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mir-766-3p调控肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制

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分子诊断与治疗杂志 2020年第12期12卷 1621-1625,1630页

作者：郭喜喜王振华胡红军张立国河南省新乡市中心医院胸瘤二科河南新乡453000

目的探讨微小RNA(mir-766-3p)对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法采用qRT-pCR与免疫组化分别检测肺癌组织及癌旁组织中mir-766-3p、KIFC1的表达。体外培养肺癌细胞A549,利用脂质体试剂Lipofectamine2000将mir-766-3p m... 详细信息

目的探讨微小RNA(mir-766-3p)对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法采用qRT-pCR与免疫组化分别检测肺癌组织及癌旁组织中mir-766-3p、KIFC1的表达。体外培养肺癌细胞A549,利用脂质体试剂Lipofectamine2000将mir-766-3p mimics、si-KIFC1转染至A549细胞,MTT检测细胞活力;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证mir-766-3p与KIFC1的靶向关系。结果 mir-766-3p在肺癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(ppmir-766-3p过表达与抑制KIFC1的表达后,细胞活力显著降低,迁移与侵袭细胞数显著减少,差异有统计学意义(pmir-766-3p可通过降低肺癌细胞中KIFC1的蛋白水平从而抑制细胞增殖、迁移及侵袭能力。

关键词： mir-766-3p KIFC1 肺癌增殖迁移侵袭

mir-766-3p下调Mipu1表达促进小鼠单核巨噬细胞凋亡

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生命的化学 2022年第1期42卷 128-134页

作者：王珏谭瑶秦建宁赵思敏万恒佺温逸凡张弛屈顺林南华大学衡阳医学院病理生理学教研室心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地衡阳421001 邵阳学院附属第二医院邵阳422000

mir-766-3p可以调控细胞凋亡,但其在动脉粥样硬化中对巨噬细胞的凋亡机制尚不清楚。本研究构建了高脂喂养的ApoE敲除小鼠动脉粥样硬化模型,采用定量pCR检测了动脉粥样硬化组织中mir-766-3p的表达水平。结果发现,mir-766-3p在小鼠动脉粥... 详细信息

mir-766-3p可以调控细胞凋亡,但其在动脉粥样硬化中对巨噬细胞的凋亡机制尚不清楚。本研究构建了高脂喂养的ApoE敲除小鼠动脉粥样硬化模型,采用定量pCR检测了动脉粥样硬化组织中mir-766-3p的表达水平。结果发现,mir-766-3p在小鼠动脉粥样硬化组织中表达上调。生物信息学预测发现,Mipu1可能为mir-766-3p调控的潜在靶基因。采用荧光素酶报告基因分析验证了mir-766-3p对Mipu1的调控作用。采用定量pCR和Western blot检测mir-766-3p对Mipu1表达的调控作用,采用流式细胞仪和Western blot检测mir-766-3p调控Mipu1对RAW264.7细胞凋亡的影响。结果发现,mir-766-3p可促进RAW264.7细胞凋亡,其机制可能与其下调Mipu1表达有关。本文初步探索了mir-766-3p对巨噬细胞的凋亡调控在动脉粥样硬化发病中的作用机制,为进一步防治动脉粥样硬化提供了新思路。

关键词：动脉粥样硬化 mir-766-3p Mipu1 细胞凋亡

沉默HOXA11-AS靶向mir-766-3p对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

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医学分子生物学杂志 2023年第1期20卷 7-13页

作者：庄媛黄莺李延辉李悦王位坐辽宁省金秋医院心内四科沈阳市110015 中国医科大学附属四院神经外科沈阳市110032

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源异形盒基因A11反义RNA(HOXA11-AS)靶向微小RNA-766-3p(mir-766-3p)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响.方法以100μg/mL的ox-LDL处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)24 h建立细胞损伤模型.将HUVEC分为对照(con)组、ox-LDL组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-HOXA11-AS组、ox-LDL+mir-NC组、ox-LDL+mir-766-3p组、ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-mir-NC组、ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-mir-766-3p组.RT-qpCR检测HOXA11-AS和mir-766-3p表达.流式细胞术分析细胞凋亡.试剂盒检测LDH释放量、胞内SOD活性.ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β水平.双荧光素酶报告实验确定HOXA11-AS和mir-766-3p的靶向关系.结果与con组比较,ox-LDL组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量、HOXA11-AS表达量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著升高(pmir-766-3p表达量显著降低(pppmir-NC组比较,ox-LDL+mir-766-3p组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著降低(ppmir-766-3p是HOXA11-AS的直接靶点.与ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-mir-NC组比较,ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-mir-766-3p组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著升高(ppmir-766-3p表达能够抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡、氧化应激和炎性反应.

