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mirna21抑制剂对食管癌细胞凋亡的影响

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安徽医科大学学报 2016年第8期51卷 1124-1127页

作者：李红霞李玉芝高峻峰刘思涵葛磊鲍扬漪汪正广安徽医科大学第三附属医院肿瘤科合肥230061 安徽医科大学第一附属医院普外科合肥230022

目的探讨mirna21抑制剂对食管癌细胞EC109凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR法检测20例食管癌及癌旁组织中mirna21的表达。转染mirna21抑制剂入人食管癌细胞株EC109,Caspase 3活性检测试剂盒分析Caspase 3活性变化,DNA片段检测试剂盒分析... 详细信息

目的探讨mirna21抑制剂对食管癌细胞EC109凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR法检测20例食管癌及癌旁组织中mirna21的表达。转染mirna21抑制剂入人食管癌细胞株EC109,Caspase 3活性检测试剂盒分析Caspase 3活性变化,DNA片段检测试剂盒分析DNA片段变化,Western blot法检测Caspase 3及BCL-2表达。结果相对癌旁组织,食管癌组织中mirna21表达明显升高;mirna21抑制剂能显著增加EC109细胞凋亡;同时mirna21抑制剂促进食管癌细胞EC109 Caspase 3的表达上调,Bcl-2的表达下调。结论食管癌的发生可能与mirna21的高表达有关,mirna21抑制剂可能通过下调Bcl-2的表达诱导人食管癌细胞EC109的凋亡。

关键词：食管癌细胞凋亡 mirna21 Bcl-2

mirna21、STAT3的异常表达与肺腺癌发生之间的关系

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MiRNA21、STAT3的异常表达与肺腺癌发生之间的关系

作者：霍艳平新乡医学院

学位级别：硕士

背景肺腺癌作为一种常见的恶性肿瘤严重危害着人们的身体健康。由于肺腺癌的发生机制迄今未明,其发病率和死亡率居高不下,因此深入研究其发病机制已成为相关研究人员的当务之急。在众多非编码的小分子RNA中,mirna21(MiR-21)作为其中的... 详细信息

背景肺腺癌作为一种常见的恶性肿瘤严重危害着人们的身体健康。由于肺腺癌的发生机制迄今未明,其发病率和死亡率居高不下,因此深入研究其发病机制已成为相关研究人员的当务之急。在众多非编码的小分子RNA中,mirna21(MiR-21)作为其中的主要一员,参与了机体内生长、代谢、发育与疾病发生,以及多种肿瘤的发生、发展、侵袭和转移过程。信号传导与转录激活因子3(STAT3)作为生物体内许多细胞因子和生长因子的主要信号传导蛋白,它在组织细胞的生理功能、细胞的分化、细胞的免疫平衡以及许多肿瘤的发生中,起着非常重要的作用。近年来越来越多的研究人员开始关注mirnas与STATs家族成员之间的信号转导通路,以及通路之间的相互作用关系,特别是MiR-21和STAT3信号调控通路之间的相互作用机制,更是引起了许多学者的关注。国内外许多研究者已经明确表示,STAT3可以直接的调控MiR-21,并发现在多种恶性肿瘤中显示出异常调控的作用。但是截止目前,并没有见到文献的报告,显示出MiR-21/STAT3信号转导通路在肺腺癌发生、发展中的作用及意义。本课题运用常规病理切片、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Westernblot等方法,通过检测人肺腺癌组织中MiR-21、STAT3和P-STAT3的表达状况,及其与正常肺组织之间的差异,探讨MiR-21、STAT3信号的异常表达对肺腺癌发生发展的影响以及临床意义,为临床上进一步揭示肺腺癌的发生机制奠定基础,为防治肺腺癌提供新的思考模式。目的试图通过检测MiR-21和STAT3及P-STAT3在肺腺癌发生、发展过程中的动态表达状况,分析比较与正常肺组织,癌旁组织中表达的差异性,探讨MiR-21、STAT3的异常表达对肺腺癌发生过程的影响,为临床上进一步防治肺腺癌提供理论依据。方法进行实验的所有标本来自于当地三家知名医院的检验病理科,包括解放军第三七一中心医院检验病理科、新乡医学院第三附属医院检验病理科、新乡市中心医院检验病理科。标本年限为2012年7月到2015年7月之间,其中实验所用标本包括18例正常肺组织、69例肺腺癌组织和其癌旁组织(癌组织以外2-5cm),其中转移癌51例。正常肺组织、腺癌组织和其癌旁组织、转移癌组织均经过病理诊断(手术前经过化学治疗的肺腺癌患者和复发的肺腺癌患者的病理标本均排除在外)。取得的各不同类型组织均为手术切除的新鲜组织标本,术后置于-80℃冰箱中保存备用。然后采用qrt-pcr方法检测mir-21及stat3mrna在各种不同类型组织中的表达情况,免疫印迹westernblot方法检测p-stat3蛋白在各种不同类型组织中的表达情况。采用spss17.0软件包对实验结果进行t检验及单因素方差分析等相关统计分析。结果1.常规病理诊断:经病理确诊18例正常肺组织;69例肺腺癌组织(包括高分化29例、中分化18例、低分化22例)和其癌旁组织69例,其中发生锁骨上淋巴结转移癌51例。***-21的表达qrt-pcr方法检测得到mir-21在各种不同组织中的表达结果:正常肺组织为0.0017±0.001;癌旁组织为0.0180±0.005;腺癌组织为0.0990±0.035;转移癌组织为0.1270±0.135。各组之间基因的表达均具有显著性差异(pmirna-21基因在正常肺组织中呈现最低表达,癌旁组织中有所升高,肺腺癌组织中呈现高表达,转移癌组织中较肺腺癌中表达的更高。***3基因表达qrt-pcr方法检测得到stat3基因在各种不同组织中的表达结果:正常肺组织为0.318±0.015;癌旁组织为0.629±0.020;肺腺癌组织为1.047±0.041;转移癌组织为1.236±0.016。各组之间基因的表达均具有显著性差异(p21与STAT3基因和p-STAT3蛋白之间的相关性运用统计学分析

