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Exosomal miR-218 regulates the development of endometritis in dairy cows by targeting TGIF2/TGF-βpathway

BIOCELL 2022年第11期46卷 2415-2423页

作者： CHANG CHEN LIMIN QIAO KAIJUN GUO YINGQIU WANG MENGYI YUAN BOFAN FU XIAOBO GAO HEMIN NI LONGFEI XIAO XIANGGUO WANG Animal Science and Technology College Beijing University of AgricultureBeijing102206China Department of Animal Husbandry and Veterinary Beijing Vocational College of AgricultureBeijing102442China Beijing Changping Animal Disease Prevention and Control Center Beijing102200China China Institute of Veterinary Drugs Control Beijing100000China

Endometritis affects the reproductive capacity of dairy cows and leads to serious economic losses in dairy farming.Clarification of the pathogenesis of endometritis is necessary to improve the reproductive efficiency of dairy cows.Exosomes and their mirNAs have been proven to play an important role in inflammatory regulation.Exosomal miR-218 is a differentially expressed mirNA found in endometrial epithelial cells(EECs)under endometrial inflammation.Therefore,we investigated the expression of miR-218 in the uterine tissue of dairy cows,lipopolysaccharide(LPS)treated EECs,exosomal vesicles,and regulation of exosomal miR-218 by targeting TGIF-2 inducible factor homology frame 2(TGIF2)/transforming growth factor-beta(TGF-β).The expression of miR-218 was suppressed in inflammatory uterine tissues and LPS treated EECs.The expression of TGIF2 and TGF-βin inflammatory uterine tissues and LPS treated EECs was significantly higher than those in healthy uterine tissues and EECs(pmiR-218 derived from donor cells was found to regulate the expression of the target gene TGIF2 in recipient cells through the fusion of exosomes.Concurrently,the expression of its target gene TGIF2 was also suppressed by miR-218 in donor cells resulting in fewer TGIF2 being transported into recipient cells with exosomal fusion.This may be a novel mechanism of mirNAs-mediated regulation and provides a new reference for analyzing the pathogenesis of endometritis in dairy cows.

关键词： Dairy cows Endometritis Exosomes miR-218 TGIF2/TGF-β

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LINC00617靶向miR-218对肺癌吉西他滨耐药性的影响

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中国免疫学杂志 2022年第24期38卷 3008-3012页

作者：张敬毅蒲兵刘秀平周肖龙淄博市第一医院淄博255200 滨州医学院附属医院滨州256600

目的:研究LINC00617对肺癌细胞增殖、凋亡及吉西他滨耐药性的影响及机制。方法:采用不同浓度(2、4、6、8μmol/L)吉西他滨处理肺癌A549和吉西他滨耐药细胞A549-Gem细胞,CCK8法和克隆形成实验检测吉西他滨对A549细胞存活率和克隆形成数,q... 详细信息

目的:研究LINC00617对肺癌细胞增殖、凋亡及吉西他滨耐药性的影响及机制。方法:采用不同浓度(2、4、6、8μmol/L)吉西他滨处理肺癌A549和吉西他滨耐药细胞A549-Gem细胞,CCK8法和克隆形成实验检测吉西他滨对A549细胞存活率和克隆形成数,qRT-PCR检测细胞中LINC00617和miR-218的水平,Western blot检测细胞中Ki67和Caspase3表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证LINC00617和miR-218的靶向关系。结果:随着吉西他滨(2、4、6、8μmol/L)浓度升高,A549细胞存活率逐渐降低,A549-Gem细胞存活率无显著变化,最高浓度(8μmol/L)吉西他滨时A549-Gem细胞存活率(97.01±7.26)%显著高于A549(43.21±5.35)%;LINC00617在A549-Gem细胞中含量(3.19±0.14)显著高于A549细胞(1.00±0.08)(PmiR-218后细胞存活率和克隆形成数均降低,凋亡率升高,增殖蛋白Ki67含量降低,凋亡蛋白Caspase3含量升高,差异均具有统计学意义(PmiR-218的表达;过表达miR-218增强了抑制LINC00617对A549-Gem细胞增殖、凋亡和吉西他滨耐药性的作用。结论:LINC00617可靶向miR-218调控A549-Gem细胞的增殖、凋亡及吉西他滨耐药性,也是肺癌潜在的分子靶点。

