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mir-221-3p对胰腺癌细胞凋亡的抑制作用及机制研究

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交通医学 2024年第3期38卷 229-233页

作者：钱静石宇严晓娣卞银珠南通大学附属医院放疗科江苏226001 南京大学医学院附属盐城第一医院/盐城市第一人民医院肿瘤科

目的:研究mir-221-3p对胰腺癌细胞凋亡的抑制作用及可能机制。方法:对人胰腺癌细胞株pATU 8988T进行mir-221-3p质粒转染,设为mir-221-3p mimics组、mimics NC组、mir-221-3p inhibitor组及inhibitor NC组,以未处理的pATU8988T细胞作为空白对照(NC)组。采用实时荧光定量pCR(qRT-pCR)验证细胞转染效率;采用流式细胞术观察mir-221-3p对胰腺癌细胞凋亡的影响;采用Western blotting法测定各组细胞中p53、磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,pTEN)蛋白表达。结果:qRT-pCR结果显示,与NC组、mimics NC组及inhibitor NC组比较,mir-221-3p mimics组细胞mir-221-3p表达显著增高,mir-221-3p inhibitor组表达明显降低,差异均有统计学意义(pmir-221-3p inhibitor组细胞凋亡明显增加,mir-221-3p mimics组细胞凋亡明显减少,差异均有统计学意义(pp53、pTEN蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(p>0.05),而mir-221-3p mimics组细胞中p53、pTEN蛋白表达水平较mimics NC组明显下降,差异均有统计学意义(ppATU 8988T胰腺癌细胞中mir-221-3p表达上调,细胞凋亡受到抑制。mir-221-3p可能通过下调p53、pTEN蛋白表达促进胰腺癌的发生发展。

关键词：胰腺癌 mir-221-3p p53 磷酸酶与张力蛋白同源物细胞凋亡

mir-221-3p和mir-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后生殖预后的相关性分析

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中国性科学 2024年第1期33卷 54-58页

作者：蒲章卫窦晓梦董羊羊纪江海宋欣沧州市人民医院妇科河北沧州061000

目的探讨mir-221-3p和mir-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后生殖预后的相关性。方法选取2019年10月至2021年9月就诊于沧州市人民医院的100例输卵管性不孕患者作为研究对象,根据腹腔镜术后1年内是否妊娠分为妊娠组(n=66)和未... 详细信息

目的探讨mir-221-3p和mir-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后生殖预后的相关性。方法选取2019年10月至2021年9月就诊于沧州市人民医院的100例输卵管性不孕患者作为研究对象,根据腹腔镜术后1年内是否妊娠分为妊娠组(n=66)和未妊娠组(n=34)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(pCR)法检测患者血清mir-221-3p和mir-486-5p的水平并进行分析,采用化学免疫发光法检测血清卵泡刺激素(FSH)、催乳素(pRL)和黄体生成素(LH)水平。收集并比较两组患者临床特征,采用pearson相关性分析患者妊娠情况与血清mir-221-3p和mir-486-5p表达的相关性,采用Logistic回归分析输卵管性不孕症妊娠情况的影响因素。结果妊娠组患者血清mir-221-3p和mir-486-5p表达水平显著高于未妊娠组患者(pppmir-221-3p、mir-486-5p水平均呈负相关(r=-0.675、-0.585,pmir-221-3p及mir-486-5p的表达、FSH、LH、HSG检查、盆腔粘连和盆腔炎病史为患者妊娠情况的影响因素(pmir-221-3p和mir-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后未妊娠呈负相关,对判断患者预后情况具有一定的临床意义。

关键词：输卵管性不孕症 mir-221-3p mir-486-5p 预后

SLC26A4-AS1介导mir-221-3p/ERBB4轴调控未分化甲状腺癌

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解剖科学进展 2024年

作者：潘星合李尤张睿孙成林郭宏鹏沈阳医学院附属中心医院普外一科沈阳市苏家屯区中心医院普外科

目的探究lncRNASLC26A4-AS1对未分化甲状腺癌细胞体外增殖、迁移、侵袭和体内肿瘤生长的影响及机制。方法建立稳定过表达SLC26A4-AS1的未分化甲状腺癌CAL-62细胞，采用RT-qpCR方法验证转染效率。CCK-8方法和Transwell实验检测过表达SL... 详细信息

