的潜在作用机制。结果:（1）通过细胞形态观察、甲苯胺蓝染色、COL2A1免疫荧光染色鉴定发现分离培养的细胞是软骨细胞。（2）myostatin及其受体Act RIIB在骨关节炎软骨细胞中高表达,表明myostatin可能在骨关节炎病理过程中发挥重要作用。（3）myostatin处理软骨细胞48h后,100 ng/m L和500 ng/m L的myostatin显著抑制软骨细胞活性;myostatin处理软骨细胞72h后,低浓度的myostatin就显著抑制软骨细胞活性,且抑制程度随着myostatin浓度的增大而增高。（4）myostatin能够促进COX2、i NOS和IL-6等炎症因子的表达;促进MMP3、MMP13等金属蛋白酶的表达;抑制COL2A1蛋白的表达。（5）myostatin处理软骨细胞后有483个差异表达基因,其中152个基因上调,331个基因下调,表明myostatin能够有效调控软骨细胞基因的表达;GO聚类分析结果发现,受myostatin调节的差异表达基因主要调控细胞的有丝分裂细胞周期、染色体分离、微管结合、ATP结合、催化活性、染色体着丝粒区、细胞内非膜结合细胞器、微管细胞骨架等功能;KEGG信号通路分析结果发现,myostatin调节的差异表达基因主要富集在细胞周期、DNA复制、p53信号通路、Fox O信号通路、细胞衰老等信号通路上。其中富集在细胞周期通路中的差异表达基因有28个,myostatin处理软骨细胞后,27个细胞周期相关蛋白表达下调,提示myostatin可能通过引起软骨细胞中细胞周期蛋白的下调,进而抑制软骨细胞活性。结论:（1）软骨细胞存在myostatin受体Act RIIB,且myostatin及其受体在骨关节炎软骨细胞中高表达。（2）myostatin抑制软骨细胞活性,促进炎症因子的表达和基质的降解。（3）myostatin调节的差异表达基因主要富集在细胞周期、DNA复制、p53信号通路、Fox O信号通路、细胞衰老等信号通路上。

关键词： myostatin 骨关节炎软骨细胞细胞增殖 RNA测序

myostatin诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制

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Myostatin诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制

作者：边睿中国协和医科大学

学位级别：硕士

肌肉抑制素(myostatin，MSTN)是TGF-β超家族的一员，迄今的发现表明myostatin的主要作用是在胚胎发育过程中抑制成肌细胞的增殖与分化，以及成体中抑制骨骼肌的肥大。细胞水平的试验结果表明，将重组MSTN加入到小鼠成肌细胞C2C12的培... 详细信息

