检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

三种鳜鱼骨骼肌生长及相关调控基因表达比较

生物技术通报 2014年第12期30卷 184-189页

作者：许淼洋赵金良李传阳钱叶周吴超钱德上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 池州市秋浦特种水产开发有限公司池州247104

通过制作骨骼肌石蜡切片研究了鳜、斑鳜及斑鳜(♀)×鳜(♂)杂交一代不同发育时期(孵化后10D、20D、30D、60D、90D)骨骼肌肌纤维的生长特征,同时,利用q PCR技术分析了肌肉中myostatin、Myo D、myogenin三个基因m RNA的表达变化。结果表... 详细信息

通过制作骨骼肌石蜡切片研究了鳜、斑鳜及斑鳜(♀)×鳜(♂)杂交一代不同发育时期(孵化后10D、20D、30D、60D、90D)骨骼肌肌纤维的生长特征,同时,利用q PCR技术分析了肌肉中myostatin、Myo D、myogenin三个基因m RNA的表达变化。结果表明,3种鳜鱼全长均随日龄呈增大趋势,种间生长差异显著,鳜生长最快,斑鳜最慢,杂交一代介于斑鳜和鳜之间。不同发育时期,3种鳜鱼骨骼肌肌纤维数目较为接近,增生生长种间无明显差异,而肌纤维平均直径大小与其生长快慢间呈正相关,表明不同鳜鱼种间生长差异主要由肌肉肥大生长引起的。鳜、斑鳜和杂交一代myostatin m RNA在D20出现表达高峰,之后表达量呈下降趋势。Myo D在D10、D20表达水平较高,后期表达水平下降;myogenin在D20时表达量最低,之后,鳜表达量升高最为明显,杂交一代次之,斑鳜保持平稳。不同种类鳜鱼肌肉生长差异与3种基因表达差异间存在一定相关性。

关键词：鳜鱼生长肌纤维 myostatin MyoD myogenin mRNA表达量

重组生长激素对猪背最长肌及半腱肌中肌肉生长相关基因表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2004年第5期12卷 538-542页

作者：杨晓静陈杰胥清富赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室

16头长白×大约克 F代去势公猪,随机分成实验组和对照组,实验组每天注射重组猪生长激素(rpGH,每头4mg/d),对照组注射等体积生理盐水,28 d 后采样。用 RT-PCR 方法,以18S rRNA 作内标,定量分析背最长肌和半腱肌中肌肉生长抑制素(myostat... 详细信息

16头长白×大约克 F代去势公猪,随机分成实验组和对照组,实验组每天注射重组猪生长激素(rpGH,每头4mg/d),对照组注射等体积生理盐水,28 d 后采样。用 RT-PCR 方法,以18S rRNA 作内标,定量分析背最长肌和半腱肌中肌肉生长抑制素(myostatin)、生肌调节因子(myogenin)、肌源性决定因子(myoD)及钙激活蛋白酶3(calpain 3)、过氧化物增殖体激活物受体γ的共激活物-1(PGC-1)mRNA 相对丰度。结果显示:(1)实验组平均日增重提高26.1%(Pmyogenin mRNA 表达无明显变化;(3)半腱肌 myoD mRNA 丰度增加82%(P<0.05),calpain 3 mRNA丰度增加93%(P<0.01);(4)背最长肌 myoD mRNA 丰度增加79%(P=0.14),calpain,mRNA 丰度增加23%(P=0.11),半腱肌中 PGC-1 mRNA 的表达有明显下调的趋势(P=0.16)。重组猪生长激素能上调肌肉 myoD 和 calpain 3的表达,但对背最长肌和半腱肌的调节程度有差别,提示这些基因可能在生长激素(GH)调节骨骼肌生长的途径中起作用。

