检索结果-南通市图书馆

circ_0081666/mir-330-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国老年学杂志 2023年第11期43卷 2730-2734页

作者：王婧雯郑大炜郭娜孙辉段东奎门翔南阳市中心医院河南南阳473000

目的探讨circ_0081666对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法选取30例非小细胞肺癌患者癌组织及癌旁组织;A549细胞分为si-con组(转染si-con)、si-circ_0081666组(转染si-circ_0081666)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-circ_0081666组(转染pcDNA-circ_0081666)、mir-con组(转染mir-con)、mir-330-5p组(转染mir-330-5p)、si-circ_0081666+anti-mir-con组(共转染si-circ_0081666和anti-mir-con)、si-circ_0081666+anti-mir-330-5p组(共转染si-circ_0081666和anti-mir-330-5p)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-pCR)检测circ_0081666和mir-330-5p表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测circ_0081666和mir-330-5p的靶向关系。结果非小细胞肺癌组织和A549细胞中circ_0081666表达水平显著升高,mir-330-5p表达水平显著降低(p5)。敲低circ_0081666或过表达mir-330-5p后,A549细胞活性显著降低,迁移、侵袭细胞数显著减少(p5)。circ_0081666靶向调控mir-330-5p;敲低mir-330-5p逆转了抑制circ_0081666对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论敲低circ_0081666可能通过上调mir-330-5p抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词： circ_0081666 mir-330-5p 非小细胞肺癌增殖迁移侵袭

circ_pOLA2靶向mir-330-5p对脑胶质瘤细胞生长及转移能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国老年学杂志 2023年第5期43卷 1123-1127页

作者：罗方接张代龙邓景阳陈亚德曾志明祝展鹏东莞市松山湖中心医院神经外科广东东莞523320

目的探讨circ_pOLA2对脑胶质瘤细胞生长及转移能力的影响及其可能作用机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-pCR)法检测脑胶质瘤组织与癌旁组织中circ_pOLA2、mir-330-5p的表达量;pearson法分析脑胶质瘤组织中circ_pOLA2、mir-330-5... 详细信息

目的探讨circ_pOLA2对脑胶质瘤细胞生长及转移能力的影响及其可能作用机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-pCR)法检测脑胶质瘤组织与癌旁组织中circ_pOLA2、mir-330-5p的表达量;pearson法分析脑胶质瘤组织中circ_pOLA2、mir-330-5p表达量的相关性;体外培养人脑胶质瘤细胞T98G,si-NC、si-circ_pOLA2、mir-NC、mir-330-5p mimics、si-circ_pOLA2与anti-mir-NC、si-circ_pOLA2与anti-mir-330-5p分别转染至T98G细胞(si-NC组、si-circ_pOLA2组、mir-NC组、mir-330-5p组、si-circ_pOLA2+anti-mir-NC组、si-circ_pOLA2+anti-mir-330-5p组);CCK-8实验检测细胞增殖;氧化酶法检测葡萄糖消耗量;比色测定法检测乳酸生成量;划痕实验、Transwell小室实验别检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验与RIp实验检测circ_pOLA2与mir-330-5p的靶向关系;Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMp)-2、MMp-9蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,脑胶质瘤组织中circ_pOLA2表达量明显升高,mir-330-5p表达量明显降低(p5);circ_pOLA2与mir-330-5p呈负相关(r=-0.8964,ppOLA2组细胞活力、划痕愈合率、MMp-2、MMp-9蛋白水平、葡萄糖消耗量和乳酸生成量明显降低,侵袭细胞数明显减少(p5);circ_pOLA2能够靶向结合mir-330-5p;与mir-NC组比较,mir-330-5p组细胞活力、划痕愈合率、MMp-2、MMp-9蛋白水平、葡萄糖消耗量和乳酸生成量明显降低,侵袭细胞数明显减少(p5);与si-circ_pOLA2+anti-mir-NC组比较,si-circ_pOLA2+anti-mir-330-5p组细胞活力、划痕愈合率、MMp-2、MMp-9蛋白水平、葡萄糖消耗量和乳酸生成量明显升高,侵袭细胞数明显增多(p5)。结论干扰circ_pOLA2表达可能通过靶向mir-330-5p而降低糖酵解水平进而抑制脑胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭。

