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microrna-181b对2型糖尿病胰岛素分泌调节的作用及其机制研究

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中国现代医学杂志 2022年第10期32卷 30-35页

作者：曾维新云川李晓燕李大伟海南医学院第一附属医院内分泌科海南海口570102

目的探讨microrna-181b(miR-181b)能否通过靶向调控NDRG2参与2型糖尿病胰岛素分泌的调节。方法选用小鼠胰岛β细胞进行体外传代培养,构建NDRG2野生型(NDRG2^(WT)-1uc)与突变型(NDRG2^(MUT)-1uc)荧光素酶报告基因质粒并进行转染,转染结... 详细信息

目的探讨microrna-181b(miR-181b)能否通过靶向调控NDRG2参与2型糖尿病胰岛素分泌的调节。方法选用小鼠胰岛β细胞进行体外传代培养,构建NDRG2野生型(NDRG2^(WT)-1uc)与突变型(NDRG2^(MUT)-1uc)荧光素酶报告基因质粒并进行转染,转染结束后进行双荧光素酶报告分析。构建NDRG2过表达和敲低质粒并转染小鼠胰岛β细胞,检测NDRG2 mRNA和蛋白表达、胰岛素分泌量。未转染的小鼠胰岛β细胞培养48 h后采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-181b和NDRG2 mRNA的表达。采用葡萄糖刺激的胰岛素释放试验检测5 mmol/L和20 mmol/L葡萄糖条件下的小鼠胰岛β细胞分泌的胰岛素。结果(1)荧光素酶报告基因实验检测发现,各组相对荧光强度比较,差异有统计学意义(P181b模拟物可以明显抑制NDRG2^(WT)-luc的3’端非翻译区的表达,但对NDRG2-MUT组和Control组无明显影响;miR-181b inhibitor可以加强NDRG2^(WT)-luc的3’-端非翻译区的表达,但对NDRG2-MUT组和Control组无明显影响。(2)过表达组NDRG2 mRNA和蛋白相对表达量高于过表达对照组(P0.05);在20 mmol/L葡萄糖条件下,过表达对照组胰岛素分泌量高于过表达组(P0.05);在20 mmol/L葡萄糖条件下,敲低组胰岛素分泌量高于敲低对照组(P181b和NDRG2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);20 mmol/L葡萄糖组miR-181b相对表达量高于对照组和5 mmol/L葡萄糖组(P181b mimics组、miR-181b inhibitor组胰岛素分泌量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在20 mmol/L葡萄糖条件下,miR-181b mimics组胰岛素分泌量高于Control组(Pb1 inhibitor组胰岛素分泌量低于Control组和miR-181b mimics组(P181b可以通过靶向抑制NDRG2的表达来提高胰岛素的分泌。

关键词： 2型糖尿病 microrna-181b NDRG2 荧光素酶报告基因实验胰岛素

丹参酮ⅡA对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织microrna-181b及TLR4表达的影响

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丹参酮ⅡA对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织MicroRNA-181b及TLR4表...