目的探究lncRNASLC26A4-AS1对未分化甲状腺癌细胞体外增殖、迁移、侵袭和体内肿瘤生长的影响及机制。方法建立稳定过表达SLC26A4-AS1的未分化甲状腺癌CAL-62细胞，采用RT-qpCR方法验证转染效率。CCK-8方法和Transwell实验检测过表达SLC26A4-AS1对未分化甲状腺癌CAL-62细胞增殖、迁移和侵袭的影响。将稳定转染的CAL-62细胞皮下注射裸鼠，观察移植瘤生长。Westernblot检测转染mir-221-3p模拟物对过表达SLC26A4-AS1的未分化甲状腺癌CAL-62细胞ERBB4表达的影响。生物信息学分析mir-221-3p与SLC26A4-AS1和ERBB4的潜在结合位点，并通过双荧光素酶报告基因实验验证。CCK-8方法和Transwell实验检测敲减ERBB4对过表达SLC26A4-AS1的未分化甲状腺癌CAL-62细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果过表达SLC26A4-AS1增加未分化甲状腺癌CAL-62细胞SLC26A4-AS1表达，抑制细胞体外增殖、迁移、侵袭和体内肿瘤生长。转染mir-221-3p模拟物逆转了过表达SLC26A4-AS1对未分化甲状腺癌CAL-62细胞ERBB4表达的上调作用。mir-221-3p分别与SLC26A4-AS1和ERBB4mRNA结合。敲减ERBB4逆转了过表达SLC26A4-AS1对未分化甲状腺癌CAL-62细胞体外增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 SLC26A4-AS1靶向结合mir-221-3p上调ERBB4表达抑制未分化甲状腺癌发展。

关键词： LncRNA SLC26A4-AS1 未分化甲状腺癌 mir-221-3p ERBB4 增殖迁移和侵袭

肿瘤相关巨噬细胞上调mir-221-3p可能参与了前列腺癌的恶性转移

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现代泌尿外科杂志 2024年第4期29卷 368-374,378页

作者：阿斯木江·阿不拉高新宋光鲁新疆医科大学第一附属医院泌尿中心新疆乌鲁木齐830000

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)上调mir-221-3p可能参与促进前列腺癌(pCa)恶性转移的作用机制。方法选择6例转移性pCa患者癌组织进行微小RNA(mirNAs)表达谱测序和差异表达mirNAs分析。分离上述转移性pCa患者癌组织中的原代TAMs。采用... 详细信息

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)上调mir-221-3p可能参与促进前列腺癌(pCa)恶性转移的作用机制。方法选择6例转移性pCa患者癌组织进行微小RNA(mirNAs)表达谱测序和差异表达mirNAs分析。分离上述转移性pCa患者癌组织中的原代TAMs。采用聚合酶链反应(qpCR)测定其中mir-221-3p的表达水平。向RAW264.7巨噬细胞转染mir-221-3p模拟物(mimic)或抑制物(inhibitor),然后与人pCa细胞系pC3细胞建立共培养体系。CCK-8法测定pC3细胞增殖能力,流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率,Transwell法测定细胞迁移和侵袭能力,Western blot法测定细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白因子的表达水平。结果在6例转移性pCa患者的癌组织中,与淋巴结转移阴性pCa组织来源TAMs相比,淋巴结转移阳性pCa组织来源TAMs中hsa-mir-221-3p显著上调(pmir-221-3p mimic组pC3细胞增殖能力明显增强;迁移能力和侵袭能力明显增强;EMT相关蛋白因子表达水平明显增强(除E-Cadherin)(p均mir-221-3p inhibitor组细胞增殖能力明显降低,凋亡率明显升高;迁移能力和侵袭能力明显被抑制;EMT相关蛋白因子表达水平明显被抑制(除E-Cadherin)(p均mir-221-3p可能参与促进了pCa恶性转移。