关键词： circ_pOLA2 mir-330-5p 脑胶质瘤细胞增殖迁移侵袭

mir-330-5p靶向pTBp1调控结肠癌凋亡的机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术 2023年第3期33卷 341-347页

作者：王磊林明刚王荣荣张宏岩陈洁青岛市城阳区人民医院肿瘤科山东青岛266000

[目的]探讨mir-330-5p/pTBp1/CTTN轴调控结肠癌细胞凋亡的潜在机制。[方法]纳入接受根治性结肠切除术的结肠癌患者113例,分析mir-330-5p在结肠癌组织和癌旁组织中的表达水平以及其对总生存率的影响。[结果]mir-330-5p在结肠癌组织中的... 详细信息

[目的]探讨mir-330-5p/pTBp1/CTTN轴调控结肠癌细胞凋亡的潜在机制。[方法]纳入接受根治性结肠切除术的结肠癌患者113例,分析mir-330-5p在结肠癌组织和癌旁组织中的表达水平以及其对总生存率的影响。[结果]mir-330-5p在结肠癌组织中的表达水平较低(0.48±0.22 vs 0.16±0.09,p5)。mir-330-5p高表达的结肠癌患者具有更高的总生存率。过表达mir-330-5p及敲低pTBp1,HCT116细胞的凋亡水平上升(13.02±2.11 vs 68.41±11.08, 12.84±2.16 vs 59.12±10.53,p5)。过表达mir-330-5p后,HCT116细胞中pTBp1的mRNA水平和蛋白水平均下降(0.39±0.04 vs 0.05±0.01,p5)。敲低CTTN后,HCTT6细胞的凋亡水平显著上升(11.70±2.05 vs 55.73±10.19,p5)。过表达mir-330-5p或pTBp1敲低后,CTTN isoform a的表达水平下降。[结论]mir-330-5p能够靶向降解pTBp1 mRNA,减少pTBp1的表达水平,促进结肠癌细胞凋亡。mir-330-5p/pTBp1轴能够调控CTTN外显子的选择性剪接,抑制CTTN isoform a的表达水平并促进结肠癌细胞凋亡。

关键词： mir-330-5p pTBp1 CTTN 结肠癌细胞凋亡选择性剪接

lncRNA OSTN-AS1通过靶向调控mir-330-5p表达对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移及侵袭的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国男科学杂志 2022年第4期36卷 62-67页

作者：崔海军田莉赵济华胡月明徐晋珩许佳林河北省唐山市工人医院泌尿外科河北唐山063000 河北省唐山中心医院病理科河北唐山063000 华北理工大学临床医学院河北唐山063210

目的探讨长链非编码RNA OSTN的反义RNA 1(lncRNA OSTN-AS1)对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法体外培养人前列腺癌细胞DU145、人前列腺正常上皮细胞RWpE-1,实时定量聚合酶链反应(qRT-pCR)法检测lncRNA OS... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA OSTN的反义RNA 1(lncRNA OSTN-AS1)对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法体外培养人前列腺癌细胞DU145、人前列腺正常上皮细胞RWpE-1,实时定量聚合酶链反应(qRT-pCR)法检测lncRNA OSTN-AS1、mir-330-5p的表达量;以DU145细胞为研究对象,随机分组:si-NC组、si-OSTN-AS1组、mir-NC组、mir-330-5p组、si-OSTN-AS1+anti-mir-NC组、si-OSTN-AS1+anti-mir-330-5p组;细胞计数试剂盒(CCK-8)法、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验检测mir-330-5p过表达对野生型载体WT-OSTN-AS1荧光素酶活性的影响。结果与RWpE-1细胞比较,DU145细胞中lncRNA OSTN-AS1的表达量升高(p5),mir-330-5p的表达量降低(p5);与si-NC组比较,siOSTN-AS1组细胞活力、划痕愈合率降低(p5),细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少(p5);与mir-NC组比较,mir-330-5p组细胞活力、划痕愈合率降低(p5),细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少(p5);mir-330-5p过表达可降低WT-OSTN-AS1的荧光素酶活性(p5);与si-OSTN-AS1+anti-mir-NC组比较,si-OSTN-AS1+anti-mir-330-5p组细胞活力、划痕愈合率升高(p5),细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多(p5)。结论下调lncRNA OSTN-AS1表达可通过上调mir-330-5p表达而减弱前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。

