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中国矫形外科杂志 2021年第14期29卷 1313-1318页

作者：邵林李同相肖睿王冰玲邓焰军宜宾市第一人民医院骨二科四川宜宾644000 宜宾市第一人民医院整形烧伤科四川宜宾644000

[目的]探讨沉默LncRNA TUG1对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响。[方法]采用qRT-pCR检测人成骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞HOS、放射抵抗的骨肉瘤细胞HOS-R中TUG1与mir-328-3p的表达量;采用不同方式检测沉默TUG1与mir-328-3p过表达对HOS-R细胞... 详细信息

[目的]探讨沉默LncRNA TUG1对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响。[方法]采用qRT-pCR检测人成骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞HOS、放射抵抗的骨肉瘤细胞HOS-R中TUG1与mir-328-3p的表达量;采用不同方式检测沉默TUG1与mir-328-3p过表达对HOS-R细胞放射敏感性的影响;TUG1的靶基因mir-328-3p;沉默TUG1对HOS-R细胞中mir-328-3p表达量的影响;HOS-R细胞凋亡率;抑制mir-328-3p联合沉默TUG1对HOS-R细胞放射敏感性及细胞凋亡率的影响。[结果]与hFOB 1.19细胞相比,TUG1在HOS与HOS-R细胞中表达量较高(pmir-328-3p的表达量显著较低(ppmir-328-3p显著降低HOS-R细胞存活分数(pmir-328-3p并调节其表达水平;抑制mir-328-3p联合沉默TUG1可逆转沉默TUG1对HOS-R细胞放射敏感性的增强作用。[结论]本研究表明LncRNA TUG1可通过靶向调控mir-328-3p的表达促进骨肉瘤细胞凋亡,并抑制其存活,从而增加骨肉瘤细胞的放射敏感性。

关键词：长链非编码RNA TUG1 mir-328-3p 骨肉瘤放射敏感性

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蛋氨酸限制通过内源性硫化氢改善高脂饮食小鼠脂代谢和氧化还原状态的研究

蛋氨酸限制通过内源性硫化氢改善高脂饮食小鼠脂代谢和氧化还原状...

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作者：王雅楠江南大学

学位级别：硕士

目的:高脂饮食会诱导机体脂代谢紊乱和氧化还原状态失衡。蛋氨酸限制可以减少高脂饮食下机体的脂肪积累和氧化应激反应,但其机制尚需深入研究。研究发现硫化氢(HS)在降低机体氧化应激、改善脂代谢紊乱等方面发挥着重要的作用。本文旨在... 详细信息

