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18β-glycyrrhetinic acid promotes gastric cancer cell autophagy and inhibits proliferation by regulating mir-328-3p/signal transducer and activator of transcription 3

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World Journal of Gastroenterology 2023年第27期29卷 4317-4333页

作者： Yi Yang Yi Nan Yu-Hua Du Shi-Cong Huang Dou-Dou Lu Jun-Fei Zhang Xia Li Yan Chen Lei Zhang Ling Yuan Ningxia Medical University Yinchuan 750004Ningxia Hui Autonomous RegionChina Key Laboratory of Ningxia Minority Medicine Modernization Ministry of Education Ningxia Medical UniversityYinchuan 750004Ningxia Hui Autonomous RegionChina

BACKGROUND Gastric cancer(GC)is one of the most common cancer types worldwide,and its prevention and treatment methods have garnered much attention.As the active ingredient of licorice,18β-glycyrrhetinic acid(18β-GRA)has a variety of pharmacological effects.The aim of this study was to explore the effective target of 18β-GRA in the treatment of GC,in order to provide effective ideas for the clinical prevention and treatment of GC.AIM To investigate the mechanism of 18β-GRA in inhibiting cell proliferation and promoting autophagy flux in GC cells.METHODS Whole transcriptomic analyses were used to analyze and screen differentially expressed microRNAs(mirNAs)in GC cells after 18β-GRA intervention.Lentivirus-transfected GC cells and the Cell Counting Kit-8 were used to detect cell proliferation ability,cell colony formation ability was detected by the clone formation assay,and flow cytometry was used to detect the cell cycle and apoptosis.A nude mouse transplantation tumor model of GC cells was constructed to verify the effect of mir-328-3p overexpression on the tumorigenicity of GC cells.Tumor tissue morphology was observed by hematoxylin and eosin staining,and microtubule-associated protein light chain 3(LC3)expression was detected by immunohistochemistry.Transmir,STRING,and mirWalk databases were used to predict the relationship between mir-328-3p and signal transducer and activator of transcription 3(STAT3)-related information.Expression of STAT3 mRNA and mir-328-3p was detected by quantitative polymerase chain reaction(qpCR)and the expression levels of STAT3,phosphorylated STAT3(p-STAT3),and LC3 were detected by western blot analysis.The targeted relationship between mir-328-3p and STAT3 was detected using the dual-luciferase reporter gene system.AGS cells were infected with monomeric red fluorescent protein-green fluorescent protein-LC3 adenovirus double label.LC3 was labeled and autophagy flow was observed under a confocal laser microscope.RESULTS The expression of mir-328-3p was significantly upregulated afte

关键词： 18β-glycyrrhetinic acid mir-328-3p Signal transducer and activator of transcription 3 Cell proliferation Autophagy flow

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mir-328-3p靶向下调FOXp3抑制IL-17诱导的Caco-2人结直肠癌细胞侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第6期38卷 487-493页

作者：张伟丽信阳职业技术学院医学院病理教研室河南信阳464000

目的研究mir⁃328⁃3p对白细胞介素17(IL⁃17)诱导的结直肠癌Caco⁃2细胞转移的影响和机制。方法实时定量pCR检测Caco⁃2结直肠上皮细胞和结直肠癌细胞中mir⁃328⁃3p、叉头盒p3(FOXp3)和IL⁃17 mRNA表达。将mir⁃328⁃3p模拟物(mimics)转染至结... 详细信息

目的研究mir⁃328⁃3p对白细胞介素17(IL⁃17)诱导的结直肠癌Caco⁃2细胞转移的影响和机制。方法实时定量pCR检测Caco⁃2结直肠上皮细胞和结直肠癌细胞中mir⁃328⁃3p、叉头盒p3(FOXp3)和IL⁃17 mRNA表达。将mir⁃328⁃3p模拟物(mimics)转染至结直肠癌Caco⁃2细胞中,然后给予IL⁃17诱导处理后,Transwell^(TM)小室测定细胞侵袭和迁移,明胶酶谱法测定细胞中基质金属蛋白酶2(MMp2)和MMp9活性。双荧光素酶报告基因实验验证mir⁃328⁃3p与FOXp3的靶向调控关系,蛋白质印迹法检测mir⁃328⁃3p mimics对Caco⁃2细胞中FOXp3蛋白表达的影响。将FOXp3过表达载体(pcDNA3.1⁃FOXp3)和mir⁃328⁃3p mimics共转染到Caco⁃2细胞,利用上述相同方法测定细胞侵袭、迁移和细胞MMp2、MMp9活性。结果与结直肠上皮细胞比较,mir⁃328⁃3p在结直肠癌细胞中的表达水平降低,FOXp3和IL⁃17 mRNA水平升高。转染mir⁃328⁃3p mimics可降低IL⁃17诱导处理后的Caco⁃2细胞侵袭和迁移能力及细胞MMp2、MMp9活性。mir⁃328⁃3p靶向结合并抑制Caco⁃2细胞FOXp3蛋白表达。转染pcDNA3.1⁃FOXp3可降低mir⁃328⁃3p mimics对IL⁃17诱导的Caco⁃2细胞侵袭、迁移及细胞MMp2、MMp9活性的影响。结论mir⁃328⁃3p可能通过靶向抑制FOXp3减弱IL⁃17诱导的结直肠癌Caco⁃2细胞的侵袭和迁移能力。

