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mirna-132在裸鼠荷人结肠癌种植瘤中的作用机制研究

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miRNA-132在裸鼠荷人结肠癌种植瘤中的作用机制研究

作者：杨绪亮天津医科大学

学位级别：硕士

目的：研究mirna-132在裸鼠人结肠癌种植瘤中表达和作用。方法：①培养人结肠癌HCT-116细胞系,建立BALB/c裸鼠种植瘤模型,分为三组,空白组;二甲基亚砜组：二甲基亚砜;抑制剂组：STAT3抑制剂WP1066+二甲基亚砜;②分别于合适时间点收获肿... 详细信息

目的：研究mirna-132在裸鼠人结肠癌种植瘤中表达和作用。方法：①培养人结肠癌HCT-116细胞系,建立BALB/c裸鼠种植瘤模型,分为三组,空白组;二甲基亚砜组：二甲基亚砜;抑制剂组：STAT3抑制剂WP1066+二甲基亚砜;②分别于合适时间点收获肿瘤,采用TaqMan mirna Assays技术对各组肿瘤mirna-132表达变化进行相对定量研究;③采用实时定量PCR技术检测种植瘤MMP-2和MMP-9分子mRNA的表达变化,蛋白免疫组化技术检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果：空白组的肿瘤体积与二甲基亚砜组的肿瘤体积大小差异无统计学意义(p>0.05),抑制剂组的肿瘤体积小于以上两组的肿瘤体积,差异具有统计学意义(pmirna-132水平差异具有统计学意义(p0.05)。抑制剂组肿瘤组织的MMP-2、MMP-9mRNA转录水平显著低于空白组和二甲基亚砜组,差异具有统计学意义(pmirna-132水平与MMP-9分子mRNA转录水呈正相关(Pmirna-132在裸鼠人HCT-116结肠癌种植瘤生长过程中起正向调节作用。STAT3抑制剂WP1066在抑制淋巴管生成的同时,使mirna-132及其下游基因MMP-9表达减低,表现为种植瘤的生长速度减慢。

关键词：人结肠癌种植瘤 mirna-132 MMP-2 MMP-9 STAT3 WP1066

mirna-132通过Wnt/β-catenin信号通路促进牙周膜干细胞成骨分化的研究

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中国美容医学 2022年第6期31卷 88-92,109页

作者：陈国勇吴芳株洲市中心医院口腔科湖南株洲412007

目的:探讨mirna-132通过Wnt/β-catenin信号通路促进牙周膜干细胞的成骨分化。方法:细胞培养,观察牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)形态。成骨诱导,检测成骨样分化情况。成脂诱导,检测成脂分化情况。将PDLSCs细胞... 详细信息

目的:探讨mirna-132通过Wnt/β-catenin信号通路促进牙周膜干细胞的成骨分化。方法:细胞培养,观察牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)形态。成骨诱导,检测成骨样分化情况。成脂诱导,检测成脂分化情况。将PDLSCs细胞分为3组,分别为对照组、mirna-132模拟组和mirna-132抑制剂组,采用八肽胆囊收缩素(Cholecystokinin octapeptide,CCK-8)检测PDLSCs细胞增殖,酶联免疫检测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase protein,ALP)活性,茜素红染色检测矿化结节沉积,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)法检测成骨相关基因,采用Western blot检测Wnt/β-catenin相关通路蛋白。结果:mirna-132模拟组的PDLSCs细胞增殖能力、ALP活性及矿化结节数量显著高于对照组,mirna-132抑制剂组明显低于对照组和mirna-132模拟组,差异有统计学意义(Pmirna-132模拟组中的ALP、Runx2、OCN和Osterix mRNA的相对表达明显高于对照组,mirna-132抑制剂组显著低于对照组和mirna-132模拟组,差异均有统计学意义(Pmirna-132模拟组中的GSK3β和β-catenin蛋白的表达明显高于对照组,mirna-132抑制剂组明显低于对照组和mirna-132模拟组,差异有统计学意义(Pmirna-132模拟组表达高于对照组和XAV-939组,mirna-132模拟组+XAV-939组表达高于XAV-939组,差异有统计学意义(Pmirna-132可以促进牙周膜干细胞的成骨分化,抑制mirna-132表达从而抑制了人牙周膜干细胞的成骨分化,mirna-132调节牙周膜干细胞的成骨分化,其机制可能是通过Wnt/β-catenin信号通路来实现的。