关键词：肺腺癌 mirna21 STAT3 p-STAT3

mirna21、mirna29b、mirna133a在心肌纤维化大鼠心肌组织及循环中的表达

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miRNA21、miRNA29b、miRNA133a在心肌纤维化大鼠心肌组织及循环中...

作者：刘科电子科技大学

学位级别：硕士

本次实验的目的是为了比较厄贝沙坦及辛伐他汀对大鼠心肌纤维化的影响作用,探索mirna21,mirna29b,mirna133a在心肌纤维化中的表达调控及血清中的含量是否与组织表达程一致性。实验选用了体重200～220gSD雄性大鼠50只,行腹主动脉缩窄术... 详细信息

本次实验的目的是为了比较厄贝沙坦及辛伐他汀对大鼠心肌纤维化的影响作用,探索mirna21,mirna29b,mirna133a在心肌纤维化中的表达调控及血清中的含量是否与组织表达程一致性。实验选用了体重200～220gSD雄性大鼠50只,行腹主动脉缩窄术后二周随机分为5组,灌胃给药,予假手术组及模型组0.5%羧甲基纤维素钠(0.5ml/d)、厄贝沙坦组(厄贝沙坦***/d)、辛伐他汀组(辛伐他汀***/d)及联合用药组(厄贝沙坦***/d+辛伐他汀***/d),连续8周后测定体重、血压、心脏指数、血清Ang II,超声测左室舒张末期(LVD)、左室收缩末期(LVS)、室间隔(IVS)直径,HE染色观察心肌细胞,Masson染色观察胶原、测心肌胶原容积(CVF),免疫组化观察并半定量测转化生子因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)及血管紧张素受体1(ATR1),Western blot定量测TGF-β1、CTGF及ATR1蛋白含量,qPCR法检测各组心肌组织及血清中mirna21,mirna29b,mirna133a的表达含量。通过实验我们得出,与假手术组比,模型组的心脏指数、室间隔、CVF、TGF-β1、CTGF均增高,体重、ATR1降低;与模型组相比,厄贝沙坦组、辛伐他汀组体重增加,联合用药组体重降低,厄贝沙坦组、辛伐他汀组心脏指数、室间隔、EF、CVF、TGF-β1、CTGF、ATR1降低(Pmirna21:与假手术组相比,厄贝沙坦组降低,模型组轻微降低,辛伐他汀组、联合用药组增高;mirna29b:与假手术组相比,辛伐他汀组增高,厄贝沙坦组、联合用药组、模型组降低;mirna133a:与假手术组相比,厄贝沙坦组、辛伐他汀组、联合用药组、模型组均降低;血清中除mirna29在辛伐他汀组水平略高于假手术组外,其余组表达水平均低于假手术组。因此我们认为厄贝沙坦及辛伐他汀均能缓解心肌纤维化,联合用药效果好于单一用药,尽管出现了不明原因的ATR1含量增加。需根据适应症使用以减少药物不良反应。mirna21,mirna29b,mirna133a在组织中的表达与纤维化程度有一定关系,在血清中的表达均高于正常对照组,有一定意义。