关键词：转移性前列腺癌肿瘤相关巨噬细胞 mir-221-3p 恶性转移上皮-间充质转化

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mir-221-3p靶向BCL2L11调控小尾寒羊卵泡颗粒细胞凋亡

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中国农业科学 2022年第9期55卷 1868-1876页

作者：刘玉芳陈玉林周祖阳储明星中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室河北工程大学生命科学与食品工程学院

【目的】BCL2L11在哺乳动物中能够促进多种细胞凋亡，同时参与繁殖性状相关组织器官的发育及疾病治疗，文章利用分子生物学方法探究mir-221-3p靶向调控BCL2L11对小尾寒羊卵泡颗粒细胞凋亡的影响，为进一步研究BCL2L11在卵泡颗粒细胞凋... 详细信息

【目的】BCL2L11在哺乳动物中能够促进多种细胞凋亡，同时参与繁殖性状相关组织器官的发育及疾病治疗，文章利用分子生物学方法探究mir-221-3p靶向调控BCL2L11对小尾寒羊卵泡颗粒细胞凋亡的影响，为进一步研究BCL2L11在卵泡颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁过程中的调控作用提供依据。【方法】在前期课题组卵巢组织全转录组测序分析的基础上，获得了候选基因BCL2L11及其调控元件mir-221-3p，利用半定量和组织荧光定量（RT-qpCR）分析BCL2L11在小尾寒羊不同组织中的表达情况；通过RT-qpCR定量试验在小尾寒羊卵泡期和黄体期卵巢组织中鉴定了BCL2L11及mirNA-221-3p的表达情况；构建BCL2L11 3’UTR野生型和突变型载体，在HEK293T细胞中共转染mir-221-3p mimic和BCL2L11野生型和突变型及阴性对照，采用双荧光素酶报告基因检测系统确定mir-221-3p与BCL2L11靶向性关系；在绵羊卵巢原代颗粒细胞中转染mir-221-3p mimic及阴性对照实现mir-221-3p过表达，使用RT-qpCR技术在mRNA水平上检测mir-221-3p对BCL2L11以及卵巢颗粒细胞凋亡标志基因XIAp和Fas表达水平的影响；同时利用EdU试验分析mir-221-3p过表达和阴性对照组中颗粒细胞的增殖变化。【结果】半定量和组织RT-qpCR分析均表明BCL2L11在卵巢组织中表达量高于其他组织；RT-qpCR定量结果显示mir-221-3p和BCL2L11在小尾寒羊卵泡期和黄体期卵巢组织中差异表达，mir-221-3p在卵泡期卵巢中的表达量高于黄体期，而BCL2L11在卵泡期卵巢中的表达量低于黄体期，表现出负调控的现象；双荧光素酶报告基因验证分析显示，过表达mir-221-3p mimic显著抑制了BCL2L11 3’UTR荧光素酶的活性（pmir-221-3p，靶基因BCL2L11 mRNA表达水平显著降低，同时，卵泡颗粒细胞凋亡标志基因XIAp和Fas的表达量也显著降低（pmir-221-3p的颗粒细胞增殖率为18.9%，极显著高于阴性对照组的10.43%(pmir-221-3p是调控绵羊卵巢发育的重要基因及调控元件，BCL2L11是mir-221-3p的靶基因之一，mir-221-3p过表达可抑制颗粒细胞凋亡，该作用结果可能通过抑制靶基因BCL2L11的表达进而影响了绵羊卵巢颗粒细胞的凋亡。

关键词： mir-221-3p 小尾寒羊卵巢颗粒细胞凋亡 BCL2L11

mir-221-3p靶向FGF14调控肺腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的分子机制

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中国免疫学杂志 2022年第7期38卷 827-832页

作者：李淑勤赵树强郑丽琴山西医科大学汾阳学院临床医学系内科教研室吕梁032200 山西医科大学附属汾阳医院检验科吕梁032200 山西医科大学附属汾阳医院呼吸科吕梁032200

目的:探讨mir-221-3p是否通过靶向FGF14调节肺腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的生物学行为。方法:采用qRT-pCR法与Western blot法分别检测人支气管上皮细胞(BEAS-2B)、人肺腺癌细胞(A549、A-427、pC-9)中mir-221-3p、FGF14的表达水平;... 详细信息