关键词：肺癌 LINC00617 miR-218 增殖凋亡吉西他滨耐药性

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miR-218靶向Bmi-1抑制肺腺癌细胞增殖的机制探讨

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现代肿瘤医学 2023年第23期31卷 4301-4306页

作者：焦会珍金小乐苑萌王天伦河北北方学院附属第一医院急诊科河北张家口075000

目的:研究微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)靶向B细胞特性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)抑制肺腺癌细胞增殖的作用及机制。方法:培养肺腺癌细胞株A549,分别转染mir-阴性对照(NC)核苷酸序列、miR-218核苷酸序列、NC质粒、Bmi-1质粒,采用平板克隆形成实验、CCK8实验检测细胞增殖水平,采用荧光定量PCR实验检测miR-218的表达,采用Western blot实验检测Bmi-1的表达,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-218与Bmi-1的靶向关系。建立移植瘤裸鼠,慢病毒转染mir-NC或miR-218核苷酸序列,检测移植瘤体积、质量及Bmi-1的表达。结果:与转染mir-NC核苷酸序列的mir-NC组比较,转染miR-218核苷酸序列的miR-218组A549细胞miR-218表达水平、增殖抑制率增加,克隆形成率、Bmi-1表达水平及野生型Bmi-1质粒的荧光素酶活性降低(PmiR-218核苷酸序列及NC质粒的miR-218+NC质粒组比较,共转染miR-218核苷酸序列及Bmi-1质粒的miR-218+Bmi-1质粒组A549细胞增殖抑制率降低,克隆形成率、Bmi-1表达水平增加(Pmir-NC核苷酸序列的mir-NC组比较,慢病毒转染miR-218核苷酸序列的miR-218组裸鼠移植瘤体积、质量及Bmi-1表达水平均降低(PmiR-218靶向下调Bmi-1表达并抑制肺腺癌细胞增殖。

关键词：肺腺癌 miR-218 Bmi-1 靶基因增殖移植瘤

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miR-218通过抑制Robo1的表达影响肺癌细胞迁移侵袭

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中国肺癌杂志 2017年第7期20卷 452-458页

作者：陈平赵云龙李英杰解放军总医院第一附属医院北京100048

背景与目的本研究旨在探讨肺癌中miR-218的表达,研究miR-218在肺癌细胞中的功能及其可能的分子机制。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测15例肺癌组织和15例癌旁组织中miR-218的表达。在肺癌细胞A549中转染miR-218的抑制物(Anti-mir-... 详细信息

背景与目的本研究旨在探讨肺癌中miR-218的表达,研究miR-218在肺癌细胞中的功能及其可能的分子机制。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测15例肺癌组织和15例癌旁组织中miR-218的表达。在肺癌细胞A549中转染miR-218的抑制物(Anti-miR-218),在肺癌细胞HCC4006中转染miR-218的模拟物后,用Transwell实验检测细胞的迁移侵袭能力的变化。用Targetscan和miranda软件预测miR-218的可能靶点,转染miR-218的抑制物及模拟物后用qRT-PCR和Western blot检测Robo1的mRNA和蛋白表达水平。用双荧光素酶报告基因方法鉴定miR-218和Robo1的调控关系。用Anti-miR-218、miR-218模拟物或阴性对照与Si-Robo1或Si-NC同时转染细胞,应用Transwell实验检测转染后细胞的侵袭迁移能力的变化。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中miR-218在肺癌组织中表达水平显著降低(PmiR-218的抑制物,能够显著降低miR-218的表达,促进了细胞的迁移侵袭。在HCC4006中转染miR-218的模拟物能够显著提高miR-218的表达,同时抑制了细胞的迁移侵袭能力。利用生物信息学预测出在Robo1的3′UTR区有miR-218的结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步证实miR-218能够调控Robo1的转录活性。抑制miR-218能够提高Robo1的表达;过表达miR-218显著降低Robo1的表达,且miR-218能够通过调控Robo1影响细胞的迁移侵袭。结论 miR-218在肺癌组织中呈现低表达状态,miR-218可能是通过抑制Robo1的表达抑制肺癌细胞侵袭迁移。