关键词：心肌纤维化 mirna21 mirna29b mirna133a

HPV感染孕妇血清mirna21、mirna199表达及与母婴结局的关系

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中华医院感染学杂志 2023年第5期33卷 771-775页

作者：王丽张震南阳医学高等专科学校第一附属医院妇产科河南南阳473000 河南省人民医院妇产科河南郑州450000

目的分析人乳头瘤病毒(HPV)感染孕妇血清mirna21、mirna199表达及其与母婴结局的关系。方法选取2020年2月-2021年2月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的80例HPV阳性孕妇为研究组,另选择同期进行筛查且结果为HPV阴性的80名孕妇为对... 详细信息

目的分析人乳头瘤病毒(HPV)感染孕妇血清mirna21、mirna199表达及其与母婴结局的关系。方法选取2020年2月-2021年2月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的80例HPV阳性孕妇为研究组,另选择同期进行筛查且结果为HPV阴性的80名孕妇为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定各组血清mirna21、mirna199表达水平,并记录孕妇妊娠结局和新生儿结局,采用多因素Logistic回归分析影响HPV阳性孕妇妊娠不良结局和新生儿结局的因素。结果研究组妊娠不良结局和新生儿不良结局总发生率均高于对照组(Pmirna21表达水平高于对照组(Pmirna199表达水平低于对照组(Pmirna21表达水平低于妊娠结局不良组(Pmirna199表达水平高于妊娠结局不良组(Pmirna21表达水平低于新生儿结局不良组(Pmirna199表达水平高于新生儿结局不良组(Pmirna21和mirna199水平是导致HPV阳性孕妇母婴不良结局发生的因素(Pmirna21明显上调、mirna199明显下调,其是导致HPV感染孕妇不良母婴结局的关键因素。

关键词： mirna21 mirna199 人乳头瘤病毒感染孕妇母婴结局

乳腺癌患者血清中mirna21、mirna210、mirna1246的表达及其意义

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乳腺癌患者血清中miRNA21、miRNA210、miRNA1246的表达及其意义

作者：舒耀西南医科大学

学位级别：硕士

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,是危害妇女身心健康的常见疾病。近年来乳腺癌的诊治水平有了明显提高,患者在疾病早期接受了科学、规范的综合治疗后5年生存率可高达95%。由于乳腺癌的早期症状不明显,不易引起患者重视,且目前缺乏简... 详细信息

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,是危害妇女身心健康的常见疾病。近年来乳腺癌的诊治水平有了明显提高,患者在疾病早期接受了科学、规范的综合治疗后5年生存率可高达95%。由于乳腺癌的早期症状不明显,不易引起患者重视,且目前缺乏简单适用的筛查方法,所以大部分患者只有在出现明显的临床症状(疼痛、酒窝征、皮肤橘皮样改变、乳头溢血等)时才进行诊断治疗,这时乳腺癌往往发展到了晚期,患者也错过了治疗的最佳时机,其治疗效果及5年生存率也往往不理想。因此对乳腺癌患者进行早期筛查显得至关重要。目前乳腺癌的诊断主要包括乳腺X线摄片、超声、乳腺磁共振及病理活检,其中病理活检检查是金标准,也是最常用的诊断方法,但其操作具有侵入性,是有创性检查,不适合早期筛查。乳腺X线摄片对诊断乳腺癌较为常见,但其敏感度随乳腺密度不同而不同,且具有放射性;乳腺B超对非浸润性乳腺癌的检出率不高;乳腺MRI检测乳腺癌灵敏度高达94%-100%,但特异度较低,且价格昂贵,应用较局限。分子诊断因其取材方便、简单快捷成为近年来研究的热点,两种基于血清的肿瘤生物标志物(CA15-3和CEA)用于检出乳腺癌,但灵敏度和特异性有限。因此,寻求新型和更准确的无创生物诊断标志物显得尤为重要。目的:通过检测血清mi RNA的表达水平在乳腺癌患者与健康体检者之间的差别,分析乳腺癌患者血清中mi RNA的表达水平与临床病理特征之间的关系,评估其作为乳腺癌生物诊断标志物的意义。方法:收集乳腺癌患者(实验组)及健康体检者(对照组)血清各48例,通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测各组mi RNA-21、mi RNA-210、mi RNA-1246的表达情况,构建受试者工作特征曲线(ROC),由此评估单个血清mi RNA及多个血清mi RNA联合检测对乳腺癌的诊断效能。分析三者在乳腺癌患者血清中的表达水平与临床病理特征的相关性。结果:1.通过q RT-PCR方法检测血清micro RNA水平得出,实验组患者血清mi RNA21的相对表达水平为0.591[0.340,1.022],对照组相对表达水平为0.145[0.078,0.193],Z为-7.108,P值210的相对表达水平为1.187[0.411,2.043],对照组相对表达水平为0.060[0.032,0.100],Z为-8.112,P值21、mi RNA210、mi RNA1246在乳腺癌患者血清中的表达水平均升高。2.血清mi RNA21、mi RNA210、mi RNA1246诊断乳腺癌患者的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.936(95%CI,0.866～0.976)、0.980(95%CI,0.928～0.998)、0.737(95%CI 0.638～0.822),特异度为0.854(95%CI,0.722～0.939)、0.917(95%CI 0.800～0.977)、0.896(95%CI 0.773～0.965)。敏感度为0.896(95%CI,0.773～0.965)、0.958(95%CI,0.857～0.995)、0.583(95%CI,0.432～0.724)。尤登指数为0.75、0.875、0.479。且mi RNA210和mi RNA1246联合检测、mi RNA21、mi RNA210和mi RNA1246联合检测的诊断效能并不优于mi RNA210单独检测。***判别分析用于建立乳腺癌的最佳诊断模型,应用此模型对本研究的样本进行回代判别,结果显示:本判别模型的敏感度为62.5%;特异度为100.0%,即该模型排除非患者的能力较好,而发现患者的能力相对较弱。4.血清mi RNA21、mi RNA210、mi RNA1246与乳腺癌TNM分期、淋巴结是否转移及Ki67的高表达有明显相关性(P0.05)。(1)血清mi RNA21在0期患者的相对表达水平为0.411(0.244,0.617),1期为0.550(0.236,0.960),2期为0.591(0.458,1.069),3期为1.054(0.753,1.579),Z为14.444,P为0.002。血清mi RNA21的表达水平随着临床分期的增高而升高。血清mi RNA21在无淋巴结转移的患者的相对表达水平为0.522(0.321,0.744),有淋巴结转移的患者为0.911(0.657,1.27

