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mirna-34a靶向调控叉头框蛋白P1对活化B细胞样弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞凋亡的影响

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癌症进展 2020年第12期18卷 1211-1216页

作者：武君梁艳张森森王娟尚念梅杜忠海潍坊市中医院肿瘤中心肿瘤科山东潍坊261041

目的探讨mirna-34a靶向调控叉头框蛋白P1(FOXP1)对活化B细胞样弥漫性大B细胞淋巴瘤(ABC-DLBCL)细胞凋亡的影响。方法将mirna-34a mimics转染至SU-DHL-2细胞并验证转染效率,检测mirna-34a过表达对SU-DHL-2细胞增殖和凋亡的影响。采用逆... 详细信息

目的探讨mirna-34a靶向调控叉头框蛋白P1(FOXP1)对活化B细胞样弥漫性大B细胞淋巴瘤(ABC-DLBCL)细胞凋亡的影响。方法将mirna-34a mimics转染至SU-DHL-2细胞并验证转染效率,检测mirna-34a过表达对SU-DHL-2细胞增殖和凋亡的影响。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测SU-DHL-2细胞转染mirna-34a mimics后FOXP1 mRNA和FOXP1蛋白表达水平的变化。通过双荧光素酶报告实验验证mirna-34a和FOXP1的相互作用机制。验证FCXP1 siRNA转染至SU-DHL-2细胞的转染效率,通过CCK8法和流式细胞仪检测FOXP1基因沉默对SU-DHL-2细胞增殖及凋亡的影响。结果SU-DHL-2细胞转染mirna-34a mimics和FOXP1 siRNA后均获得满意的转染效果。mirna-34a过表达明显降低了SU-DHL-2细胞中FOXP1 mRNA和FOXP1蛋白的相对表达量。mirna-34a对FOXP13’非翻译区(3’-UTR)具有直接调控作用。mirna-34a过表达组和FOXP1基因沉默组细胞凋亡率均明显高于NC组细胞,差异均有统计学意义(Pmirna-34a过表达和FCXP1基因沉默对细胞增殖能力没有影响。结论mirna-34a抑制ABC-DLBCL细胞的发生发展可能与mirna-34a通过结合FOXP13’-UTR有效抑制FOXP1蛋白表达进而促进肿瘤细胞凋亡有关。

关键词：弥漫性大B细胞淋巴瘤 mirna-34a 叉头框蛋白P1 细胞凋亡

mirna-34a、SIRT6对老龄小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡的影响及机制

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遵义医科大学学报 2020年第5期43卷 589-592,598页

作者：吉杨松饶澄龙依琳谢天宏王世飞遵义医科大学附属医院耳鼻咽喉科贵州遵义563099

目的研究mirna-34a、沉默信息调节因子(Silent information regulator,SIRT6)对老龄小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡的影响及机制。方法mirna-34a基因敲除小鼠(mirna-34a敲除组)、SIRT6基因敲除小鼠(SIRT6敲除组)与野生型小鼠(对照组)各10只... 详细信息

目的研究mirna-34a、沉默信息调节因子(Silent information regulator,SIRT6)对老龄小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡的影响及机制。方法mirna-34a基因敲除小鼠(mirna-34a敲除组)、SIRT6基因敲除小鼠(SIRT6敲除组)与野生型小鼠(对照组)各10只,所有小鼠均为16月龄,TUNEL法分别检测各组小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡情况,免疫组化法检测各组小鼠听觉皮层神经元中B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关的x蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Cysteine aspartic protease8,Caspase8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteine aspartic protease3,Caspase3)表达情况。结果mirna-34a敲除组小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡指数与SIRT6组相比,差异有统计学意义(Pmirna-34a敲除组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),SIRT6敲除组与对照组相比,差异有统计学意义(Pmirna-34a敲除组小鼠听觉皮层神经元抑凋亡因子Bcl-2表达量与SIRT6敲除组相比,差异有统计学意义(Pmirna-34a敲除组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),SIRT6敲除组与对照组相比,差异有统计学意义(Pmirna-34a敲除组小鼠听觉皮层神经元促凋亡因子Bax、Caspase8、Caspase3表达量与SIRT6敲除组相比,差异有统计学意义(Pmirna-34a敲除组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),SIRT6敲除组与对照组相比,差异有统计学意义(Pmirna-34a与SIRT6可通过多种凋亡因子调控老龄小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡过程;mirna-34a促进其凋亡,而SIRT6抑制小鼠听觉皮层神经元细胞凋亡;mirna-34a与SIRT6在调控小鼠听觉皮层神经元凋亡中负相关,二者可能是治疗老年性耳聋的新靶点。