关键词：生长激素(GH) myostatin myogenin myoD calpain3 PGC-1

绿色荧光蛋白和成肌调节因子在骨髓基质干细胞中的共表达

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

第四军医大学学报 2006年第9期27卷 813-817页

作者：李美山张成陈松林于美娟张雅妮王淑辉熊符中山大学第一医院神经科中山大学干细胞与组织工程研究中心广东广州510080

目的:研究重组腺病毒(Ad)对骨髓基质干细胞(MSCs)的转染,以及绿色荧光蛋白(GFP)和成肌调节因子MyoD和myogenin在MSCs中的表达.方法:用差速贴壁法体外培养大鼠MSCs,并用流式细胞仪(FCM)检测其表面标志;对构建有绿色荧光蛋白的重组腺病毒(... 详细信息

目的:研究重组腺病毒(Ad)对骨髓基质干细胞(MSCs)的转染,以及绿色荧光蛋白(GFP)和成肌调节因子MyoD和myogenin在MSCs中的表达.方法:用差速贴壁法体外培养大鼠MSCs,并用流式细胞仪(FCM)检测其表面标志;对构建有绿色荧光蛋白的重组腺病毒(AdGFP)进行扩增和鉴定,并转染MSCs;用RTPCR检测MyoD和myogenin在转染后MSCs中的表达;将MSCs与C2C12成肌细胞共培养,诱导前者的分化,并用免疫荧光检测MyoD的表达.结果:FCM检测证实,在MSCs的表面标志中CD11b和CD45阴性,而CD29和CD44阳性;随着AdGFP感染复数(MOI)的增加,转染效率也相应提高,但在MOI大于100后,MSCs开始出现病变;RTPCR结果提示MyoD和myogenin在转染后的MSCs中有表达;免疫荧光检测证实诱导后的MSCs可以表达MyoD蛋白.结论:MSCs可以被AdGFP有效转染而表达GFP;同时内源性成肌调节因子的激活,可以促进MSCs的成肌分化.

关键词：基质干细胞腺病毒 C2C12 MyoD myogenin 绿色荧光蛋白成肌调节因子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

运动与生肌调节因子研究进展

中国运动医学杂志 2007年第6期26卷 770-772页

作者：苏艳红王瑞元周越辽宁师范大学体育学院大连116029 北京体育大学研究生院北京体育大学运动人体科学学院

生肌调节因子(myogenic regulatory factors,MRFs)包括MyoD、myogenin、myf5、MRF4四个成员。MRFs可与E盒结合,调节基因的转录。在几个肌肉表型蛋白的调控区,如快肌肌球蛋白轻链、肌球蛋白重链(MHc)Ⅰ和MHCⅡb都有E盒的存在。[第一段]

关键词：生肌调节因子 myogenin 肌球蛋白轻链运动肌球蛋白重链 MyoD MRF4 调节基因

MafF在骨骼肌缺血再灌注损伤修复中的作用及其潜在机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MafF在骨骼肌缺血再灌注损伤修复中的作用及其潜在机制

作者：钱攀婷苏州大学

学位级别：硕士

研究背景卫星细胞(Satellite cells,SCs)是负责肌肉损伤后修复的骨骼肌干细胞,PAX7是卫星细胞增殖的重要标志物,MyoD和myogenin分别指示卫星细胞早期和晚期的分化。MafF是碱性亮氨酸拉链(Basic leucine zipper,bZIP)型转录因子,其表达... 详细信息