肌肉抑制素(myostatin，MSTN)是TGF-β超家族的一员，迄今的发现表明myostatin的主要作用是在胚胎发育过程中抑制成肌细胞的增殖与分化，以及成体中抑制骨骼肌的肥大。细胞水平的试验结果表明，将重组MSTN加入到小鼠成肌细胞C2C12的培养基中24小时以后，能够明显看到细胞增殖变慢，且在分化培养基中也不能分化成肌管细胞。经过遗传选育的双肌牛有明显的肌肉肥大，后来经过分子遗传学的鉴定发现这种牛的MSTN基因发生突变;MSTN基因敲除的小鼠的肌肉平均比野生型重三倍，并且脂肪也明显少于后者;人类MSTN突变也同样导致肌肉肥大，这在2004年发现的一名男婴身上得到证实。 TGF-β家族的蛋白普遍具有抑制细胞增殖的作用，该信号通路的异常通常导致癌症的发生，但是其在不同组织类型的肿瘤发生的不同阶段所起的作用是不一样的。MSTN是TGF-β超家族的一员，本研究主要探讨的是MSTN对于肿瘤是否具有与TGF-β类似的作用。我们将MSTN加入到几种不同组织来源的肿瘤细胞培养基中，发现有些细胞(Jurkat)对于MSTN不敏感，而有的细胞(Hela、A549等)则会死亡。细胞死亡的类型分为程序性细胞死亡和坏死。程序性细胞死亡又分为细胞凋亡、自吞性死亡及程序性坏死。经过Hoechst染细胞核并用荧光显微镜观察和拍照发现经过MSTN处理的细胞有典型的细胞凋亡时发生的细胞核凝缩现象，说明MSTN导致的细胞死亡是细胞凋亡。我们应用AnnexinV结合PI染色通过流式细胞仪分析的方法检测了经MSTN处理的细胞，发现MSTN诱导的细胞凋亡呈现剂量及时间依赖性。在细胞凋亡过程中大都伴有Caspase的激活，我们用Western以及试剂盒染色通过流式细胞仪检测细胞中Caspase总活性的方法，发现MSTN诱导的细胞凋亡过程中的确有Caspase的激活。为了验证myostatin诱导的细胞凋亡是否像TGF-β一样是由线粒体途径介导的，我们用Western检测到Caspase-9于MSTN被加入到细胞培养液24小时后能够激活。细胞色素C由线粒体内膜释放入胞浆中是常见的导致Caspase 9激活的重要事件。因此我们用免疫荧光技术和分离亚细胞成分结合Western方法检测经myostatin处理的细胞有细胞色素C释放的现象。 Bcl-2家族的蛋白是一类调节线粒体膜稳定性并调控细胞凋亡的重要因子。我们检测到Bcl-2家族只含有BH3结构域且能够诱导细胞凋亡的蛋白Bim在MSTN处理细胞过程中有上调，提示其可能参与MSTN诱导的细胞凋亡。

关键词： myostatin 细胞凋亡细胞色素C释放 Bim

myostatin基因对骨骼肌代谢机制影响的定量蛋白组学与磷酸化蛋白组学研究

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Myostatin基因对骨骼肌代谢机制影响的定量蛋白组学与磷酸化蛋白...

作者：辛向博天津农学院

学位级别：硕士

骨骼肌是机体能量调节的关键部位,肌肉生长抑制素myostatin(MSTN)作为一种重要的肌肉生长发育负调控因子,在骨骼肌的生长发育过程中起着非常关键的作用。大量的研究表明,抑制MSTN基因的表达,不仅仅能够在生产方面提高畜禽的瘦肉产量,而... 详细信息