目的:高脂饮食会诱导机体脂代谢紊乱和氧化还原状态失衡。蛋氨酸限制可以减少高脂饮食下机体的脂肪积累和氧化应激反应,但其机制尚需深入研究。研究发现硫化氢(HS)在降低机体氧化应激、改善脂代谢紊乱等方面发挥着重要的作用。本文旨在研究蛋氨酸限制对高脂饮食小鼠脂代谢失调、氧化应激的改善作用以及对内源性HS的调节作用,探究蛋氨酸限制改善脂代谢和调控转硫途径的潜在机制。方法:60只C57BL/6雄性小鼠随机分成3组:低脂正常饮食组(CON组,4%脂肪,0.86%蛋氨酸);高脂正常蛋氨酸饮食组(HF组:20%脂肪,0.86%蛋氨酸);高脂蛋氨酸限制饮食组(MR组:20%脂肪,0.17%蛋氨酸)。每周监测体重,用CLAMS动物代谢系统监测小鼠的活体代谢状态。分别随机选出10只在11周和22周禁食8 h后处死,取血液和肝脏组织,观察肝脏切片,测定血脂和肝脏脂肪含量,测定血浆和肝脏的氧化还原状态相关指标;测定血浆和肝脏内源性HS水平及肝脏转硫途径相关酶的活性;用q pCR技术测定肝脏脂代谢相关基因及转硫途径相关酶的m RNA表达;用western blot测定转硫途径相关酶的蛋白表达;用高通量测序技术对肝脏组织micro RNA(mi RNA)进行转录组测序;用q pCR技术验证有差异mi RNAs的m RNA表达;并用双荧光素酶报告基因系统检测mi RNA-328-3p与胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的靶标关系。结果:短期(11周)饲喂蛋氨酸限制饮食,HF组小鼠体重显著高于CON组,而MR组小鼠体重显著低于HF组。与HF组相比,饮食MR组小鼠血浆和肝脏中的甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量显著降低;肝脏脂肪合成相关基因脂肪酸合成酶(FAS)m RNA的表达水平显著降低,肝脏脂肪分解相关基因肉毒碱棕榈酰转移酶1(CpT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(ppARα)m RNA的表达水平显著增加;血浆丙二醛(MDA)含量显著降低,血浆和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性显著增加;肝脏内源性HS、CSE m RNA和蛋白表达水平显著增加;肝脏mi R-328-3p、mi R-872-5p和mi R-30c-5p m RNA的表达水平显著降低。中长期(22周)饲喂蛋氨酸限制饮食,HF组小鼠体重显著高于CON组。与HF组相比,MR组小鼠体重、血浆和肝脏中的TG和TC含量显著降低;肝脏脂肪合成相关基因FAS、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBp1c)m RNA的表达水平显著下调,脂肪分解相关基因胆固醇7α-羟化酶(CYp7A1)、CpT1和ppARαm RNA的表达水平显著上调;血浆中总抗氧化能力(T-AOC)、GSH-px活性和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值显著增加,MDA水平显著下降;肝脏中TAOC和GSH-px活性显著增加,MDA含量和GSH/GSSG比值显著降低;血浆和肝脏HS含量显著增加;肝脏CSE酶活、CSE m RNA和CSE蛋白的表达水平显著上调;肝脏中mi R-328-3p和mi R-194-5p m RNA的表达水平显著下调。双荧光素酶报告基因检测系统结果显示,在293FT细胞中转染突变型CSE 3’-UTR载体质粒,mi R-328-3p组与NC组的相对荧光素酶活性值无显著性差异;转染CSE 3’-UTR载体质粒,mi R-328-3p组的相对荧光素酶活性与NC组相比显著被抑制,说明mi R-328-3p与CSE m RNA的3’-UTR存在特异性的结合位点,可以特异性调控CSE m RNA转录后的表达。结论:高脂饮食导致小鼠氧化还原状态失衡,抑制了内源性HS的产生,造成了脂代谢相关基因的表达失调,最终导致小鼠体重显著增加;mi R-328-3p与CSE m RNA的3’-UTR存在特异性的结合位点,短期和中长期的蛋氨酸限制饮食通过抑制肝脏mi R-328-3p的表达,提高了CSE的蛋白表达,增加内源性HS的生成,从而显著抑制了氧化应激,并改善了高脂饮食小鼠诱导的脂代谢紊乱。

关键词：蛋氨酸限制脂代谢氧化应激内源性H2S mir-328-3p

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缺血性脑卒中患者外周血microRNA差异性表达与患者临床预后的关系

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南昌大学学报（医学版） 2023年第2期63卷 45-49,69页

作者：王逍李庆黄晓峰王秋月张卓然陕西中医药大学附属医院脑病医院一病区陕西咸阳712000 西安医学院附属宝鸡医院神经内科陕西宝鸡721006 陕西省中医医院老年病科西安710000

目的探讨缺血性脑卒中(CIS)患者外周血microRNA差异性表达与临床预后的关系。方法选取2019年6月至2021年6月CIS患者36例,健康体检者25例,入组时收集其人口统计学和外周血样本检查基线数据。收集CIS患者发病第2天(急性期)第10天的血液样... 详细信息

目的探讨缺血性脑卒中(CIS)患者外周血microRNA差异性表达与临床预后的关系。方法选取2019年6月至2021年6月CIS患者36例,健康体检者25例,入组时收集其人口统计学和外周血样本检查基线数据。收集CIS患者发病第2天(急性期)第10天的血液样本。使用高通量测序(HTS)分析和筛选差异microRNA。单因素方差分析评估各组的人口统计学特征和临床实验室基线间的差异,pearson相关系数用于相关性分析,ROC曲线分析microRNA的预测价值。结果CIS患者急性期和恢复期有58个差异mirNA,其中上调30个,下调28个。不同的血清mirNA包括mir-328-3p、mir-1301-3p、mir-320a等。其中,27个mirNA也与健康体检者不同,包括15个上调和12个下调的mirNA。CIS患者和健康体检者间葡萄糖、总胆固醇间差异无统计学意义,2组的高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、mir-328-3p水平和脂蛋白(a)间差异有统计学意义(p3的脑卒中患者血清mir-328-3p表达明显降低;血清mir-328-3p在第2天(急性期)明显降低;预后不良的患者与预后良好的患者相比,mir-328-3p的表达较低,差异有统计学意义(pmir-328-3p与NIHSS评分进展相关(r=-0.694,pmir-328-3p与NIHSS评分进展相关(r=-0.559,pmir-328-3p的AUC为0.920,恢复期mir-328-3p的AUC为0.833,差异有统计学意义(pmir-328-3p在CIS的预后中起着关键的预测作用,在CIS诊断和治疗中具有重要意义。

关键词：缺血性脑卒中 microRNA mir-328-3p 预后

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