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microrna-101在结肠癌中的表达及与临床病理参数的关系

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广东医学 2014年第20期35卷 3235-3237页

作者：柳勤译杨小乔王伟福李博郭婉薇许鸣广东省第二人民医院消化内科广州510310

目的研究分析microrna-101在结肠癌中的表达情况及与患者临床病理参数的相关性。方法提取80例结肠癌患者癌组织及其正常结肠黏膜组织标本的总RNA,采用茎环逆转录及实时荧光定量方法(stemloop-RT-q PCR)检测microrna-101的表达量,统计分... 详细信息

目的研究分析microrna-101在结肠癌中的表达情况及与患者临床病理参数的相关性。方法提取80例结肠癌患者癌组织及其正常结肠黏膜组织标本的总RNA,采用茎环逆转录及实时荧光定量方法(stemloop-RT-q PCR)检测microrna-101的表达量,统计分析microrna-101表达情况与患者临床病理参数之间的关系。结果结肠癌组织中microrna-101的表达量明显低于癌旁正常结肠黏膜组织中的表达(P=0.001 8);microrna-101在高分化患者的癌组织中表达水平较高,在低分化患者组织中表达水平最低,差异有统计学意义(Pmicrorna-101在TNM分期为Ⅰ和Ⅱ期的患者中表达量高于Ⅲ和Ⅳ期患者(Pmicrorna-101的表达降低对肿瘤的发生发展起到了重要的作用,microrna-101具有抑癌基因的作用,从而为结肠癌的分子靶向治疗提供了新的靶点。

关键词： microrna-101 抑癌基因组织分化结肠癌

实体瘤microrna-101表达与预后关系的meta分析

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实体瘤MicroRNA-101表达与预后关系的meta分析

作者：马先雄华中科技大学

学位级别：硕士

目标:microrna-101已被报道在多种实体瘤发生发展过程中起重要作用,同时伴随表达异常,但是它在实体瘤的预后意义仍然不明确,因此我们做此meta分析旨在阐明microrna-101在实体肿瘤的预后价值。方法:总体生存期(或无病生存期/无转移生存期... 详细信息

目标:microrna-101已被报道在多种实体瘤发生发展过程中起重要作用,同时伴随表达异常,但是它在实体瘤的预后意义仍然不明确,因此我们做此meta分析旨在阐明microrna-101在实体肿瘤的预后价值。方法:总体生存期(或无病生存期/无转移生存期/无进展生存期/无复发生存期)的汇集风险比及其95%可信区间依据异质性的大小用随机效应模型或固定效应模型来进行计算。通过亚组分析、敏感性分析以及meta回归分析揭示潜在的混淆因子并阐明异质性的来源。使用Begg和Egger检验评估发表偏倚。结果:根据纳入以及排除标准共收录21篇文献,总计3753个样本。microrna-101低表达跟实体肿瘤患者总体生存期(HR=0.66,95%CI[0.52-0.85],P=0.001)和无病生存期(HR=0.70,95%CI[0.51-0.95],P=0.023)显著相关。结论:microrna-101低表达可以作为实体肿瘤的可信生物标志物。

关键词： microrna-101 实体瘤预后 meta分析

microrna-101和EZH2基因在前列腺癌干细胞中的表达研究

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microRNA-101和EZH2基因在前列腺癌干细胞中的表达研究

作者：徐瑞权南昌大学

学位级别：硕士

目的：探寻前列腺癌激素依赖（LNCaP）与激素非依赖（PC-3）细胞株中microrna-101及EZH2表达差异。流式细胞术分选CSCs,并比较前列腺癌激素依赖CSCs与激素非依赖癌CSCs中microrna-101及EZH2表达差异,探讨前列腺癌干细胞特异性分子靶点。... 详细信息