关键词： mirna-132 Wnt/β-catenin 牙周膜干细胞成骨分化 ALP Runx2 OCN

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mirna-132在癫痫大鼠模型中的作用及意义

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延边大学医学学报 2023年第2期46卷 79-86页

作者：李艳芳郑微微高帆李佳芮李今子延边大学附属医院儿科吉林延吉133000

[目的]探讨mirna-132对颞叶癫痫大鼠脑组织海马神经元的凋亡及保护作用及其机制.[方法]选择雄性SD大鼠随机分为正常组、癫痫组、agomir-132组和antagomir-132组.建立模型前采用脑立体定位仪向大鼠海马区注射给予agomir-132和antagomir-1... 详细信息

[目的]探讨mirna-132对颞叶癫痫大鼠脑组织海马神经元的凋亡及保护作用及其机制.[方法]选择雄性SD大鼠随机分为正常组、癫痫组、agomir-132组和antagomir-132组.建立模型前采用脑立体定位仪向大鼠海马区注射给予agomir-132和antagomir-132,正常组和癫痫组注射给予生理盐水.取脑及海马组织,HE染色观察各组海马组织的病理学变化,利用实时荧光定量PCR法检测各组海马组织中mirna-132的含量,采用Western blot法及免疫组织化学染色法检测各组海马组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达水平.[结果]与正常组比较,癫痫大鼠mirna-132含量均升高;与癫痫组比较,agomir-132组mirna-132含量显著升高(P132组mirna-132含量明显降低(P132组及antagomir-132组海马组织中Bcl-2表达水平显著降低,Bax、Caspase-3表达水平均显著升高;与癫痫组比较,agomir-132组Bcl-2表达水平显著降低,Bax、Caspase-3表达水平均显著升高,antagomir-132组Bcl-2表达水平显著升高,Bax、Caspase-3表达水平均显著降低;相比较差异均有统计学意义(Pmirna-132在癫痫大鼠海马组织中含量显著升高,antagomir-132可能通过调控癫痫大鼠海马中的凋亡因子而减弱神经元细胞的损伤,agomir-132通过使凋亡因子增多来加速神经元细胞的凋亡.

关键词： mirna-132 癫痫海马凋亡

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mirna-132通过靶向调控Bmi-1表达影响鼻咽癌细胞对放射治疗敏感性

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新医学 2015年第7期46卷 428-432页

作者：谭洁媚李明毅梁颖广东省江门市中心医院中山大学附属江门医院肿瘤科江门529031 中山大学肿瘤防治中心内科广州510000

目的研究mirna-132对鼻咽癌细胞放射治疗敏感性的影响。方法使用mirna芯片技术,对比5-8F(亲代细胞)和5-8F/R(放射治疗抵抗细胞)中mirna表达水平差异,从中挑选差异最为明显的mirna-132作后续研究。使用流式细胞仪检测mirna-132对细胞凋... 详细信息

目的研究mirna-132对鼻咽癌细胞放射治疗敏感性的影响。方法使用mirna芯片技术,对比5-8F(亲代细胞)和5-8F/R(放射治疗抵抗细胞)中mirna表达水平差异,从中挑选差异最为明显的mirna-132作后续研究。使用流式细胞仪检测mirna-132对细胞凋亡的影响。使用双荧光报告素酶、蛋白免疫印迹法等方式验证mirna-132的下游靶基因。结果 mirna-132可以促进鼻咽癌5-8F/R细胞的凋亡,提高其对放射治疗的敏感性,还可以抑制其体内的生长能力。mirna-132可以抑制Bmi-1信使RNA和蛋白质表达水平。结论 mirna-132可通过抑制下游靶基因Bmi-1来发挥其放射治疗增敏功能。

关键词： mirna-132 Bmi-1 鼻咽癌放射治疗增敏

mirna-132靶向SCN2A调控对癫痫大鼠海马区细胞凋亡的影响

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贵州医药 2021年第4期45卷 510-512,F0003页

作者：李顺钧浦苏颖王慧李云霞上海市徐汇区大华医院神经内科上海200237 上海市同济医院神经内科上海200065

目的研究mirna-132靶向SCN2A调控对癫痫大鼠海马区细胞凋亡的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠60只,随机分为模型组、过表达组、沉默组各10只。细胞转染,建立沉默组、过表达组。荧光定量检测mirna-132、SCN2A表达,MTT检测细胞增殖能力,... 详细信息

