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mirna-148b靶向AMPKα1通过氧化应激介导高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡

中华肾脏病杂志 2019年第1期35卷 43-47页

作者：杨莹范秋灵李露露汪旭文思徐莉中国医科大学附属第一医院肾内科沈阳110001 中国医科大学附属第一医院消化内科沈阳110001 中国医科大学附属第一医院检验科沈阳110001

目的探讨微小RNA-148b(mirna-148b)在高糖诱导肾小管损伤中表达变化及其作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组,培养48 h后,实时定量PCR法检测mirna-148b表达;采用2′,7′-二氯二... 详细信息

目的探讨微小RNA-148b(mirna-148b)在高糖诱导肾小管损伤中表达变化及其作用机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组,培养48 h后,实时定量PCR法检测mirna-148b表达;采用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)在荧光显微镜下检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western印迹检测HK-2细胞腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)、NOX2、NOX4、bcl-2、cleaved-caspase3的蛋白表达。结果培养48 h后,与正常糖组相比,高糖组、高渗组HK-2细胞内mirna-148b表达上调(Pbcl-2蛋白表达减少(均Pmirna-148b的表达,靶向抑制AMPKα1的表达,促进NOX2、NOX4表达,活性氧产生增多,活化线粒体凋亡途径,激活caspase酶,诱导HK-2细胞凋亡。高糖的肾小管毒性部分是渗透压的影响。mirna-148b可能参与了糖尿病肾病病理损伤的发生,有望成为糖尿病肾病新的治疗靶点。

关键词：糖尿病肾病氧化应激肾小管上皮细胞 mirna-148b AMPKα1

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通利三焦、清热利湿方对IgA肾病大鼠肾组织mirna-148b及血清IL-4的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2020年第6期41卷 475-484页

作者：季兰阁王思瑜郭登洲河北中医学院第一附属医院肾病二科河北石家庄056001

目的:通过观察通利三焦、清热利湿方对IgA肾病大鼠肾组织mirna-148b及血清IL-4表达水平的影响,探求本方干预IgA肾病的作用机制.方法:将48只健康清洁级雄性SD大鼠适应性喂养一周后,尿蛋白阴性者进入实验,按随机数字表法分为4组:正常组、... 详细信息

目的:通过观察通利三焦、清热利湿方对IgA肾病大鼠肾组织mirna-148b及血清IL-4表达水平的影响,探求本方干预IgA肾病的作用机制.方法:将48只健康清洁级雄性SD大鼠适应性喂养一周后,尿蛋白阴性者进入实验,按随机数字表法分为4组:正常组、模型组、贝那普利组与中药组,每组12只,使用牛血清白蛋白灌胃+脂多糖+四氯化碳+蓖麻油免疫诱导的方法制备实验性IgA肾病大鼠模型,予模型组、贝那普利组、中药组3组隔日灌胃牛血清白蛋白、每周皮下注射蓖麻油与四氯化碳、每4周尾静脉注射脂多糖,正常组予等体积的蒸馏水与生理盐水代替,造模持续8周.于第9周、第13周末观察bUN、Scr、24h-UTP的水平、光镜及电镜下肾脏组织病理改变及IgA免疫荧光检测结果确定造模是否成功,造模成功后,中药组予通利三焦、清热利湿方中药灌胃干预,贝那普利组每日予质量1.8 mg的贝那普利灌胃给药,正常组与模型组予等体积蒸馏水灌胃.干预治疗4周后运用ELISA法检测血清中IL-4含量变化,用RT-PCR法检测大鼠肾脏组织中IL-4、mirna-148b的表达.结果:模型组大鼠出现精神萎靡、纳食减少、毛色黯淡粗糙等表现,且尿蛋白异常增多,HE、PASM染色可见系膜细胞增生,肾间质炎性细胞浸润明显,毛细血管袢变窄,IgA免疫荧光呈团块状荧光沉积,模型制备成功.模型组尿蛋白较正常组显著增多(Pmirna-148b及血清IL-4表达水平较正常组升高(Pmirna-148b及血清IL-4表达水平发挥治疗IgA肾病的作用.

