检索结果-南通市图书馆

作者：张家仕广州中医药大学

学位级别：硕士

目的：各种研究表明,mirna-499与人类各种疾病都具有一定的相关性,它与心血管疾病也具有十分密切的关系,尤其是在冠心病发展过程中,它能通过转录后调控的方式对其靶基因的翻译进行调控。冠心病血管内皮损伤时,mirna-499的表达水平特异... 详细信息

目的：各种研究表明,mirna-499与人类各种疾病都具有一定的相关性,它与心血管疾病也具有十分密切的关系,尤其是在冠心病发展过程中,它能通过转录后调控的方式对其靶基因的翻译进行调控。冠心病血管内皮损伤时,mirna-499的表达水平特异性增高,本研究经过一系列的中医四诊“望”、“闻”、“问”、“切”进行系统化的中医临床证候分型,即中医辨证分型,通过统计学的分析,对不同证型患者血样中mirna-499的表达水平进行统计,分析不同证型患者mirna-499表达水平是否存在差异,评估在冠心病不同中医证型中的含量水平。探讨mirna-499在冠心病病理过程中的作用,为冠心病的中医辨证分型提供客观化指标。方法：1.病例选择：以2013年10月至2014年4月入住于广州中医药大学第一附属医院心血管内科住院病区患者为研究对象,纳入冠心病患者人数165例,均符合缺血性心脏病的诊断标准,男115例,女50例;平均年龄(55.5±19.8)岁;平均病程(6.5±2.1)年。均排除严重肝肾、造血系统疾病等原发性疾病、肿瘤、慢性感染、脑血管疾病、近期手术及创伤者、重度神经官能症者、精神异常者;排除中医辨证两型兼见无主次之分及证型复杂者。另设健康人对照组30例,均排除冠心病患者,男21例,女9例;平均年龄(56.5±10.5)岁。两组性别和年龄比较差异无统计学意义,具有可比性。2.冠心病组病人按照2012年《中药、天然药物治疗冠心病心绞痛临床研究技术指导原则》进行中医辨证分型;心血瘀阻型45例、男20例,女15例,平均年龄(54.5±11.8)岁,平均病程(5.5±2.1)年;气虚血瘀型40例,男25例,女15例;平均年龄(52.5±9.8)岁,平均病程(4.5±1.1)年;痰阻心脉型45例,男35例,女10例,平均年龄(49.5±9.8)岁,平均病程(6.5±1.1)年;心肾阴虚型35例,男25例,女10例,平均年龄(51.5±9.8)岁,平均病程(6.5±1.1)年。气滞血瘀型0例,阴寒凝滞型0例,气阴两虚型0例,阳气虚衰型0例,另设排除冠心病健康人志愿者30例。各证型间一般资料及可能影响mirna-499浓度的因素(吸烟、高血压病及心衰等)经方差检验差异无统计学意义。3.总RNA的提取：取血液样本50ml,冷冻(4℃)高速(20000r/s)离心去上清,取沉淀物lml移入EP管中,加入1mL Trizol,颠倒混匀后室温下裂解5min后,低温离心;加入0.2mL氯仿溶液,混匀充分,室温静置5min;低温离心,上层透明液体转移入新EP管中,加入0.2mL异丙醇,静置1min后低温离心;弃上清加入1mL75%乙醇(DECP处理),轻振荡,离心弃上清;40μL DEPC处理无菌水溶解沉淀,最终获得总RNA样品溶液。Nanodrop2000微量紫外分光光度计测定RNA样品浓度,-80℃保存样本。***逆转录实验：(总反应体系5OμL) RNA template (500-550ng/μL)1μL, miR-499RT Primer (62.5nM)4μL, RNase-free H2014μL,70℃10min,0℃2min;5XPrimeScript Buffer10μL, Prime Script RT Enzyme Mix2.5μL, Random6mers(100μM)10μL, template19μL, RNase-free H2O8.5μL,37℃×3,85℃5sec。***-PCR实验：(总反应体系20.0μL) SYBR Green Mix9μL, miR-499Forward Primer2μL, MiR-449a Reverse Primer2μL, Template cDNA2μL, RNase-free H2O5μL;反应条件为95℃20s预变性;95℃10s、60℃20s、70℃10s采集荧光,共40cycles,溶解曲线分析：70℃-95℃,升温速率0.4℃/次,恒温时间lsec/次。同时进行内参U6的荧光定量检测。6.统计学方法：采用SPSS13.0软件进行统计学分析,用均数±标准差(x±S)表示mirna-499表达水平,显著性水准取0.05,采用双侧检验,pmirna-499表达水平的差异有统计学意义,心血瘀阻型、痰浊心脉型、气虚血瘀型、心肾阴虚型mirna-499表达水平较空白对照组上调(Pmirna-499含量较痰浊心脉型、气虚血瘀型、心肾阴虚型上调(P<0.05)。结论：大量文献表明,心脉的病变是引起心络绌急而致心痛猝然发作的重要因素。心络瘀阻和