作者：李济方遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨丹参酮ⅡA（TanshinoneⅡA,TSⅡA）对缺氧缺血性脑损伤（Hypoxic ischemic brain damage,HIbD）新生鼠脑组织中TLR4及Micro RNA-181b表达的影响。方法:选择7日龄SD新生大鼠40只作为研究对象,然后基于随机数字法分组,分为以下... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA（TanshinoneⅡA,TSⅡA）对缺氧缺血性脑损伤（Hypoxic ischemic brain damage,HIbD）新生鼠脑组织中TLR4及Micro RNA-181b表达的影响。方法:选择7日龄SD新生大鼠40只作为研究对象,然后基于随机数字法分组,分为以下的四组,即:正常对照组、模型对照组、TSⅡA低剂量组、TSⅡA高剂量组,各组均为10只,分组和缺氧缺血手术后仍然与母鼠同笼进行正常生活。正常对照组仅做切开颈部皮肤,将相应的颈总动脉分离开,不做结扎处理。参考Rice等人的方法建立经典的HIbD动物模型,并且在造模过程中要注意观察建立动物模型前后实验动物的行为学改变。模型对照组在进行缺氧缺血术后使用等量生理盐水腹腔注射,每日注射1次,直至取用标本。TSⅡA低剂量组在缺氧缺血术后使用TSⅡA磺酸钠注射液以35mg/kg的剂量进行腹腔注射,每日注射1次。TSⅡA高剂量组,行缺氧缺血术后使用TSⅡA磺酸钠注射液以70mg/kg的剂量进行腹腔注射,每日注射1次。将四组新生鼠处死,并完整的取出大脑,之后再将脑组织进行常规固定、石蜡包埋、切片等操作。通过HE染色的方法进行观察,并基于免疫组织化学染色的方法对各组新生鼠脑组织中TLR4的阳性率进行检测,采用PCR的方法进行检测各组新生鼠脑组织中Micro RNA-181b水平。结果:1.实验动物模型的鉴定:新生鼠在缺氧缺血术后可表现出不同程度的异常行为,如抽搐、头颤、肢体抖动、翻身困难、夹尾左旋等。2.各组脑组织HE染色结果:在正常对照组中,脑组织神经细胞形态结构表现的较为正常,神经细胞排列规则有序,细胞数量丰富,组织结构较为致密,未见明显的病理改变。在模型对照组中可以见到脑组织出现大面积的坏死,从而造成的神经细胞数量减少,组织结构出现明显的疏松,在这一视野中仅可以见到少量的神经细胞,而且出现神经元细胞固缩,脑血管明显充血,同时也可观察到炎性细胞的浸润。在TSⅡA低剂量组或高剂量组中均可见,神经细胞的细胞核排列出现有少许紊乱,炎症细胞的浸润相较于模型组明显减少,且TSⅡA高剂量组的病理表现总体来说是要好于TSⅡA低剂量组的。3.各组新生鼠脑组织TLR4表达量的变化:TLR4蛋白在正常对照组新生鼠脑组织中表达较少。模型对照组的TLR4较正常对照组的TLR4表达增多（P＜0.05）,TSⅡA各组的TLR4的表达量均低于模型对照组（P＜0.05）,TSⅡA低剂量组TLR4蛋白的表达量高于TSⅡA高剂量组（P＜0.05）。4.各组新生鼠脑组织Micro RNA-181b表达量的变化:模型对照组Micro RNA-181b较正常对照组表达减少（P＜0.05）,TSⅡA各组Micro RNA-181b均较模型对照组表达增加（P＜0.05）,TSⅡA高剂量组Micro RNA-181b表达高于TSⅡA低剂量组（P＜0.05）。结论:TSⅡA可能通过影响Micro RNA-181b及TLR4的表达,从而对新生鼠缺氧缺血脑损伤产生保护作用。

关键词：缺氧缺血性脑病 microrna-181b TLR4 TS ⅡA

丹参酮ⅡA对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织中microrna-181b表达的影响

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医学食疗与健康 2022年第18期20卷 176-178,190页

作者：李济方宋文秀遵义医科大学第五附属(珠海)医院广东珠海519100

目的:探讨丹参酮ⅡA(TSⅡA)对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织中microrna-181b(miR-181b)表达的影响。方法:挑选出生时间在7日的SD新生大鼠作为本次研究的实际对象,选择的数量为40只,最后使用随机数字法分为以的四组:正常对照组、模型对... 详细信息

目的:探讨丹参酮ⅡA(TSⅡA)对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织中microrna-181b(miR-181b)表达的影响。方法:挑选出生时间在7日的SD新生大鼠作为本次研究的实际对象,选择的数量为40只,最后使用随机数字法分为以的四组:正常对照组、模型对照组、TSⅡA低剂量组、TSⅡA高剂量组,各组均为10只,缺氧缺血手术完成以及分组之后,将其与原有小组中的母鼠放在一起。对照组中的小鼠只将其颈部皮肤划开,分离其颈总动脉,但不对其进行结扎手术。建立经典的HIbD动物模型,并且在造模过程中要注意观察建立动物模型前后实验动物的行为学改变。模型对照组在进行缺氧缺血术后使用等量生理盐水腹腔注射,每日注射1次,直至取用标本。TSⅡA低剂量组在缺氧缺血术后使用TSⅡA磺酸钠注射液以35mg/kg的剂量进行腹腔注射,每日注射1次。TSⅡA高剂量组,行缺氧缺血术后使用TSⅡA磺酸钠注射液以70mg/kg的剂量进行腹腔注射,每日注射1次。将四组新生鼠处死,并完整的取出大脑,采用PCR的方法进行检测各组新生鼠脑组织中miR-181b水平。结果:各组新生鼠脑组织miR-181b表达量的变化:正常对照组miR-181b较模型对照组明显表达(P181b均较模型对照组明显表达(P181b表达强于TSⅡA低剂量组(P181b的表达。

关键词：缺氧缺血性脑病 microrna-181b TSⅡA

急慢性注射地卓西平马来酸盐对小鼠额叶microrna-181b表达的影响

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中国神经精神疾病杂志 2012年第6期38卷 346-349页

