检索结果-南通市图书馆

獐牙菜苦苷通过调控mir-351-5p表达对6-羟基多巴胺诱导pC12细胞帕金森模型损伤的影响

中成药 2023年第11期45卷 3808-3812页

作者：周喜燕马晓维李彬张鑫鑫郭联于淼王群青岛市中医医院(市海慈医院)神经内科山东青岛266033

目的探讨獐牙菜苦苷对6-羟基多巴(6-OHDA)诱导pC12细胞损伤的影响及其分子机制。方法以100μmol/L 6-OHDA处理pC12细胞建立帕金森病细胞模型,将pC12细胞分为对照组、6-OHDA组、獐牙菜苦苷低、中、高剂量组(30、60、120μmol/L)、anti-mi... 详细信息

目的探讨獐牙菜苦苷对6-羟基多巴(6-OHDA)诱导pC12细胞损伤的影响及其分子机制。方法以100μmol/L 6-OHDA处理pC12细胞建立帕金森病细胞模型,将pC12细胞分为对照组、6-OHDA组、獐牙菜苦苷低、中、高剂量组(30、60、120μmol/L)、anti-mir-NC组、anti-mir-351-5p组、獐牙菜苦苷(120μmol/L)+mir-NC组、獐牙菜苦苷(120μmol/L)+mir-351-5p组。MTT法检测细胞存活率,采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白表达,RT-qpCR法检测mir-351-5p表达。结果与对照组比较,6-OHDA组pC12细胞存活率、SOD活性、Bcl-2蛋白表达降低(p5),LDH活性、MDA水平、凋亡率、Bax蛋白表达升高(p5),mir-351-5p表达升高(p5);与6-OHDA组比较,獐牙菜苦苷处理或干扰mir-351-5p表达可升高pC12细胞存活率、SOD活性、Bcl-2蛋白表达(p5),降低LDH活性、MDA水平、凋亡率、Bax蛋白表达(p5);獐牙菜苦苷处理可下调6-OHDA诱导的mir-351-5p表达(p5),且上调mir-351-5p表达逆转了獐牙菜苦苷对6-OHDA诱导pC12细胞损伤的作用(p5)。结论獐牙菜苦苷可通过下调mir-351-5p表达抑制6-OHDA诱导的pC12细胞凋亡和氧化应激。

关键词：獐牙菜苦苷 pC12细胞帕金森病 mir-351-5p 6-羟基多巴胺(6-OHDA) 凋亡氧化应激

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

mir-351-5p对前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化的影响及作用机制

MiR-351-5p对前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化的影响及作用机制

引用

作者：张晓萌内蒙古大学

学位级别：硕士

脂肪是一种重要的代谢器官,在机体能量平衡方面具有非常关键的作用。随着肥胖及肥胖相关疾病的普遍,脂肪细胞的分化过程引起人们的重视。前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化过程是精细调控的系列事件,包括生长抑制、克隆增殖、和终末分化。mir... 详细信息

脂肪是一种重要的代谢器官,在机体能量平衡方面具有非常关键的作用。随着肥胖及肥胖相关疾病的普遍,脂肪细胞的分化过程引起人们的重视。前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化过程是精细调控的系列事件,包括生长抑制、克隆增殖、和终末分化。mirNAs是一类内源sncRNA在脂肪细胞分化及脂质代谢过程中发挥重要作用。据报道mir-351-5p在脂肪组织分化过程发挥作用,但其在脂肪细胞分化和脂质代谢过程的功能和机制尚未研究清楚。本研究以小鼠前体脂肪细胞3T3-L1为材料进行成脂诱导,探究mir-351-5p对前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化过程的影响。1、mir-351-5p在3T3-L1细胞成脂分化过程中的表达变化通过qpCR及油红O染色检测mir-351-5p在成脂分化过程中的表达变化以及在小鼠不同组织的表达谱,发现mir-351-5p在成脂过程中表达呈上升趋势,在脂滴开始积累的第8d达到表达量的峰值。2、mir-351-5p对3T3-L1细胞成脂分化的影响在前体脂肪细胞3T3-L1中转染mir-351-5p mimics,利用qpCR及Western Blot检测成脂相关转录因子表达量的变化,结果发现转染mir-351-5p后,成脂关键转录因子ppARγ表达量下调。利用CCK-8、EdU、流式细胞术分别检测mir-351-5p对细胞活性、增殖、细胞周期的影响,结果发现mir-351-5p对细胞活性和细胞增殖没有显著影响,但细胞周期检测表明mir-351-5p mimics转染后阻滞在S期的细胞数目增多。油红0染色及脂质定量分析,结果表明mir-351-5p抑制前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化过程脂滴积累,证实mir-351-5p对于前体脂肪细胞分化过程具有抑制作用。3、mir-351-5p的靶基因预测及验证为了解mir-351-5p的作用机理,首先使用生物信息学预测软件TargetScan、mirDB、picTar分别预测靶基因,软件共预测出12个靶基因。然后用qpCR从中筛选出5个与脂肪相关的靶基因。最后通过双荧光素酶报告基因检测系统及Western Blot验证在脂肪分化过程中mir-351-5p的靶基因是Necab3。4、si-Necab3对3T3-L1细胞成脂分化的影响为了明确Necab3对3T3-L1成脂分化的影响,将Necab3基因的siRNA转染3T3-L1细胞。利用qpCR和Western Blot检测成脂相关转录因子ppARγ的表达,发现ppARγ表达降低。通过油红0染色及脂质定量分析,结果发现干扰Necab3基因表达抑制前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化过程脂滴积累。证实mir-351-5p通过Necab3基因来影响ppARγ的表达和脂滴积累,进而抑制前体脂肪细胞3T3-L1成脂分化过程。

