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响应内生真菌侵染的地黄mir166家族鉴定及胁迫下的表达分析

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中国实验方剂学杂志 2023年第2期29卷 133-140页

作者：朱畇昊许姣张梦佳董诚明时博河南中医药大学药学院呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心郑州450046

目的:为了鉴定地黄mir166基因家族的成员,明确其家族成员在逆境下的响应模式。方法:采用高通量测序技术获得小RNA数据库,筛选地黄mir166家族成员,利用RNAfold分析其前体结构,DNAMAN和MEGA分别进行保守性和进化性分析;采用TargetFinder... 详细信息

目的:为了鉴定地黄mir166基因家族的成员,明确其家族成员在逆境下的响应模式。方法:采用高通量测序技术获得小RNA数据库,筛选地黄mir166家族成员,利用RNAfold分析其前体结构,DNAMAN和MEGA分别进行保守性和进化性分析;采用TargetFinder软件预测地黄mir166家族成员的靶基因;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分析其家族成员在响应非生物胁迫中的表达模式。结果:鉴定到5条mir166,前体都具有完整的茎环结构;序列比对结果显示前体和成熟体保守性均较高;预测到48个mir166的靶基因,主要注释到HD-ZIPⅢ家族转录因子;表达特性分析表明,地黄经过内生真菌侵染后,mir160均呈上调表达,在非生物胁迫下其家族成员的表达情况不同,其中rgl-mir166b-5p在旱涝处理组及高低温处理中表达量分别都较空白组显著下调,与在内生真菌侵染下表达模式相反。结论:该研究结果初步明确了地黄mir166家族在响应生物胁迫和非生物胁迫下的表达模式,为地黄今后育种改良及相关研究提供理论依据。

关键词：地黄 mir166 实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR) 胁迫表达

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mir166在龙眼体胚发生早期中的研究

miR166在龙眼体胚发生早期中的研究

作者：张清林福建农林大学

学位级别：硕士

龙眼(Dimocarpus longan Lour.)属于无患子科龙眼属常绿木本果树,具有较高的营养价值与药用价值。龙眼胚胎发育是影响果实品质与产量的重要因素;然而龙眼胚胎发育的研究存在诸多不利因素影响,而龙眼体胚发生系统作为木本植物优良模式体... 详细信息