关键词： mirna-34a 沉默信息调节因子老龄小鼠听觉皮层神经元

mirna-34a在宫颈HPV持续感染患者脱落细胞中的表达及意义

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现代肿瘤医学 2017年第8期25卷 1282-1285页

作者：陈贝贝于丽波孙文洲葛鲁倩赵欣瑶金雁哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇科黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内科黑龙江哈尔滨150081

目的:研究mirna-34a在宫颈高危型人乳头瘤病毒(human paplilloma virus,HPV)持续感染患者脱落细胞中的表达及临床意义。方法:收集2012年3月-2014年3月妇科门诊60例HPV感染患者的宫颈脱落细胞学组织标本,运用Poly(A)加尾法的SYBR Green ... 详细信息

目的:研究mirna-34a在宫颈高危型人乳头瘤病毒(human paplilloma virus,HPV)持续感染患者脱落细胞中的表达及临床意义。方法:收集2012年3月-2014年3月妇科门诊60例HPV感染患者的宫颈脱落细胞学组织标本,运用Poly(A)加尾法的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测mirna-34a在宫颈脱落细胞中的表达,分析其与HPV持续感染的关系。结果:mirna-34a在HPV持续感染标本中表达较转归组降低,差异具有统计学意义(Pmirna-34a与HPV持续感染密切相关,可能成为HPV持续感染在宫颈癌早期筛查、诊断及临床诊治中的新指标。

关键词： mirna-34a HPV持续感染宫颈脱落细胞宫颈癌

mirna-34a通过靶向调控HGF在喉癌中的作用及临床意义

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癌症进展 2019年第23期17卷 2838-2842页

作者：徐杨斌洪艺云李慧凤朱忠寿刘平福建医科大学附属宁德市医院耳鼻咽喉科

目的探讨mirna-34a与肝细胞生长因子(HGF)的靶向调控关系在喉癌中的作用及临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测63例喉癌患者的喉癌组织及癌旁正常组织中mirna-34a的表达水平,分析不同临床特征喉癌患者喉癌组织中mirna-... 详细信息

目的探讨mirna-34a与肝细胞生长因子(HGF)的靶向调控关系在喉癌中的作用及临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测63例喉癌患者的喉癌组织及癌旁正常组织中mirna-34a的表达水平,分析不同临床特征喉癌患者喉癌组织中mirna-34a的表达情况。采用mirna靶基因数据库预测mirna-34a的潜在靶基因为HGF并采用荧光素酶报告基因法验证。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测HGF的mRNA和蛋白表达水平。采用CCK8法、细胞划痕实验及流式细胞术检测mirna-34a和HGF对Hep-2细胞增殖、迁移及周期的影响。结果喉癌组织中mirna-34a的表达水平明显低于癌旁正常组织(P﹤0.01)。不同年龄、性别、分化程度、临床分期的喉癌患者喉癌组织中mirna-34a的表达情况比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);无淋巴结转移的喉癌患者喉癌组织中mirna-34a的高表达率明显高于有淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P﹤0.01)。mirna-34a可靶向调控HGF并抑制其mRNA和蛋白的表达。mirna-34a可以抑制Hep-2细胞的增殖、迁移和S期细胞周期的聚集,这一效果会被HGF逆转。结论mirna-34a通过结合靶基因HGF的3'-UTR抑制其mRNA和蛋白表达,在喉癌的发生发展过程中发挥抑癌作用,提示mirna-34a可能成为喉癌诊断及治疗的潜在新靶点。