目的：探寻前列腺癌激素依赖（LNCaP）与激素非依赖（PC-3）细胞株中microrna-101及EZH2表达差异。流式细胞术分选CSCs,并比较前列腺癌激素依赖CSCs与激素非依赖癌CSCs中microrna-101及EZH2表达差异,探讨前列腺癌干细胞特异性分子靶点。方法：采用无血清悬浮培养体系（serum-free medium, SFM）培养前列腺癌LNCaP及PC-3细胞富集前列腺癌干细胞,流式细胞术分选SFM细胞CD133+CD44+双阳性细胞（CSCs）;RT-PCR及荧光定量PCR检测CSCs中miR-101及EZH2基因的表达,比较其在PC-3与LNCaP、PC3 CSCs与LNCaP CSCs中的表达差异。结果：PC-3细胞经悬浮培养扩增后,CSCs比例显著提高（p＜0.05）, LNCaP细胞经悬浮培养扩增后CSCs含量无明显改变。前列腺癌PC-3细胞株中miR-101表达量是LNCaP的26.8%,而EZH2的表达显著上调达6.681倍。PC-3 CSCs中EZH2的表达显著高于LNCaP CSCs表达,且二者均明显高于贴壁细胞中的表达（p＜0.05）。结论：前列腺癌激素非依赖细胞株较激素敏感细胞株miR-101及EZH2表达显著改变;在前列腺癌CSCs中,EZH2基因的表达显著上调,具有一定的癌干细胞基因水平特异性,尤以激素非依赖前列腺癌CSCs较为显著。其可能主导前列腺癌激素非依赖、耐药以及侵袭转移等生物学特性。

关键词：前列腺癌 microrna-101 EZH2 肿瘤干细胞

microrna-101在心房颤动心房重构中的作用研究

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MicroRNA-101在心房颤动心房重构中的作用研究

作者：何艳广西医科大学

学位级别：硕士

目的:检测持续心房颤动(房颤)患者心房肌组织mi croRNA-101的表达情况,旨在探讨microNA-101在房颤心房重构中的作用。方法:54例行外科开胸手术患者,其中先天性心脏病7例,风湿性心脏病47例。分窦律组25例,房颤组29例,于手术中建立体外循... 详细信息

目的:检测持续心房颤动(房颤)患者心房肌组织mi croRNA-101的表达情况,旨在探讨microNA-101在房颤心房重构中的作用。方法:54例行外科开胸手术患者,其中先天性心脏病7例,风湿性心脏病47例。分窦律组25例,房颤组29例,于手术中建立体外循环前获取患者右心耳组织,采用HE染色观察心房肌组织形态学的改变,电子显微镜观察组织超微结构的重构情况,荧光定量PCR法检测右房肌组织microrna-101及Cx43 mRNA的相对表达量,Western blot检测Cx43蛋白的表达,组织原位杂交法对microrna-101进行定位分析,masson三原染色检测胶原纤维在心房肌组织的沉积情况。结果:(1)HE染色结果表明,房颤患者心房肌细胞增大,肌纤维明显增粗、断裂、排列紊乱、大小不均、胞核增大,心肌组织间质纤维化明显。超微结构观察到心肌纤维排列紊乱、稀疏;线粒体水肿明显、空泡形成;细胞核染色质浓缩边集、核周隙变宽;胶原纤维沉积增多。(2)荧光定量PCR法结果显示房颤组microrna-101的表达量(0.6157±0.1749)与窦律组(2.2900±0.3992)相比明显下调(P0.05),而Cx43蛋白的相对表达量(0.5710±0.2062)较窦律组(1.1439±0.3750)明显减低(Pmicrorna-101表达比窦律组下调约25.6%,大部分microrna-101表达于心房肌组织间、心内膜、心外膜和血管周围的纤维组织,心房肌细胞也有少量表达。(5)Masson三原染色显示房颤组胶原纤维容积分数(10.2%±1.80%)较窦律组(7.25%±1.26%)明显增高(Pmicrorna-101表达明显下调,其预测的靶基因Cx43蛋白表达下调。microrna-101及其预测的靶基因表达的非负性相关关系提示,房颤发生的机理中,microrna-l0l不通过直接调控Cx43的表达参与房颤心房重构。(2)microrna-101特异性表达于结缔组织,提示其很可能通过影响胶原代谢、调控纤维化的形成参与房颤的发生和维持。

关键词： microrna-101 连接蛋白43 心房重构心房颤动

microrna-101通过靶向EZH2对人喉鳞状细胞癌的影响及临床意义

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MicroRNA-101通过靶向EZH2对人喉鳞状细胞癌的影响及临床意义

作者：陈露郑州大学

学位级别：硕士

目的喉鳞状细胞癌（Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC）是耳鼻咽喉领域常见的恶性肿瘤,是全身第二大常见的头颈癌,发病率呈上升趋势,且患者复发率高,生存率低。从基因水平上研究治疗LSCC的新方法已成为目前研究的热点。据报道,Mi... 详细信息