关键词：前列腺肿瘤长链非编码RNA OSTN-AS1 mir-330-5p 细胞增殖迁移侵袭

Circ_0001666通过靶向mir-330-5p/HMGA2轴促进非小细胞肺癌细胞的增殖并抑制凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生理学报 2021年第3期73卷 491-500页

作者：项保利苏菁刘洋河北北方学院附属第一医院呼吸与危重症医学科张家口075000

许多研究表明环状RNA (circular RNAs, circRNAs)在肿瘤的整个生物过程中发挥着关键的调控作用。本研究旨在探讨circ_0001666在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞中的生物学功能及其分子机制,以期为NSCLC的早期诊断... 详细信息

许多研究表明环状RNA (circular RNAs, circRNAs)在肿瘤的整个生物过程中发挥着关键的调控作用。本研究旨在探讨circ_0001666在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞中的生物学功能及其分子机制,以期为NSCLC的早期诊断和治疗提供新的靶点。在公共基因芯片数据库GEO (Gene Expression Omnibus)中下载GSE101586数据集,通过GEO2R分析得到差异基因。采用实时定量聚合酶链反应检测NSCLC细胞中circ_0001666的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8和细胞凋亡检测试剂盒分别检测敲低circ_0001666对NSCLC细胞增殖和凋亡的作用。通过生物信息学预测、双荧光素酶报告实验、RNA结合蛋白免疫沉淀实验和RNA pull down实验研究微小RNA 330-5p (microRNA 330-5p, mir-330-5p)与circ_0001666、高迁移率蛋白A2 (high mobility group A2 protein, HMGA2)之间的靶向关系。结果显示:circ_0001666在NSCLC细胞系中的表达显著高于正常肺上皮细胞。敲低circ_0001666显著降低了NSCLC细胞的增殖活力,并促进了细胞凋亡,而转染mir-330-5p抑制剂可逆转此作用。mir-330-5p是circ_0001666的下游靶点,可以被circ_0001666吸附;HMGA2是mir-330-5p的靶基因,可以被circ_0001666间接正向调控。以上结果提示,circ_0001666通过靶向调控mir-330-5p/HMGA2轴促进NSCLC细胞的增殖并抑制凋亡。

关键词： circ_0001666 mir-330-5p 高迁移率蛋白A2 非小细胞肺癌

mir-330-5p和mir-433-3p通过靶向BCAA通路相关基因对绵羊前体脂肪细胞分化调控的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

MiR-330-5p和miR-433-3p通过靶向BCAA通路相关基因对绵羊前体脂肪...

作者：闫晓茹山西农业大学

学位级别：硕士

MicroRNAs(mirNAs)在基因表达的转录调控中起着重要作用。mirNAs缺失可影响脂肪组织的形态、结构和大小,甚至导致其基本功能的损伤。支链氨基酸(BCAA)包括亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。在脂肪组织中,过多的BCAA摄入会转化成脂肪储存起来,... 详细信息