关键词：结直肠癌 mir-328-3p 转移白细胞介素17(IL-17)

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mir-328-3p-Akt/mTOR轴在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞生长中的作用及机制研究

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中国实验动物学报 2023年第6期31卷 697-705页

作者：刘喜红杜晓丹范孟杨徐柳清赵培源河南中医药大学医学院郑州450046

目的以U251细胞和原位胶质瘤小鼠模型为研究对象,观察mir-328-3p对脑胶质瘤细胞生长和凋亡的影响,探讨mir-328-3p-Akt/mTOR轴在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞生长中的作用及机制。方法在U251细胞中过表达mir-328-3p,再结合雷公藤甲素的... 详细信息

目的以U251细胞和原位胶质瘤小鼠模型为研究对象,观察mir-328-3p对脑胶质瘤细胞生长和凋亡的影响,探讨mir-328-3p-Akt/mTOR轴在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞生长中的作用及机制。方法在U251细胞中过表达mir-328-3p,再结合雷公藤甲素的处理,采用qRT-pCR、CCK8、克隆形成实验、流式细胞术、Western Blot等方法检测mir-328-3p在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞U251生长中的作用;构建mir-328-3p稳定过表达的原位胶质瘤小鼠模型,采用qRT-pCR和小动物活体成像体内验证mir-328-3p在雷公藤甲素抑制脑胶质瘤细胞生长的作用。结果 mir-328-3p在脑胶质瘤细胞和组织中表达降低,其表达水平与原发性和复发性脑胶质瘤患者总生存率呈正相关;mir-328-3p与雷公藤甲素可以协同作用抑制脑胶质瘤细胞的生长,促进脑胶质瘤细胞的凋亡,抑制Akt/mTOR信号通路的激活。结论 mir-328-3p在脑胶质瘤细胞中起到抑癌基因的作用,雷公藤甲素可能通过mir-328-3p促进脑胶质瘤细胞凋亡,抑制Akt/mTOR信号通路的激活,进而抑制脑胶质瘤细胞的生长。

关键词：脑胶质瘤雷公藤甲素 mir-328-3p 凋亡

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mir-328-3p靶向pINK1基因对胃癌细胞增殖侵袭的影响机制研究

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中国煤炭工业医学杂志 2022年第2期25卷 121-126页

作者：张辉靳伟民韩一梅金瑞陕西省汉中市中心医院 723000

目的探究mir-328-3p靶向pINK1基因对胃癌(GC)细胞增殖侵袭的影响机制,旨在为GC新型靶向治疗提供参考。方法收集2019年1月—2021年1月汉中市中心医院收治的91例GC患者癌组织及癌旁组织新鲜标本(冻存于液氮罐内),对MGC-803胃癌细胞株进行... 详细信息

目的探究mir-328-3p靶向pINK1基因对胃癌(GC)细胞增殖侵袭的影响机制,旨在为GC新型靶向治疗提供参考。方法收集2019年1月—2021年1月汉中市中心医院收治的91例GC患者癌组织及癌旁组织新鲜标本(冻存于液氮罐内),对MGC-803胃癌细胞株进行培养,依据细胞转染情况分为对照组(正常培养的MGC-803细胞)、mir-328-3p组(转染mir-328-3p模拟物)、pINK1-pcDNA组(转染pINK1-pcDNA)、mir-328-3p+pINK1-pcDNA组(mir-328-3p和pINK1-pcDNA共转染)。RT-pCR检测胃癌癌组织、癌旁组织中mir-328-3p表达情况,对比各组pINK1蛋白及mRNA表达量、细胞增殖情况、细胞增殖相关蛋白(Cyclin B1、Cyclin D1)表达、细胞侵袭情况。结果GC患者癌组织中mir-328-3p相对表达量明显低于癌旁组织(ppINK1-pcDNA组pINK1蛋白及mRNA表达量明显高于对照组、mir-328-3p+pINK1-pcDNA组(pmir-328-3p组细胞增殖率、细胞增殖相关蛋白Cyclin B1、Cyclin D1表达水平、穿膜细胞数较对照组、pINK1-pcDNA组、mir-328-3p+pINK1-pcDNA组明显低,对照组、mir-328-3p+pINK1-pcDNA组细胞增殖率、细胞增殖相关蛋白Cyclin B1、Cyclin D1表达水平、穿膜细胞数较pINK1-pcDNA组明显低,差异有统计学意义(pmir-328-3p可通过靶向调控pINK1基因,明显抑制GC细胞增殖侵袭,为GC的新型靶向治疗提供必要的参考。