目的:探讨mir-221-3p是否通过靶向FGF14调节肺腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的生物学行为。方法:采用qRT-pCR法与Western blot法分别检测人支气管上皮细胞(BEAS-2B)、人肺腺癌细胞(A549、A-427、pC-9)中mir-221-3p、FGF14的表达水平;分别将mir-inhibitor-NC、mir-221-3p inhibitor、si-NC、si-FGF14、mir-inhibitor-NC+si-NC、mir-221-3p inhibotor+si-NC、mir-221-3p inhibotor+si-FGF14转染至pC-9细胞;采用MTT实验检测细胞增殖;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测mir-221-3p、FGF14靶向关系;Western blot法检测CyclinD1、MMp-2、MMp-9、Bcl-2、p21、Bax蛋白表达量。结果:与BEAS-2B细胞比较,肺腺癌细胞A549、A-427、pC-9中mir-221-3p的表达水平升高(ppmir-221-3p inhibitor可明显降低OD值及CyclinD1、MMp-2、MMp-9、Bcl-2蛋白水平(pp21、Bax蛋白水平(ppmir-221-3p的靶基因;转染si-FGF14可提高OD值及CyclinD1、MMp-2、MMp-9、Bcl-2蛋白水平(ppp21、Bax蛋白水平(pmir-221-3p inhibitor对pC-9细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的作用。结论:抑制mir-221-3p表达可通过上调FGF14的表达从而抑制肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导细胞凋亡。

关键词： mir-221-3p FGF14 肺腺癌增殖凋亡迁移侵袭

mir-221-3p在胃癌中的表达及临床意义

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miR-221-3p在胃癌中的表达及临床意义

作者：李兴亮兰州大学

学位级别：硕士

研究目的:在消化道系统最常见的恶性肿瘤中,胃癌发病率居高不下,由于其早期症状不易被察觉,多数患者因身体不适来院就医时,往往已处于疾病末期,通常难以痊愈。目前,对于胃癌的治疗,依然以胃癌根治术+D2淋巴结清扫为主,尽管可以将病灶充... 详细信息