关键词： mir-351-5p 3T3-L1 ppARγ 成脂分化 Necab3

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

mir-351-5p与mir-20b-5p在METH诱导的主动脉瘤/夹层中的作用及机制初探

miR-351-5p与miR-20b-5p在METH诱导的主动脉瘤/夹层中的作用及机...

引用

作者：杨亚光南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景:甲基苯丙胺(Methamphetamine,METH),属于苯丙胺类兴奋剂,是一种在麻黄素化学结构基础上衍生而来的物质,故又称去氧麻黄素,因外观为纯白色晶体,又俗称“冰毒”。1919年,日本化学家A.Ogata首次合成晶体状的甲基苯丙胺,使其大规... 详细信息

研究背景:甲基苯丙胺(Methamphetamine,METH),属于苯丙胺类兴奋剂,是一种在麻黄素化学结构基础上衍生而来的物质,故又称去氧麻黄素,因外观为纯白色晶体,又俗称“冰毒”。1919年,日本化学家A.Ogata首次合成晶体状的甲基苯丙胺,使其大规模的生产成为可能;1945年,确定甲基苯丙胺可滥用成瘾;1951年,日本开始对甲基苯丙胺进行管制。二十世纪末,以甲基苯丙胺为代表的新型毒品由于其生产和加工相对简单,吸食毒品的成品更为低廉,已逐步替代以罂粟为主要原料的传统毒品并迅速在世界各国蔓延。根据我国食品药品监督管理总局(CDFA)发布的《国家药物滥用监测年度报告(2016)》,2016年药物滥用监测276,980例(份),海洛因滥用监测数据占全部监测数据的45.0%,同比2015年下降3.6个百分点,近五年呈持续下降趋势;含甲基苯丙胺的毒品(“冰毒”、“麻谷丸”)滥用所占比例55.1%,同比2015年度增加3.2个百分点,是我国流行滥用的主要合成毒品,这表明以海洛因为代表的传统毒品快速蔓延势头得到进一步遏制,而以甲基苯丙胺为主的新型合成毒品滥用人员增长迅速,我国毒品形势依然不容乐观。甲基苯丙胺长期滥用可引起各类刑事犯罪,给社会的治安带来极大危害,因此,对METH的毒性及其防治的研究已经成为世界面临的重大课题和研究热点。METH的分子量为149.233,分子式为C10H15N,结构式为其化学结构与麻黄素、儿茶酚胺类递质结构极其类似,因此其药理学特性包括中枢神经兴奋性、致幻作用,同时还通过中枢及外周神经末梢释放大量的儿茶酚胺类物质,引起血管收缩、心跳加快和血压升高等拟交感神经效应。从流行病学调查总结的大量临床资料得出,METH可引起心、脑、肺、肝、肾等体内重要实质器官的损害;在对众多器官的损伤中,对中枢神经系统的毒性损伤最大、是研究最深入的;而近年来,越来越多的研究显示,METH对心血管系统也造成较大影响,甚至是致死性的损害。2017年,有伊朗病理学家研究了 100例甲基苯丙胺中毒相关死亡病例,在所有案例中,法医确定甲基苯丙胺毒性是其直接致死原因,而其中68%的研究病例发现心血管病理改变。METH所致心血管损伤中,主动脉瘤/夹层的发病率呈逐年上升趋势,病情凶险,且致残率和猝死率较高,1994年,报导7例由于滥用METH猝死的案例,其中4例动脉瘤,3例主动脉夹层;1999年,报导84例由于滥用毒物导致主动脉夹层破裂死亡的病例,其中35例为单独使用METH;2007年,对109例主动脉夹层病例进行分析,发现≦50岁的未有相关基础疾病的病人与吸食METH密切相关,随着大量的案例报道发表,目前认为METH是继高血压后导致主动脉瘤/夹层发生的第二大危险因素。根据国内外研究发现,TGF-β、MMps、白介素、前列腺素、RhoA、microRNA等参与主动脉瘤/夹层的形成与发展,microRNA(mirNA或mir),是一种长度约为20-23个核苷酸的一类非编码小RNA;据推测,其参与体内近三分之一的基因表达的调控;主要通过与靶基因的不完全互补配对而在转录及转录后水平上对靶基因的表达进行负调控,导致mRNA的降解或翻译抑制。目的:明确microRNA介导血管平滑肌细胞(VSMCs)的凋亡与自噬在METH诱导的大鼠主动脉瘤/夹层中的作用及可能调控机制。方法:第一部分 1.0mmol/L METH 处理 VSMCs 24h后进 microRNA 芯片筛查及体内、体外QpCR验证(1)分离培养150-200g左右的雄性SD大鼠的血管平滑肌细胞;(2)实验分组:control 组,METH 处理组(1.Ommol/LMETH 作用 24h)Trizol处理后收集细胞,送至上海伯豪生物技术有限公司进行microRNA芯片筛查;(3)按照 p5 及 Fold change≥2 或者≤0.6 选择待验证 microRNAs;(4)QpCR 检测 METH 处理后 VSMCsmir-351-5p、mir-20b-5p、mir-708-5p的表达变化;(5)METH诱导的主动脉瘤/夹层动物模型分组:control组、BApN+METH-组、BApN-METH+组、BApN+METH+组;(6)QpCR 检测主动脉瘤/夹层中 mir-351-5p、mir-20b-5p、mir-708-5p 的表达变化;(7)根据体外、体内验证结果选取研究目的microRNAs。第二部分 mir-351-5p在METH诱导的VSMCs自噬中的作用、靶标及在METH诱导的主动脉瘤/夹层模型中的作用(1)实验分组:NC组、mir-mimics 组、NC+METH 组、mir-mimics+METH组;(2)QpCR 检测 mir-351-5p mimics AGGCUCAAAGGGCUCCUCAGGGA UU过表达效率;(3)Western-blot检测过表达mir