研究背景卫星细胞(Satellite cells,SCs)是负责肌肉损伤后修复的骨骼肌干细胞,PAX7是卫星细胞增殖的重要标志物,MyoD和myogenin分别指示卫星细胞早期和晚期的分化。MafF是碱性亮氨酸拉链(Basic leucine zipper,bZIP)型转录因子,其表达具有组织或刺激特异性。目前研究发现,MafF具有丰富的生物学功能,它与糖尿病、神经系统疾病、血小板减少和癌症等疾病之间存在着相关的联系。然而,MafF在组织再生方面的功能知之甚少,尚不清楚MafF在骨骼肌缺血再灌注(Ischemia reperfusion,IR)损伤修复中是否发挥作用及其调控机制,有待进一步研究。研究目的本论文旨在探讨MafF参与调节骨骼肌卫星细胞生长和肌肉再生修复的作用方式及机制。研究方法(1)流式分选野生型C57BL/6J小鼠骨骼肌卫星细胞,对卫星细胞进行免疫荧光染色及腓肠肌(Gastrocnemius muscle,GAST)冷冻切片进行免疫组化染色,探究MafF是否在肌卫星细胞及肌肉组织中表达及其定位情况;(2)构建野生型C57BL/6J小鼠骨骼肌IR损伤模型,RT-qPCR和Western blot检测IR损伤后MafF的表达变化;(3)构建过表达MafF基因的稳定C2C12成肌细胞系,通过对照组(C2C12-LV5)和过表达MafF实验组(C2C12-MafF)的Ki67染色、EdU染色及统计分析阳性细胞的百分率,以及CCK8检测分析MafF是否影响细胞增殖;(4)RT-qPCR检测C2C12-LV5和C2C12-MafF的PAX7表达水平,并用卫星细胞进行ChIP实验,探究MafF是否直接靶向调控PAX7的转录并影响PAX7的表达;(5)对C2C12-LV5和C2C12-MafF细胞分化形成的肌管进行MyHC免疫荧光染色,并统计分析指示肌管分化、融合指数的各项指标,探究MafF是否影响C2C12成肌细胞的分化;(6)利用卫星细胞的ChIP实验和双荧光素酶报告实验,通过研究MafF与肌源性相关因子的调控关系,推演其参与肌肉再生的方式。研究结果(1)骨骼肌卫星细胞的免疫荧光染色和腓肠肌冷冻切片的免疫组化染色结果表明MafF主要表达于细胞核,在胞浆中也有少量表达;(2)MafF基因的表达在IR损伤后瞬时上调,之后逐渐恢复正常水平,提示MafF参与骨骼肌IR损伤后的早中期再生过程;(3)C2C12-LV5和C2C12-MafF细胞增殖速度无显著差异,证明过表达MafF不影响C2C12细胞增殖;(4)C2C12-LV5和C2C12-MafF中PAX7的表达量无显著差异,ChIP实验发现PAX7基因的转录起始位点上游2000 bp内没有MafF的富集和结合位点,说明MafF不能靶向调控PAX7表达,提示MafF参与肌肉损伤再生与卫星细胞的增殖无关;(5)过表达MafF会使C2C12细胞更高水平的分化,并且有利于肌管之间的融合;(6)利用卫星细胞进行ChIP实验及RT-qPCR分析MafF富集百分率,结果表明,MyoD作为肌源性细胞的早期分化决定因子,可以结合MafF启动子。并且,myogenin作为晚期分化因子,其启动子上游调控区-1330～-1102、-1101～-918位置上存在MafF的结合位点,双荧光素酶报告实验也进一步证明MafF能结合myogenin启动子并激活其转录。研究结论在本研究中,我们发现MafF的表达在骨骼肌IR损伤后瞬时上调。利用细胞增殖实验和ChIP实验证明MafF不影响C2C12细胞增殖和PAX7的表达,阐明MafF参与肌肉损伤再生并非是通过影响卫星细胞增殖。过表达MafF促进形成更高质量的肌管,同时有利于肌管之间的融合。此外,我们还发现MafF在受到MyoD调控后,能结合myogenin启动子并增强myogenin的表达,不同于以往研究中“MyoD直接结合myogenin启动子E-box序列并激活myogenin转录”的分化调控方式,丰富了原有的肌肉再生途径。综上所述,我们的研究结果证明MafF通过参与MyoD/MafF/myogenin通路促进卫星细胞的分化,为骨骼肌再生提供了一个新的调控机制。