关键词：血管内皮细胞氧化低密度脂蛋白 HOXA11-AS mir-766-3p 凋亡氧化应激炎症

外周血mir-766-3p的表达对肝癌患者预后的预测价值

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黑龙江医药 2022年第3期35卷 518-521页

作者：黄雄沛董白燕王仕佳朱明品茂名市人民医院肝胆胰肛肠外科广东茂名525000 茂名市人民医院肝麻醉手术科广东茂名525000

目的:为探究外周血mir-766-3p的表达对肝癌患者预后的预测价值。方法:回顾性分析我院于2015年8月至2017年8月收治的124例肝癌患者的病历资料,作为研究组,同时选取同时期124例体检健康人群为对照组,检测外周血mir-766-3p水平。统计肝癌... 详细信息

目的:为探究外周血mir-766-3p的表达对肝癌患者预后的预测价值。方法:回顾性分析我院于2015年8月至2017年8月收治的124例肝癌患者的病历资料,作为研究组,同时选取同时期124例体检健康人群为对照组,检测外周血mir-766-3p水平。统计肝癌不同病理特点的外周血mir-766-3p水平,并比较124例肝癌患者治疗前后的mir-766-3p的表达水平。结果:外周血mir-766-3p的表达受肿瘤大小、TNM分期及侵袭转移的因素影响,差异具有统计学意义(pmir-766-3p的水平低于对照组(pmir-766-3p水平明显高于治疗前水平(pmir-766-3p可抑制肝癌细胞生长,抑制癌症的发展。

关键词： mir-766-3p 肝癌预后病理特征

MicroRNA-766-3p靶向调控SIRT6抑制肝癌进展的实验研究

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中国现代普通外科进展 2019年第2期22卷 85-89页

作者：王亚东周军孙学军尹家俊大连大学附属中山医院普通外科辽宁大连116001 大连大学附属中山医院介入科辽宁大连116001 西安交通大学附属第一医院普通外科陕西西安710061

目的:探究mir-766-3p是否可通过调节靶基因SIRT6影响肝细胞癌(HCC)的发生与发展进程。方法:RT-pCR及Western blot检测mir-766-3p及SIRT6在HCC组织及癌旁组织中的表达;CCK-8、流式凋亡检测技术、划痕实验及Trans well小室检测mir-766-3p/... 详细信息

目的:探究mir-766-3p是否可通过调节靶基因SIRT6影响肝细胞癌(HCC)的发生与发展进程。方法:RT-pCR及Western blot检测mir-766-3p及SIRT6在HCC组织及癌旁组织中的表达;CCK-8、流式凋亡检测技术、划痕实验及Trans well小室检测mir-766-3p/SIRT6对HCC细胞生长、凋亡、转移及侵袭能力的影响;荧光报告基因实验及western blot技术检测mir-766-3p对SIRT6表达的影响。结果:mir-766-3p在HCC组织中低表达,而SIRT6高表达。过表达mir-766-3p通过与SIRT6的3’UTR区结合降低SIRT6的表达。上调mir-766-3p明显抑制HepG2细胞增殖、转移及侵袭能力,促进细胞凋亡;但SIRT6过表达后终止mir-766-3p的以上作用。结论:mir-766-3p通过靶向负调控SIRT6的表达抑制HCC进展。

关键词：肝细胞癌 mir-766-3p 靶基因-沉默信息调节因子6

microRNA-766-3p通过靶向Wnt3a抑制原发性肝癌的发展

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microRNA-766-3p通过靶向Wnt3a抑制原发性肝癌的发展

作者：阙克婷重庆医科大学

学位级别：硕士

最近研究表明microRNAs(mirNAs)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)进展中起着重要的作用。在我们的这项研究中发现mir-766-3p在大约72%的HCC组织和细胞系中减少,且其低表达水平和肿瘤大小、TNM分期和转移显著相关。mir-766-3... 详细信息

最近研究表明microRNAs(mirNAs)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)进展中起着重要的作用。在我们的这项研究中发现mir-766-3p在大约72%的HCC组织和细胞系中减少,且其低表达水平和肿瘤大小、TNM分期和转移显著相关。mir-766-3p过表达抑制HCC细胞增殖,集落形成,迁移和侵袭。此外,我们观察到mir-766-3p抑制Wnt3a表达。荧光素酶报告基因测定显示Wnt3a是mir-766-3p的直接靶标,我们观察到mir-766-3p和Wnt3a表达之间存在负相关。此外,Wnt3a过表达逆转了mir-766-3p在HCC进展中的作用。再者,我们的研究表明过表达mir-766-3p下调了核β-连环蛋白水平(β-catenin)和Wnt靶标(TCF1和Survivin)的表达,降低了胞质分裂蛋白1(pRC1)的MAp蛋白调节因子的水平。然而,mir-766-3p的这些作用是由Wnt3a上调逆转。此外,pRC1上调增加了核β-连环蛋白水平和TCF1和Survivin蛋白质的表达。iCRT3可以破坏β-catenin和TCF4之间的相互作用,抑制TCF1,Survivin和pRC1蛋白表达水平。总之,我们的结果表明,mir-766-3p下调促进HCC细胞进展,这可能是通过靶向Wnt3a/pRC1途径实现的,mir-766-3p可能作为HCC的潜在治疗靶点。

