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myogenin mRNA丰度在金华猪和长白猪背最长肌中的表达

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中国兽医学报 2009年第3期29卷 374-377,388页

作者：单立莉张敏苗志国王雷杰许梓荣延边大学农学院动物科学系吉林龙井133400 河南科技学院动物科技学院河南新乡453003 浙江大学动物科学学院饲料研究所浙江杭州310029

运用半定量RT-PCR方法对不同生长阶段金华猪和长白猪背最长肌中肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因mRNA的表达丰度进行测定,分析与肌肉沉积的关系。结果表明:在2种猪35、80、125日龄均可检测到MyoG mRNA,金华猪背最长肌中MyoG基因的表达... 详细信息

运用半定量RT-PCR方法对不同生长阶段金华猪和长白猪背最长肌中肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因mRNA的表达丰度进行测定,分析与肌肉沉积的关系。结果表明:在2种猪35、80、125日龄均可检测到MyoG mRNA,金华猪背最长肌中MyoG基因的表达随着年龄和胴体瘦肉率的增加而增加,并且MyoG基因表达与胴体瘦肉率呈正比;而长白猪背最长肌中MyoG基因的表达恰好相反。除35日龄以外品种间无显著差异。

关键词： myogenin mRNA丰度金华猪长白猪背最长肌

Antibody to MyoD or myogenin Decreases Acetylcholine Receptor Clustering in C2C12 Myotube Culture

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CellBio 2013年第3期2卷 138-148页

作者： Matthew K. Ball David H. Campbell Kelly Ezell Jessica B. Henley Paul R. Standley Wade A. Grow Department of Anatomy Arizona College of Osteopathic Medicine Midwestern University Glendale USA Department of Basic Medical Sciences University of Arizona College of Medicine Phoenix USA

Skeletal muscle development is influenced by myogenic regulatory factors, including the expression of MyoD and myogenin. Our objective was to use the C2C12 cell culture model to test the hypothesis that both MyoD and myogenin were required for agrin-induced acetylcholine receptor (AChR) clustering and the fusion of myoblasts into myotubes. We induced fusion of myoblasts into myotubes by switching from growth medium (GM) to differentiation medium (DM). During myotube formation AChRs cluster spontaneously, but treatment with motor neuron derived agrin increases clustering of AChRs and other postsynaptic components of the neuromuscular synapse. We examined the normal expression pattern of MyoD and myogenin in C2C12 cell culture using immunofluorescence. MyoD was highly expressed while myoblasts were in GM, but expression declined within 72 hours after cell cultures were switched to DM. myogenin expression was low in GM, but increased when cell cultures were switched to DM. Next we used antibodies to decrease MyoD and/or myogenin function. Fluorescence microscopy images were captured and then analyzed to assess agrin-induced AChR clustering with or without antibody treatment. Finally we calculated the proportion of nuclei in myotubes and myoblasts by creating digital overlays of phase contrast and DAPI stained microscopy images. This allowed the comparison of myotube formation with or without antibody treatment. We report that antibody to either MyoD or myogenin decreases the frequency of agrin-induced AChR clustering without affecting myotube formation. We conclude that agrin-induced AChR clustering requires both MyoD and myogenin.

关键词： Agrin Acetylcholine Receptor MyoD myogenin C2C12

Impact of Bovine Skeletal Muscle Satellite Cell Differentiation by Small Interfering RNA Targeting myogenin Gene

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Journal of Northeast Agricultural University(English Edition) 2013年第2期20卷 32-37,F0003页

作者： Liu Cong-cong Zhao Dan-dan Tong Hui-li Ye Feng Yang Yue Li Shu-feng Jia Ming-yu Yan Yun-qin College of Life Sciences Northeast Agricultural University

To examine the effect of myogenin gene on the differentiation of bovine skeletal muscle satellite cell, we constructed small interfering RNA plasmid vector to obtain myogenin knockdown bovine skeletal muscle cells, then used cell transfection, real time RCR and Western Blot to detect the influence of myogenin to cell differentiation. Results showed that the knockdown of myogenin significantly decreased its expression and other muscle-specific genes. Compared to the control, it could differentiate into few myotubes when challenged by low serum in the medium. These findings provided an important theoretical basis for further explore of the genetic mechanism in adult skeletal muscle, the remedy of muscle injuries and the cultivation of high-yield transgenic cattle.