关键词：胃癌 mir-328-3p pINK1 增殖侵袭

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绝经后骨质疏松患者骨组织中mir-124-3p、mir-328-3p、mir-338-3p的表达

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吉林医学 2022年第7期43卷 1771-1774页

作者：牟朋林麦彩园曹燕明王斌广州新海医院广东广州510080 广东省妇幼保健院广东广州510010 广州医科大学附属第二医院广东广州510260 佛山市三水区人民医院广东佛山528100

目的:探讨绝经后骨质疏松患者骨组织中mir-124-3p、mir-328-3p、mir-338-3p表达。方法:选取30例绝经后骨质疏松妇女(pMOp组)和30例非骨质疏松的绝经后妇女(对照组),髂前上棘穿刺取骨组织300mg,研磨、匀浆,通过RT-qpCR方法分析检测两组mi... 详细信息

目的:探讨绝经后骨质疏松患者骨组织中mir-124-3p、mir-328-3p、mir-338-3p表达。方法:选取30例绝经后骨质疏松妇女(pMOp组)和30例非骨质疏松的绝经后妇女(对照组),髂前上棘穿刺取骨组织300mg,研磨、匀浆,通过RT-qpCR方法分析检测两组mir-124-3p、mir-328-3p、mir-338-3p的表达水平。结果:mir-338-3p在pMOp组骨组织中的表达水平升高;mir-124-3p、mir-328-3p在pMOp组骨组织中的表达水平降低。结论:mir-124-3p、mir-328-3p、mir-338-3p可调节成骨、破骨引起pMOp,可通过调控其表达干预pMOp的发生和治疗。

关键词：绝经后骨质疏松 mir-124-3p mir-328-3p mir-338-3p

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mir-328-3p靶向1基因抑制非小细胞肺癌细胞增殖侵袭

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国际遗传学杂志 2018年第2期41卷 79-85页

作者：孙瑜王慧吴宇晗周红哈尔滨医科大学附属第一医院呼吸内科

目的 MicroRNAs(mirNAs)调控多种恶性肿瘤的发生发展。mir-328-3p具有抑制非小细胞肺癌增殖的作用。本文主要探讨mir-328-3p如何抑制非小细胞肺癌增殖。方法首先通过qRT-pCR的方法检测在非小细胞肺癌患者癌与癌旁中mir-328-3p的表达。通... 详细信息

目的 MicroRNAs(mirNAs)调控多种恶性肿瘤的发生发展。mir-328-3p具有抑制非小细胞肺癌增殖的作用。本文主要探讨mir-328-3p如何抑制非小细胞肺癌增殖。方法首先通过qRT-pCR的方法检测在非小细胞肺癌患者癌与癌旁中mir-328-3p的表达。通过CCK-8、细胞克隆形成以及细胞迁移的方法检测转染mir-328-3p后,对A549以及H1299细胞增殖、侵袭的影响。荧光素酶报告基因分析结果显示pINK1是mir-328-3p的靶基因。免疫蛋白印迹检测转染mir-328-3p后cyclinB1、cyclinD1以及pINK1蛋白的变化。结果研究结果表明,mir-328-3p在非小细胞肺癌患者以及肺癌细胞中相对于癌旁组织以及正常细胞表达显著下调(p=0.0312)。此外,mir-328-3p显著抑制肺癌细胞A549以及H1299细胞的增殖、侵袭能力。此外,过表达mir-328-3p能够抑制A549以及H1299细胞中cyclinB1、cyclinD1蛋白的表达。荧光素酶活性检测以及免疫蛋白印记结果表明pINK1是mir-328-3p的直接靶点。结论结果证明,mir-328-3p在非小细胞肺癌患者中是一种肿瘤抑制因子,可能成为非小细胞肺癌患者的一个潜在的治疗靶点。

关键词：非小细胞肺癌 mir-328-3p pINK1 细胞增殖

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血浆循环mir-328-3p与风湿性心脏病合并心房颤动的关系