研究目的:在消化道系统最常见的恶性肿瘤中,胃癌发病率居高不下,由于其早期症状不易被察觉,多数患者因身体不适来院就医时,往往已处于疾病末期,通常难以痊愈。目前,对于胃癌的治疗,依然以胃癌根治术+D2淋巴结清扫为主,尽管可以将病灶充分切除,但由于术后复发和远处转移以及术后并发症,患者的远期生存率依然较低。因此,寻找影响胃癌预后及疗效的生物学指标尤为迫切。mir-221-3p是一种长度为23个碱基的短链非编码RNA,参与调控炎症病变、血管形成以及肿瘤淋巴结转移等过程,在人体内发挥多种生物学效应,在多种肿瘤的发生、侵袭和远处转移等方面具有重要作用。在本课题中,我们采用生物信息学分析和实验验证相结合的方法,探究在胃癌组织和癌旁组织及胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中mir-221-3p的表达水平,以及mir-221-3p表达与胃癌患者临床特征的相关性,分析了mir-221-3p对胃癌患者预后的影响,希望为胃癌的临床诊治提供理论依据。方法:1.生物信息学分析本课题首先采用生信分析挖掘数据集GSE10687和TCGA数据库,分析mir-221-3p在人类癌症组织和血清中的表达,mir-221-3p在41对胃癌和癌旁组织中的相对表达,以及mir-221-3p在胃癌诊断及评估胃癌患者预后方面的重要性。随后,利用在线网站Starbase3.0预测了mir-221-3p的靶基因,在线网站STRING绘制靶基因之间的蛋白网络图,R3.6.3绘制靶基因的差异表达热图,并且通过GO和KEGG富集分析靶基因的功能,最后分析了mir-221-3p与免疫细胞浸润之间的关系。2.实验验证收集65对胃癌组织及癌旁组织与对应患者临床病理数据,对患者进行生存随访。mir-221-3p的表达水平主要通过qRT-pCR检测,包括65对胃癌组织与相对应癌旁组织以及胃癌细胞系MKN-45、AGS和正常胃粘膜细胞GES-1,并且通过对3对新鲜胃癌组织与对应癌旁组织进行荧光原位杂交（FISH）,对qRT-pCR结果进行验证。其次利用χ检验分析了mir-221-3p表达与胃癌患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存函数和COX比例风险回归模型,分析了mir-221-3p表达对胃癌患者预后的影响。结果:1.生物信息学分析结果mir-221-3p在胆管癌、食管癌、头颈部鳞状细胞癌、肾嫌色细胞癌、肾透明细胞癌、肝细胞癌、胃癌和甲状腺癌组织中表达水平高于癌旁组织。在胰腺癌、结直肠癌、肝癌、食管癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、软组织肉瘤、良性卵巢疾病、交界性卵巢肿瘤和卵巢癌患者血清当中,循环mir-221-3p表达水平显著高于健康患者。mir-221-3p可能通过调控MApK信号通路、Wnt信号通路等介导肿瘤的发生发展,并且mir-221-3p的表达水平与15种免疫细胞表达显著相关。***-221-3p在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达水平qRT-pCR结果显示mir-221-3p在胃癌组织中的表达要比癌旁组织高（ppmir-221-3p依然高表达（p221-3p与胃癌患者临床病理资料的关系mir-221-3p与肿瘤直径、cTNM分期,有无淋巴结转移和有无远处转移显著相关（pmir-221-3p表达水平越高。与mir-221-3p表达无关的因素包括:年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤分化程度、有无血管侵犯。***-221-3p高表达提示胃癌患者不良预后据Kaplan-Meier生存分析结果,与低表达组相比,mir-221-3p高表达患者的生存期明显更短（pmir-221-3p过表达会明显降低胃癌患者的生存期。根据单因素分析,与胃癌患者的预后显著相关的因素主要包括:肿瘤分化程度、cTNM分期、有无淋巴结转移、有无远处转移和mir-221-3p表达水平;依据多因素分析,引起胃癌患者的不良预后的重要因素是:淋巴结转移和远处转移,mir-221-3p并不能作为一个独立的危险因子来影响胃癌病人的预后。结论:mir-221-3p在胃癌组织中高表达,mir-221-3p的表达水平与肿瘤直径、cTNM分期、有无淋巴结转移和有无远处转移明显相关;在预后方面,mir-221-3p高表达组与低表达组相比,总生存期更短。但是实验结果和生信分析结果的生存曲线不相同,能是由于随访时间过短和随访病例过少导致。总之,mir-221-3p与胃癌的发生和转移密切相关,可能是评估胃癌患者预后的新型生物分子,也是治疗胃癌的潜在靶点。

关键词： mir-221-3p 胃恶性肿瘤差异表达预后

mir-221-3p通过靶向HIpK2促进糖尿病皮肤伤口愈合

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MiR-221-3p通过靶向HIPK2促进糖尿病皮肤伤口愈合

作者：余琪琪安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:糖尿病足溃疡（Diabetic foot ulcer,DFU）是糖尿病慢性并发症。长期高血糖状态会导致外周血管病变及周围神经病变,加上机体抗感染能力下降,容易形成下肢溃疡,严重者溃疡深度可达骨髓。DFU受全身状态以及局部微环境的共同调节,愈... 详细信息