龙眼(Dimocarpus longan Lour.)属于无患子科龙眼属常绿木本果树,具有较高的营养价值与药用价值。龙眼胚胎发育是影响果实品质与产量的重要因素;然而龙眼胚胎发育的研究存在诸多不利因素影响,而龙眼体胚发生系统作为木本植物优良模式体系,是龙眼胚胎发育研究的良好替代材料。mir166家族是植物中特有且保守的一类mirNA,在植物生长发育、营养相变及逆境响应等方面发挥着重要的作用。因此,mir166家族在龙眼体胚发生早期中如何调控体胚的发生进程,如何通过对mir166的调控而实现对合子胚实际生产上的应用具有重要而积极的指导意义。本研究借助龙眼体胚早期发生系统,对龙眼mir166进行序列分析,初级体克隆,顺式作用元件分析;并对mir166前体及mir166成熟体进行体胚早期不同阶段及不同激素处理的胚性愈伤组织中的表达模式分析;研究龙眼体胚早期mir166a.2、mir166c和mir166f过表达和抑制表达对体胚形态影响及对应靶标和eTM的表达模式;最后利用pri-mir166编码的小肽(miPEP166 S338)处理下龙眼胚性愈伤组织,以期为mir166调控合子胚的发育提供可用于实践的方法论,同时更为实现人工调控mir166的表达在实际农艺生产中的应用奠定基础。主要研究结果如下:1 龙眼mir166家族的分子进化特性及不同组织部位时空表达分析为了解mir166基因家族的分子进化特性及其在龙眼不同组织部位的表达规律,对龙眼mir166家族成员的成熟体和前体序列及其进化、前体二级结构预测、靶基因预测以及时空表达模式进行了分析。结果表明:龙眼mir166家族含有12条成熟体序列和7个前体序列(pre-mirNA)。Mfold预测显示pre-mir166家族7个成员的序列均能形成典型稳定的茎环二级结构,成熟序列的碱基保守性高,其他位置的则保守性减弱;它们的最小折叠自由能(△G)在-35.30～-83.30 kal·mol-1。系统发育进化树分析显示,龙眼pre-mir166家族与葡萄、碧桃的pre-mir166亲缘关系更为接近。靶基因预测显示,龙眼mir166基因家族靶基因包括同源异型域-亮氨酸拉链蛋白、三角状五肽重复结构蛋白、假定蛋白、DNA指导的RNA聚合酶III亚单位RPC2、紫外线B受体等。红核子中13个器官实时荧光定量PCR显示,pre-mir166家族不同成员在龙眼生长发育进程中均有表达且表达模式不尽相同,在龙眼生长发育中可能具有分工,又有功能上的互补性,通过调控其靶标在龙眼叶、花的发育、以及果实器官的发育中可能有重要的功能。为进一步鉴定龙眼mir166在生长发育中的作用奠定基础。2龙眼mir166初级体克隆及生物信息学分析在上述基础上,对龙眼体胚发生早期mir166必基因的7条初级体(pri-mir166)进行克隆,确认其转录起始位点,并预测其潜在的smORF;利用龙眼基因组数据库提取其启动子序列,预测其含有的顺式作用元件。结果表明:获得3条初级体,pri-mir166 S53、pri-mir166 S78和pri-mir166S338,分别检测到1、3、1个转录起始位点,对应的碱基长度是317 bp、510(374和372)bp、436 bp;对其进行潜在smORF翻译,pri-mir166 S53编码一条长13个氨基酸序列的miPEP166S53(MLCFVDALFLIST);pri-mir166S78 三个不同转录起始位点共同编码一条29个氨基酸的miPEP166-78(MLSGSRTLLLIIFCRSNLSIQINSGSIIC);pri-mir166S338 编码一条长 53 个氨基酸序列的 miPEP166 S338(MTNSISNSPLLVPSFYIYLS FFFFFFSISLLWGMLSGSRPFAYKLSSWHHLLE)。利用生物信息学软件分析这3条基因的启动子序列发现,3条初级体转录起始位点上游-30 bp处均含有TATA-box,在TATA框上游-30～60 bp处均有CAAT-box。启动子还含有大量光响应元件(ACE、spl、Box4和chs-CMA2b等)、激素响应元件(生长素、脱落酸、乙烯和茉莉酸甲酯等)、逆境胁迫等特异作用元件(HSE、LTR、WUN-motif、MBS、Box-Wl 和 02-site 等)。3 pre-mir166和mir166在龙眼体胚发生早期不同阶段及不同激素处理下的表达模式分析利用实时荧光定量PCR的方法,对龙眼体胚发生早期不同阶段及不同激素处理下的胚性愈伤组织中的3个前体成员(pre-mir166 S53、pre-mir166S78、pre-mir166S338)及对应的 5 个成熟体成员(mir166a.2、mir166c、mir166e、mir166

关键词：龙眼 mir166 进化特性靶基因 eTMs 表达模式短肽

mir166及其靶基因HD-Zip在水稻镉胁迫应答中的功能研究

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miR166及其靶基因HD-Zip在水稻镉胁迫应答中的功能研究

作者：吕冰中国计量学院

学位级别：硕士

水稻是世界上主要的粮食作物,近年来重金属污染已成为严重影响我国农田生态系统和水稻安全生产的重大问题之一。micro RNA(mi RNA)是一类新型的调控基因表达的小分子RNA,在植物对重金属等多种逆境胁迫应答过程中发挥重要的调节作用。其... 详细信息

水稻是世界上主要的粮食作物,近年来重金属污染已成为严重影响我国农田生态系统和水稻安全生产的重大问题之一。micro RNA(mi RNA)是一类新型的调控基因表达的小分子RNA,在植物对重金属等多种逆境胁迫应答过程中发挥重要的调节作用。其中,mi R166通过调控HD-Zip转录因子的表达,参与多种植物对干旱、冷害以及重金属等胁迫的响应过程。本实验以实验室前期研究分离得到的、镉胁迫相关的mi R166及其靶基因HD-Zip作为研究对象,对35S:mir166m和35S:HD-Zip过表达转基因水稻T2代的纯合后代进行鉴定和mi R166的时序表达模式分析。Cd胁迫实验中,分析了对照组与Cd处理组的mi R166m和HD-Zip的表达量、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、Cd含量、Cd的亚细胞分布等指标。通过比较Cd处理组和对照组多个指标的差异,发现过表达mi R166m抑制了Cd在根部的吸收和Cd由根到地上部的转运过程,从而提高了水稻对Cd的耐受性;HD-Zip过表达增强了水稻对Cd的吸收及向地上部的转运过程。以上结果表明了mi R166对其靶基因的负调控及其在水稻Cd胁迫响应中的具体作用,为探明水稻mi R166及靶基因对Cd胁迫的应答调控机制奠定了基础。