MicroRNAs(mirNAs)在基因表达的转录调控中起着重要作用。mirNAs缺失可影响脂肪组织的形态、结构和大小,甚至导致其基本功能的损伤。支链氨基酸(BCAA)包括亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。在脂肪组织中,过多的BCAA摄入会转化成脂肪储存起来,脂肪组织有效地把BCAA碳骨架转化成新的脂肪酸,作为脂肪分化和脂肪合成的碳来源,所以BCAA的摄入有利于成脂功能。BCAT2是BCAA代谢过程中的第一个催化酶,催化BCAA分解为支链酮酸的可逆反应。脂肪分化过程中,BCAT2还参与支链氨基酸的代谢。在后续分解过程中,支链酮酸需在限速酶支链酮酸脱氢酶复合体(BCKDH)作用下才能特异性分解,BCKDHA和BCKDHB是BCKDH E1结构的α和β亚基,它们同样参与BCAA的代谢与脂肪的代谢。BCAT2,BCKDH 和BCKDHB三者的异常表达,都会引起BCAA代谢的紊乱、代谢产物的大量积累以及三羧酸循环过程的障碍,在一定程度上影响了机体能源物质的供应,甚至会造成一些代谢疾病。本研究采用绵羊前体脂肪细胞为试验对象,首先对采取的细胞进行验证,通过对培养和分化过程中的不同时段观察细胞形态、油红O染色以及有关脂肪细胞分化的标志基因的检测,增加所有结果的可信度。利用生物信息学软件,预测能与BCAT2、BCKDHB结合的mirNAs。构建BCAT2-3’-UTR和BCKDHB-3’-UTR的双荧光素酶报告载体pmirGLO-BCAT2-3’-UTR 及 pmirGLO-BCKDHB-3’-UTR,购买 mir-433-3p 及 mir-330-5p的过表达载体mimics,培养HEK-293T细胞进行共转染后收集细胞,使用双荧光素酶报告系统分别检测其荧光活性,进行BCAT2与mir-330-5p、BCKDHB与mir-433-3p靶标关系验证。分别过表达mir-330-5p和mir-433-3p探索对绵羊前体脂肪细胞分化的调控机制,各自都分为过表达组和阴性对照组,提取总RNA和总蛋白,利用RT-qpCR分别检测过表达前后的mirNAs和靶基因的表达量,同时利用Western blotting技术分别检测过表达前后BCAT2和BCKDHB的蛋白水平。在过表达mir-330-5p前后,对脂肪分化的标志基因进行了 mRNA表达以及脂滴变化的检测。用RT-qpCR技术分别检测前体脂肪细胞分化过程中BCAT2和mir-330-5p,BCKDHB和mir-433-3p的时序表达。同时,利用腺病毒载体pMSCV过表达BCAT2,利用BCAT2的siRNA敲除BCAT2,分别检测过表达和敲除前后BCAT2、BCKDHA和BCKDHB三种mRNA和蛋白的表达量,同时检测脂肪分化的标志基因的表达变化,以及检测转染前后脂滴变化,从而说明BCAT2对前体脂肪细胞分化过程的影响。本研究通过理论预测和试验验证,分别揭示了 BCAT2 和 mir-330-5p,BCKDHB和mir-433-3p 的靶标关系。同时,也揭示了BCAT2在BCAA通路中对脂肪分化的调节机制。主要结果如下:1、培养的绵羊前体细胞呈纺锤形或不规则三角形;随着分化的进行,脂滴由小变大,且越来越透明。油红O染色结果发现着色区域越来越大。在分化过程中ppARγ、C/EBpα、FABp4和ADIpOQ的mRNA表达量呈上升趋势,表明培养的细胞可作为后续试验的绵羊前体脂肪细胞。2、双荧光素酶报告系统检测荧光活性显示:共转染pmirGLO-BCAT2-3’-UTR和mir-330-5pmimics 的荧光活性显著(p5)低于共转染 pmirGLO-BCAT2-3’-UTR 和mir-330-5pNC的荧光活性,也显著(p5)低于空白对照组的荧光活性,表明BCAT2与mir-330-5p有结合位点,两者有靶标关系。共转染pmirGLO-BCKDHB-3’-UTR和mir-433-3pmimics 的荧光活性显著(p5)低于共转染 pmirGLO-BCKDHB-3’-UTR和mir-433-3pNC的荧光活性,也显著(p5)低于空白对照组的荧光活性,表明BCKDHB与mir-433-3p有结合位点,两者有靶标关系。3、过表达mir-330-5p后,过表达组BCAT2mRNA和蛋白的相对表达量显著(p5)低于阴性对照组,说明mir-330-5p不仅下调BCAT2mRNA表达,也下调了其蛋白的表达。过表达mir-433-3p后,过表达组BCKDHBmRNA和蛋白的相对表达量也显著(p5)低于阴性对照组,表明mir-433-3p在绵羊前体脂肪细胞中对BCKDHB有负调控作用。4、在分化前期检测到mir-330-5p和BCAT2的mRNA表达量呈负相关,而且mir-433-3

关键词：绵羊前体脂肪细胞分化 BCAT2 mir-330-5p BCKDHB mir-433-3p

circ_0001785与mir-330-5p在结直肠癌中的表达及其生物学意义

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2020年第17期28卷 865-872页

作者：赵卫华马睿温学红刘娜胡建功王新峰马亮天津市中医药大学第二附属医院检验科天津市300250 天津医科大学总医院精准医学实验室天津市300052 天津市中医药大学第二附属医院病理科天津市300250 中日友好医院检验科北京市100029

背景结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病机制尚未cular RNA,circRNA)在CRC等肿瘤中表达异常并可调控细胞增殖、迁移及侵袭等生物学过程,但关于其具体作用机制尚未完全阐明,因而探寻新型circRNA分子并探究其可能作用机制对进一步揭示CR... 详细信息