关键词：肺肿瘤 miR-218 Robo1 迁移侵袭

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miR-218靶向Bmi-1抑制急性早幼粒细胞白血病细胞增殖的研究

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中国实验血液学杂志 2020年第3期28卷 815-820页

作者：刘剑锋何攀潘德锋南华大学附属第二医院儿科湖南衡阳421001

目的:研究miR-218通过靶向调控Bmi-1抑制急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞增殖的分子机制。方法:选取HL-60细胞株,分别转染miR-218及RNA阴性对照序列。实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-218的表达水平;MTT检测转染miR-218对HL-60细胞增殖... 详细信息

目的:研究miR-218通过靶向调控Bmi-1抑制急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞增殖的分子机制。方法:选取HL-60细胞株,分别转染miR-218及RNA阴性对照序列。实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-218的表达水平;MTT检测转染miR-218对HL-60细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测并评价转染miR-218对HL-60细胞凋亡的影响;Western blot检测miR-218对肿瘤细胞Bmi-1表达的调节;Spearman相关分析法分析mi R-218及Bmi-1表达的相关性;荧光素酶实验验证miR-218与Bmi-1的靶向关系。结果:MTT实验表明,高表达miR-218可明显抑制HL-60细胞的体外增殖能力;流式细胞术结果表明,转染mi R-218后G1和G2期细胞增加,S期细胞减少;Western blot结果显示,转染miR-218后HL-60细胞中Bmi-1蛋白水平显著降低(PmiR-218 mRNA水平与Bmi-1蛋白含量呈负相关(r=-0.326,PmiR-218可直接靶向Bmi-1。结论:miR-218可抑制APL细胞增殖、转移及侵袭,这可能与下调Bmi-1有关。

关键词： miR-218 Bmi-1 急性早幼粒性白血病细胞增殖

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过表达miR-218对舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9的增殖和侵袭的影响

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上海口腔医学 2019年第4期28卷 373-377页

作者：冯小东易文殷卫红首都医科大学附属北京同仁医院口腔科

目的:探讨miR-218在舌鳞癌细胞中的表达,以及对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:在人舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9中分别转染negative control、miR-218模拟物和抑制剂,然后利用MTT法检测细胞增殖活性;通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞... 详细信息

目的:探讨miR-218在舌鳞癌细胞中的表达,以及对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:在人舌鳞癌细胞系SCC-4和SCC-9中分别转染negative control、miR-218模拟物和抑制剂,然后利用MTT法检测细胞增殖活性;通过流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;通过Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用GraphPad 7.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-218抑制剂的SCC-4和SCC-9细胞,细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和侵袭能力无显著改变;而转染miR-218模拟物的细胞,增殖能力变弱,凋亡数增加,侵袭能力显著降低。结论:miR-218在口腔癌中的表达量和细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和侵袭能力相关,提示miR-218与口腔癌的发生、发展有一定关系。

关键词： miR-218 舌鳞癌细胞细胞增殖细胞凋亡侵袭

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银椴苷通过调控miR-218/NEDD9轴影响肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡

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华中科技大学学报（医学版） 2021年第5期50卷 574-579页

作者：吴雄健朱海燕黄利兴邹玲婷赣南医学院第一附属医院消化内科赣州341000

目的探讨银椴苷对肝癌细胞生物学行为的影响和分子机制。方法采用不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L)的银椴苷分别处理肝癌细胞Huh748h,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell实验检测细胞活力、凋亡率以及迁移、侵... 详细信息