目的喉鳞状细胞癌（Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC）是耳鼻咽喉领域常见的恶性肿瘤,是全身第二大常见的头颈癌,发病率呈上升趋势,且患者复发率高,生存率低。从基因水平上研究治疗LSCC的新方法已成为目前研究的热点。据报道,Micro RNA-101（miR-101）是包括喉鳞状细胞癌（LSCC）在内的多种恶性肿瘤中的肿瘤抑制因子。然而,miR-101在LSCC发展中的作用和分子机制尚未完全阐明。为进一步探讨出LSCC的新的治疗方案,提高临床生存率,本次研究把LSCC细胞系作为研究对象,通过多种实验方法进一步探究miR-101对LSCC的影响及作用机制,以期为该病的临床治疗提供理论指导。方法采用RT-qPCR法检测miR-101及zeste同源物2（EZH2）m RNA的表达。利用MTS法测定细胞增殖活性。通过流式细胞术法检测细胞凋亡指数,并通过测定半胱天蛋白酶-3（caspase-3）活性进一步评估细胞凋亡情况。采用Western Blot法测定EZH2蛋白表达。利用生物信息学软件,预测miR-101可能调控的靶基因,并通过双荧光素酶报告分析和RNA免疫沉淀（RIP）进一步验证miR-101与基因的靶向关系。结果在LSCC细胞系中miR-101表达水平显著下调。MTS检测结果显示miR-101过表达抑制Hep-2和TU-212细胞的增殖活性。流式细胞术及caspase-3活性检测结果显示miR-101过表达促进Hep-2和TU-212细胞凋亡。进一步的机制研究表明,miR-101可通过靶向结合EZH2抑制该基因表达。此外,EZH2上调削弱了miR-101介导的抗增殖和促凋亡作用。结论1、miR-101过表达抑制LSCC细胞增殖并促进凋亡;2、miR-101通过靶向EZH2抑制LSCC细胞增殖,并促进细胞凋亡,为深入了解LSCC的发病机制,并为开发针对性的靶向治疗药物奠定理论基础。

关键词：喉鳞状细胞癌 microrna-101 EZH2 增殖凋亡

microrna-101、COX-2、TS在不同生存期的大肠癌患者中的表达情况及其之间的关系

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MicroRNA-101、COX-2、TS在不同生存期的大肠癌患者中的表达情况...

作者：张高高新乡医学院

学位级别：硕士

背景大肠癌在我国的发病率及死亡率有着不断上升的趋势,根本没有下降甚至是平稳走形的迹象,仅短短14年该数值就升高了63.4%,年平均增加4.87%[1]。这种畸形走势与我国人口的遗传因素、环境因素、饮食结构的调整以及经济发展方式之间存在... 详细信息