关键词： MafF 骨骼肌缺血再灌注损伤肌卫星细胞 MyoD myogenin

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

32例小儿横纹肌肉瘤生肌因子的表达

上海第二医科大学学报 2002年第3期22卷 263-265页

作者：奚政君张忠德祝明洁信明军成宇帆王燕上海第二医科大学新华医院病理科上海200092

目的探讨小儿横纹肌肉瘤中生肌因子（MyoD1、myogenin）的表达及意义。方法应用免疫组化Envision法检测32例小儿横纹肌MyoD1、myogenin、Des、Sr-A、MG标记物的表达。结果5种标记物在小儿RMS表达的阳性率依次为:myogenin90.6％、MyoD18... 详细信息

目的探讨小儿横纹肌肉瘤中生肌因子（MyoD1、myogenin）的表达及意义。方法应用免疫组化Envision法检测32例小儿横纹肌MyoD1、myogenin、Des、Sr-A、MG标记物的表达。结果5种标记物在小儿RMS表达的阳性率依次为:myogenin90.6％、MyoD181.1％、Des65.5％、Sr-A50.0％、MG46.8％。结论 myogenin与MyoD1较Des、Sr-A、MG在诊断小儿RMS中灵敏度及特异性方面具有显著的优越性,有很高的诊断价值。Myo-genin特异性略高于MyoD1,是目前诊断小儿RMS的最佳免疫组化标记物。

关键词：小儿横纹肌肉瘤生肌因子 myogenin MyoD1 免疫组织化学

成骨细胞损伤和促炎性因子在诱导成肌细胞成骨中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

成骨细胞损伤和促炎性因子在诱导成肌细胞成骨中的作用

作者：张翔南方医科大学

学位级别：硕士

骨化性肌炎是发生于软组织特别是肌肉内的一种瘤样病变，分为两大类，一类为局限性骨化性肌炎，另一类为进行性骨化性肌炎。进行性骨化性肌炎是一种遗传性、进行性结缔组织疾患，是一种全身性的疾患。局限性骨化性肌炎常常由于创伤、手... 详细信息