关键词： myogenin small interfering RNA adult bovine skeletal muscle satellite cell differentiation

Caveolin-3、myogenin、MyoD在大鼠力竭运动后骨骼肌损伤过程的时程表达

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北京体育大学学报 2012年第12期35卷 57-61页

作者：苏艳红齐鸷周越邹伟张青吴争辽宁师范大学体育学院辽宁省运动人体科学重点实验室辽宁大连116029 北京体育大学北京100084 辽宁师范大学生命科学学院辽宁大连116029

目的:为了探讨力竭运动引起骨骼肌损伤过程中Caveolin-3、myogenin和MyoD的作用,以雄性Wister大鼠为研究对象,采用一次性下坡跑运动,坡度为-16°,跑速16 m/s,分别在力竭后即刻、6、12、24、48 h和4、7 d时取材。腓肠肌进行HE染色,测定... 详细信息

目的:为了探讨力竭运动引起骨骼肌损伤过程中Caveolin-3、myogenin和MyoD的作用,以雄性Wister大鼠为研究对象,采用一次性下坡跑运动,坡度为-16°,跑速16 m/s,分别在力竭后即刻、6、12、24、48 h和4、7 d时取材。腓肠肌进行HE染色,测定血清肌酸激酶活性,RT-PCR法测定Caveolin-3、Myoge-nin、MyoD mRNA的表达。结果:骨骼肌形态学变化在损伤后24 h、48 h最严重;血清肌酸激酶在6、12、24、48 h时均显著高于对照组,其中6 h表达最高;Caveolin-3、MyoD和myogenin mRNA均表现在先升高,后下降,其中MyoD mRNA在运动后12 h达到峰值,Caveolin-3和myogenin mRNA在24 h达到峰值。结论:Caveolin-3、myogenin、MyoD均参与到骨骼肌损伤及修复过程中,变化特点可能与三者在肌发生过程及肌损伤修复过程所起作用不同有关。

关键词： Caveolin-3 MyoD myogenin 骨骼肌损伤力竭运动离心运动

急性骨骼肌钝挫伤修复过程及MyoD、myogenin变化的实验研究

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中国运动医学杂志 2016年第2期35卷 152-157,125页

作者：刘宇肖卫华罗贝贝陈佩杰上海体育学院运动科学学院上海200438 沈阳体育学院运动人体科学学院辽宁沈阳110102 中国人民解放军第二军医大学细胞生物学教研室上海200433

目的:观察小鼠急性骨骼肌钝挫伤后骨骼肌动态修复过程,探讨伤后Myo D和myogenin的作用。方法:以雄性C57BL/6小鼠为研究对象,制作腓肠肌钝挫伤模型,分为正常对照组和损伤后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d组。经HE染色和Masson三色染色... 详细信息

目的:观察小鼠急性骨骼肌钝挫伤后骨骼肌动态修复过程,探讨伤后Myo D和myogenin的作用。方法:以雄性C57BL/6小鼠为研究对象,制作腓肠肌钝挫伤模型,分为正常对照组和损伤后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d组。经HE染色和Masson三色染色观察骨骼肌钝挫伤后再生和纤维化瘢痕愈合过程;经免疫蛋白印迹法与免疫组织化学法检测Myo D和myogenin定量与定位表达变化。结果:(1)骨骼肌钝挫伤后3 d首次观察到新生肌细胞核,伤后5 d开始出现胶原纤维。(2)MyoD伤后1 d表达至高峰,随后下降,伤后14 d再次表达至第2高峰;MyoD阳性细胞核由正常肌细胞边缘逐渐迁移至受损骨骼肌周围聚集。(3)myogenin伤后3 d开始表达至高峰;myogenin阳性细胞核伤后3 d首次出现在新生成肌细胞核上,伤后5 d在新生肌管中表达,伤后7 d逐渐迁移至新生肌细胞边缘表达。结论:骨骼肌急性钝挫伤后MyoD和myogenin表达具有时间规律性,新生肌纤维和纤维化共同完成骨骼肌钝挫伤后的愈合过程。

关键词：骨骼肌钝挫伤 MyoD myogenin

成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程的动态变化

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第一军医大学学报 2004年第5期24卷 542-545页

作者：曾缨张成刘克玄李才明冯善伟李群柳太云黄文中山大学附属第一医院神经内科广东广州510080 中山大学附属第一医院麻醉科广东广州510080

目的探讨成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程中的动态表达。方法用盐酸布比卡因局部注射制作肌肉损伤模型,在损伤后不同时间点取腓肠肌行冰冻切片,HE染色显示损伤肌肉的病理变化,用SABC法检测MyoD与myogenin的表达。结果Myo... 详细信息

目的探讨成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程中的动态表达。方法用盐酸布比卡因局部注射制作肌肉损伤模型,在损伤后不同时间点取腓肠肌行冰冻切片,HE染色显示损伤肌肉的病理变化,用SABC法检测MyoD与myogenin的表达。结果MyoD在肌肉损伤后18 h开始表达,48 h达高峰;myogenin在肌肉损伤后24 h开始表达,72 h达高峰。结论MyoD与myogenin在肌肉损伤后的再生修复过程中起作用,可作为鉴定肌肉前体细胞和反映肌肉再生的指标。

关键词：成肌调节因子 MyoD myogenin 肌肉损伤修复过程动态变化

失喉返神经支配的人环杓后肌成肌调节因子myogenin表达的变化

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第二军医大学学报 2007年第9期28卷 951-955页