关键词：乳腺癌 mirna21 mirna210 mirna1246 诊断

mirna21的表达变化在胃癌患者诊断中的意义

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罕少疾病杂志 2018年第5期25卷 74-75页

作者：杨安李曦北京大学深圳医院消化内科广东深圳518035

目的通过研究胃癌患者血清和组织中mirna21的表达情况,了解其在胃癌发病过程中的意义。方法选取胃癌患者及正常健康对照组各20例,采用原位杂交的方法检测和实时定量PCR检测mirna21的水平。结果胃癌组组织和血清中的mirna21表达水平均较... 详细信息

目的通过研究胃癌患者血清和组织中mirna21的表达情况,了解其在胃癌发病过程中的意义。方法选取胃癌患者及正常健康对照组各20例,采用原位杂交的方法检测和实时定量PCR检测mirna21的水平。结果胃癌组组织和血清中的mirna21表达水平均较正常组升高,且差异具有统计学意义(Pmirna21表达升高,可能为胃癌的诊断以及治疗提供新的方向。

关键词：胃癌 mirna21

mirna21对人肺癌A549细胞增殖及迁移的影响

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现代肿瘤医学 2016年第23期24卷 3706-3710页

作者：姜学东门万夫张林刘宏旭李文雅武警辽宁省总队医院胸外科辽宁沈阳1100342 中国医科大学附属第一医院胸外科辽宁沈阳110001

目的:探讨抑制mirna21对人肺癌A549细胞体外增殖、迁移及凋亡的影响。方法:采用体外转染法将mirna21-5p瞬时转染A549细胞后,应用Real-time PCR特异探针法检测人肺癌细胞系中mirna21的表达情况;应用MTT法检测人肺癌A549细胞的增殖情况;应... 详细信息

目的:探讨抑制mirna21对人肺癌A549细胞体外增殖、迁移及凋亡的影响。方法:采用体外转染法将mirna21-5p瞬时转染A549细胞后,应用Real-time PCR特异探针法检测人肺癌细胞系中mirna21的表达情况;应用MTT法检测人肺癌A549细胞的增殖情况;应用Transwell小室检测人肺癌A549细胞的迁移情况;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞的凋亡情况;Western blot检测人肺癌A549细胞中表皮因子生长受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达。结果:与正常对照组和mirna21-NC阴性对照组相比,mirna21-5p转染组人肺癌A549细胞中mirna21表达水平显著降低,EGFR表达显著下调,细胞生长显著受抑制,且促进人肺癌A549细胞的凋亡(Pmirna21在人肺癌A549细胞中的表达,能够抑制A549细胞的生长,促进其凋亡,mirna21有可能作为治疗肺癌的新靶标之一。