目的探讨银椴苷对肝癌细胞生物学行为的影响和分子机制。方法采用不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L)的银椴苷分别处理肝癌细胞Huh748h,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell实验检测细胞活力、凋亡率以及迁移、侵袭能力。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-218和神经元细胞表达发育下调基因9(NEDD9)mRNA的表达水平,蛋白质印迹(Westernblot)检测NEDD9蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Westernblot验证miR-218和NEDD9的靶向调控关系。将miR-218抑制物(anti-miR-218)转染Huh7细胞,检测干扰miR-218表达联合银椴苷处理对Huh7细胞活力、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果与空白组比较,银椴苷处理组Huh7细胞活力、迁移和侵袭数、NEDD9mRNA和蛋白表达显著降低,凋亡率、miR-218表达显著升高(均PmiR-218可与NEDD9直接结合。过表达miR-218后NEDD9表达水平降低(均PmiR-218后NEDD9表达水平升高(均PmiR-218表达可逆转银椴苷对Huh7细胞增殖、迁移侵袭、凋亡的影响(均PmiR-218/NEDD9轴实现的。

关键词：银椴苷 miR-218 NEDD9 肝癌细胞增殖迁移侵袭凋亡

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龙胆苦苷通过调控miR-218表达减轻高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤

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中国老年学杂志 2023年第11期43卷 2799-2802页

作者：彭莉王莉潘春勤彭牡姣谢程长江大学附属仙桃市第一人民医院肾病内科湖北仙桃433000 长江大学附属仙桃市第一人民医院CT室湖北仙桃433000 长江大学附属仙桃市第一人民医院妇产科湖北仙桃433000

目的探讨龙胆苦苷(GPS)对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞(MPC5)损伤的影响及其可能的作用机制。方法高糖诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型(HG组),正常培养的MPC5细胞记为Con组,用不同剂量(8、40、200μg/μl)GPS处理高糖诱导的MPC5细胞(HG+GPS-... 详细信息

目的探讨龙胆苦苷(GPS)对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞(MPC5)损伤的影响及其可能的作用机制。方法高糖诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型(HG组),正常培养的MPC5细胞记为Con组,用不同剂量(8、40、200μg/μl)GPS处理高糖诱导的MPC5细胞(HG+GPS-L组、HG+GPS-M组、HG+GPS-H组),anti-mir-NC、anti-miR-218转染至MPC5细胞后加入30 mmol/L D-葡萄糖处理24 h(HG+anti-mir-NC组、HG+anti-miR-218组),mir-NC、miR-218 mimics分别转染至MPC5细胞后加入200μg/μl GPS与30 mmol/L D-葡萄糖共同处理24 h(HG+GPS+mir-NC组、HG+GPS+miR-218组);流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测miR-218相对表达量;Western印迹法检测肾素(nephrin)、足突蛋白(podocin)、剪切的胱天蛋白酶(cleaved-caspase)3、cleaved-caspase9蛋白相对表达量。结果HG组nephrin、podocin蛋白表达显著低于Con组,细胞凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达显著高于Con组,miR-218相对表达量显著高于Con组(均PmiR-218相对表达量显著低于HG组,且呈剂量依赖性(PmiR-218组nephrin、podocin蛋白表达显著高于HG+anti-mir-NC组,细胞凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达显著低于HG+anti-mir-NC组(均PmiR-218组nephrin、podocin蛋白表达显著低于HG+GPS+mir-NC组(Pmir-NC组(均PmiR-218的表达而促进nephrin、podocin表达及抑制细胞凋亡从而减轻高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤。

关键词：龙胆苦苷(GPS) miR-218 肾脏足细胞细胞凋亡高糖

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恶性肿瘤中miR-218的作用及其临床应用

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临床与实验病理学杂志 2023年第5期39卷 588-591页

作者：杜晓丹赵培源刘喜红杨丽萍刘征河南中医药大学医学院中西医结合基础学系郑州450046

微小RNA(mirNA)是一类高度保守的单链非编码RNA,可参与多种生物学过程,在肿瘤发生、发展中扮演重要角色。miR-218在多种恶性肿瘤中异常表达,靶向调控下游基因,参与肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡以及放、化疗抗性等,发挥促癌基因或... 详细信息