关键词： mirna-499 冠心病中医证型心血瘀阻型

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血浆mirna-499和mirna-22作为急性心肌梗死诊断标志物的研究

血浆miRNA-499和miRNA-22作为急性心肌梗死诊断标志物的研究

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作者：王晓庆承德医学院

学位级别：硕士

目的:目前,急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）已发展成为最常见的心脏疾病,具有很高的患病率和致死率。因此,及时和准确的临床诊断对于众多的临床患者和医生来讲无疑是至关重要的。然而,心肌肌钙蛋白是目前应用于临床的... 详细信息

目的:目前,急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）已发展成为最常见的心脏疾病,具有很高的患病率和致死率。因此,及时和准确的临床诊断对于众多的临床患者和医生来讲无疑是至关重要的。然而,心肌肌钙蛋白是目前应用于临床的诊断标志物（cardiac troponin,c Tn）,在其他急、慢性疾病中也可检测到高水平的c Tn,如肾功能衰竭和骨骼肌组织损伤等。这导致c Tn的诊断准确率相对较低,使得其检测可能受到限制。因此,摸索和探究新的生物标志物显得尤为重要。MicroRNA（mirna）是由大约20个核苷酸组成的、非编码的的单链RNA。大量研究表明mirna可以在血液中稳定存在,其外周血循环含量可以作为疾病诊断,病情监测及预后的重要指标。血循环mirna作为AMI诊断标准物的研究也已广泛展开。有研究显示mirna-499参与心脏干细胞向心肌细胞结构和功能的分化,在AMI患者含量增高。研究表明mirna-22是对心脏结构重塑的重要调节因子,在心脏中高度广泛表达,可以被认为是诊断心血管疾病的候选生物化学标志物。然而,关于外周血循环mirna-499作为AMI诊断标准物的研究存在争议,并且国内对血循环mirna-22在AMI中的诊断价值未见报道。因此,本研究的主要目的是探索mirna-499和mirna-22在AMI中诊断价值。方法:以2018年10月到2019年7月就诊于我院的胸痛发作12小时内50例心肌梗死（AMI）患者作为实验组。将50例非心梗（N-MI）人群,包括25名不稳定心绞痛患者（UAP）和25名健康体检者（HC）作为实验对照组。并采用定量PCR技术分析血浆中mirna-499和mirna-22的相对表达水平。结果:1 mirna-499和mirna-22水平的比较mirna-499的表达水平在HC组、UAP组和AMI组之间逐渐增高,AMI组的mirna-499水平明显高于UAP组和HC组。mirna-499在HC组和AMI组之间,UAP组和AMI组之间都显示出显著差异（P＜0.05）。但是在HC组和UAP组之间mirna-499的表达水平未见差异（P＞0.05）。与mirna-499在HC组、UAP组和AMI组之间的表达趋势相反,mirna-22的表达水平在三组之间逐渐降低,AMI组的mirna-22水平明显低于UAP组和HC组。mirna-22的相对水平在AMI组和HC组、AMI组和UAP组之间的比较中发现均具有统计学意义（P＜0.05）。2 mirna-499和mirna-22的敏感性和特异性分析mirna-499、mirna-22的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.958,0.908。当mirna-499和mirna-22水平分别为0.377和0.946时,诊断心梗的敏感性分别为86.00%和86.00%,诊断心梗的特异性分别为98.00%和94.00%。3 Logistic回归分析采用Logistic回归分析mirna-499和mirna-22对AMI的独立预测能力。结果显示,mirna-499和mirna-22是AMI独立预测指标。4相关性分析采用Spearman等级相关分析来分析AMI患者中mirna-499和mirna-22与各指标之间的关系。其结果显示,mirna-22和白细胞计数呈负相关,其相关系数r=-0.50（P＜0.001）;mirna-499和mirna-22之间呈负相关,其相关系数r=-0.52（P＜0.001）。结论:mirna-499和mirna-22有可能是诊断AMI的潜在生物标志物。并且随着mirna检测技术的不断改进和提高,更加准确、快速、便宜的检测方法可能会出现。同时考虑到检测时限、样本数量等限制,仍需要进一步研究以证实其结果。