作者：张贤郑宏良陈世彩南京军区福州总医院耳鼻咽喉科福州350025 第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433

目的：观察不同时限失神经状态下人环杓后肌成肌调节因子myogenin的表达变化,为喉神经修复时限的选择奠定基础。方法：取38例喉返神经完全离断患者的环杓后肌标本,按神经离断时限分为4组：失神经6-12个月（n=12）、1-2年（n=10）、2-3年... 详细信息

目的：观察不同时限失神经状态下人环杓后肌成肌调节因子myogenin的表达变化,为喉神经修复时限的选择奠定基础。方法：取38例喉返神经完全离断患者的环杓后肌标本,按神经离断时限分为4组：失神经6-12个月（n=12）、1-2年（n=10）、2-3年（n=8）及〉3年组（n=8）,另取12例正常环杓后肌标本作为对照,各组患者的年龄、性别比例具有可比性。免疫荧光染色、实时定量PCR法比较各组环杓后肌myogenin蛋白及mRNA的表达。结果：免疫荧光染色结果显示：myoge-nin阳性表达主要定位于失神经3年内的环杓后肌肌细胞核,对照组正常环杓后肌基本无阳性表达;与正常对照组相比,失神经6-12个月组肌细胞核myogenin表达程度及阳性细胞百分比升高,1-2年组表达最高,2-3年组逐渐下降,但仍显著高于对照组（P均〈0.01）,而3年以上组基本无阳性表达,与对照组无显著差异。实时定量PCR结果表明：对照组myogenin mR-NA未表达,失神经1-2年组myogenin mRNA表达水平为6-12个月组的4倍,失神经2-3年组为其64倍,失神经3年以上组仅为其1/2（P均〈0.01）。结论：失喉返神经支配的环杓后肌肌纤维3年内有较大的再生潜力。

关键词：环杓后肌喉返神经创伤和损伤 myogenin

牙鲆myogenin蛋白在大肠杆菌中重组表达的研究

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2007年第5期37卷 754-758页

作者：徐芃谭训刚张培军王先磊张玉青中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室

采用大肠杆菌表达系统及pProEXTMHTc表达载体对牙鲆肌肉发生调节因子myogenin基因进行了体外重组表达研究。通过对诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导温度的优化,确定了最佳诱导条件为:诱导温度31℃,IPTG终浓度0.6mmol/L,诱导时间2 h。在... 详细信息

采用大肠杆菌表达系统及pProEXTMHTc表达载体对牙鲆肌肉发生调节因子myogenin基因进行了体外重组表达研究。通过对诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导温度的优化,确定了最佳诱导条件为:诱导温度31℃,IPTG终浓度0.6mmol/L,诱导时间2 h。在该条件下,重组蛋白表达量最高且是可溶性的。myogenin融合蛋白的成功表达为进一步深入研究其在牙鲆肌肉发育过程中的分子机制奠定了基础。

关键词：牙鲆体外蛋白表达 myogenin

鸡AChRγ亚基基因远端E盒子与myogenin的相互作用

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生物化学杂志 1995年第5期11卷 516-520页

作者：肖国芝贾弘张迺蘅北京医科大学生化与分子生物学系

业已证明，鸡ｎＡｃｈＲγ亚基基因５＇连接区，－５０９／－３０２，－３２４／＋３６片段可独立激活异源启动子ＳＶ４０的转录活性；γ基因近端两个Ｅ盒子（ＣＡＮＮＴＧ）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用及转录激活分... 详细信息

业已证明，鸡ｎＡｃｈＲγ亚基基因５＇连接区，－５０９／－３０２，－３２４／＋３６片段可独立激活异源启动子ＳＶ４０的转录活性；γ基因近端两个Ｅ盒子（ＣＡＮＮＴＧ）与生肌调节因子（ｍｙｏｇｅｎｉｎ）的相互作用及转录激活分析表明，近端两个Ｅ盒于是γ启动子活性必不可少的，但却是不充分的。利用胶阻滞和ＤＮａｓｅⅠ足纹试验观察了鸡ｎＡｃｂＲγ基因远端Ｅ盒子与ＧＳＴ－ｍｙｏｇｅｎｉｎ融合蛋白的相互作用。胶阻滞试验证明，－５３８／－２８８片段可与ｍｙｏｇｅｎｉｎ相互结合，引起（３２）￣ｐ标记的ＤＮＡ片段在ＰＡＧＥ中迁移率减慢，这种胶阻滞现象可被含Ｅ盒子的未标记片段消除，并被抗鸡ｍｙｏｇｅｎｉｎ单克隆抗体或抗血清所改变。ＤＮａｓｅⅠ足纹试验证明，ｍｙｏｇｅｎｉｎ系通过γ基因转录起始点上游－４２９／－４２４及－４６３／－４５８两个Ｅ盒子与γ基因５＇连接区－５３８／－２８８相互作用。

关键词：鸡 AchRγ亚基基因 E盒子 myogenin