骨化性肌炎是发生于软组织特别是肌肉内的一种瘤样病变，分为两大类，一类为局限性骨化性肌炎，另一类为进行性骨化性肌炎。进行性骨化性肌炎是一种遗传性、进行性结缔组织疾患，是一种全身性的疾患。局限性骨化性肌炎常常由于创伤、手术等多致病因素引起，少数无明显诱因。创伤性骨化性肌炎是创伤所致的一种局限性骨化性肌炎。创伤性骨化性肌炎的发病机制尚未明确，一般认为各种创伤、神经损伤和炎症等因素均可造成间充质细胞转化为成骨细胞，进而引起局限性的异位成骨。创伤导致损伤部位成骨、成肌细胞的损伤;创伤引起的炎症反应导致局部巨噬细胞大量聚集，这些都被认为是创伤性骨化性肌炎的诱导因素。 CC细胞系被认为是骨骼肌组织中分离出的肌卫星细胞，在不同的培养条件下表现出不同的分化潜能。BMP是最早被认为诱导骨骼肌组织异位骨化的细胞因子。BMP-2有抑制CC生肌原性分化，使CC细胞表达成骨相关因子的能力。这说明CC细胞有分化为成骨细胞的潜力，是研究创伤性骨化性肌炎的理想细胞模型。促炎性因子与异位骨化的研究近年来多有报道，但主要集中于心脏瓣膜、动脉内皮细胞等。但促炎性因子与成肌细胞钙化的关系至今无相关研究。本实验以CC成肌细胞为研究模型，研究细胞损伤、促炎性因子在诱导成肌细胞成骨方面的机制，并初步探讨了创伤性骨化性肌炎的发病机制。【目的】探讨成骨细胞损伤和促炎性因子对成肌细胞成肌、成骨相关基因表达的影响。【方法】 1、MC-3T3-E1细胞上清及裂解液处理CC细胞，观察CC细胞成肌、成骨相关基因的表达情况。 2、小鼠腹腔巨噬细胞上清液及IL-1β处理CC细胞及MC-3T3-E1细胞，观察促炎性因子对两种细胞成骨、成肌相关基因的表达情况。 3、小鼠腹腔巨噬细胞上清液、1L-1β处理MC-3T3-E1细胞裂解液诱导后的CC细胞，观察CC细胞成骨相关基因的表达情况。 4、统计处理：计量资料采用均数±标准差((?)±s)，完全随机设计的多个样本均数的比较运用单因素方差分析(One-way ANOVA)，组与组两两比较采用SNK(Student-Newman-Keuls Test)检验进行分析，Pmyogenin表达下降，差别有统计学意义(P=0．000);ALP表达上升，差别有统计学意义(P=0．000);OPN表达上升，差别有统计学意义(P=0．000)。MC-3T3-E1细胞上清液对CC细胞成肌、成骨相关基因的表达影响无统计学意义(P>0．05)。 2、小鼠腹腔巨噬细胞上清液促进CC细胞MyoD的表达升高，差别有统计学意义(P=0．000);促进myogenin的表达升高，差别有统计学意义(P=0．000);促进MC-3T3-E1细胞ALP的表达升高，差别有统计学意义(P=0．000);促进OPN的表达升高，差别有统计学意义(P=0．000)。IL-1β对CC细胞和MC-3T3-E1细胞的成肌、成骨因子的表达影响无统计学意义(P>0．05)。 3、小鼠腹腔巨噬细胞上清液、IL-1β均可使MC-3T3-E1细胞裂解液诱导后的CC细胞ALP表达上升，差别有统计学意义(P=0．000)。【结论】 1、MC-3T3-E1细胞裂解液可诱导CC细胞的成骨效应。 2、促炎性因子可上调成骨细胞的成骨相关基因表达;上调成肌细胞的成肌相关基因表达。 3、MC-3T3-E1细胞裂解液诱导的CC细胞的成骨效应可被促炎性因子上调;其中IL-1β可能是关键因素之一。

关键词：骨化性肌炎 MC-3T3-E1细胞 C2C12细胞促炎性因子 ALP MyoD myogenin

牛Akirin1基因对牛成肌细胞分化的影响研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

牛Akirin1基因对牛成肌细胞分化的影响研究

作者：汪海鹏东北农业大学

学位级别：硕士

脊椎动物的肌纤维在胚胎期形成,出生后数目不再改变。出生后肌肉的生长主要依赖卫星细胞的增殖分化而导致肌纤维长度增加和周径增大即肥大,而不是依赖肌细胞数目的增多即增生。研究肌肉发生的机制对于了解胚胎发育、细胞增殖与分化具有... 详细信息