关键词： mirna mirna-499 mirna-22 急性心肌梗死诊断标志物

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mirna-499基因多态性与慢性丙型肝炎干扰素疗效的相关性研究

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四川医学 2017年第11期38卷 1242-1245页

作者：张宁王莉刘志强南阳市第二人民医院检验科河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第二附属医院妇科河南南阳473000 安阳市肿瘤医院肿瘤科河南安阳455000

目的探讨mirna-499基因多态性与慢性丙型肝炎干扰素疗效的相关性。方法选取我院141例丙型肝炎病毒(HCV)患者,所有患者皮下注射聚乙二醇干扰素α-2a注射液135~180μg,利巴韦林900~1200 mg/d,疗程为48~72周,疗程结束后mirna-499基因双色荧... 详细信息

目的探讨mirna-499基因多态性与慢性丙型肝炎干扰素疗效的相关性。方法选取我院141例丙型肝炎病毒(HCV)患者,所有患者皮下注射聚乙二醇干扰素α-2a注射液135~180μg,利巴韦林900~1200 mg/d,疗程为48~72周,疗程结束后mirna-499基因双色荧光MGB探针检测rs3746444位点的多态性,根据mirna-499基因多态性分为CC组104例和TT37例组,并判断基因多态性与干扰素疗效的关系。结果 141例HCV患者mirna-499基因CC型检出104例,TT型检出37例,检出频率分别为73.6%、26.2%,未检出CT型;mirna-499基因CC型SVR 74例,SVR%为71.2%,TT型SVR 19例,SVR%为51.2%,基因CC型SVR%高于基因TT型SVR%,差异有统计学意义(X^2=4.76,Pmirna-499基因CC型为对照,TT型OR值为2.954[90%CI(1.234,5.639)],差异有统计学意义(Pmirna-499(rs3746444)的SNPs可预测干扰素治疗丙肝的疗效,TT型获得较高SVR,对于临床治疗具有重要预测意义。

关键词： mirna-499 单核苷酸多态性干扰素丙肝

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mirna-149、mirna-499基因多态性与肝癌易感性的关系:基于meta分析和生物信息学功能预测的研究

miRNA-149、miRNA-499基因多态性与肝癌易感性的关系:基于meta分...

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全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议

作者：叶莉霞江峰付朝伟崔员霞孟炜宁波市疾病预防控制中心复旦大学公共卫生学院复旦大学公共卫生学院流行病学教研室教育部公共卫生安全重点实验室

目的探讨mirna-149、mirna-499基因多态性与肝癌易感性的关系。方法检索Pubmed、Web of Science、中国生物医学文献数据库、万方数据和中国知网数据库至2015年5月31日为止公开发表的文献,由两个独立研究者提取数据进行meta分析,计算合... 详细信息