关键词： mir166 HD-Zip 水稻镉胁迫吸收转运

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玉米mir166基因家族的进化与功能研究

南方农业学报 2015年第8期46卷 1345-1349页

作者：王艳芳赵彦宏刘林德周瑞莲鲁东大学生命科学学院山东烟台264025 鲁东大学农学院山东烟台264025

【目的】分析玉米mir166基因家族的序列特征、分子进化及靶基因等,了解mir166基因家族在玉米生长发育与逆境胁迫响应中的调控作用。【方法】运用生物信息学方法在mi RBase中搜索zma-mir166基因家族的序列,用BLAST搜索工具进行基因定位;... 详细信息

【目的】分析玉米mir166基因家族的序列特征、分子进化及靶基因等,了解mir166基因家族在玉米生长发育与逆境胁迫响应中的调控作用。【方法】运用生物信息学方法在mi RBase中搜索zma-mir166基因家族的序列,用BLAST搜索工具进行基因定位;采用Clustal W2软件进行多序列比对,用MEGA 6.0构建zam-mir166家族的系统发育进化树;利用ps RNATarget软件对zma-mir166基因家族的靶基因进行预测。【结果】通过搜索,在玉米中找到14个zma-mir166基因,并获得其对应的14个前体序列及由其产生的26个成熟mi RNA序列。zma-mir166基因家族在产生成熟mi RNA的位置高度保守,其他位置则保守性减弱。基因定位结果发现,zma-mir166基因家族的14个成员分布在染色体1、3、4、5、6、7等6条染色体上,其中以染色体1上zma-mir166基因最多,共有5个。进化分析结果表明,14个zma-mir166基因家族成员分别处于3个进化分支,而同处于一条染色体上的成员的亲缘关系较远。对zam-mir166基因家族的靶基因进行预测,发现zma-mir166基因家族靶基因功能涉及发育调控蛋白家族、胁迫相关蛋白、光系统I作用中心亚基、转座子插入位点等。【结论】zam-mir166基因家族序列保守性较高,具有明显的家族特征与相似的功能,在玉米生长发育和胁迫响应等生物过程中发挥广泛而重要的调控作用。

关键词：玉米 mir166 基因家族分子进化靶基因预测

Sly-mir166抑制HD-Zip Ⅲ转录因子调控番茄果实形成及干旱抗性

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Sly-miR166抑制HD-Zip Ⅲ转录因子调控番茄果实形成及干旱抗性

作者：向威重庆大学

学位级别：硕士

植物mirNA参与调控多种生理进程,包括根、茎、叶、花和果实的发育以及对逆境胁迫的响应。mir166及其靶基因主要参与茎尖分生组织SAM(shoot apical meristem)发育、叶极性建立和花形态建成,还参与热应激、冷害、盐胁迫和干旱等逆境胁迫... 详细信息