微小RNA(mirNA)是一类高度保守的单链非编码RNA,可参与多种生物学过程,在肿瘤发生、发展中扮演重要角色。miR-218在多种恶性肿瘤中异常表达,靶向调控下游基因,参与肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡以及放、化疗抗性等,发挥促癌基因或抑癌基因的作用。该文就miR-218在肿瘤的发生、发展、放、化疗抗性以及肿瘤标志物等方面中的作用进行综述。

关键词：恶性肿瘤肿瘤标志物 miR-218 放、化疗文献综述

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miR-218及HMGB1在婴幼儿喘息性肺炎发病机制中的作用研究

miR-218及HMGB1在婴幼儿喘息性肺炎发病机制中的作用研究

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作者：尚乐芬内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的:本课题通过研究miR-218及HMGB1在喘息性肺炎患儿血浆中的表达水平及其相关性,探讨miR-218及HMGB1在婴幼儿喘息性肺炎发病机制中的作用。方法:选取2021年9月至2022年9月在内蒙古自治区人民医院儿科住院的6个月-3岁喘息性肺炎和非喘... 详细信息

目的:本课题通过研究miR-218及HMGB1在喘息性肺炎患儿血浆中的表达水平及其相关性,探讨miR-218及HMGB1在婴幼儿喘息性肺炎发病机制中的作用。方法:选取2021年9月至2022年9月在内蒙古自治区人民医院儿科住院的6个月-3岁喘息性肺炎和非喘息性肺炎患儿各30例作为实验组,同期体检的健康儿童30例为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCR,q PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测喘息性肺炎、非喘息性肺炎患儿及正常儿童血浆中miR-218、HMGB1的水平,比较两者之间表达水平并分析其相关性,采用ROC曲线对miR-218、HMGB1进行分析,评估其对喘息性肺炎的预测价值。结果:1.喘息组患儿急性期血浆miR-218表达水平显著低于非喘息组急性期及对照组,非喘息组患儿急性期血浆miR-218水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(PmiR-218、HMGB1表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。3.喘息组患儿急性期血浆miR-218表达水平较恢复期减低,HMGB1水平较恢复期高,差异均有统计学意义(PmiR-218表达水平较恢复期减低,HMGB1水平较恢复期高,差异均有统计学意义(PmiR-218表达水平与HMGB1呈显著负相关,(r=-0.898,PmiR-218表达水平与HMGB1呈显著负相关,(r=-0.638,PmiR-218表达水平与HMGB1呈显著负相关,(r=-0.685,PmiR-218表达水平与HMGB1呈显著负相关,(r=-0.817,PmiR-218、HMGB1对喘息性支气管肺炎的预测价值,选择ROC曲线进行分析,通过对miR-218、HMGB1两项指标进行ROC曲线分析,分别得出:miR-218曲线下面积(AUC)为0.800,灵敏度为80.0%,特异度为73.3%,对应的截断值为1.254;HMGB1 AUC为0.842,灵敏度为70.0%,特异度为86.7%,对应的截断值为28.825 ng/ml。二者AUC均大于0.7,表明miR-218、HMGB1对喘息性肺炎具有一定的预测价值。6.喘息组、非喘息组、对照组在年龄、性别之间差异无统计学意义。喘息组患儿住院时间较非喘息组长,经皮动脉血氧饱和度(SPO)较非喘息组低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:1.miR-218可能通过靶向负调控HMGB1的表达参与婴幼儿喘息性肺炎的发病机制。2.中性粒细胞、嗜酸性粒细胞参与婴幼儿喘息性肺炎发病过程。3.通过ROC曲线分析发现miR-218、HMGB1可作为喘息性肺炎的良好预测指标,有助于早期预测喘息的发生。

关键词：喘息性肺炎 miR-218 高迁移率族蛋白B1 婴幼儿

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