目的探讨mirna-149、mirna-499基因多态性与肝癌易感性的关系。方法检索Pubmed、Web of Science、中国生物医学文献数据库、万方数据和中国知网数据库至2015年5月31日为止公开发表的文献,由两个独立研究者提取数据进行meta分析,计算合并OR值及其95%可信区间,并行生物信息学分析。结果 miR-149 rs2292832共纳入6篇文献,病例1096例,对照1701例;miR-499 rs3746444纳入12篇文献,病例3117例,对照4126例。meta分析的结果未显示miR-149 rs2292832和miR-499 rs3746444与肝癌易感性相关,但是亚组分析提示,在样本量较大或者采用结果准确性较高的基因分型方法的情况下,mirna-499基因（rs3746444）与肝癌（HCC）易感性存在相关性,相对于等位基因T,C可能是肝癌的危险基因（等位基因比较（C vs.T）:OR=1.32,95%CI=1.02-1.70,P=0.03（样本量＞400）;OR=1.34,95%CI=1.09-1.66,P=0.01（其他基因分型方法）;显性模型:OR=1.36,95%CI=1.03-1.80,P=0.03（样本量＞400）;OR:1.49,95%CI=1.16-1.92,P=0.00（其他基因分型方法））。同时,生物信息学分析提示miR-149 rs2292832和miR-499 rs3746444在肝癌细胞中表达降低,可能具有功能作用。结论本次meta分析未发现miR-149 rs2292832和miR-499 rs3746444与肝癌易感性相关,但亚组分析的结果提示miR-499rs3746444的等位基因C相对于T可能是肝癌发病风险相关,生物信息学分析也提示本次研究的两个位点可能具有功能作用。由于meta分析和生物信息学分析结论的不一致性,我们需要更多设计合理的研究,进一步证实这两个位点多态性与肝癌风险之间的关系。

关键词： mirna-149 mirna-499 肝癌 Meta分析生物信息学

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MicroRNA-499对中华鳖脂类代谢相关基因表达的影响

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浙江农业学报 2020年第5期32卷 798-803页

作者：卢祎高有领王水涛何盛盛浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波315100

采用体内注射microRNA-499特异性抑制剂antagomirs的方法,揭示microRNA-499对中华鳖脂类代谢相关基因的调控作用。选取健康稚鳖15只,随机分成3组,分别设为空白对照组、注射生理盐水组和注射miR-499 antagomirs组。在同一时间点连续注射... 详细信息

采用体内注射microRNA-499特异性抑制剂antagomirs的方法,揭示microRNA-499对中华鳖脂类代谢相关基因的调控作用。选取健康稚鳖15只,随机分成3组,分别设为空白对照组、注射生理盐水组和注射miR-499 antagomirs组。在同一时间点连续注射3 d后,测定中华鳖血清和肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量,采用实时荧光定量PCR测定肝脏中microRNA-499和脂类代谢相关基因表达水平。结果表明,相对于空白对照组和注射生理盐水组,注射miR-499 antagomirs导致中华鳖肝脏甲状腺激素应答蛋白(THRSP)和钠/碘共同转运体(NIS)的表达水平升高,肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)表达水平降低(P499影响中华鳖脂类代谢相关基因的表达水平,这可能与中华鳖脂肪生成和脂肪酸β-氧化有关。

关键词：中华鳖 mirna-499 antagomirs 脂类代谢基因表达

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microRNA-499对急性心肌梗死诊断价值的Meta分析

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临床心血管病杂志 2017年第5期33卷 423-426页

作者：王倩马俊芬蒋知云吴凡平杰丹明亮郑州大学第一附属医院检验科郑州450052

目的:系统评价microRNA-499(mirna-499)在急性心肌梗死(AMI)患者诊断中的临床价值。方法:计算机检索Cochrane Library Medline、Embase、Pubmed、万方数据库、维普中国科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网数据库有关mirna... 详细信息

目的:系统评价microRNA-499(mirna-499)在急性心肌梗死(AMI)患者诊断中的临床价值。方法:计算机检索Cochrane Library Medline、Embase、Pubmed、万方数据库、维普中国科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网数据库有关mirna-499诊断AMI的文献。采用MetaDisc1.4软件进行系统评价。评价指标为总体灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断优势比以及受试者工作特征曲线(SROC)下面积。结果:共纳入15篇文献,合计AMI患者1 943例,健康者1 867例。Meta分析结果显示,mirna-499诊断AMI的总体灵敏度为0.83(95%CI:0.82~0.85);特异度为0.79(95%CI:0.77~0.80);阳性似然比为5.73(95%CI:3.74~8.78);阴性似然比为0.21(95%CI:0.16~0.29);诊断优势比为26.29(95%CI:15.24~45.34)。SROC曲线下面积为0.881 8。结论:mirna-499对AMI诊断具有较高的灵敏度和特异度,有较强的诊断价值。

关键词： mirna-499 心肌梗死诊断 Meta分析

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《循环中的MicroRNA-1和MicroRNA-133a在急性心肌梗塞早期诊断中的评价》

《循环中的MicroRNA-1和MicroRNA-133a在急性心肌梗塞早期诊断中...