关键词：肝细胞肝癌侵袭 mir-766-3p 增殖 Wnt3a

基于血浆外泌体small RNA测序筛选结核相关mirNAs及功能验证

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基于血浆外泌体small RNA测序筛选结核相关miRNAs及功能验证

作者：袁天琪山西大学

学位级别：硕士

结核病(Tuberculosis,TB)是世界范围内的一种慢性传染病,对公共卫生影响巨大。外泌体是一类新型的细胞间信号调节器,其含有大量的micro RNA(mirNA),它们可以被附近或者偏远的细胞内吞,随后调控受体细胞。mirNA是一类内源、非编码高度保... 详细信息

结核病(Tuberculosis,TB)是世界范围内的一种慢性传染病,对公共卫生影响巨大。外泌体是一类新型的细胞间信号调节器,其含有大量的micro RNA(mirNA),它们可以被附近或者偏远的细胞内吞,随后调控受体细胞。mirNA是一类内源、非编码高度保守的小RNA,其高特异性和保守性提高了疾病诊断的准确性和精密度。本研究旨在针对健康人群(HC)及结核病人群(TB)血浆外泌体进行small RNA测序技术筛选差异表达mirNAs并进行靶基因预测,获得TB相关mirNAs及易感基因,以期为TB诊断和治疗提供潜在的靶标。主要结果如下:1.血浆外泌体small RNA-Seq筛选差异表达mirNAs本研究旨在从外泌体的角度筛选HC、TB人群中差异表达的mirNAs。应用超速离心法分离外周血血浆中的外泌体,并应用Western Blotting、透射电子显微镜(TEM)及纳米颗粒跟踪分析技术(TAE)对外泌体表面蛋白标志物、粒径大小和形态进行鉴定;应用small RNA-Seq技术对提取的血浆外泌体构建小RNA文库,对TB/HC组进行生物信息学分析并筛选组间差异表达mirNAs,整合分析共得到14个mirNAs。同时,应用Target Scan、RNAhybrid、miranda软件对其进行靶基因预测,结果显示:mirNA-766-3p、mir-302a-3p等mirNAs可以靶向NRAMp1、ASAp1、Sp110等TB易感基因。进一步应用DAVID和KOBAS软件对靶基因进行GO分析和KEGG通路分析,这些基因聚焦在p53、m TOR、溶酶体等相关信号通路。2.血浆外泌体差异mirNAs对A549细胞中NRAMp1的影响本研究通过激光扫描共聚焦显微镜观察A549细胞吞噬外泌体情况,并应用qRT-pCR检测前期筛选的差异表达mirNAs的表达量,结果显示:外泌体被A549细胞吞噬后,差异mirNAs表达量上调。为验证mirNAs转染效率,对A549细胞转染模拟物/抑制剂后,发现转染mir-372-3p/mir-302a-3p/mir-766-3p模拟物后,mirNAs表达量上调,转染抑制剂后下调。同时,基于双荧光素酶报告基因系统在HEK-293T细胞系检测mirNAs与靶基因之间的调控关系,结果表明:mir-302a-3p、mir-766-3p可以通过调控NRAMp1基因的3’UTR抑制NRAMp1的表达。通过在A549细胞系转染mir-766-3p模拟物/抑制剂验证其如何调控NRAMp1的表达,结果显示:过表达mir-766-3p后,NRAMp1表达显著降低,而加入mir-766-3p抑制剂后,NRAMp1表达基本不受影响。对转染模拟物/抑制剂的A549细胞系检测细胞增殖和凋亡的情况,发现mir-766-3p通过调控NRAMp1的表达抑制细胞增殖,同时促进细胞凋亡。***-766-3p对胞内Mtb存活的影响临床样本检测人外周血中mir-766-3p与NRAMp1的表达水平,结果显示mir-766-3p与NRAMp1表达及TB发生相关;本研究用Mtb感染A549细胞系后,发现mir-766-3p表达量上调,NRAMp1表达量下调;进一步检测细胞增殖和凋亡的情况,发现A549细胞系感染Mtb/未感染Mtb,mir-766-3p都能通过调控NRAMp1的表达抑制细胞增殖,同时促进细胞凋亡。以上结果表明mir-766-3p通过调控NRAMp1的表达影响Mtb胞内存活,这为结核病的诊断和治疗提供潜在的靶标。

关键词：结核病外泌体 mir-766-3p NRAMp1