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实用心脑肺血管病杂志 2020年第5期28卷 66-71页

作者：韩婕高登峰王晓娜曹瑞华邓捷叶平西安交通大学第二附属医院心血管内科陕西省西安市710004 中国人民解放军总医院第二医学中心老年心血管内科北京市100853

背景流行病学研究表明生活方式、饮食结构等外部因素的改变与遗传因素相互作用导致人体脂代谢紊乱,而胆固醇逆转运过程能够维持体内胆固醇稳态。目的探讨mirna-638对巨噬细胞内胆固醇外流的影响及其发生机制。方法实验于2016年9月-2017... 详细信息

背景流行病学研究表明生活方式、饮食结构等外部因素的改变与遗传因素相互作用导致人体脂代谢紊乱,而胆固醇逆转运过程能够维持体内胆固醇稳态。目的探讨mirna-638对巨噬细胞内胆固醇外流的影响及其发生机制。方法实验于2016年9月-2017年9月完成。采用100 ng/ml佛波酯诱导人髓系白血病单核细胞(THP-1)贴壁并分化为巨噬细胞,根据预实验结果选取浓度为20 nmol/L的mirna-638模拟物及其阴性对照物进行转染。采用NBD-胆固醇分别检测转染mirna-638模拟物及其阴性对照物巨噬细胞经载脂蛋白AI(ApoAI)、高密度脂蛋白(HDL)及标准血清外流液介导的胆固醇外流率;采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测转染mirna-638模拟物及其阴性对照物巨噬细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)和极低密度脂蛋白受体(VLDLR)mRNA及其相对表达量。结果转染mirna-638模拟物巨噬细胞经ApoAI外流液介导的NBD-胆固醇外流率低于转染阴性对照物巨噬细胞(Pmirna-638模拟物巨噬细胞与转染阴性对照物巨噬细胞经HDL、标准血清外流液介导的NBD-胆固醇外流率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。转染mirna-638模拟物巨噬细胞的ABCA1、ABCG1、VLDLR mRNA相对表达量低于转染阴性对照物巨噬细胞(Pmirna-638模拟物巨噬细胞中ABCA1、ABCG1相对表达量低于转染阴性对照物巨噬细胞(Pmirna-638模拟物巨噬细胞与转染阴性对照物巨噬细胞中VLDLR相对表达量比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论mirna-638可减少由ApoAI介导的巨噬细胞内胆固醇外流,该作用可能是通过调控ABCA1/ABCG1的表达实现的。

关键词：脂代谢障碍胆固醇外流 mirna-638 巨噬细胞

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Diagnostic and prognostic value of plasma level of microRNA-92a in acute myeloid leukemia

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American Journal of Molecular Biology 2014年第1期4卷 1-10页

作者： Nabil El-Halawani Nahla Hamed Mohamed Eldafrawi Zeinab Mourad Amani Sorour Omar Ghallab Department of Clinical Pathology Faculty of Medicine Alexandria University Alexandria Egypt Department of Haematology Faculty of Medicine Alexandria University Alexandria Egypt

Background: MicroRNAs (mirnas) are short noncoding RNAs of ~21 to 23 nucleotides in length that post-transcriptionally regulate mRNA expression. Highthroughput methodologies have shown deregulated mirna expression in an increasing number of human cancers. mirna expression patterns have been found to distinguish tumors of different developmental origin, even better than traditional mRNA expression profiling. Aim: To assess the plasma level of microRNA-92a in adult acute myeloid leukemia and to correlate it with prognostic factors and therapeutic response. Patients and Methods: This study was carried out on fifty AML patients as well as fifty healthy subjects as control. Conventional cytogenetics was performed on patients group only while measurement of the plasma level of mirna-92a using TaqMan quantitative RT-PCR with mirna-638 as endogenous reference for standardization and FLT3/ITD mutation was performed on patients and controls. Results: The differences in the ratio or relative quantitation (RQ) of plasma mirna-92a to mirna-638 in patients group to the control group have confirmed statistical significance. Also there was significant negative correlation between RQ of mirna-92a and white blood count in patient group. Patients who achieved a response after induction chemotherapy had a mean RQ of mirna-92a higher than non-responder with statistical significance. With regard to cytogenetics, favorable risk cytogenetics had meant RQ of mirna-92a that was comparable to intermediate risk cytogenetics. While poor risk cytogenetics had a mean RQ which is significantly lower than both favorable and intermediate risk cytogenetics. Summary/Conclusions: Our data suggest the potential importance of the microRNA-92a as noninvasive cancer biomarkers helping in diagnosis, clinical prediction and therapeutic response.