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作者：万晓群福建医科大学

学位级别：硕士

研究背景近年来中国冠心病的发病率和致残、致死率均急剧升高，而冠心病中导致死亡的主要原因是急性心肌梗塞(acute myocardial infarction, AMI)。因此在发病早期及时诊断和进行再灌注治疗能明显降低死亡率并改善预后。大量临床实践... 详细信息

研究背景近年来中国冠心病的发病率和致残、致死率均急剧升高，而冠心病中导致死亡的主要原因是急性心肌梗塞(acute myocardial infarction, AMI)。因此在发病早期及时诊断和进行再灌注治疗能明显降低死亡率并改善预后。大量临床实践发现，大约25%0%的AMI患者在发病早期没有典型的临床表现或特殊性心电图(EKG)改变，这使得心肌生化标志物在AMI早期诊断中起着十分重要的作用。在心肌生化标志物中肌钙蛋白I(cTnI)被认为是“金指标”，但其有局限性，故人们不断探索新的、更早出现、更敏感、更特异的心肌标志物。微小核糖核酸(microRNA，mirna)是一类高度保守的非编码小核糖核酸(20-25个核苷酸)的一个新种类，于转录后水平调节基因表达，通过靶向于mirna，导致mirna的降解或者翻译抑制。近年来mirna在心脏发育、心肌肥厚、心力衰竭、心律失常、心肌损伤、凋亡、心肌缺血等疾病的作用机制方面取得了一系列进展。最近循环mirnas作为疾病诊断标志物的研究取得了一些重要进展，国外研究发现循环中的肌肉特异性表达mirna-1、mirna-133a、mirna-208a和mirna-499在急性心肌梗塞患者表达水平异常，提示它们可能是急性心肌梗塞的潜在生物标志物，但尚未得出一致结论，国内也无类似报道。故本研究旨在探讨肌肉特异性表达模式的mirna在循环中的表达水平以及在急性心肌梗塞早期诊断中的价值。目的用qRT-PCR方法检测急性心肌梗塞模型大鼠和急性心肌梗塞患者血浆中的microRNAs水平，评价其在急性心肌梗塞早期诊断中的价值。方法： 1、AMI大鼠模型组6例，假手术组6例;手术后即刻、1h、2h、3h、6h、12h、24h、48h分别测定血浆中microRNA-1、microRNA-133a、microRNA-208a、microRNA-499水平。 2AMI的患者24例，对照组为健康志愿者20例;在症状发作后3h、6h、12h、24h、48h、72h检测血浆中microRNA-1、microRNA-133a、microRNA-208a、microRNA-499的水平。所有数据资料用SPSS16.0软件包行统计学处理。Pmirna-1、mirna-133a在1h出现，3h达到峰值，12h-24h回到正常水平;而假手术组未检测到相应升高的mirnas。循环中mirna-1、mirna-133a表达水平在AMI模型组比假手术组升高40-220倍，差异有统计学意义。mirna-208a、mirna-499在AMI模型大鼠血浆中表达水平低，与假手术组相比无明显升高，差异无统计学意义。 2．急性心肌梗塞患者血浆中mirna-1在缺血性胸痛发作后3h出现血浆水平明显升高达到高峰，此后逐渐下降，72h后基本降至正常;mirna-133a在缺血性胸痛发作后6h出现血浆水平明显升高，12h达到高峰，24h后降至正常;健康志愿者血浆中未检测出上述的mirnas。急性心肌梗塞时血浆中mirna-1、mirna-133a表达水平比对照组高10-55倍，差异有统计学意义;而血浆中的mirna-208a、mirna-499在急性心肌梗塞患者表达水平低，与对照组相比无明显升高，差异无统计学意义。 3．急性心肌梗塞患者mirna-1和mirna-133a在血浆中表达水平与cTnI相关，mirna-1的峰值出现在cTnI之前，mirna-133a峰值与cTnI发生在同一时间。 4．急性心肌梗塞患者循环中升高的mirna-1、133a水平与QRS波宽度无相关，但在合并室性心律失常患者mirna-1水平较无室性心律失常患者升高3.5倍，差异有统计学意义。结论循环中升高的mirna-1、mirna-133a可能是诊断早期急性心肌梗塞的一种有潜力的、新型的生物标志物。