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中国当代医药 2019年第16期26卷 8-11,15页

作者：唐春仕卢新林谭利辉陈文江湖南省郴州市第四人民医院心血管内科湖南郴州423000 湖南省郴州市第四人民医院急诊科湖南郴州423000 重庆医科大学附属第二医院心血管内科重庆400010

目的探讨血浆循环mir-328-3p是否与风湿性心脏病合并心房颤动的发生有关,并初步探讨其发病机制。方法选取2017年8月~2018年7月于湖南省郴州市第四人民医院心血管内科住院的19例风湿性心脏病合并心房颤动患者作为观察组,选取同期21例风... 详细信息

目的探讨血浆循环mir-328-3p是否与风湿性心脏病合并心房颤动的发生有关,并初步探讨其发病机制。方法选取2017年8月~2018年7月于湖南省郴州市第四人民医院心血管内科住院的19例风湿性心脏病合并心房颤动患者作为观察组,选取同期21例风湿性心脏病窦性心律患者作为对照组。采用qRT-pCR检测其血浆循环mir-328-3p的表达;分析血浆循环mir-328-3p相对表达量的ROC曲线;采用mirFocus和starBase等生物信息学软件对mir-328-3p进行生物信息预测。结果观察组的血浆循环mir-328-3p mRNA表达水平为0.31±0.05,低于对照组的0.69±0.03,差异有统计学意义(pmir-328-3p曲线下面积为0.9323,95%置信区间为0.8598~1.0005(pmir-328-3p的KEGG信号通路主要有细胞分裂、结合蛋白、心室形成、调控胰岛素受体信号通路、调控pI3K通路、调控Wnt通路等有关,其靶基因主要是TLE1、USp37、EN2、NRIp1、FOXO4等。结论血浆循环mir-328-3p可能参与风湿性心脏病合并心房颤动的发生,可以作为风湿性心脏病合并心房颤动的生物标志物;其有可能通过调控pI3K通路和Wnt通路而导致风湿性心脏病合并心房颤动的发生。

关键词： mir-328-3p 风湿性心脏病心房颤动生物标志物信号通路

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小檗碱联合mir-328-3p对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力的影响

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中国药师 2021年第7期24卷 262-266页

作者：赵利华徐兴才杨鑫广元市中心医院药学部四川广元628000

目的:探讨小檗碱对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响及可能机制。方法:体外培养人骨髓间充质干细胞,分为对照组、不同剂量(低、中、高)小檗碱组、mir-NC组、mir-328-3p组、高剂量+anti-mir-NC组和高剂量+anti-mir-328-3p组,细胞计... 详细信息

目的:探讨小檗碱对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响及可能机制。方法:体外培养人骨髓间充质干细胞,分为对照组、不同剂量(低、中、高)小檗碱组、mir-NC组、mir-328-3p组、高剂量+anti-mir-NC组和高剂量+anti-mir-328-3p组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖情况,实时定量聚合酶链式反应(RT-qpCR)法检测mir-328-3p表达,蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)的表达及成骨分化相关蛋白碱性磷酸酶(AKp)、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OpN)的表达。结果:与对照组比较,不同剂量小檗碱组骨髓间充质干细胞光密度(OD)值、细胞中Cyclin D1、AKp、OCN和OpN的蛋白表达及mir-328-3p表达升高(pp21蛋白表达降低(pmir-NC组比较,mir-328-3p组骨髓间充质干细胞OD值及细胞中Cyclin D1、AKp、OCN和OpN蛋白表达升高(pp21蛋白表达降低(pmir-NC组比较,高剂量+anti-mir-328-3p组骨髓间充质干细胞OD值及细胞中Cyclin D1、AKp、OCN和OpN蛋白表达降低(pp21蛋白表达升高(pmir-328-3p表达促进骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化。

关键词：小檗碱骨髓间充质干细胞 mir-328-3p 细胞增殖成骨分化

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长链非编码RNA AC008通过mir-328-3p–AQp1/ANKH轴促进骨关节炎的发生

长链非编码RNA AC008通过miR-328-3p–AQP1/ANKH轴促进骨关节炎的...