关键词： Acute Myeloid Leukemia mirnas mirna-92a mirna-638 Biomarker

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miR-638对胃癌细胞侵袭和迁移的影响及其分子机制

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中国老年学杂志 2017年第14期37卷 3419-3422页

作者：王钊杨东海彭林涛邢台市人民医院普外科河北邢台054000 邢台医学高等专科学校第二附属医院普外科

目的探讨miR-638是否可通过直接调控靶向性别决定区Y框蛋白(SOX)2抑制上皮-间质转化(EMT)相关通路从而抑制胃癌细胞的侵袭迁移。方法 qRT-PCR检测miR-638在100对胃癌组织及癌旁组织中的表达、检测miR-638在7株胃癌细胞系及1株正常胃黏... 详细信息

目的探讨miR-638是否可通过直接调控靶向性别决定区Y框蛋白(SOX)2抑制上皮-间质转化(EMT)相关通路从而抑制胃癌细胞的侵袭迁移。方法 qRT-PCR检测miR-638在100对胃癌组织及癌旁组织中的表达、检测miR-638在7株胃癌细胞系及1株正常胃黏膜细胞中的表达。Transwell和Wound Healing实验验证分别转染miR-638模拟物(miR-638 mimics)及其无关对照寡核苷酸序列(scramble)到胃癌细胞AGS中时对细胞的侵袭和迁移能力的影响。Target Scan软件预测miR-638的靶基因、将野生型或突变型SOX2的3'-UTR区域克隆到荧光素酶报告基因的下游(SOX2-wt或SOX2-mut)并分别与miR-638 mimics或scramble共转染,荧光素酶报告基因实验验证所预测的靶基因为SOX2,qRT-PCR和Western印迹分别检测转染miR-638 mimics和scramble后SOX2的mRNA和蛋白表达的及EMT相关蛋白表达。结果 miR-638在胃癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织,同时miR-638在胃癌细胞系中的表达水平也显著低于正常胃黏膜细胞系。转染miR-638后,胃癌细胞AGS的侵袭和迁移能力显著低于scramble组(P638或scramble和SOX2-wt的两组中,共转染miR-638和SOX2-wt组的荧光素酶活性强度降低了约43.1%(P638后,SOX2的mRNA和蛋白表达水平均显著下调;EMT相关的上皮标志物钙黏附蛋白E(E-cadherin)的表达显著增加,而EMT相关的间质标志物神经钙联素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达则显著降低(P638可通过靶向调控SOX2而影响EMT,抑制胃癌细胞AGS的侵袭和迁移。

关键词：胃癌 mirna-638 性别决定区Y框蛋白2 侵袭迁移

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巨噬细胞外泌体抑制HBV DNA复制

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传染病信息 2018年第2期31卷 125-130页

作者：杨帆杨涛周文靖徐若男王福生蚌埠医学院基础免疫系 233000 解放军第三〇二医院感染病诊疗与研究中心北京100039

目的探讨巨噬细胞(macrophage,M?)外泌体抑制HBV DNA复制的机制及与慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)肝损伤的相关性。方法体外分离鉴定M?外泌体,并将其与Hep G2.2.15细胞共培养,利用实时定量PCR检测共培养后HBV DNA复制的... 详细信息

目的探讨巨噬细胞(macrophage,M?)外泌体抑制HBV DNA复制的机制及与慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)肝损伤的相关性。方法体外分离鉴定M?外泌体,并将其与Hep G2.2.15细胞共培养,利用实时定量PCR检测共培养后HBV DNA复制的变化,分别分析M?及其上清外泌体中微小RNA(micro RNA,mi RNA)-638的表达;同时入组CHB免疫活化(immune activation,IA)期、低(非)复制(inactive carrier,IC)期患者,并以同期健康者作为对照组,通过实时定量PCR检测血清外泌体中mi RNA-638的表达,并与肝损伤、HBV DNA载量进行相关性分析。结果 M?外泌体可以抑制HBV DNA复制;M?及其上清外泌体中mi RNA-638高表达;CHB患者IA期mi RNA-638的表达水平低于IC期;CHB患者血清外泌体中mi RNA-638的表达水平与ALT、AST和HBV DNA水平呈负相关。结论 M?外泌体可以抑制HBV DNA复制,外泌体中mi RNA-638的表达水平与肝脏炎性损伤和病毒复制密切相关,M?外泌体相关mi RNA可能是潜在的抑制HBV复制、减轻肝脏炎症的靶点。

关键词：外泌体 mirna-638 巨噬细胞慢性乙型肝炎

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