脊椎动物的肌纤维在胚胎期形成,出生后数目不再改变。出生后肌肉的生长主要依赖卫星细胞的增殖分化而导致肌纤维长度增加和周径增大即肥大,而不是依赖肌细胞数目的增多即增生。研究肌肉发生的机制对于了解胚胎发育、细胞增殖与分化具有重要意义。脊椎动物生肌过程除由经典的生肌决定因子家族（MRFs）、心肌细胞增强子2家族（MEF2s）以及肌肉生成抑制素（MSTN）调控外还依赖于其他众多调节因子。这里我们研究了转录因子akirin1基因对牛成肌细胞分化的影响,以期为产肉动物肉质和产量的提高及肌营养不良和肌肉重生的治疗等临床应用提供理论依据,并为后续的转基因牛提供理论基础。本实验应用RT-PCR的方法扩增了牛akirin1基因594bp的CDS区域,构建了akirin1基因真核表达载体pIRES2-EGFP-akirin1,使用PEI转染技术使akirin1基因在牛成肌细胞中瞬时高效表达。利用Real-time PCR技术检测了akirin1转染细胞前后akirin1基因和肌肉分化标志性基因myogenin、MCK的mRNA表达水平变化,western blot技术检测了MRFs家族成员myogenin的蛋白水平在转染akirin1基因前后的变化。应用软件和在线网站对akirin1基因进行生物信息学分析,初步预测了akirin1蛋白的保守结构域和功能域,并预测了myogenin基因启动子上游的转录因子结合位点。最后还使用双荧光素酶报告基因检测系统研究了akirin1基因对myogenin基因启动子活性的影响。使用重组质粒pIRES2-EGFP-akirin1转染成肌细胞后的24h、48h、72h均能观察到绿色荧光表明akirin1基因在成肌细胞中得到表达。通过Real-time PCR检测到akirin1表达载体转染成肌细胞后的24h、48h、72h时间点akirin1基因均有高水平表达,肌肉分化相关的基因myogenin和MCK的mRNA水平也有不同程度的升高。Western blot检测到转染akirin1 24h、48h、72h后myogenin的蛋白水平均高于对照组,并且转染akirin1后myogenin的表达时间提前。双荧光素酶报告基因检测系统证明,akirin1能够通过增强myogenin启动子的活性从而促进myogenin的表达,最终促进肌肉分化。结论:akirin1的过表达能够促进肌肉分化相关基因的表达,这种对肌肉分化的促进作用机制之一是通过促进myogenin启动子活性实现的。

关键词： akirin1 myogenin 成肌细胞肌肉分化

麻痹性上斜视功能亢进的下斜肌形态结构改变及活性卫星细胞表达的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

麻痹性上斜视功能亢进的下斜肌形态结构改变及活性卫星细胞表达的...

作者：王雪中南大学

学位级别：硕士

目的：观察麻痹性上斜视患者功能亢进的下斜肌和正常人下斜肌形态结构及活性肌卫星细胞比例的差异，探讨活性卫星细胞对下斜肌形态结构改变及功能的影响。方法：收集麻痹性上斜视患者继发性功能亢进的下斜肌（20例27眼）(斜视组)和正常... 详细信息

目的：观察麻痹性上斜视患者功能亢进的下斜肌和正常人下斜肌形态结构及活性肌卫星细胞比例的差异，探讨活性卫星细胞对下斜肌形态结构改变及功能的影响。方法：收集麻痹性上斜视患者继发性功能亢进的下斜肌（20例27眼）(斜视组)和正常人的下斜肌（10例10眼）(对照组)，分别行光镜、电镜观察并采用免疫组化染色，统计Myf-5及myogenin阳性染色卫星细胞数;测量肌细胞横截面积。结果：斜视组下斜肌光镜表现为肌纤维粗细不一，排列稍紊乱，间质见少量胶原组织增生;电镜下肌小节结构尚完整，部分肌纤维萎缩变性，肌细胞内肌丝稀疏、溶解，线粒体聚集、水肿、空泡变，肌浆网扩张，肌纤维内见大量激活状态的卫星细胞。对照组下斜肌肌纤维形态结构正常。斜视组和对照组下斜肌中肌卫星细胞Myf-5及myogenin的阳性率分别为17.74％±3.16％和3.20％±1.14％，27.52％±2.65％和3.40％±0.84％，差异具有显著性意义（P＜0.001）;肌细胞横截面积分别为744.03±157.15μm和645.63±79.44μm，差异无显著性意义（P＞0.05）。结论：麻痹性上斜视继发性功能亢进的下斜肌形态结构改变呈多样化，出现大量的活性肌卫星细胞，提示功能亢进的下斜肌肌纤维中存在再生、重塑现象。而且，活性卫星细胞可能通过参与肌纤维的再生重塑过程，引起其功能改变。

关键词：麻痹性斜视下斜肌卫星细胞 Myf-5 myogenin