关键词：喉癌 mirna-34a 肝细胞生长因子

mirna-34a-5p,SIRT6在不同月龄小鼠耳蜗中的表达及意义

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遵义医科大学学报 2022年第1期45卷 15-18,24页

作者：苏琳凌王世飞谢天宏饶澄龙依琳李欢遵义医科大学附属医院耳鼻咽喉科贵州遵义563099

目的探讨mirna-34a-5p、沉默信息调节因子6(SIRT6)在老年性耳聋发生发展中的相互作用及意义。方法3、6、12、16月龄C57BL/6小鼠各6只以及D-半乳糖耳聋造模小鼠模型6只,采用qRT-PCR法分别检测各组小鼠耳蜗中mirna-34a-5p、SIRT6的表达,... 详细信息

目的探讨mirna-34a-5p、沉默信息调节因子6(SIRT6)在老年性耳聋发生发展中的相互作用及意义。方法3、6、12、16月龄C57BL/6小鼠各6只以及D-半乳糖耳聋造模小鼠模型6只,采用qRT-PCR法分别检测各组小鼠耳蜗中mirna-34a-5p、SIRT6的表达,比较各组间差异。结果3、6、12、16月龄C57BL/6小鼠耳蜗组织中mirna-34a-5p、SIRT6蛋白相对表达水平差异均有统计学意义(F=9.437,Pmirna-34a-5p的表达水平,D-半乳糖造模组与12、16月龄组相比,差异无统计学意义;SIRT6的表达水平,D-半乳糖造模组与16月龄组相比,差异无统计学意义。Pearson相关性分析显示,mirna-34a-5p耳蜗组织中表达水平随小鼠年龄的增长而增加,SIRT6水平反之则逐渐降低,二者呈负相关(r=-0.591,Pmirna-34a-5p的相对表达水平上升,而SIRT6的表达水平下降,两者呈负相关,提示mirna-34a-5p和SIRT6对老年性耳聋的发生发展具有调控作用,可能是新的治疗靶点。

关键词： mirna-34a SIRT6 老年性耳聋小鼠

mirna-34a对无血清培养诱导心肌细胞凋亡的影响及机制研究

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浙江医学 2014年第21期36卷 1779-1781页

作者：邢大伟张鑫杨鹏麟温州医科大学附属第二医院心内科 325027

目的探讨mirna-34a(miR-34a)对无血清培养诱导的大鼠心肌细胞凋亡及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达水平的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,实验分实验组(转染miR-34a inhibitor)、空白对照组(无转染miR inhibitor)和阴性对照组(转染... 详细信息

目的探讨mirna-34a(miR-34a)对无血清培养诱导的大鼠心肌细胞凋亡及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达水平的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,实验分实验组(转染miR-34a inhibitor)、空白对照组(无转染miR inhibitor)和阴性对照组(转染随机合成NC microRNA片段)。转染24h后无血清培养饥饿诱导细胞凋亡,Western bolt法检测Caspase-3及Bcl-2的表达。结果实验组细胞Caspase-3表达低于空白对照组和阴性对照组(P34a inhibitor可以下调miR-34a的表达,减少无血清培养诱导H9C2细胞的凋亡,Bcl-2的表达增加可能参与了其保护机制。

关键词： H9C2 mirna-34a 凋亡 Bcl-2

mirna-34a靶向Bcl-2对肝癌细胞HepG2的生长和迁移能力的影响

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西部医学 2022年第11期34卷 1613-1616,1623页

作者：张游侠严其康陈玉然郝佳奇朱金玲佳木斯大学基础医学院黑龙江佳木斯154007

目的通过过表达mirna-34a检测Bcl-2的表达及对肝癌细胞的生长和迁移能力的影响,为肝癌的治疗提供新靶点。方法通过生物信息学方法预测mirna-34a的潜在作用靶点;采用双荧光素酶报告实验检测mirna-34a与Bcl-2的靶向调控关系;体外培养肝癌... 详细信息

