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老年医学与保健 2022年第4期28卷 777-782页

作者：黄海华何琛波孙毅郴州市第一人民医院影像医学中心湖南郴州423000

目的研究miR-500a在三阴性乳腺癌(TNBC)中的作用,明确其对TNBC的临床意义。方法收集2012年8月—2015年8月在郴州市第一人民医院确诊的113例TNBC患者的肿瘤组织及相应的癌旁正常组织。培养TNBC细胞和正常乳腺上皮细胞。采用qRT-PCR检测... 详细信息

目的研究miR-500a在三阴性乳腺癌(TNBC)中的作用,明确其对TNBC的临床意义。方法收集2012年8月—2015年8月在郴州市第一人民医院确诊的113例TNBC患者的肿瘤组织及相应的癌旁正常组织。培养TNBC细胞和正常乳腺上皮细胞。采用qRT-PCR检测miR-500a在TNBC组织和细胞系中的表达水平。采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析其预后价值。用miR-500a模拟物、miR-500a抑制物和阴性对照转染TNBC细胞。CCK-8法检测TNBC细胞增殖能力。采用Transwell试验检测miR-500a对TNBC细胞的迁移和侵袭能力的影响。结果 miR-500a在TNBC组织和细胞系中的表达高于相邻正常组织和细胞系。与miR-500a低表达的患者相比,miR-500a上调的TNBC患者通常预后较差,总生存期较短。miR-500a高表达可促进TNBC细胞增殖、迁移和侵袭。结论 miR-500a可能在TNBC的发生发展过程中发挥促癌作用。

关键词：老年三阴性乳腺癌 miR-500a 临床意义进展

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mir-199a/b-5p及miR-500a在调控肝癌恶性生物学表型中的作用及其机制研究

miR-199a/b-5p及miR-500a在调控肝癌恶性生物学表型中的作用及其...

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作者：展洋洋第二军医大学

学位级别：硕士

肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,尽管随着医疗水平的不断提高,肝癌的预后水平有所提高,但其发病率与死亡率依然不容乐观。肿瘤的发生是一个多基因、多阶段突变的过程,其分子机制十分复杂,目前尚未明了。进一步探究肿瘤发生发展... 详细信息

肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,尽管随着医疗水平的不断提高,肝癌的预后水平有所提高,但其发病率与死亡率依然不容乐观。肿瘤的发生是一个多基因、多阶段突变的过程,其分子机制十分复杂,目前尚未明了。进一步探究肿瘤发生发展的分子机制,对于探索肿瘤诊疗中有效的分子靶点具有重要的科研意义和临床价值。随着第二代高通量测序技术的成熟和广泛应用,肿瘤学的研究迎来了“数据爆炸”时代。一系列整合了肿瘤大数据的数据库也由此应运而生,深度挖掘肿瘤数据库中大数据成为揭开肿瘤发展机制神秘面纱的突破口。TCGA数据库是目前全球最大的肿瘤数据库,具有肿瘤样本量大,数据类型全面等特点,成为近年来肿瘤学研究的一把利器。人类基因组计划的完成,大规模转录组研究的日益深入,对经典的基因表达调控模式造成了冲击。人们发现,在人类基因组中仅有约2%的序列可以转录并翻译为有功能的蛋白质,而超过90%虽被转录但并不编码蛋白质,这类基因所转录的RNA被称为nc RNA。随着对nc RNA的深入研究,人们逐渐认识到这类RNA在调控基因表达,乃至生物学各个重要的进程中扮演着重要的角色。在肿瘤的发生发展中具有重要的作用。mirNA是一类长度约为22nt左右的nc RNA,人们发现mirNA在调控癌相关基因表达中发挥着重要的功能,其可通过靶向靶基因m RNA 3’UTR区进而抑制靶基因的翻译过程,被认为是肿瘤诊疗潜在的分子靶点。尽管近年来人们发现并揭示了众多mirNA在肿瘤发生发展中的功能和机制,但目前研究仍有不足,主要表现为:一,mirNA具有多靶点特性,其靶点需要进一步探究和完善,以揭示复杂的mirNA-m RNA调控网络在肿瘤发生中的全貌;二、仍有部分mirNA的功能和机制未见报道,需进一步的研究。基于以上研究背景,本研究共分为两部分对肝癌中差异表达mirNA进行深入探究。第一部分mir-199a/b-5p在肝癌发生发展中的作用及其机制研究在本部分的探究中,我们通过分析TCGA数据库中肝癌样本mirNA芯片数据以及临床预后数据,发现mir-199a/b-5p在肝癌中发生下调,且高表患者具有更长的生存期,提示其在肝癌中可能具有重要的作用。通过对肝癌组织和细胞系中mir-199a/b-5p表达的检测,进一步印证了mir-199a/b-5p在肝癌中发生显著下调表达。接下来,我们重点对发生显著下调的mir-199a/b-5p的分子功能和机制进一步探究。通过一系列体内外实验我们发现,mir-199a/b-5p可以显著抑制肝癌的转移。其主要机制是通过负向调控ROCK1的表达,进而抑制ROCK1/MLC及PI3K/Akt信号通路活化,最终抑制肝癌的转移。此外,我们发现ROCK1蛋白水平而非m RNA水平在肝癌中发生显著的上调,提示ROCK1的上调表达是由转录后调控因子所介导的,mir-199a/b-5p则可能是其主要的转录后调控因子。通过本部分的研究,我们揭示了mir-199a/b-5p在肝癌中新的分子机制,以及进一步明确ROCK1在肝癌中的功能及机制。第二部分miR-500a在肝癌发生发展中的作用及其机制研究第一部分中对TCGA数据库中mirNA表达芯片数据及临床数据分析,我们发现miR-500a发生显著上调且低表达患者具有更长的生存期。鉴于miR-500a未在肝癌中有相关报道,我们对其功能和分子机制展开了研究。通过一系列体内外实验,我们发现抑制miR-500a后,可以显著抑制肝癌细胞的增殖并诱导细胞凋亡。接下来,我们对其分子机制进行了探究,并发现miR-500a可以靶向BID m RNA 3’UTR区,负向调控BID基因的表达,下调Cleaved-Caspase-3,-9的水平,从而达到抑制肝癌凋亡的作用。通过本部分的研究,我们揭示了miR-500a在肝癌中的分子功能和机制:miR-500a通过靶向BID蛋白,减弱诱导凋亡相关信号通路,从而抑制肝癌细胞的凋亡。因此,miR-500a在肝癌中是一种典型的促癌性mirNA。

关键词： microRNA mir-199a/b-5p miR-500a 肝癌

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lncRNA VIM-AS5在人乳腺癌细胞系中的表达及对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

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基础医学与临床 2024年第4期44卷 447-453页

作者：陆凯陆建菊郭文利黄建棋李志华嘉兴市第一医院乳腺病科浙江嘉兴314001 南昌市第三医院乳腺肿瘤科江西南昌330008

目的探讨长链非编码RNA (lncRNA)VIM-AS5在人乳腺癌组织中表达的临床意义及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法利用Lnc2Cancer 3.0数据库分析VIM-AS5在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌患者临床分期、生存期的相关性。RT-qPCR... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA (lncRNA)VIM-AS5在人乳腺癌组织中表达的临床意义及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法利用Lnc2Cancer 3.0数据库分析VIM-AS5在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌患者临床分期、生存期的相关性。RT-qPCR检测乳腺癌BT-549、MDA-MB-435、MDA-MB-231、CAL-51细胞中VIM-AS5的表达量。通过脂质体分别将VIM-AS5过表达质粒和阴性对照质粒转染至CAL-51细胞,依次记为VIM-AS5组和NC组。采用集落形成实验、划痕愈合法分别检测CAL-51细胞的增殖活力和迁移率。双荧光素酶报告基因实验验证VIM-AS5与miR-500a的靶向关系。RT-qPCR检测CAL-51细胞中miR-500a表达。Western blot检测CAL-51细胞中JAK/STAT3分子通路蛋白表达。结果乳腺癌组织中VIM-AS5表达显著低于癌旁组织(PmiR-500a是VIM-AS5的靶基因(PmiR-500a的表达(PmiR-500a/JAK/STAT3分子通路抑制乳腺癌CAL-51细胞的增殖及迁移。

关键词： lncRNA VIM-AS5 乳腺癌 miR-500a 细胞增殖细胞迁移

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