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江苏省遗传学会2019年学术研讨会

作者：杨家书马长艳南京医科大学基础医学院医学遗传学系

骨关节炎（Osteoarthritis, OA）是一种慢性关节疾病,目前很难治愈。长链非编码RNA（lncRNA）参与多种疾病的发生发展过程,包括骨关节炎。AC008是我们通过基因芯片技术筛选到的在骨关节炎患者软骨组织中表达显著上调的一条lncRNA,其在... 详细信息

骨关节炎（Osteoarthritis, OA）是一种慢性关节疾病,目前很难治愈。长链非编码RNA（lncRNA）参与多种疾病的发生发展过程,包括骨关节炎。AC008是我们通过基因芯片技术筛选到的在骨关节炎患者软骨组织中表达显著上调的一条lncRNA,其在骨关节炎中的具体作用及机制尚不清楚。我们通过Real-time pCR进一步验证了AC008在骨关节炎患者软骨组织中的表达上调。此外,我们发现在原代软骨细胞中过表达AC008明显抑制软骨细胞的增殖,促进细胞凋亡和细胞外基质降解,敲低AC008表达则呈现相反的结果。mi R-328-3p以及AQp1和ANKH是我们通过基因芯片技术筛选得到的在骨关节炎中患者软骨组织中表达显著下调的mi RNA以及表达显著上调的m RNA。通过使用在线工具预测,我们发现mi R-328-3p可以和AC008结合,且AQp1和ANKH是mi R-328-3p的潜在靶基因。FISH的结果表明,AC008定位于细胞质。荧光素酶报告基因实验的结果表明,AQp1和ANKH是mi R-328-3p的直接靶基因,且AC008能够直接与mi R-328-3p结合。进一步地,我们通过Real-time pCR实验证明了mi R-328-3p在人骨关节炎组织中表达量显著降低,而AQp1和ANKH的表达则显著升高。回补实验结果表明,mi R-328-3p可以逆转AC008对软骨细胞增殖的抑制及其对细胞凋亡和细胞外基质降解的促进作用。此外,AQp1和ANKH过表达可以逆转mi R-328-3p对软骨细胞增殖促进作用及对ECM降解和凋亡的抑制作用。总之,AC008以ceRNA的方式参与mi R-328-3p对AQp1和ANKH表达的调控,进而抑制软骨细胞增殖、促进细胞凋亡和细胞外基质降解,从而在骨关节炎的发生中发挥重要作用。该结果提示:lncRNA AC008–mir-328-3p–AQp1/ANKH轴可能是OA的治疗靶点。

关键词：骨关节炎 LncRNA mir-328-3p AQp1 ANKH 软骨细胞

来源： cnki会议评论

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缺血性脑卒中患者外周血microRNA差异性表达与患者临床预后的关系

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南昌大学学报（医学版） 2023年第2期63卷 45-49,69页

作者：王逍李庆黄晓峰王秋月张卓然陕西中医药大学附属医院脑病医院一病区陕西咸阳712000 西安医学院附属宝鸡医院神经内科陕西宝鸡721006 陕西省中医医院老年病科西安710000

目的探讨缺血性脑卒中(CIS)患者外周血microRNA差异性表达与临床预后的关系。方法选取2019年6月至2021年6月CIS患者36例,健康体检者25例,入组时收集其人口统计学和外周血样本检查基线数据。收集CIS患者发病第2天(急性期)第10天的血液样... 详细信息

目的探讨缺血性脑卒中(CIS)患者外周血microRNA差异性表达与临床预后的关系。方法选取2019年6月至2021年6月CIS患者36例,健康体检者25例,入组时收集其人口统计学和外周血样本检查基线数据。收集CIS患者发病第2天(急性期)第10天的血液样本。使用高通量测序(HTS)分析和筛选差异microRNA。单因素方差分析评估各组的人口统计学特征和临床实验室基线间的差异,pearson相关系数用于相关性分析,ROC曲线分析microRNA的预测价值。结果CIS患者急性期和恢复期有58个差异mirNA,其中上调30个,下调28个。不同的血清mirNA包括mir-328-3p、mir-1301-3p、mir-320a等。其中,27个mirNA也与健康体检者不同,包括15个上调和12个下调的mirNA。CIS患者和健康体检者间葡萄糖、总胆固醇间差异无统计学意义,2组的高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、mir-328-3p水平和脂蛋白(a)间差异有统计学意义(p3的脑卒中患者血清mir-328-3p表达明显降低;血清mir-328-3p在第2天(急性期)明显降低;预后不良的患者与预后良好的患者相比,mir-328-3p的表达较低,差异有统计学意义(pmir-328-3p与NIHSS评分进展相关(r=-0.694,pmir-328-3p与NIHSS评分进展相关(r=-0.559,pmir-328-3p的AUC为0.920,恢复期mir-328-3p的AUC为0.833,差异有统计学意义(pmir-328-3p在CIS的预后中起着关键的预测作用,在CIS诊断和治疗中具有重要意义。

关键词：缺血性脑卒中 microRNA mir-328-3p 预后

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