关键词： IgA肾病通利三焦,清热利湿 mirna-148b interleukin 4(IL-4)

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中华医院感染学杂志 2017年第10期27卷 2177-2182页

作者：张亚琼孙倩倩娄欣欣金冲章月桃台州市中心医院检验科浙江台州318000 温州医科大学临床检验诊断专业浙江温州325000

目的研究幽门螺杆菌相关mirna-148b在胃癌中过表达与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的相关性及其在胃癌细胞增殖及侵袭中的分子机制。方法本研究首先建立稳定的H.pylori感染人胃上皮细胞模型;检测H.pylori感染前后胃上皮细胞的mirnas表达谱变... 详细信息

目的研究幽门螺杆菌相关mirna-148b在胃癌中过表达与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的相关性及其在胃癌细胞增殖及侵袭中的分子机制。方法本研究首先建立稳定的H.pylori感染人胃上皮细胞模型;检测H.pylori感染前后胃上皮细胞的mirnas表达谱变化,筛选出感染后mirna-148b表达显著上调的为研究对象。选择胃癌细胞系AGS、HGC-27、SGC-7901及人正常胃上皮细胞GES-1为研究对象。设计合成mirna-148b特异性siRNA及mirna-148b的过表达质粒,抑制或过表达mirna-148b的表达水平,通过细胞凋亡实验,Transwell小室细胞侵袭等实验,研究mirna-148b在胃癌细胞增殖及侵袭中的作用。探讨mirna-148b在胃癌细胞增殖侵袭中的分子作用机制。结果 realtime PCR检测,H.pylori在感染胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞株AGS、HGC-27、SGC-7901后miR-148b表达升高,不同胃癌细胞株较正常胃黏膜miR-148b表达下降,在体外,发现miR-148b可以促进胃癌细胞株AGS、HGC-27、SGC-7901细胞的增殖,抑制胃癌细胞株SGC-7901细胞的凋亡;证实抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1为miR-148b的靶基因,在胃癌细胞株和胃癌组织中miR-148b和PAI-1的表达水平呈显著负相关。结论通过H.pylori感染胃上皮细胞株前后miR-148b的表达检测,验证了先前的mirnas芯片检测结果,在体外,过表达miR-148b促进胃癌细胞株增殖,抑制其凋亡,提示机体可能以这种方式减缓在H.pylori感染早期所诱导的胃上皮细胞的过度凋亡进程,从而发挥了相应的保护作用;相对于正常胃黏膜组织,在不同胃癌细胞株中miR-148b都表达下调暗示,在胃癌的发生发展过程中,miR-148b可能作为一个抑癌基因而被抑制,证实抑癌基因TP53INP1和癌基因PAI-1为miR-148b的靶基因,提示miR-148b在H.pylori感染和胃癌发生的不同时期功能不同。

关键词：幽门螺杆菌 mirna-148b 胃癌转移侵袭机制

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microRNA-148b在肝细胞癌中的表达及意义

microRNA-148b在肝细胞癌中的表达及意义

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作者：王维昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]原发性肝细胞癌是世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一,近年来我国的肝细胞癌诊治已经取得了很大的成绩。由于我国感染HbV、HCV的人群较多,肝细胞癌仍将是威胁国人健康的重大疾病,因此,探寻与肝细胞癌发生发展相关的基因,尤... 详细信息

[目的]原发性肝细胞癌是世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一,近年来我国的肝细胞癌诊治已经取得了很大的成绩。由于我国感染HbV、HCV的人群较多,肝细胞癌仍将是威胁国人健康的重大疾病,因此,探寻与肝细胞癌发生发展相关的基因,尤其是可能的用于早期诊断的分子标记物一直是研究工作的关键。本课题旨在检测mirna-148b在肝细胞癌中的表达情况,可望提供一个新的检测肝细胞癌的分子标记物。[方法]采用RT—PCR技术检测标本中的mirna-148b表达水平,标本来源于肝癌细胞株HepG2,2008年10月～2014年12月收集的25例HCC患者的肝癌组织及25例正常肝组织。结果进行统计学分析。[结果]正常肝组织中mirna-148b表达量为(45.7534±2.0091),肝癌组织中mirna-148b表达量为(0.0009±5.5695),肝癌细胞株HepG2中mirna-148b表达量为(0.0009±5.4592),差异具有统计学意义(Pmirna-148b表达量与正常肝组织比较,差异具有统计学意义(Pmirna-148b表达量与正常肝组织比较,差异具有统计学意义(Pmirna-148b在人肝癌组织及人肝癌细胞HepG2细胞株中的表达较正常组织低,提示我们]mirna-148b可能在肝癌的发生发展中具有重要作用,可望成为一个新的检测原发性肝细胞癌的分子标记物。

关键词：肝细胞癌 mirna-148b 分子标记物

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