背景结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病机制尚未cular RNA,circRNA)在CRC等肿瘤中表达异常并可调控细胞增殖、迁移及侵袭等生物学过程,但关于其具体作用机制尚未完全阐明,因而探寻新型circRNA分子并探究其可能作用机制对进一步揭示CRC发病机制具有重要意义.目的探讨circ_0001785与mir-330-5p在CRC中的表达及其生物学意义.方法采用qRT-pCR法检测CRC组织、癌旁组织中circ_0001785、mir-330-5p的表达量;采用pearson法检测CRC中circ_0001785与mir-330-5p的相关性;根据circ_0001785、mir-330-5p表达量的平均值将患者分为circ_0001785高表达组41例、circ_0001785低表达组39例与mir-330-5p高表达组45例、mir-330-5p低表达组35例,观察circ_0001785、mir-330-5p表达量与CRC患者临床病理参数的相关性;体外培养人CRC细胞SW480,分别将si-NC、si-circ_0001785、sicirc_0001785与anti-mir-NC、si-circ_0001785与antimir-330-5p转染至SW480细胞;采用qRT-pCR法检测细胞中circ_0001785、mir-330-5p的表达量;采用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验检测circ_0001785与mir-330-5p的靶向关系;Western blot法检测MMp-2、MMp-9蛋白表达量.结果circ_0001785在CRC组织及细胞系中表达水平显著升高(p5),mir-330-5p的表达水平显著降低(p5);circ_0001785与mir-330-5p呈负相关(r=-0.985,p5、mir-330-5p表达量与分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期密切相关(p5);与si-NC组比较,si-circ_0001785组细胞活力及MMp-2、MMp-9蛋白水平显著降低(p5),迁移及侵袭细胞数显著减少(p5);双荧光素酶报告实验证实circ_0001785可靶向结合mir-330-5p;下调mir-330-5p表达可降低干扰circ_0001785表达对CRC细胞SW480增殖、迁移及侵袭的作用.结论circ_0001785在CRC中表达上调,而mir-330-5p表达下调,干扰circ_0001785表达可通过上调mir-330-5p的表达从而抑制CRC细胞增殖、迁移及侵袭.

关键词： circ_0001785 mir-330-5p 结直肠癌增殖迁移侵袭

Circ-ZKSCAN1靶向mir-330-5p调控FAM83A表达并失活MApK信号促进非小细胞肺癌进展

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

Circ-ZKSCAN1靶向miR-330-5p调控FAM83A表达并失活MAPK信号促进非...

作者：王元勇青岛大学

学位级别：硕士

研究目的/背景肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,也是癌症相关死亡的主要组成部分。非小细胞肺癌（NSCLC）的发病率约占肺癌的80%左右,其又包括腺癌,鳞状细胞癌和大细胞癌。由于缺乏早期诊断,约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率... 详细信息

研究目的/背景肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,也是癌症相关死亡的主要组成部分。非小细胞肺癌（NSCLC）的发病率约占肺癌的80%左右,其又包括腺癌,鳞状细胞癌和大细胞癌。由于缺乏早期诊断,约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。因此,有必要对NSCLC发生发展的分子机制有更全面的认识,以寻找可靠有效的治疗靶点和早期生物标志物。环状RNA（circRNA）属于新型的内源性非编码RNA,没有5’-3’极性或多聚腺苷化的尾巴,具有共价闭环结构,并且对RNA酶具有很高的抗性,在致癌作用中起关键作用。Circ-ZKSCAN1（hsa＿circ＿0001727）已被证明是依赖肿瘤的circRNA。但是,它在NSCLC中的作用尚未被报道。研究方法我们使用了qRT-pCR法确定了circ-ZKSCAN1在NSCLC样本和细胞系中的表达水平,结合临床病理资料和随访数据进行分析和预后关系。我们使用了生物信息学软件circbank、Circ Interactome、TargetScan和miranda来预测circRNA-mi RNA和mirNA-mRNA的相互作用。我们制备了siRNA瞬转A549细胞和H1299细胞后,利用CCK-8测定法和集落形成实验测定基因与细胞增殖关系;使用划痕愈合法和Transwell测定法评估细胞迁移和侵袭;利用流式细胞数检测肿瘤细胞凋亡;通过RNA下拉实验和荧光素酶报告基因分析法分析了NSCLC细胞中circ-ZKSCAN1和mir-330-5p的相互作用关系。利用蛋白印迹法确定了mirNA和下游蛋白及通路的调控关系;免疫组化实验评估肿瘤中Ki67含量及细胞增殖能力。最后,通过裸鼠皮下成瘤异物种植实验验证了circRNA和肿瘤生长大小的关系。结果结果表明,Circ-ZKSCAN1在NSCLC中组织和细胞系中表达明显上调,与NSCLC的恶性特征和不良预后密切相关,并与肿瘤大小和临床分期有关。随后的实验表明,Circ-ZKSCAN1在体内外均能抑制NSCLC细胞的生长。重要的是,Circ-ZKSCAN1可以作为致癌mi R-330-5p的海绵,上调FAM83A的表达,进而抑制MApK信号转导通路,从而促进NSCLC的进展。有趣的是,Circ-ZKSCAN1过表达导致FAM83A表达增加,进而促进Circ-ZKSCAN1的表达。结论及意义Circ-ZKSCAN1是NSCLC发生发展的关键正向调控因子,阐明了Circ-ZKSCAN1/mir-330-5p/FAM83A反馈环促进NSCLC进展,是理想的早期诊断和潜在的治疗靶点。