关键词：甲基苯丙胺(METH) 主动脉瘤/夹层血管平滑肌细胞(VSMCs) mir-351-5p mir-20b-5p 凋亡自噬

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Circular RNA CircTET3 Mediates Migration of Vascular Smooth Muscle Cells in Vein Graft by Targeting mir-351-5p

Circular RNA CircTET3 Mediates Migration of Vascular Smooth ...

引用

中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会...

作者： Qing-ping Yao Ying-Xin Qi Institute of Mechanobiology & Medical Engineering Shanghai Jiao Tong University Key Laboratory for Biomechanics and Mechanobiology of Ministry of Education School of Biological Science and Medical Engineering Beihang University

MicroRNAs(mirNAs) regulate gene expression by repressing translation of target genes. Our previous work has established a role for mir-33/BMp3 protecting against abnormal proliferation of vascular smooth muscle cells(VSMCs) which is the pathological basis of neointimal hyperplasia in the grafted vein. We further detected whether circular RNAs(circRNAs) interacting with mirNAs are involved in the dysfunction of VSMCs in graft vein. Grafted veins were generated by the ‘cuff’ technique in rats and the whole transcriptome deep sequencing was applied to identify differential circRNAs in the graft vein compared with the self-control vein. CircTET3 was increased in the graft vein compared with the control vein, and the circular structure was verified by pCR and RNase R digestion. In VSMCs, circTET3 was transcribed from the 4 th exon of tet3 and stably located in cytoplasm. Based on the mirNA-sequencing and bioinformatics, circTET3 was predicted to bind with mir-351-5 p, which was confirmed by RNA pull-down and dual-luciferase reporter assay. Specific siRNA of circTET3 suppressed VSMC migration by acting as an endogenous mir-351-5 p sponge. Then, a differentially expressed circRNA-mirNA-mRNA triple network was constructed. Ingenuity pathway analysis showed the genes function in the network. pTpN1 were the targeted genes due to the competitive binding of circTET3 to mir-351-5 p. Our findings reveal a novel circular RNA circTET3 acts as a nature sponge for mir-351-5 p to modulate VSMC migration in graft vein. This regulatory pathway may serve as a potential therapeutic avenue against neointimal hyperplasia.

关键词： Vascular smooth muscle cells Circular RNAs Vein graft mir-351-5p Migration

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：