骨骼肌是机体能量调节的关键部位,肌肉生长抑制素myostatin(MSTN)作为一种重要的肌肉生长发育负调控因子,在骨骼肌的生长发育过程中起着非常关键的作用。大量的研究表明,抑制MSTN基因的表达,不仅仅能够在生产方面提高畜禽的瘦肉产量,而且可以用于医学方面肌肉萎缩相关疾病的研究。目前对于MSTN功能的研究主要依赖于MSTN小鼠模型,本研究利用之前构建的MSTN牛模型,采用高通量的蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学技术,对MSTN在肌肉生长发育过程中的调控机制进行了深入研究。1.本研究利用TMT-6 plex标记的蛋白质组学技术,对MSTN内蒙古黑牛和野生型牛的腿臀肌组织中蛋白的表达丰度变化进行了对比研究。本次质谱结果共鉴定到1,678个有定量的蛋白,其中发现72个蛋白为差异表达的蛋白(Fold change=1.55;P≤0.05)。通过对这72个差异蛋白的功能分析,我们发现MSTN组中与肌肉发育相关的蛋白显著上调,同时,参与脂代谢、线粒体代谢及呼吸链的活性相关生物学过程的蛋白也都呈上调表达的趋势。生物信息学的分析结果也表明,72个差异蛋白主要参与脂肪酸代谢、氧化磷酸化过程、PPAR信号通路、肌肉的生长发育等代谢调控通路。2.在蛋白组学鉴定的同时,我们利用TiO技术对肽段进行富集,对MSTN牛和野生型牛进行了肌肉的磷酸化蛋白组学研究。最终鉴定到1,777个磷酸化肽段,这些肽段归属于433个磷酸化蛋白;同样,在Fold change=1.55,P≤0.05的筛选条件下,我们获得50个差异表达的磷酸化肽段,这些肽段归属于36个蛋白。对这36个差异磷酸化蛋白进行生物信息学分析,结果显示差异磷酸化蛋白主要参与肌肉的生长发育和糖酵解等生物过程。3.综合蛋白组学和磷酸化组学的研究结果,我们发现在MSTN牛的肌肉组织中,上调的差异蛋白主要富集在糖酵解途径和脂肪酸降解途径中,结合肌肉中糖原含量和肌间脂肪含量的测定结果,发现MSTN基因敲除后,不仅能够通过增强糖酵解途径加强糖原的分解,而且能够通过增强线粒体的活性促进脂肪酸的β氧化进而降低肌间脂肪含量,这两个途径同时为肌肉的生长发育提供更多的能量。同时我们还发现,MSTN是通过提高AMP/ATP的比值激活AMPK信号通路发挥对糖代谢和脂代谢的调控功能,进而调控肌肉的生长发育和正常的生理活动。本研究通过对MSTN牛与野生牛的肌肉组织进行比较蛋白组学和磷酸化蛋白组学分析,研究MSTN影响肌肉生长发育的调控机制。一方面我们发现了一系列与MSTN功能相关的调节蛋白;另一方面我们发现MSTN可以激活AMPK信号通路,同时调节糖代谢和脂代谢这两大代谢通路。本研究结果不仅为研究MSTN对肌肉生长发育的调控机制提供了理论基础,同时对医学上关于糖尿病和肥胖病的研究提供了新的靶点。

关键词： myostatin 蛋白质组学磷酸化蛋白质组学糖酵解脂代谢生物信息学

myostatin通过Smad3下调MyoD的表达来抑制骨骼肌卫星细胞的分化

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中国生物工程杂志 2008年第5期28卷 99-103页

作者：阮井玲甄鑫刘娣周佳勃东北农业大学动物科技学院哈尔滨150030 东北农业大学哈尔滨150030

myostatin基因,是肌肉生长的负调控因子,通过下调MyoD的表达抑制骨骼肌细胞的分化,但具体机制目前尚未完全清楚。以体外培养的猪骨骼肌卫星细胞为实验材料,利用RNA i技术,以Smad3为靶基因进行干扰研究,研究干扰前后猪骨骼肌卫星细胞增... 详细信息

myostatin基因,是肌肉生长的负调控因子,通过下调MyoD的表达抑制骨骼肌细胞的分化,但具体机制目前尚未完全清楚。以体外培养的猪骨骼肌卫星细胞为实验材料,利用RNA i技术,以Smad3为靶基因进行干扰研究,研究干扰前后猪骨骼肌卫星细胞增殖情况的变化以及MyoD、myostatin基因的表达规律,进一步阐述3个基因间的调控关系。结果表明,myostatin通过下调MyoD的表达,抑制骨骼肌卫星细胞的分化,但这种抑制作用是受Smad3调节的。

关键词： myostatin Smad3 MyoD RNAi基因网络

The single nucleotide polymorphisms of the chicken myostatin gene are associated with skeletal muscle and adipose growth

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中国科学：生命科学英文版 2004年第1期47卷 25-30页