目的研究mirna-132靶向SCN2A调控对癫痫大鼠海马区细胞凋亡的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠60只,随机分为模型组、过表达组、沉默组各10只。细胞转染,建立沉默组、过表达组。荧光定量检测mirna-132、SCN2A表达,MTT检测细胞增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2、Bax、Akt表达。结果沉默组SCN2A mRNA表达高于模型组和过表达组(Pmirna-132沉默能够增强SCN2A表达,mirna-132通过靶向调控SCN2A,能促进癫痫大鼠海马区细胞增殖,抑制其凋亡。

关键词： mirna-132 SCN2A 癫痫海马区细胞凋亡

mirna-132上调p75ECD和Trk A抑制Aβ对大鼠海马CAI区神经元毒性作用

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解剖科学进展 2021年第1期27卷 71-74页

作者：王延辉姜浩威刘慧郑敏沈阳医学院附属第三医院神经内科辽宁沈阳110034

目的探讨mirna-132调控p75ECD和TrkA抑制Aβ对大鼠海马CAI区神经元损伤的机制。方法将60只健康大鼠分为对照组、Aβ组和miR-132组,每组20只。用免疫组化检测大鼠海马区Trk A的阳性细胞数量;CCK8检测神经细胞活力;TUNEL检测神经细胞凋亡... 详细信息

目的探讨mirna-132调控p75ECD和TrkA抑制Aβ对大鼠海马CAI区神经元损伤的机制。方法将60只健康大鼠分为对照组、Aβ组和miR-132组,每组20只。用免疫组化检测大鼠海马区Trk A的阳性细胞数量;CCK8检测神经细胞活力;TUNEL检测神经细胞凋亡程度;Western blot检测p75ECD、Trk蛋白表达,比较各组差异性。结果 Aβ组海马CAI区Trk A细胞数与对照组相比明显减少,而miR-132组与Aβ组相比明显增多;Aβ组较对照组神经元活性减弱,神经元损伤严重,修复能力缓慢,miR-132组较Aβ组神经元活性增强,神经元损伤程度下降;Aβ组与对照组相比神经元凋亡程度严重,miR-132组较Aβ组神经元凋亡程度减轻;Aβ组与对照组相比神经元中p75ECD、Trk A蛋白表明下降,miR-132组较Aβ组神经元中p75ECD、Trk A蛋白水平上升。结论 mirna-132过表达可激活p75ECD和Trk A,降低Aβ对神经元的损伤。

关键词： mirna-132 p75ECD 阿尔茨海默病 TrKA 大鼠

mirna-132 在阿尔茨海默病中的调控作用及机制

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2021年第9期 263-265页

作者：陈欣宇李娜杨翰林黑龙江省齐齐哈尔市第一医院神经内科黑龙江齐齐哈尔161000

探讨 mirna-132 对阿尔茨海默病发生和发展的影响及可能的调控机制。方法: 用 TargetScan 筛选潜在的基因,并用荧光素酶报告实验进一步确认。STRING 分析β-淀粉样前体蛋白与Cuererin 蛋白之间的相互作用网络。以 APPswe/PS1dE9双转基... 详细信息

探讨 mirna-132 对阿尔茨海默病发生和发展的影响及可能的调控机制。方法: 用 TargetScan 筛选潜在的基因,并用荧光素酶报告实验进一步确认。STRING 分析β-淀粉样前体蛋白与Cuererin 蛋白之间的相互作用网络。以 APPswe/PS1dE9双转基因小鼠和年龄匹配的野生型对照为研究模型, 实时定量 PCR 分析 APPswe/PS1ΔE9 转基因小鼠和同龄野生型小鼠脑组织中的 miR-132 和 CLU 的 mRNA 表达水平。免疫印迹进一步检测Clusterin 蛋白水平。用脂质体转染的方法建立阿尔兹海默病细胞系模型,同时分别进行miR-132 模拟和miR-132 抑制处理。进一步用 ELISA 分析 Clusterin 和 APP 的蛋白水平。结果:荧光素酶报告实验结果显示 miR-132 结合 CLU 基因的 3’-UTR 区。蛋白-蛋白相互作用网络分析结果提示 Clusterin 蛋白与β-淀粉样前体蛋白(APP ) 蛋白直接结合。实时定量 PCR分析APPswe/PS1ΔE9 转基因小鼠和同龄野生型小鼠脑组织样本,结果显示AD 组小鼠的脑组织中 miR-132 基因表达水平较对照组低,而 CLU 基因的表达水平显著增加。同时,AD 小鼠的大脑皮层组织中 CLU 蛋白水平增加。AD 细胞模型的结果显示,过表达 miR-132 或抑制 miR-132 的表达影响 CLU 和 APP 蛋白的表达水平。上述结果表明,CLU 和 APP 蛋白表达水平与 miR-132 的水平呈负相关。结论:过表达 miR-132 从而下调 CLU 的表达水平,可能改善阿尔兹海默病的症状。