植物mirNA参与调控多种生理进程,包括根、茎、叶、花和果实的发育以及对逆境胁迫的响应。mir166及其靶基因主要参与茎尖分生组织SAM(shoot apical meristem)发育、叶极性建立和花形态建成,还参与热应激、冷害、盐胁迫和干旱等逆境胁迫响应。本研究以Micro Tom番茄为研究材料,通过生物信息学、遗传学、分子生物学和生理生化分析等技术研究了mir166及其靶基因在番茄SAM发育和果实形成以及干旱胁迫响应中的功能,主要研究结果如下:(1)通过生物信息学分析,获得9条Sly-mir166前体序列,进一步通过5′-RACE鉴定了其6个靶基因Sl HZ06、Sl HZ09、Sl HZ23、Sl HZ38、Sl HZ49和Sl HZ51,均属于HD-ZipⅢ转录因子家族。靶基因的启动子中主要包含参与植物激素响应、植物生长发育和植物胁迫响应三类顺式作用元件。组织表达模式分析发现靶基因在SAM及花器官中有较高的表达,暗示其可能对番茄SAM和花器官的发育具有重要的调控作用。(2)超表达Sly-mir166导致番茄植株矮化、SAM提前分化、花器官数量增多和果实发育异常,Sly-mir166表达量高的株系表型变化强烈,且基本形成无籽果实,而表达量相对较低的株系表型变化较小,且能产生种子。通过创制CRISPR/Cas9突变体,发现KO-Sl HZ23和KO-Sl HZ51突变体与Sly-mir166超表达植株在花和果实上具有相似的表型,表明超表达Sly-mir166可能是通过降低Sl HZ23和Sl HZ51的表达量影响番茄SAM发育和果实形成。(3)通过进一步实验发现,Sl HZ23和Sl HZ51定位于细胞核,具有转录自激活活性且受到生长素(IAA)和赤霉素(GA)信号的诱导表达。(4)通过qRT-PCR检测,发现超表达Sly-mir166和敲除Sl HZ23影响了包括调控SAM分化的CLV-WUS信号相关基因在内的多个相关基因的表达。进一步对敲除Sl HZ23突变体的子房进行转录组测序发现,富集了多条与果实形成相关的GO途径;同时影响了多个与生长素和赤霉素信号、细胞发育、细胞壁形成、SAM发育及果实形成相关基因的表达。(5)超表达Sly-mir166提高了番茄的干旱抗性。干旱胁迫下Sly-mir166超表达植株的复水存活率和相对含水量都显著高于野生型,叶片气孔状态分析发现,超表达Sly-mir166显著降低了气孔密度。生理指标检测表明,超表达Sly-mir166减少了植株体内干旱胁迫诱导的氧化活性物质的积累,并提高了抗氧化物酶的活力。同时,q RT-PCR检测发现,超表达Sly-mir166影响了多个干旱胁迫相关基因的表达及其对干旱胁迫的响应,且干旱胁迫后Sly-mir166的靶基因Sl HZ06和Sl HZ38在超表达植株中的差异变化量显著底于野生型,推测Sly-mir166可能是通过调控这两个靶基因的表达,从而提高番茄植株的干旱抗性。综上所述,本研究鉴定了Sly-mir166和其靶基因的生物学功能,明确了它们在番茄SAM发育、果实形成及干旱抗性中的重要作用。研究结果为解析mir166-HD-ZipⅢ模块调控植物生长发育和逆境抗性的分子机制奠定了理论基础。

关键词：番茄 mir166 茎尖分生组织果实形成干旱胁迫

百合体胚发生过程中mir166及其靶基因的鉴定与表达分析

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百合体胚发生过程中miR166及其靶基因的鉴定与表达分析

作者：杨越沈阳农业大学

学位级别：硕士

百合体细胞胚具有发生数量多、繁殖率高、易萌发成苗等优点,但同时也面临着胚性能力不易保存,繁殖速率慢等难题。研究百合体细胞胚的发生机制,能够为百合工厂化快繁、转基因育种、突变体筛选、人工种子研制等研究提供理论依据与实践意... 详细信息