作者： GU Zhiliang, ZHU Dahai, LI Ming, LI Hui, DENG Xuemei & WU ChangxinMolecular and Cellular Developmental Biology Laboratory, Harbin Institute of Technology, Harbin 150001, China College of Animal Science & Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China National Laboratories for Agribiotechnology, China Agricultural University, Beijing 100094, China College of Animal Science & Technology, China Agricultural University, Beijing 100094, China Department of Life Science and Technology, Changshu Institute of Technology, Changshu 215500, China Department of Biochemistry and Molecular Biology, National Laboratory of Medical Molecular Biology, Peking Union Medical College, Beijing 100005, China Molecular and Cellular Developmental Biology Laboratory Harbin Institute of Technology Harbin 150001 China

myostatin, a new member of the TGF-β superfamily, is predominantly expressed in skeletal muscle cells and functions as a negative regulator of skeletal muscle growth in animals. Recently, we have reported three single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the chicken myostatin gene. Herein, we investigate the association of those SNPs with the production traits in a F2 chicken line derived from Broilers crossing to Silky with the least square analysis. The results show that the BB and AA genotypes are strongly associated with abdominal fat weight (AFW), abdominal fat percentage (AFP), and birth weight (BW) (P myostatin not only plays an important role in controlling skeletal muscle growth and differentiation, but also may be involved in regulation of adipose growth in chicken.

关键词： myostatin gene, SNPs, F2 chicken population, abdominal fat, breast muscle weight.

myostatin降解组蛋白乙酰转移酶p300的分子机制研究

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Myostatin降解组蛋白乙酰转移酶p300的分子机制研究

作者：季鸣中国协和医科大学

学位级别：硕士

myostatin又称GDF-8,属于TGF-β超家族成员,是骨骼肌的负调控因子。myostatin通过调控肌细胞的增殖和分化影响肌肉的生长与发育。myostatin通过上调p21以及减少CDK2的表达抑制肌细胞增殖,另外myostatin还可下调CyclinD1表达以及通过PI3K... 详细信息

myostatin又称GDF-8,属于TGF-β超家族成员,是骨骼肌的负调控因子。myostatin通过调控肌细胞的增殖和分化影响肌肉的生长与发育。myostatin通过上调p21以及减少CDK2的表达抑制肌细胞增殖,另外myostatin还可下调CyclinD1表达以及通过PI3K-AKT-GSK3β引起CyelinD1的降解来抑制增殖。Myostain抑制分化与下调肌肉特异性调节因子MyoD、Myogenin、Myf5表达有密切关系。在myostatin基因敲除小鼠上,许多基因的表达发生了明显的改变。然而myostatin对这些下游基因的调控机制还不清楚,组蛋白乙酰化修饰是调控基因表达的一种重要方式,本实验试图从乙酰化修饰的角度出发来揭示myostatin调控基因表达的具体机制。本实验发现myostatin能降低小鼠成肌细胞C2C12组蛋白H3的乙酰化水平,并且myostatin在蛋白水平下调组蛋白乙酰转移酶p300和PCAF,对组蛋白去乙酰化酶HDAC1则没有影响。进一步研究发现,PCAF蛋白水平的变化可能是myostatin下调其转录水平导致的。myostatin引起的p300蛋白水平减少与其转录水平无关,而与促进p300蛋白的降解有关。作为细胞内的转录共激活因子,p300在肌肉发生中起着重要作用,因此我们对myostatin引起p300降解的机制进行了深入研究,在C2C12细胞中P13K-AKT信号转导通路参与了p300降解,myostatin能够通过抑制这条信号通路引起p300降解,而IGF-1可以拮抗myostatin引起p300降解。此外,myostatin处理过表达AKT的C2C12细胞后p300仍有一定程度的降低,这提示除PI3K-AKT信号通路外,其他信号通路也参与了myostatin引起的p300降解。研究结果提示myostatin可能是通过下调p300和PCAF来降低组蛋白的乙酰化状态,来影响下游基因的表达,从而抑制肌肉发生。因此进一步揭示myostatin抑制肌肉发生的乙酰化调控机制,对于阐明myostatin的分子机制,解释myostatin与肌肉萎缩之间的关系,以及临床治疗肌肉萎缩将具有重要的指导意义。

关键词： myostatin 增殖与分化组蛋白去乙酰化酶组蛋白乙酰转移酶