关键词：阿尔茨海默病 mirna-132 Cluererin β-淀粉样前体蛋白靶向调控

mirna-132抑制人骨肉瘤细胞的增殖和侵袭能力

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中国组织化学与细胞化学杂志 2021年第1期30卷 33-37页

作者：王晓敏刘瑞雪杨杰于梦雨付刚潍坊市益都中心医院病理科青州262500 潍坊医学院附属医院口腔科潍坊261000 潍坊市益都中心医院泌尿外科青州262500

目的观察mirna-132在不同骨肉瘤细胞系中的表达及对骨肉瘤细胞生物学行为的影响,探讨mirna-132在人骨肉瘤发生发展中的作用。方法通过荧光定量PCR技术检测不同骨肉瘤细胞系U2OS、MG63、143B中mirna-132的表达情况,使用pRFP-mirna-132-d... 详细信息

目的观察mirna-132在不同骨肉瘤细胞系中的表达及对骨肉瘤细胞生物学行为的影响,探讨mirna-132在人骨肉瘤发生发展中的作用。方法通过荧光定量PCR技术检测不同骨肉瘤细胞系U2OS、MG63、143B中mirna-132的表达情况,使用pRFP-mirna-132-down质粒转染U2OS细胞、pRFP-mirna-132-up质粒转染143B细胞,使用EdU检测肿瘤细胞增殖状态,Transwell小室检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力。结果在3种骨肉瘤细胞系U2OS、MG63、143B中,mirna-132的表达依次下降(U2OS>MG63>143B);降低mirna-132在U2OS细胞中的表达促进细胞的增殖和侵袭能力,增加mirna-132在143B细胞中的表达抑制细胞的增殖和侵袭能力。结论mirna-132可能通过抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭调节骨肉瘤的发生发展。

关键词： mirna-132 骨肉瘤增殖迁移

利拉鲁肽对肥胖相关性高血压患者mirna-132表达的影响及临床疗效

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实用中西医结合临床 2022年第16期22卷 1-4,9页

作者：邓志生邹文彭勇江西省南昌市第一医院南昌330008

目的:探讨mirna-132在肥胖相关性高血压患者中的表达及临床意义,分析利拉鲁肽治疗肥胖相关性高血压对mirna-132表达的影响及临床疗效。方法:选取2021年1~10月医院收治的60岁及以上被确诊为肥胖相关性高血压患者50例为肥胖相关性高血压... 详细信息

目的:探讨mirna-132在肥胖相关性高血压患者中的表达及临床意义,分析利拉鲁肽治疗肥胖相关性高血压对mirna-132表达的影响及临床疗效。方法:选取2021年1~10月医院收治的60岁及以上被确诊为肥胖相关性高血压患者50例为肥胖相关性高血压组和健康人群50例为健康人群组。采用实时荧光定量PCR方法检测血清mirna-132水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析mirna-132对肥胖相关性高血压的诊断价值。再将50例肥胖相关性高血压患者随机分为对照组与观察组,各25例。对照组给予氨氯地平片治疗,观察组在对照组治疗基础上给予利拉鲁肽注射液治疗。比较肥胖相关性高血压组和健康人群组mirna-132表达水平,对照组与观察组mirna-132表达水平、体质量指数(BMI)、血压、生化指标及临床疗效。结果:肥胖相关性高血压组血清mirna-132的表达水平显著低于健康人群组(Pmirna-132诊断肥胖相关性高血压的曲线下面积为0.945,灵敏度为94.0%,特异度为78.0%。治疗6个月后,观察组mirna-132表达水平与对照组相比,明显升高(P0.05)。结论:mirna-132在肥胖相关性高血压患者血清中表达降低,对其具有诊断价值;利拉鲁肽可显著增加肥胖相关性高血压患者mirna-132的表达,具有减肥、降压及保护心血管效应。

关键词：肥胖相关性高血压利拉鲁肽 mirna-132 诊断治疗