作者：向熙刘卫青余艺王栋陈晓岗温州医学院基因组医学研究院温州325000 中南大学湘雅二医院精神卫生研究所

目的研究急慢性注射地卓西平马来酸盐(MK-801)对小鼠额叶中与精神分裂症相关的微小RNA(microrna,miRNA)-181b表达的影响,探讨其参与精神分裂症病理学的可能机制。方法急性注射实验中40只小鼠随机分成四组,分别腹腔注射不同剂量(0.125 mg... 详细信息

目的研究急慢性注射地卓西平马来酸盐(MK-801)对小鼠额叶中与精神分裂症相关的微小RNA(microrna,miRNA)-181b表达的影响,探讨其参与精神分裂症病理学的可能机制。方法急性注射实验中40只小鼠随机分成四组,分别腹腔注射不同剂量(0.125 mg/kg,0.25 mg/kg,0.50 mg/kg)的MK-801和生理盐水(简称急性对照组),15 min后用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测额叶miRNA-181b的相对表达量;慢性注射实验中22只小鼠随机分成两组,分别腹腔注射0.25 mg.kg-1.d-1的MK-801和生理盐水(简称慢性对照组),连续14 d,然后检测miRNA-181b的相对表达量。结果急性注射0.125 mg/kg、0.25 mg/kg、0.50 mg/kgMK-801的各组小鼠额叶miRNA-181b的相对表达水平分别为0.65±0.05、0.61±0.05和0.91±0.08。前两个剂量组miRNA-181b的表达明显低于对照组(1.00±0.13),P181b表达无影响(P>0.05)。慢性MK-801注射组miRNA-181b的相对表达量为1.86±0.19,显著高于慢性对照组(1.00±0.10),P181b表达的影响不同,结合miR-181b的分子功能,提示miRNA-181b在急性和慢性模型鼠的构建中起到不同的作用。

关键词：地卓西平马来酸盐额叶 microrna-181b 实时荧光定量PCR

microrna-181b对心血管疾病的调控作用及机制的研究进展

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首都医科大学学报 2019年第3期40卷 396-401页

作者：祁缘荆黎首都医科大学基础医学院北京100069 首都医科大学公共卫生学院北京100069

心血管疾病是当前发病率和病死率最高的疾病之一。microrna-181b(miR-181b)在心血管疾病的发生和发展过程中发挥了重要的作用。大量研究表明,miR-181b可通过调控心血管组织中的相关靶基因进而调节细胞因子、蛋白酶以及受体的表达,从而... 详细信息

心血管疾病是当前发病率和病死率最高的疾病之一。microrna-181b(miR-181b)在心血管疾病的发生和发展过程中发挥了重要的作用。大量研究表明,miR-181b可通过调控心血管组织中的相关靶基因进而调节细胞因子、蛋白酶以及受体的表达,从而参与调控心血管系统的生理及病理状态。在高血压、动脉粥样硬化、动脉瓣膜钙化、心肌纤维化、心肌肥厚以及心肌炎等心血管疾病中发挥着重要的调控作用。本文拟就相关的研究进展对miR-181b在心血管疾病中的作用及机制进行综述。

关键词： microrna-181b 心血管疾病作用机制

microrna-181b通过靶定MLK2调节白血病细胞HL-60的增殖

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中国科学：C辑 2009年第11期39卷 1034-1040页

作者：陈宏陈群方明米延哈尔滨市医科大学附属第一医院新生儿科哈尔滨150001 哈尔滨市阿城区人民医院检验科哈尔滨150300 哈尔滨医科大学研究生院哈尔滨150081

microrna在细胞的转移、凋亡、分化等生命过程中发挥着重要的作用.miR-181b在急髓性白血病组织中高表达,通过靶定MLK2调节急髓性白血病细胞的增殖.本结果提示,miR-181b在急髓性白血病的生物学过程发挥着重要的作用,同时为急髓性白血病... 详细信息

microrna在细胞的转移、凋亡、分化等生命过程中发挥着重要的作用.miR-181b在急髓性白血病组织中高表达,通过靶定MLK2调节急髓性白血病细胞的增殖.本结果提示,miR-181b在急髓性白血病的生物学过程发挥着重要的作用,同时为急髓性白血病的治疗提供了新的解决方案.