关键词：非小细胞肺癌 Circ-ZKSCAN1 预后 FAM83A mir-330-5p

角化细胞源外泌体携带mir-330-5p通过靶向TYR抑制黑色素细胞色素生成

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

角化细胞源外泌体携带miR-330-5p通过靶向TYR抑制黑色素细胞色素...

作者：刘颖山西农业大学

学位级别：硕士

色素沉着需要复杂的机制来调控。多项研究表明microRNAs(mirNAs)可以参与调控色素沉着,但是机制尚未阐明。外泌体作为细胞间的通讯载体,能够与相邻或远处的细胞进行交流。本研究证实了外泌体携带mirNAs参与角化细胞和黑色素细胞串扰的... 详细信息

色素沉着需要复杂的机制来调控。多项研究表明microRNAs(mirNAs)可以参与调控色素沉着,但是机制尚未阐明。外泌体作为细胞间的通讯载体,能够与相邻或远处的细胞进行交流。本研究证实了外泌体携带mirNAs参与角化细胞和黑色素细胞串扰的一种新型调节色素沉着的机制。且运用多种分子生物学技术研究分析了 mir-330-5p对色素沉着的抑制作用,外泌体特异性标志物TSG101在角化细胞和黑色素细胞中的表达与定位,将黑色素细胞与过量表达mir-330-5p的外泌体共培养,检测共培养后黑色素细胞产生黑色素含量的变化,以及靶基因TYR及其相关基因TYRp1、TYRp2和MITF表达量的变化。结果如下:(1)利用qRT-pCR技术和western blotting技术分析黑色素细胞过表达mir-330-5p后,TYR、TYRp1和TYRp2的相对表达量。二项结果均表明mir-330-5p可有效抑制TYR及其相关基因的表达,同时检测黑色素含量,结果显示过表达组黑色素含量降低。(2)利用免疫荧光、qRT-pCR技术和western blotting技术鉴定角化细胞分泌的外泌体。免疫荧光结果显示:TSG101在角化细胞中正常表达;提取角化细胞源外泌体蛋白,western blotting结果显示外泌体特异性标志物TSG101和CD9均呈阳性反应;最后qRT-pCR分析显示角化细胞中过表达mir-330-5p可使外泌体高表达mir-330-5p。(3)通过荧光原位杂交、免疫荧光、qRT-pCR技术和western blotting技术分析角化细胞源外泌体与黑色素细胞之间的相互作用。结果证明过表达mir-330-5p的角化细胞源外泌体可以显著提高黑色素细胞中mir-330-5p的表达水平;过表达mir-330-5p的角化细胞源外泌体可以显著抑制黑色素细胞中TYR的表达和黑色素的合成。本研究结果表明在表皮黑色素单元中角化细胞和黑色素细胞的交流可通过外泌体携带mirNAs来完成。同时,这项研究揭示了外泌体在黑色素细胞色素沉着中的重要作用,为黑色素生成开辟了一条新的途径。

关键词：色素沉着外泌体 mir-330-5p TYR