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TGF-β1-regulated mir-3691-3p targets E2F3 and pRDM1 to inhibit prostate cancer progression

Asian Journal of Andrology 2021年第2期23卷 188-196页

作者： Yue-Mei Hu Xiao-Li Lou Bao-Zhu Liu Li Sun Shan Wan Lei Wu Xin Zhao Qing Zhou Mao-Min Sun Kun Tao Yong-Sheng Zhang Shou-Li Wang Department of pathology School of Biology and Basic Medical SciencesSoochow UniversitySuzhou 215123China Department of pathology Tongren HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200336China Collaborative Innovation Center of Clinical Immunology between Soochow University and Sihong people's Hospital Sihong 223900China Department of pathology Sihong People's HospitalSihong 223900China Laboratory Animal Research Center Soochow University School of MedicineSuzhou 215123China Department of Surgery The First Affiliated Hospital of Soochow UniversitySuzhou 215006China Department of pathology The Second Affiliated Hospital of Soochow UniversitySuzhou 215004China Suzhou Key Laboratory of Tumor Microenvironment and pathology Soochow UniversitySuzhou 215006China

Transforming growth factor-β1(TGF-β1)acts as a tumor promoter in advanced prostate cancer(pCa).We speculated that microRNAs(mirNAs)that are inhibited by TGF-β1 might exert anti-tumor *** assess this,we identified several mirNAs downregulated by TGF-β1 in pCa cell lines and selected mir-3691-3p for detailed analysis as a candidate anti-oncogene ***-3691-3p was expressed at significantly lower levels in human pCa tissue compared with paired benign prostatic hyperplasia tissue,and its expression level correlated inversely with aggressive clinical pathological *** of mir-3691-3p in pCa cell lines inhibited proliferation,migration,and invasion,and promoted *** mir-3691-3p target genes E2F transcription factor 3(E2F3)and pR domain containing 1,with ZNF domain(pRDM1)were upregulated in mir-3691-3p-overexpressing pCa cells,and silencing of E2F3 or pRDM1 suppressed pCa cell proliferation,migration,and *** of mice bearing pCa xenografts with a mir-3691-3p agomir inhibited tumor growth and promoted tumor cell *** with the negative regulation of E2F3 and pRDM1 by mir-3691-3p,both proteins were overexpressed in clinical pCa specimens compared with noncancerous prostate *** results indicate that TGF-β1-regulated mir-3691-3p acts as an anti-oncogene in pCa by downregulating E2F3 and *** results provide novel insights into the mechanisms by which TGF-β1 contributes to the progression of pCa.

关键词： E2F transcription factor 3 mir-3691-3p pR domain containing 1,with ZNF domain prostate cancer transforming growth factor-β1

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mir-3691-3p靶向调控E2F3/pRDM1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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江苏大学学报（医学版） 2018年第1期28卷 22-27页

作者：孙莉牛涵波徐义英孙茂民苏州大学实验动物中心江苏苏州215123

目的:探讨微小RNA-3691-3p(mir-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和pR结构域蛋白1(pR domain containing 1,pRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的mir-3691-3p mimic后,采用实时荧光定量pCR和蛋白质印迹法检测候选靶基因E2F3和pRDM1 mRNA和蛋白表达的变化;人工合成候选靶基因的小干扰RNA(E2F3 siRNA和pRDM1 siRNA)转染入DU145细胞中,采用实时荧光定量pCR检测siRNA在细胞中的转染率;DU145细胞株分别转染阴性对照siRNA、E2F3 siRNA和pRDM1 siRNA后,采用MTT、Transwell、划痕实验检测DU145细胞株增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:随着mir-3691-3p mimic转染浓度增高,在DU145细胞株中E2F3和pRDM1 mRNA的表达量逐渐下降(ppp3 siRNA和pRDM1 siRNA的DU145细胞株中,E2F3和pRDM1在mRNA水平上表达量显著减少(E2F3:t=31,ppRDM1:t=10.44,p3 siRNA的DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(均ppRDM1 siRNA的DU145细胞增殖和侵袭能力显著下降(均pp>0.05)。结论:在DU145细胞中,低水平的mir-3691-3p通过靶向调控E2F3和pRDM1的增高来增强细胞的生物学特性。

关键词：前列腺癌 DU145细胞株 mir-3691-3p E2F3 pRDM1 生物学特性

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微小RNA-3691-3p在前列腺癌中低表达及意义初步分析

微小RNA-3691-3p在前列腺癌中低表达及意义初步分析

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作者：胡月梅苏州大学

学位级别：硕士

目的:研究证实,转化生长因子-β1(TGF-β1)可促进前列腺癌(pCa)的生长和转移,因此我们推测TGF-β1相关microRNA(mirNA)即TGF-β1抑制的mirNA可能具有抑制肿瘤的作用。这里基于微阵列分析证实mir-3691-3p在pCa细胞系、肿瘤组织减少,与病... 详细信息

目的:研究证实,转化生长因子-β1(TGF-β1)可促进前列腺癌(pCa)的生长和转移,因此我们推测TGF-β1相关microRNA(mirNA)即TGF-β1抑制的mirNA可能具有抑制肿瘤的作用。这里基于微阵列分析证实mir-3691-3p在pCa细胞系、肿瘤组织减少,与病人的预后差显著相关。进一步预测mir-3691-3p的靶基因,研究其在pCa组织中的表达及临床意义,为深入研究mirNA在pCa中的作用机制提供线索。方法:(1)利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-pCR)检测人类pCa组织标本和细胞株中TGF-β1相关mirNAs的表达水平;在高表达和低表达mir-3691-3p组织标本中对其进行Kaplan-Meier生存分析,及临床病理特征进行分析。(2)运用生物信息学技术预测mir-3691-3p的靶基因;将mir-3691-3p Mimics(M)转染pCa细胞株(pC-3、DU-145),提取蛋白,通过Western blot技术检测mir-3691-3p靶蛋白表达水平;采用免疫组织化学染色验证靶基因在人类前列腺癌组织和正常前列腺组织中的表达水平,并分析其临床意义。结果:(1)利用qRT-pCR检测TGF-β1抑制的相关mirNAs表达时,mir-3691-3p在pC-3细胞系中表达下降2倍,在DU145细胞系中表达降低了3倍。mir-3691-3p在前列腺癌组织中的表达较正常前列腺组织下降近20倍,它是TGF-β1相关mirNAs中表达量最低的。(2)mir-3691-3p低表达在临床病例中与以下临床病理特征相关,病理分期(p=0.0251);淋巴结转移(p=0.003);术前前列腺特异性抗原(pSA)(p=0.0019)和阳性脉管浸润(p=0.0017)。此外mir-3691-3p低表达在前列腺癌根治术后患者中有更短的生化复发(BCR)生存率,相比于mir-3691-3p高表达(p3)运用生物信息学技术预测mir-3691-3p的靶基因为CDK17、E2F3和pRDM1。Western blot检测过表达mir-3691-3p的细胞株中,E2F3的表达量明显降低。免疫组织化学法,检测所验证靶基因在前列腺癌组织和正常前列腺组织中的表达水平,在癌组织中E2F3和pRDM1均表现出阳性。结论:(1)相对于正常前列腺组织,前列腺癌中mirNA具有差异表达谱,mir-3691-3p低表达与前列腺癌密切相关;(2)E2F3是mir-3691-3p调控的下游靶基因。

关键词：前列腺癌 mir-3691-3p TGF-β1 临床病理特征

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