关键词： microrna-181b MLK2 AML HL-60 增殖凋亡

microrna-181b及Toll样受体4在新生大鼠神经元缺氧缺血损伤中的作用机制研究

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中国现代医学杂志 2018年第21期28卷 21-27页

作者：阎雯齐薛浩陕西省西安市儿童医院新生儿一科陕西西安710003 陕西省西安市儿童医院NICU科陕西西安710003

目的观察Micro RNA-181b(mi RNA-181b)及Toll样受体4(TLR4)对新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIbD)的影响并探讨其潜在机制。方法选取3只1~2日龄新生大鼠脑皮质神经元细胞原代培养7 d,分为对照组和HIbD组。CKK-8法测定原代培养的脑皮质神经元... 详细信息

目的观察Micro RNA-181b(mi RNA-181b)及Toll样受体4(TLR4)对新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIbD)的影响并探讨其潜在机制。方法选取3只1~2日龄新生大鼠脑皮质神经元细胞原代培养7 d,分为对照组和HIbD组。CKK-8法测定原代培养的脑皮质神经元细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,瞬时转染调节细胞内mi RNA-181b及TLR4表达。双荧光素酶实验检测mi RNA-181b对TLR4基因的靶向调控,SYbR Green实时荧光定量PCR观察mi RNA-181b及TLR4 m RNA表达变化。Western blot观察TLR4蛋白在不同组别神经元细胞中的表达。结果与对照组比较,mi RNA-181b在新生大鼠缺氧缺血损伤神经元细胞中表达降低(P181b mimic转染后过表达mi RNA-181b能抑制缺血缺氧对新生大鼠神经元细胞的损伤(P181b可与TLR4 m RNA 3'-UTR直接结合,发挥对TLR4转录后翻译的抑制作用。进一步机制研究发现,si-TLR4转染后抑制TLR4表达能增加细胞活性,而mi RNA-181b抑制剂anti-mi RNA-181b转染后降低细胞活性,anti-mi RNA-181b与si-TLR4共转染能部分逆转神经元细胞缺血缺氧下的损伤(PbD神经元细胞中mi RNA-181b能够负性调控TLR4表达发挥一定的神经保护作用。

关键词：新生儿缺血缺氧性脑病 microrna-181b Toll样受体4

骨肉瘤患者血浆中microrna-181b水平的检测

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昆明医科大学学报 2015年第9期36卷 54-57页

作者：陆斌李建武杨艳中国人民武装警察部队陕西省总队医院骨科陕西西安710054

目的检测骨肉瘤患者血浆中micro RNA-181b(mi R-181b)的水平变化,初步探讨其临床意义.方法选择25例骨肉瘤患者和30例健康对照,采用茎-环定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测血浆中mi R-181b的水平,并分析mi R-181b与骨肉瘤临床病理... 详细信息

目的检测骨肉瘤患者血浆中micro RNA-181b(mi R-181b)的水平变化,初步探讨其临床意义.方法选择25例骨肉瘤患者和30例健康对照,采用茎-环定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测血浆中mi R-181b的水平,并分析mi R-181b与骨肉瘤临床病理指标之间的关系.结果骨肉瘤患者血浆中mi R-181b水平(0.62±0.25)与正常对照组(0.41±0.18)相比明显升高,差异具有统计学意义(P181b的水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、病理类型及Enneking分期均无明显相关性(P>0.05).结论骨肉瘤患者血浆中mi R-181b水平增高,mi R-181b可能参与了骨肉瘤的发病过程.

关键词： microrna-181b 骨肉瘤临床意义

microrna-181b在多种疾病中的作用机制研究进展

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神经疾病与精神卫生 2018年第7期18卷 506-510页

作者：顾丽红孙争宇李林首都医科大学宣武医院药学部北京市神经药物工程技术研究中心北京脑重大疾病研究院神经变性病教育部重点实验室 100053

microrna是一大类非编码的小分子RNA，miR．181b是miR．181家族中四个成员之一。近年来的研究发现，miR．181b与多种疾病的发生发展密切相关，有可能作为生物标记物及干预治疗的潜在靶点。现对miR-181b在精神分裂症、神经系统疾病、心... 详细信息

microrna是一大类非编码的小分子RNA，miR．181b是miR．181家族中四个成员之一。近年来的研究发现，miR．181b与多种疾病的发生发展密切相关，有可能作为生物标记物及干预治疗的潜在靶点。现对miR-181b在精神分裂症、神经系统疾病、心血管疾病、恶性肿瘤等疾病中的表达水平及其作用机制的研究进展作一综述，以帮助学者全面了解miR．181b在疾病中的作用，为疾病的临床诊疗提供新的思路和方法。

关键词：精神分裂症神经系统疾病心血管疾病恶性肿瘤 microrna-181b