目的通过过表达mirna-34a检测Bcl-2的表达及对肝癌细胞的生长和迁移能力的影响,为肝癌的治疗提供新靶点。方法通过生物信息学方法预测mirna-34a的潜在作用靶点;采用双荧光素酶报告实验检测mirna-34a与Bcl-2的靶向调控关系;体外培养肝癌细胞,将肝癌细胞分为对照组(转染mirna-34a阴性对照物mimic NC)及mirna-34a转染组(转染mirna-34a模拟物)。分别转染miR-34a模拟物和阴性对照,转染36 h后,CCK8检测细胞增殖,Trans-well检测细胞迁移能力,q-PCR和Western blot方法检测mirna-34a对肝癌细胞中Bcl-2表达量的影响。结果mirna-34a对肝癌HepG2细胞的活力和迁移能力具有抑制作用(Pmirna-34a可以直接靶向下调Bcl-2(Pmirna-34a可靶向并负向调控Bcl-2,降低肝癌细胞HepG2的活力和迁移能力。

关键词： mirna-34a Bcl-2 肝癌增殖迁移

mirna-34a和癌胚抗原在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值

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中国卫生检验杂志 2023年第3期33卷 320-322,331页

作者：周黎黄伟萍王世俊陈捷浙江省余姚市人民医院浙江315400

目的探讨mirna-34a和癌胚抗原(CEA)的检测在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值。方法收集良恶性胸腔积液患者各35例,采用实时荧光定量PCR测定mirna-34a的相对表达量,全自动免疫分析仪测定血清CEA水平,应用ROC曲线评估mirna-34a和CE... 详细信息

目的探讨mirna-34a和癌胚抗原(CEA)的检测在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值。方法收集良恶性胸腔积液患者各35例,采用实时荧光定量PCR测定mirna-34a的相对表达量,全自动免疫分析仪测定血清CEA水平,应用ROC曲线评估mirna-34a和CEA的诊断性能。结果恶性胸腔积液组患者mirna-34a相对表达量低于良性胸腔积液组,差异有统计学意义(Pmirna-34a和CEA诊断恶性胸腔积液曲线下面积(AUC)分别为0.704和0.764。结论 mirna-34a在恶性胸腔积液中呈低表达,可能与相关肿瘤的胸膜转移有关。胸腔积液中mirna-34a和CEA检测对恶性胸腔积液的诊断具有一定的辅助性价值。

关键词： mirna-34a 癌胚抗原胸腔积液应用价值

mirna-34a对人结肠癌细胞HCT116增殖及侵袭转移的影响

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实用癌症杂志 2016年第2期31卷 179-182,186页

作者：庄彪闵志均王廷峰张鹏倪熊瞿惠龙丁育明上海市浦东医院 201300

目的研究微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)在人结肠癌细胞株HCT116中的过表达对细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法设计合成并构建携带绿色荧光蛋白(GFP)的miR-34a真核表达载体,脂质体法稳定转染HCT116细胞。通过Realtime PCR验证转... 详细信息

目的研究微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)在人结肠癌细胞株HCT116中的过表达对细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法设计合成并构建携带绿色荧光蛋白(GFP)的miR-34a真核表达载体,脂质体法稳定转染HCT116细胞。通过Realtime PCR验证转染后miR-34a的表达变化。MTT法检测转染前后HCT116细胞增殖能力变化,Transwell法检测转染前后HCT116细胞侵袭能力改变,western blot检测目的蛋白的表达。结果 miR-34a转染HCT116细胞后其表达量增加到(7.32±1.34)倍,而HCT116细胞增殖能力也受到显著抑制,下降到(0.49±0.10);Bcl-2蛋白受到miR-34a表达的抑制,而BAX的表达则受到miR-34a表达的增强;HCT116细胞侵袭能力在miR-34a过表达后显著增强,相应的MMP-2和MMP-9表达也出现显著增强。阴性对照组与空白对照组比较无显著性差异。结论 miR-34a的过表达能够抑制人结肠癌细胞HCT116的增殖及侵袭转移,与调控Bcl-2/BAX和MMP-2和-9蛋白的表达密切相关。

关键词：人结肠癌细胞 mirna-34a 增殖侵袭