目的:糖尿病足溃疡（Diabetic foot ulcer,DFU）是糖尿病慢性并发症。长期高血糖状态会导致外周血管病变及周围神经病变,加上机体抗感染能力下降,容易形成下肢溃疡,严重者溃疡深度可达骨髓。DFU受全身状态以及局部微环境的共同调节,愈合缓慢,严重时需截肢治疗。DFU不仅导致患者生活质量及劳动能力大大降低,还给家庭及社会带来沉重的医疗负担。Micro RNAs（mirNAs）为小的非编码RNA,在基因转录后发挥调控作用,多种mirNA被证明参与糖尿病的发生发展。本课题组既往研究发现mir-221-3p对糖尿病小鼠皮肤伤口愈合有促进作用,但具体机制尚不明确。本研究使用人脐静脉内皮细胞（HUVEC）探索mir-221-3p对内皮细胞功能的影响及机制,动物实验进一步探索mir-221-3p对伤口愈合的调控机制,旨在为DFU的临床治疗提供新的治疗靶点。方法:1.正常糖浓度（NG:6 mmol/L）及高糖浓度（HG:33 mmol/L）培养HUVEC,转染mir-221-3p mimic（100 nmol/L）及NC（100 nmol/L）,采用CCK-8、Transwell及Tube Formation实验分别检测HUVEC细胞的增殖、迁移及成管能力。2.实时荧光定量pCR（q RT-pCR）、免疫组化、蛋白免疫印迹（Western Blot、WB）实验检测高糖引起的HIpK2的含量改变。3.使用HIpK2 siRNA（100 nmol/L）及si NC（100 nmol/L）转染HUVEC,采用CCK-8、Transwell及Tube Formation实验检测HUVEC细胞的增殖、迁移及成管能力。4.采用双荧光素酶基因报告实验验证HIpK2是mir-221-3p的靶基因,q RT-pCR、WB检测mir-221-3p对HIpK2表达水平的影响。5.使用HIpK2选择性抑制剂t BID验证mir-221-3p是否通过HIpK2影响HUVEC细胞的增殖、迁移及成管能力。6.正常C57BL/6小鼠制备背部全层皮肤伤口后分为两组:皮下注射NC组及注射mir-221-3p agomir组;C57BL/6小鼠通过腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠模型,制备背部全层皮肤伤口后分为两组:皮下注射NC组及注射mir-221-3p agomir组;检测mir-221-3p对皮肤伤口愈合的影响,最后留取伤口局部皮肤组织使用q RT-pCR检测mir-221-3p和HIpK2的含量。结果:1.与正常糖浓度组相比,高糖组HUVEC细胞的增殖、迁移、成管能力均下降,转染mir-221-3p mimic后HUVEC细胞的增殖、迁移与成管均有所改善,尤其在高糖状态下。2.与正常糖浓度组相比,高糖组HUVEC中HIpK2含量升高;糖尿病小鼠皮肤组织中HIpK2含量高于正常小鼠皮肤组织。3.在高糖状态下,与转染si NC组相比,转染HIpK2 siRNA组HUVEC细胞增殖、迁移、成管均增强;而正常糖浓度下使用HIpK2 siRNA降低HIpK2含量后增殖、迁移、成管无显著改变。4.双荧光素酶报告基因实验发现,正常情况下转染mir-221-3p较NC组显著抑制荧光基因强度,若对HIpK2 3’UTR区进行突变,转染mir-221-3p不能抑制荧光基因强度;q RT-pCR及WB实验显示,与转染NC组相比,转染mir-221-3p能显著降低HUVEC中HIpK2的m RNA及蛋白水平。***培养HUVEC,当HIpK2选择性抑制剂t BID存在时,转染mir-221-3p mimic组与NC组相比,HUVEC细胞的增殖、迁移与成管无显著差异。6.动物实验表明,无论是正常或糖尿病模型组小鼠,与NC治疗组相比,mir-221-3p agomir治疗组小鼠的愈合率明显提高,伤口局部皮肤组织中mir-221-3p含量明显升高而HIpK2 m RNA含量明显降低。结论:mir-221-3p通过靶向HIpK2改善HUVEC的增殖、迁移与成管功能,进而促进皮肤伤口愈合;高糖使内皮细胞中HIpK2的表达升高,高糖引起的内皮细胞功能失调与HIpK2含量变化有关。本研究证明了mir-221-3p促进伤口愈合的机制以及发现HIpK2在糖尿病伤口愈合中的新角色,为DFU的临床诊疗提供新的理论基础。

关键词：糖尿病足溃疡伤口愈合 mir-221-3p HIpK2

血浆外泌体mir-221-3p对结直肠癌的筛查价值及临床意义

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血浆外泌体miR-221-3p对结直肠癌的筛查价值及临床意义

作者：李思锦承德医学院

学位级别：硕士

结直肠癌是临床常见恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率逐年增高。大多数患者早期症状不典型,且临床缺乏敏感性高的血清学标记物筛查结直肠癌,多数患者确诊时已到晚期,治疗手段单一且预后较差。外泌体是一种直径大小约40-160nm的微小囊泡,... 详细信息