背景大肠癌在我国的发病率及死亡率有着不断上升的趋势,根本没有下降甚至是平稳走形的迹象,仅短短14年该数值就升高了63.4%,年平均增加4.87%[1]。这种畸形走势与我国人口的遗传因素、环境因素、饮食结构的调整以及经济发展方式之间存在着极其微妙的联系。影响该病治疗效果的因素众多。随着经济的发展,单纯运用手术和静脉药物化学治疗肿瘤的时代已经一去不返。近年各种先进的治疗方法层出不穷为广大的肿瘤患者及其家属带来了福音,但是昂贵的治疗费用使得肿瘤治疗出现了一个尴尬的局面。进行更针对性的个体化治疗决策已成为现阶段提高临床治疗效果的研究重点。个体化治疗须要更加精确的诊断手法,目前肿瘤的分期未将血清学指标纳入其中,因为目前我们掌握的血清学标志物还比较有限,而且与肿瘤预后的关系尚不清晰,以导致了这一重要指标的不作为。因此我们必须加大对于血清学肿瘤标志的研究力度。目的实验一：探讨环氧化酶-2（COX-2）与胸苷酸合成酶（TS）在不同无病生存期的结肠癌患者的肿瘤组织中的表达情况及这两种标志物之间的关系。实验二：探讨在大肠癌患者中microrna-101与COX-2的表达情况及两者之间的关系以及microrna-101与患者无病生存期之间的关系。方法实验一：1.研究对象：针对大肠癌根治术后人群跟踪随访,并记录DFS（无病生存时间）。以DFS为筛选的重要标准,挑选DFS＜48个月患者和DFS＞48个月患者各25名,共50名。2.实验方法：将每例患者癌组织、癌旁组织蜡块切片,经免疫组织化学染色法（SP法）染色,染色后在光学显微镜下分别由3名资深病理医师阅片,判读TS与COX-2的表达水平后综合阅片结果。将两组的TS和COX-2表达情况进行对比,并做统计学分析。3.统计学方法：采用非参数检验X2检验进行比较两组间TS和COX-2是否存在统计学差异。实验二：1.研究对象：筛选我院收治的大肠癌根治术患者,选择无病生存期小于48个月者25例为A组,无病生存期大于48个月者25例为B组,同时挑选手术治疗的溃疡性结肠炎患者25例为C组。2.实验方法：采用荧光免疫原位杂交法：应用荧光染料标记探针microrna-101,将其加入脱蜡后的大肠癌、癌旁正常组织及溃疡性结肠炎组织中杂交后,使用荧光显微镜观察并记录结果。采用免疫组化法检测大肠癌组织、周围正常结肠组织和溃疡性结肠炎病变部位中COX-2的表达情况,并分析其与患者无病生存期的关系。3.统计学方法：采用K Independent Samples Test分析不同无病生存时间的患者大肠癌组织中microrna-101表达情况是否存在差异,采用Spearman相关系数分析癌组织巾microrna-101与COX-2的表达情况是否相关。结果：实验一：1.50例结直肠癌患者中,TS的阳性表达率为90.00%,COX-2的阳性表达率为76.00%。2. 不同无病生存期的大肠癌患者TS的表达水平比较无统计学差异（P=0.646）。3. COX-2在无病生存期＞48个月的患者癌组织中表达水平明显低于无病生存期＜48个月的患者,差异有统计学意义（P=0.033）。实验二1.microrna-101:A组癌组织（Mean Rank=32.24）阳性率最低,B组癌组织（Mean Rank=43.75）阳性率中等,C组病变组织（Mean Rank=58.58）阳性率最高,之间均存在显著差异（P＜0.001）。A、B组患者的癌组织中的表达水平均低于其正常组织（P＜0.001）。2.COX-2：A组癌组织（Mean Rank=50.26）阳性率最高,B组癌组织（Mean Rank=35.78）阳性率最低,C组病变组织（Mean Rank=49.13）与A组接近,之间均存在显著差异（P=0.015）。A、B组患者的癌组织中的表达水平均低于其正常组织（P＜0.001）。3.在癌组织和癌旁组织中microrna-101和COX-2存在显著负相关;在溃疡性结肠炎病变组织中microrna-101和COX-2存在显著正相关。结论：1.COX-2的表达水平与大肠癌患者的无病生存期呈负相关,可能成为预测大肠癌预后的参考指标。2.microrna-101与大肠癌患者的无病生存期显著相关,生存期越长癌组织microrna-101阳性表达率越高。3.在癌组织和正常组织中COX-2阳性表达与microrna-101阳性表达呈负相关,但在溃疡性结肠炎患者的病灶粘膜中这两种标志物的相关关系并不明显。这可能是因为microrna-101能够抑制COX-2的表达所致,但仍需进一步探究。

关键词：大肠痛 microrna-101 环氧化酶-2 胸苷酸合成酶无病生存期

3D腹腔镜下全结肠系膜切除术对右半结肠癌患者术后microrna-101和CD4^+水平变化及局部复发率的影响

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中国内镜杂志 2019年第4期25卷 24-31页

作者：李琰杨博南阳市医学高等专科学校第一附属医院普外二科河南南阳473000 南阳市医学高等专科学校第一附属医院病理科河南南阳473000

目的探讨3D腹腔镜下全结肠系膜切除术对右半结肠癌患者术后microrna-101、T细胞亚群指标水平变化及局部复发率的影响。方法选取该院2015年3月-2017年4月右半结肠癌患者86例,随机数字表法分为对照组(n=43)与研究组(n=43)。对照组采取传... 详细信息