关键词： mirna21 肺癌细胞增殖迁移凋亡

mirna21在戊四氮致癫痫大鼠马神经元中的作用及其机制的研究

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海南医学院学报 2019年第10期25卷 744-749页

作者：刘东海赵天宁杨嘉琦陶雪彤张靖博陈玉然杨鲁鲁刘学宋海鹏朱金玲佳木斯大学基础医学院黑龙江佳木斯154007

目的:探讨mirna21在戊四氮致癫痫大鼠海马组织中的表达情况及其可能的作用机制。方法:24只健康雄性wister大鼠随机分为正常组和癫痫组,记录两组大鼠的Racine等级评分对癫痫大鼠模型的建立进行评价;应用生物信息学方法筛选癫痫大鼠海马... 详细信息

目的:探讨mirna21在戊四氮致癫痫大鼠海马组织中的表达情况及其可能的作用机制。方法:24只健康雄性wister大鼠随机分为正常组和癫痫组,记录两组大鼠的Racine等级评分对癫痫大鼠模型的建立进行评价;应用生物信息学方法筛选癫痫大鼠海马中高差异性表达的并靶向Bcl-2的microRNA;应用qRT-PCR方法验证癫痫大鼠海马中microRNA21的表达情况;应用Western blot和免疫组织化学方法检测大鼠海马中Bcl-2的表达情况;应用Hoechst 33258检测大鼠海马神经元的凋亡情况。结果:癫痫组大鼠的Racine评分明显高于正常对照组(Pmirna21表达降低(Pmirna21的表达量下调,且mirna21可能通过调节Bcl-2的表达含量进一步导致海马神经元凋亡,进而对癫痫大鼠产生影响。

关键词：癫痫 mirna21 Bcl-2 细胞凋亡海马神经元

mirna21联合重组人干扰素γ对小鼠肺癌移植瘤的作用效果及机制研究

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临床和实验医学杂志 2020年第22期19卷 2374-2378页

作者：廖艳姚忠强何婷汉中市三二〇一医院肿瘤科陕西汉中723000

目的探讨mirna21联合重组人干扰素γ(IFN-γ)对小鼠肺癌移植瘤的作用效果,并分析了相关机制。方法每只小鼠接种2×10^6个肺癌细胞建立小鼠肺癌移植瘤模型。将建模成功的54只肺癌移植瘤小鼠随机分为3组:模型组、干扰素组与联合组,每组18... 详细信息

目的探讨mirna21联合重组人干扰素γ(IFN-γ)对小鼠肺癌移植瘤的作用效果,并分析了相关机制。方法每只小鼠接种2×10^6个肺癌细胞建立小鼠肺癌移植瘤模型。将建模成功的54只肺癌移植瘤小鼠随机分为3组:模型组、干扰素组与联合组,每组18只。模型组给予腹腔注射磷酸盐缓冲液治疗,干扰素组给予腹腔注射重组人IFN-γ治疗,联合组给予mirna21联合重组人IFN-γ治疗。记录与计算小鼠的移植瘤重量和抑瘤率。采用TUNEL法检测与计算细胞凋亡指数。采用免疫组织化学法检测组织微血管密度(MVD)。采用Western bolt法检测Beclin-1、LC3的表达情况。采用免疫组化法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白介素-6(IL-6)含量。结果①干扰素组与联合组的移植瘤重量[(4.91±0.15)、(4.01±0.22)g]低于模型组[(6.26±0.53)g],抑瘤率[(23.71±5.22)%、(40.86±11.31)%]高于模型组(0),且联合组的移植瘤重量低于干扰素组,抑瘤率高于干扰素组,差异有统计学意义(P21.74±3.13)%、(30.67±4.14)%]均高于模型组[(3.13±0.24)%],且联合组移植瘤高于干扰素组,差异有统计学意义(P21±0.52)pg/mL]与IL-6含量[(16.02±1.85)、(8.08±1.84)pg/mL]均低于模型组[(27.33±1.49)、(34.20±2.11)pg/mL],且联合组低于干扰素组,差异均有统计学意义(Pmirna2与重组IFN-γ联合应用于小鼠肺癌移植瘤能抑制TNF-α与IL-6的表达,促进移植瘤细胞凋亡与自噬,降低组织微血管密度,从而提高抑瘤率与降低移植瘤重量。

关键词：小鼠肺癌移植瘤 mirna21 重组人干扰素γ 微血管密度细胞自噬