百合体细胞胚具有发生数量多、繁殖率高、易萌发成苗等优点,但同时也面临着胚性能力不易保存,繁殖速率慢等难题。研究百合体细胞胚的发生机制,能够为百合工厂化快繁、转基因育种、突变体筛选、人工种子研制等研究提供理论依据与实践意义。蛋白质的合成过程实际上就是基因表达的过程,而mirNA能够通过引导靶基因mRNA降解、抑制翻译等途径负向调控植物基因的表达。因此,研究百合体胚发生过程中mirNA与靶基因的表达模式,有助于揭示百合体胚发生的分子调控机制,从而解决体胚生产过程中出现的一系列难题,本试验对百合体胚发生过程中的mir166及其靶基因进行了鉴定与表达分析,并得出以下主要结论:***-mir166a/b/c和lda-mir166a/b/c的克隆及其靶基因预测采用特异的茎环引物反转录方法(Stem-1oop RT PCR),克隆得到了细叶百合(Lilium ***.)lpu-mir166a、lpu-mir166b、lpu-mir166c 以及兰州百合(Lilium davidii ***)lda-mir166a、lda-mir166b、lda-mir166c 成熟体序列并预测得到了相应的靶基因,lpu-mir166a/lda-mir166a 的靶基因为 LMBR1,lpu-mir166b/lpu-mir166c的靶基因为 LpIDD1,lda-mir166b/lda-mir166c 的靶基因为LdHD-ZIP Ⅲ。2.鉴定mir166及其靶基因的作用位点通过RLM-5'RACE技术鉴定mir166及其靶基因的作用位点,结果表明lpu-mir1 66a/lda-mir 166a的切割位点有一个且在该位点的切割频率为10/10;lpu-mir166b/lpu-mir166c的切割位点有一个且在该位点切割频率为8/10;lda-mir166b/lda-mir166c的切割位点有一个且在该位点切割频率为10/10。***166及其靶基因在百合体胚发生过程中的表达分析lpu-mir166a/lpu-mir166b/lpu-mir166c与其靶基因的表达模式整体呈负相关关系,其中lpu-mir166a在胚性保存阶段几乎不表达,在球形胚中的表达量出现峰值,随着体胚的成熟,lpu-mir166a的表达量逐渐下降,其靶基因LpLMBR1的表达量则显著上升;lpu-mir1 66b/lpu-mir1 66c在胚性保存阶段表达量很低,在球形胚中的表达量显著上升,随着体胚的成熟,lpu-mir166c的表达量呈现逐步上升趋势,lpu-mir166b的表达量呈现出先降低后升高的趋势,而其靶基因LpIDD1的表达量则呈现先升高后降低的趋势;lda-mir166a与其靶基因LdLMBR1的表达模式整体呈负相关关系,随着体胚的成熟,lda-mir166a的表达量呈逐步上升趋势,在子叶形胚时期达到峰值,而LdLMBR1的表达量没有明显变化;lda-mir166b/lda-mir166c在胚性保存时期表达量最低,随着体胚的发育,lda-mir166c的表达量逐渐升高,lda-mir166b的表达量先升后降再升,LdHD-ZIP Ⅲ的表达量先降后升再降,说明lda-mir166b对LdHD-ZIP Ⅲ起主要调控作用。

关键词： mir166 体细胞胚细叶百合兰州百合 LMBR1

mir192、mir166及其靶基因HD-Zip对水稻镉胁迫应答的功能研究

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miR192、miR166及其靶基因HD-Zip对水稻镉胁迫应答的功能研究

作者：刘海丽中国计量学院

学位级别：硕士

microRNA （mirNA）是一类长度约为21－27核苷酸的小分子非编码RNA，广泛存在于真核生物中。它在转录后水平负调控靶基因的表达，因而在植物生长发育、激素分泌与信号转导和逆境应答等过程中发挥重要作用。mirNA的靶基因通常是调控植物... 详细信息

microRNA （mirNA）是一类长度约为21－27核苷酸的小分子非编码RNA，广泛存在于真核生物中。它在转录后水平负调控靶基因的表达，因而在植物生长发育、激素分泌与信号转导和逆境应答等过程中发挥重要作用。mirNA的靶基因通常是调控植物生长发育和信号转导通路中的转录因子，表明它处于基因表达调控网络的核心位置。本研究以粳稻中花11为材料，以前期利用mirNA芯片分离得到的mir166和mir192作为研究对象，通过构建mir166和mir192前体序列的过表达载体获得转基因水稻株系，对转基因水稻的镉胁迫研究证实过表达mir192株系增强了种子萌发时对镉的敏感性，过表达mir166株系增强了种子萌发和幼苗对镉的耐性。利用生物信息学对它们的靶基因的预测分析获得ATP结合蛋白（ATP binding protien，ABC）为mir192的靶基因和同源异型域亮氨酸拉链蛋白（Homeodomain leucine zipper protein，HD-Zip）为mir166的靶基因。利用荧光定量PCR技术对镉胁迫下野生型中花11和转基因水稻中mir166和HD-Zip的表达量进行检测分析，验证了mir166对HD-Zip的负调控。在以上工作的基础上构建了HD-Zip的过表达载体和RNAi表达载体，并利用农杆菌介导的遗传转化获得转基因水稻植株，为进一步探明mirNA及其靶基因调控水稻抗镉的分子机制奠定了基础。

关键词：水稻 mir192 mir166 靶基因镉转基因

光皮桦mir166及其靶基因HD-ZIP Ⅲ转录因子家族成员鉴定与分析

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光皮桦miR166及其靶基因HD-ZIP Ⅲ转录因子家族成员鉴定与分析

作者：刘文哲浙江农林大学

学位级别：硕士

光皮桦(Betula luminifera)是主要分布在我国南方的珍贵用材树种,材性优良,是林木遗传育种研究的良好材料。mir166在植物顶端分生组织发育、维管组织的形成、胚的发育中具有重要作用,其对靶基因HD-ZIP Ⅲ转录因子的调控是维管组织发育... 详细信息