目的探讨3D腹腔镜下全结肠系膜切除术对右半结肠癌患者术后microrna-101、T细胞亚群指标水平变化及局部复发率的影响。方法选取该院2015年3月-2017年4月右半结肠癌患者86例,随机数字表法分为对照组(n=43)与研究组(n=43)。对照组采取传统开腹手术,研究组采取3D腹腔镜下全结肠系膜切除术。统计两组患者围手术期情况、术前及术后1和3 d血清T细胞亚群指标(CD3^+、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+)水平、手术前后microrna-101水平和并发症发生率,随访6～12个月,统计两组局部复发率。结果①围术期情况:研究组淋巴结清扫数目与对照组无显著差异(P>0.05),研究组术中失血量少于对照组,手术时间、肛门排气用时、住院时间和开始进食时间短于对照组(P microrna-101:术前两组microrna-101水平无显著差异(P>0.05),术后两组microrna-101水平较术前增高,且研究组高于对照组(P 0.05),研究组术后12个月局部复发率(4.65%)低于对照组(18.60%),差异有统计学意义(P microrna-101水平,可降低疾病局部复发风险和并发症发生率,安全性高,利于改善预后效果。

关键词：右半结肠癌 3D腹腔镜下全结肠系膜切除术 microrna-101 局部复发率免疫功能安全性

结肠癌组织中microrna-101 microrna-132及COX-2的表达与病理相关性分析

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浙江临床医学 2017年第3期19卷 411-413页

作者：高文仓朱红叶张月蒙俞森权姚成浙江中医药大学附属第二医院 310005

目的分析结肠癌组织中miRNA-101、miRNA-132及COX-2的表达与病理相关性。方法收集2013年11月至2016年1月结肠癌病灶组织和癌旁正常组织各135例，应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测组织中miRNA-101mRNA、miRNA-132mRNA和COX-2m... 详细信息

目的分析结肠癌组织中miRNA-101、miRNA-132及COX-2的表达与病理相关性。方法收集2013年11月至2016年1月结肠癌病灶组织和癌旁正常组织各135例，应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测组织中miRNA-101mRNA、miRNA-132mRNA和COX-2mRNA的表达，并分析各基因的相关性及与结肠癌临床病理特征的关系。结果与癌旁正常组织相比，结肠癌组织中的miRNA-101mRNA和miRNA-132mRNA的表达水平显著降低，COX-2mRNA显著上升，差异有统计学意义（P〈0．05）；结肠癌组织中miRNA-101mRNA、miRNA-132mRNA和COX-2mRNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期以及淋巴结转移有关；低中分化、TNM分期为Ⅲ期或Ⅳ期及淋巴结转移，结肠癌组织中miRNA-101mRNA和micrRNA-132mRNA的表达显著降低，COX-2mRNA的表达显著提高（P〈0．05）；miRNA-101、miRNA-132与COX-2呈显著负相关（P〈0．05）。结论结肠癌组织中miRNA-101和miRNA-132表达下调，COX-2表达上调与结肠癌的发展进程有关，可作为结肠癌治疗的潜在靶点。

关键词： microrna-101 microrna-132 环氧合酶-2 结肠癌

microrna-101、L型钙通道β_2及钠钙交换体在房颤病人血清中的表达变化及临床意义

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中西医结合心脑血管病杂志 2017年第6期15卷 712-714页

作者：李菲同济大学附属同济医院分院上海200092

目的比较microrna-101(miR-101)、L型钙通道β2(L-type calcium channelβ2Subunit,CACNB2)及钠钙交换体(NCX)在房颤(AF)病人血清中的表达变化,并分析其临床意义。方法筛选2014年3月—2015年3月来就诊的100例AF病人为研究对象,设为试验组(n=100);同时选取100例正常病人作为空白对照组(n=100)。试验时,分别应用荧光定量逆转录聚合酶链式技术(Real-Time quantity PCR)和免疫印迹(Western blot)方法检测两组右心耳组织中miR-101和CACNB2、NCX的表达水平变化,探讨miR-101与CACNB2、NCX表达水平的相关性,阐述miR-101在房颤发生与维持中可能机制及临床检测意义。结果 (1)治疗前,两组受试者在年龄、性别、手术方式等临床资料比较无有统计学意义(P>0.05),试验组左房内径(58.9±7.2)mm,大于对照组(37.9±8.1)mm,差异具有统计学意义(Pmicrorna-101表达量(0.620 7±0.132 1),较正常病人(2.310 0±0.342 2)低;AF病人右心耳组织中的CACNB2、NCX通道mRNA表达量(1.980 0±0.315 1,1.8027±0.281 1),较正常病人(0.752 6±0.383 0,0.602 1±0.291 1)表达量高,组间差异具有统计学意义(P101的表达水平与AF的发生具有相关性,CACNB2、NCX通道是miR-101的靶向调控位点,参与AF的发生。

关键词：房颤 microrna-101 L型钙通道β2 钠钙交换体