结直肠癌是临床常见恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率逐年增高。大多数患者早期症状不典型,且临床缺乏敏感性高的血清学标记物筛查结直肠癌,多数患者确诊时已到晚期,治疗手段单一且预后较差。外泌体是一种直径大小约40-160nm的微小囊泡,其中富含多种蛋白质、mirNA(micro RNA)、DNA等物质,参与肿瘤发生发展且广泛存在于体液循环中,其被膜结构可以作为“保护膜”让其内的生物活性因子保持相对稳定状态。基于此特点使外泌体mirNAs作为肿瘤标记物应用于临床成为可能。通过课题组前期基因测序结果发现mir-221-3p在结直肠癌细胞中的表达升高,但未进行大样本验证,同时查阅文献发现血浆mir-221-3p在胰腺癌、胃癌中表达升高,由此猜想mir-221-3p通过外泌体分泌到血液循环而成为潜在的诊断标记物,目前血浆外泌体mir-221-3p对结直肠癌的筛查及临床意义的研究少有报道。目的:明确结直肠癌组织mir-221-3p及结直肠癌血浆外泌体mir-221-3p的表达情况,并分析血浆外泌体mir-221-3p对结直肠癌的筛查价值及其与临床病理特征的关系。方法:收集2022年2月至2022年11月于承德医学院附属医院消化内科及胃肠外科就诊者50例为结直肠癌组,收集空腹静脉血,行外科手术切除的结直肠癌及癌旁配对组织23例,且均经结肠镜及病理结果初次诊断为结直肠癌,同期收集体检科健康者47例作为健康组,收集空腹静脉血。通过试剂盒法提取循环血浆外泌体,通过透射电镜、粒径分析及Western Blot法鉴定外泌体;通过RT-q pCR方法检测结直肠癌及癌旁组织mir-221-3p和血浆外泌体mir-221-3p的表达情况,化学发光免疫分析法检测血浆CEA的表达情况;同期收集入组人群临床基本信息及病理结果,结合实验结果进行统计学分析。结果:1.结直肠癌及癌旁组织中mir-221-3p的表达情况结直肠癌组织中mir-221-3p的表达远高于癌旁组织(p3均有表达。3.血浆外泌体mir-221-3p在结直肠癌组及健康组中的表达情况结直肠癌组血浆外泌体mir-221-3p的表达水平高于健康组(pmir-221-3p、血浆CEA及二者联合对结直肠癌的诊断价值血浆外泌体mir-221-3p对结直肠癌的诊断ROC曲线下面积为0.740,敏感性为0.760,特异性为0.640;血浆CEA对结直肠癌的诊断ROC曲线下面积为0.787,敏感性为0.680,特异性为0.830;血浆外泌体mir-221-3p、血浆CEA二者联合对结直肠癌的诊断ROC曲线下面积为0.818,敏感性为0.890,特异性为0.680。5.血浆外泌体mir-221-3p在各不同临床病理特征组别间的差异表达情况结果显示,血浆外泌体mir-221-3p在TNM分期中Ⅲ-Ⅳ期的表达高于Ⅰ-Ⅱ期(pmir-221-3p在有淋巴结转移的Ⅲ-Ⅳ期患者表达高于无淋巴结转移的Ⅰ-Ⅱ期患者(p3期患者(pmir-221-3p在以浸润深度、肿瘤部位及肿瘤大小分类的不同组别间无表达差异(p>0.05)。6.血浆外泌体mir-221-3p的表达与临床病理特征的相关性分析通过Spearman相关性分析,结直肠癌组血浆外泌体mir-221-3p与淋巴结转移、远处转移呈正相关(pp>0.05)。结论:1.血浆外泌体mir-221-3p与CEA联合检测提高了敏感性,对结直肠癌筛查具有一定价值;2.血浆外泌体mir-221-3p高表达可能提示转移,对评估肿瘤分期有一定价值。

关键词：结直肠癌外泌体 mir-221-3p 筛查肿瘤标记物