光皮桦(Betula luminifera)是主要分布在我国南方的珍贵用材树种,材性优良,是林木遗传育种研究的良好材料。mir166在植物顶端分生组织发育、维管组织的形成、胚的发育中具有重要作用,其对靶基因HD-ZIP Ⅲ转录因子的调控是维管组织发育的重要途径。鉴定mir166及HD-ZIP Ⅲ转录因子基因家族成员,并研究其功能,可为光皮桦木材形成机制和遗传改良提供重要的理论基础。本研究以光皮桦为材料,对mir166及其靶基因HD-ZIP Ⅲ的家族成员进行了鉴定,并通过表达及转基因分析对其功能进行了研究,获得以下主要结果。1.根据光皮桦转录组及部分基因组数据,鉴定并克隆得到8个mir166前体序列,命名为Blmir166almir166g,序列长为0.3Kb.4Kb。对8个mir166和靶基因Bl HDZ Ⅲ进行了基因结构、顺式作用元件与系统进化等生物信息学分析,结果显示Blmir166b、Blmir166c与Blmir166e含有1个内含子,其它mir166在基因组上则不含内含子。5个靶基因除了Bl HDZ1有19个外显子,其他Bl HD-ZIP Ⅲ基因都由18个外显子组成。对所有基因的顺式元件统计显示,光启动元件出现次数最多。系统进化分析表明,光皮桦8个mir166成熟体全部在同一个分支,而在前体序列比对中,8个pre-mir166分布在3个不同的亚组。2.组织表达特性分析表明,在所有mir166中,只有Blmir166a和Blmir166h在韧皮部表达量高,可能与其含有维管束发育相关元件有关;而Blmir166d、Blmir166e的表达十分相似,都是在芽中有高丰度的转录水平;Blmir166b、Blmir166c和Blmir166f的表达较为相似,在雄花中表达量高;Blmir166g则是在芽、雌花、雄花等组织都有表达。我们发现所有Bl HD-ZIP Ⅲ基因在韧皮部、种子和根中表达量都很低。Bl HDZ2和Bl HDZ5的表达情况相似,在木质部中的表达量远高于其他组织,暗示其参与了木质部的发育。Bl HDZ3和Bl HDZ4在茎中的表达丰度很高,且成熟茎段的明显高于幼嫩茎段。Bl HDZ1则在顶端分生组织中表达丰度高,表明其参与到了分生组织的发育中。此外,发现部分mir166与HD-ZIP Ⅲ间的表达呈现负调控。如Blmir166a和Blmir166h在木质部中几乎不表达而在韧皮部中表达量高,而靶基因Bl HDZ2和Bl HDZ5的表达正好相反。这表明这些基因在木质部与韧皮部的生长发育中存在负调控关系。*** HD-ZIP Ⅲ基因在不同激素处理下的表达情况进行研究发现,5个Bl HD-ZIP Ⅲ基因在0.1m M浓度的IAA处理下都明显的受到诱导调控,其表达量与对照相比显著上调。这暗示Bl HDZⅢ基因与激素IAA参与了调控木质部的发育。Bl HDZ1、Bl HDZ3和Bl HDZ4分别在IAA、ET和GA的诱导下上调明显,可能与所含激素类相关顺式元件有关。Bl HDZ2和Bl HDZ5只有在0.1m M IAA处理下表达量有所增加,而在其他激素处理下变化不大。4.构建了5个Bl HDZⅢ基因的超表达载体并利用农杆菌介导法转化拟南芥,在分子水平进行了目的基因和报告基因的PCR检测,成功将Bl HDZ1、Bl HDZ2、Bl HDZ4和Bl HDZ5转到拟南芥中,其中Bl HDZ1和Bl HDZ5得到T2代各8个株系,Bl HDZ2和Bl HDZ4得到T2代各2个株系。发现与拟南芥野生型相比,Bl HDZ4和Bl HDZ5在表型性状上有一定的差异,这些基因的具体功能还有待于后续的深入研究。

关键词：光皮桦 mir166 Bl HDZⅢ 表达分析激素转基因

马铃薯干旱胁迫下内参基因筛选及mir166功能研究

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马铃薯干旱胁迫下内参基因筛选及miR166功能研究