关键词：急性心肌梗塞 mirna-1 mirna-133a mirna-208a mirna-499

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中国西南地区人群中microRNA-499多态性与肝癌易感性的相关性分析

中国西南地区人群中microRNA-499多态性与肝癌易感性的相关性分析

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作者：余莉华重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：MicroRNAs(mirnas)是一类新型的非编码小RNA分子，可以作为致癌基因或抑癌基因参与肿瘤的发生发展。mirna分子靶点序列上单个核苷酸发生变异可引起遗传多态性。mirna的遗传多态性可能与乙型肝炎病毒相关性肝癌(HBV-related HCC)... 详细信息

目的：MicroRNAs(mirnas)是一类新型的非编码小RNA分子，可以作为致癌基因或抑癌基因参与肿瘤的发生发展。mirna分子靶点序列上单个核苷酸发生变异可引起遗传多态性。mirna的遗传多态性可能与乙型肝炎病毒相关性肝癌(HBV-related HCC)的发生风险有关。方法：本研究共纳入中国西南地区共300例受试者，包括100例肝细胞癌确诊患者（HBV阳性73例，HBV阴性27例），100例慢性乙型肝炎患者和100例健康对照，采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法分析mirna-146a(rs291016)与mirna-499(rs3746444)的基因多态性，并进行DNA测序确认。结果：mirna-499基因分布频率在肝癌组和对照组之间的差异有统计学意义。与携带mirna-499T/T基因型比较,携带mirna-499C/C基因型者发生肝癌的危险性为OR值=3.630(95%CI:1.545-8.532)，而发生乙肝病毒相关性肝癌的危险性为OR值=3.133(95%CI:1.248-7.861)。mirna-146a多态性与肝癌发生风险无明显相关性。结论：在中国西南地区人群中mirna-499多态性与乙肝病毒相关性肝癌的易感性相关。mirnas多态性可能为癌症的研究和干预治疗方法开辟新途径。

关键词：乙型肝炎病毒肝细胞肝癌循环microRNAs mirna-499 mirna-146a

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microRNA-449通过调控SIRT1相关的脂质代谢途径抑制HepG2.2.15细胞增殖

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国际病毒学杂志 2015年第4期22卷 221-228页

作者：张文超王汉宁萧金丰陈开运贺轲段小鹏黄睿向国安广东医学院教学医院广东省第二人民医院广州510000

目的研究mirna-449通过调控SIRT1相关脂质代谢途径抑制HepG 2.2.15增殖的作用机制.方法使用Entrez Nucleotide database预测SIRT1是否为mirna-449的靶基因.使用RT-PCR和western blot明确mirna-449是否调控胆固醇调节元件结合蛋白1-脂肪生成-胆固醇生成代谢途径.BrdU实验明确mirna-449对HepG 2.2.15有丝分裂的影响.mirna-449模拟物或抑制剂转染HepG 2.2.15,观察mirna-449对细胞增殖的影响.结果 mirna-449通过下调SIRT1表达进一步抑制SREBP-1c及其下游的靶基因脂肪酸合酶（fatty acid synthase,FASN）和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase,HMGCR）的表达来调控HepG 2.2.15细胞中脂肪生成及胆固醇合成.mirna-449通过调节代谢途径抑制HepG 2.2.15细胞有丝分裂、增殖以及DNA合成.结论 mirna-449可能通过下调SIRT1表达进一步抑制肝脏肿瘤的发生和发展.mirna-449可能成为HBV感染相关肝细胞肝癌治疗的新靶点.

关键词： mirna-499 脂质代谢肝癌 mirna-499

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