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microrna-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响

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南京医科大学学报（自然科学版） 2014年第2期34卷 159-163页

作者：朱楠张积森荆珏华钱军仇汪宝安徽医科大学第二附属医院骨科安徽合肥230601

目的:探讨microrna-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆... 详细信息

目的:探讨microrna-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-pCR)检测各组细胞miR-199a-3p的表达量,Western blot法检测各组细胞中髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(pARp)的剪切情况,利用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,并对实验结果进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中,miR-199a-3p的表达量明显升高,MCL-1蛋白的表达降低,pARp蛋白的剪切水平增加,细胞的凋亡率增高,差异均有统计学意义(p199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡。

关键词：骨肉瘤凋亡 microrna-199a-3p 转染

microrna-199a-3p在肾细胞癌中的表达及功能学研究

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MicroRNA-199a-3p在肾细胞癌中的表达及功能学研究

作者：陶良俊南京医科大学

学位级别：硕士

背景与目的：肾细胞癌（又称肾癌，RCC）对放、化疗不敏感，且缺乏用于早期诊断的肿瘤标记物，是其病死率高的主要原因。微小RNA（microrna，miRNA，miR）在人类肿瘤中广泛差异性表达，因其具有类似癌基因和抑癌基因的功能而备受关注... 详细信息

背景与目的：肾细胞癌（又称肾癌，RCC）对放、化疗不敏感，且缺乏用于早期诊断的肿瘤标记物，是其病死率高的主要原因。微小RNA（microrna，miRNA，miR）在人类肿瘤中广泛差异性表达，因其具有类似癌基因和抑癌基因的功能而备受关注。研究表明miRNA具有成为肿瘤诊断和治疗特异性标志物的潜能。microrna-199a-3p（miR-199a-3p）在人类多种肿瘤中差异性表达，且具有一定的抑癌或致癌作用。然而，到目前为止尚没有关于miR-199a-3p在肾癌中的表达及作用的研究。本研究旨在检测miR-199a-3p在肾癌细胞株和肾癌组织中的表达，分析miR-199a-3p的表达水平与肾癌患者生存之间的关系，并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。研究方法: 利用实时定量RT-pCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和肾癌组织中的表达水平;结合肾癌患者的随访资料，采用Kaplan-Meier生存分析法分析肾癌组织中miR-199a-3p表达水平与肾癌患者生存之间的相关性;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0、Caki-1上调miR-199a-3p后，通过CCK-8、克隆形成、transwell以及细胞周期、凋亡检测来探究其在肾癌细胞中的作用。研究结果: 与肾细胞HK-2相比，miR-199a-3p在肾癌细胞786-O和Caki-1中明显低表达（p199a-3p在76.7%（23/30）的肾癌组织中明显低表达;Kaplan-Meier生存分析表明miR-199a-3p低表达的肾癌患者具有更差的生存期（p199a-3p可显著抑制肾癌细胞786-O、Caki-1的增殖（48h：786-O p=0.021、Caki-1p=0.032;72h：786-O p=0.015、Caki-1p=0.028;96h：786-O p=0.000、Caki-1p=0.000）、存活（786-O：p=0.000;Caki-1：p=0.000）和侵袭（786-O：p=0.004;Caki-1：p=0.006），并能诱导细胞周期G1期阻滞（786-O: p=0.012;Caki-1: p=0.001）。结论: 我们的研究显示在肾癌细胞和组织中miR-199a-3p明显低表达，miR-199a-3p的表达水平与肾癌患者的预后相关，miR-199a-3p在肾癌中具有一定的抑癌作用。上述发现表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断、预后判断和治疗靶点的潜能。

关键词：肾细胞癌 microrna-199a-3p 预后抑癌基因

microrna-199a-3p在肾癌中的表达及作用

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现代泌尿生殖肿瘤杂志 2012年第4期4卷 229-232,241页

作者：陶良俊秦超曹强钱健蔡宏宙朱建李普邵鹏飞孟小鑫殷长军南京医科大学第一附属医院泌尿外科 210029

目的检测microrna-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-pCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-1... 详细信息

目的检测microrna-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-pCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-199a-3p后,通过CCK-8、克隆形成、Transwell以及细胞周期检测来探究其在肾癌细胞中的作用。结果 miR-199a-3p在肾癌细胞中明显低表达,在78%(14/18)的肾癌组织中亦明显低表达;上调miR-199a-3p可显著抑制肾癌细胞的增殖、存活和侵袭并能诱导细胞周期G1期阻滞。结论我们的研究显示在肾癌中miR-199a-3p明显低表达并参与肾癌的发生、发展,这表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断和治疗靶点的潜能。

关键词： microrna-199a-3p 抑癌基因肾细胞癌

miR-199a-3p靶向视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1促进心肌细胞肥大

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中山大学学报（医学版） 2019年第1期40卷 23-30页

作者：杨静胡志琴朱杰宁李晖符永恒袁淑菁潘蓉张梦珍单志新华南理工大学医学院广东广州510006 广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省心血管病研究所广东广州510080 南方医科大学药学院广东广州510515

【目的】探讨微小RNA microrna-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因。【方法】原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),转染miR-199a-3p模拟物(mimic)和视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1(Rb-1)siRNA分别来增加N... 详细信息

【目的】探讨微小RNA microrna-199a-3p(miR-199a-3p)对心肌细胞肥大的调控作用及其作用靶基因。【方法】原代分离培养C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),转染miR-199a-3p模拟物(mimic)和视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1(Rb-1)siRNA分别来增加NMVC中miR-199a-3p和抑制Rb-1的水平。双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-3p与潜在靶基因Rb-1 3′端非翻译区(3′-UTR)的结合作用。FITC-鬼笔环肽染色检测乳小鼠心肌细胞表面积。RT-qpCR和Western blot检测miR-199a-3p,Rb-1和心肌细胞肥大相关基因的表达。【结果】①过表达miR-199a-3p可明显增加NMVC中的肥厚相关基因Nppa,Acta1,Myh7表达;②双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-199a-3p与Rb-1 3′UTR具有特异结合作用;miR-199a-3p可在转录后水平抑制Rb-1的表达;③过表达miR-199a-3p或抑制Rb-1表达均能一致性地增加心肌细胞表面积和心肌细胞肥大相关基因表达,并促进E2f2进入NMVC细胞核。【结论】miR-199a-3p通过抑制Rb-1表达,促进了E2f2进入细胞核来发挥促进NMVC肥大的作用。

关键词：心肌肥厚微小RNA microrna-199a-3p 视网膜母细胞瘤转录辅阻遏子1