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外泌体包裹的miR-19b抑制EV71复制的影响

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河南师范大学学报（自然科学版） 2023年第2期51卷 115-120页

作者：李艳梅程侠菊王燕苏州大学生物医学研究院江苏苏州215123 苏州市立医院江苏苏州215008

[目的]探讨外泌体包裹的miR-19b对EV71病毒复制的影响,为EV71病毒的mirNA防治药物的开发提供参考.[方法]将游离的miR-19b-cy3.5分子和转染miR-19b-cy3.5的HT29细胞分泌的外泌体分别处理T98G细胞,观察进入细胞的效率;分别提取未处理的、... 详细信息

[目的]探讨外泌体包裹的miR-19b对EV71病毒复制的影响,为EV71病毒的mirNA防治药物的开发提供参考.[方法]将游离的miR-19b-cy3.5分子和转染miR-19b-cy3.5的HT29细胞分泌的外泌体分别处理T98G细胞,观察进入细胞的效率;分别提取未处理的、转染mimic-n.c.和转染miR-19b的HT29细胞分泌的外泌体,并给予T98G细胞孵育后,检测细胞内miR-19b的表达;分别以60 mg/L转染mimic-n.c.的HT29细胞分泌的外泌体、60 mg/L和40 mg/L转染miR-19b的HT29细胞分泌的外泌体孵育T98G细胞并感染EV71病毒,检测病毒RNA载量;将携带包裹的miR-19b-cy3.5的HT29细胞来源的外泌体,通过尾静脉注射小鼠检测miR-19b在小鼠各个器官中的表达.[结果]miR-19b-cy3.5能够通过外泌体的形式进入T98G细胞中,而游离的miR-19b-cy3.5无法进入细胞;转染miR-19b的HT29细胞分泌的外泌体在处理T98G细胞后,胞内miR-19b高表达,同时,外泌体处理后的T98G细胞中EV71病毒RNA复制量显著降低;动物实验中,外泌体包裹的miR-19b能够在小鼠的脑、肝及肺有效表达.[结论]外泌体包裹的miR-19b能够有效进入靶细胞中,并且可以抑制靶细胞中EV71病毒的复制;同时,外泌体包裹的miR-19b能够有效进入小鼠脑、肝以及肺等组织中并表达.

关键词： miR-19b EV71 外泌体 microRNA

基于RhoA/ROCK信号通路研究上调miR-19b对MSCs成骨分化的影响

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中国老年学杂志 2023年第5期43卷 1189-1193页

作者：陈顺玲许和贵朱旭杨砥贵州中医药大学第一附属医院骨伤科贵州贵阳550002

目的基于Ras同源基因家族成员(Rho)A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路研究上调miR-19b对骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法选取24只雌性大鼠,随机选取6只为正常组,剩余18只建立骨质疏松模型,分为模型组、空白组和上调... 详细信息

目的基于Ras同源基因家族成员(Rho)A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路研究上调miR-19b对骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法选取24只雌性大鼠,随机选取6只为正常组,剩余18只建立骨质疏松模型,分为模型组、空白组和上调组各6只,聚合酶链反应(PCR)检测miR-19b表达量,Western印迹检测成骨细胞特异性转录因子(OSX)、骨黏连蛋白(OSN)、骨桥蛋白(OPN)、RhoA、ROCK蛋白水平。结果上调组miR-19b表达量高于模型组和空白组,OSX、OSN、OPN蛋白水平高于模型组和空白组RhoA、ROCK蛋白水平低于模型组和空白组,均有统计学差异(均PmiR-19b可通过调控RhoA/ROCK通路蛋白促进MSCs成骨分化。

关键词： miR-19b 骨髓间充质干细胞骨质疏松成骨分化

急性心肌梗死并发医院感染患者外周血miR-19b和IL-37水平及预后影响因素

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中华医院感染学杂志 2021年第11期31卷 1629-1633页

作者：林燕仔张光星郑婉魏俊萍符惠丽林明霞唐利龙海南医学院第一附属医院心血管内科海南海口570100 海南医学院第一附属医院心电图室海南海口570100

目的分析急性心肌梗死并发医院感染患者外周血miR-19b、白细胞介素-37(IL-37)的表达水平及预后的影响因素。方法选择2017年1月-2019年12月海南医学院第一附属医院心血管内科收治的68例急性心肌梗死并发医院感染患者设为感染组,另选择同... 详细信息

目的分析急性心肌梗死并发医院感染患者外周血miR-19b、白细胞介素-37(IL-37)的表达水平及预后的影响因素。方法选择2017年1月-2019年12月海南医学院第一附属医院心血管内科收治的68例急性心肌梗死并发医院感染患者设为感染组,另选择同期收治的68例急性心肌梗死无医院感染患者设为未感染组,比较两组患者外周血miR-19b、IL-37水平。依据预后情况将感染组患者分为预后良好患者和预后不良患者,分析不同预后患者临床资料,归纳急性心肌梗死并发医院感染患者预后不良的影响因素。结果感染组外周血miR-19b、IL-37分别为(3.47±0.84)、(41.65±6.48)ng/ml均高于未感染组(PmiR-19b、IL-37水平均高于预后良好患者(PmiR-19b是急性心肌梗死并发医院感染患者预后不良的影响因素(OR=2.552,95%CI:1.193~5.460,P=0.016)。结论急性心肌梗死并发医院感染患者外周血miR-19b、IL-37水平较高,miR-19b为急性心肌梗死并发医院感染患者预后不良的影响因素。

关键词：急性心肌梗死医院感染 miR-19b 白细胞介素-37 预后危险因素

血清miR-19b、mir-744-5p水平在非小细胞肺癌诊断中的临床价值

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国际肿瘤学杂志 2024年第2期51卷 83-88页

作者：李丹李睿尧李膺函于秀艳吴雪峰吉林省肿瘤医院检验科长春130012

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-19b、mir-744-5p水平,分析其在NSCLC诊断中的临床价值。方法选择吉林省肿瘤医院2019年8月至2022年8月收治的NSCLC患者226例(NSCLC组)和健康体检者100例(对照组)为研究对象。采用实时荧光定量PC... 详细信息

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-19b、mir-744-5p水平,分析其在NSCLC诊断中的临床价值。方法选择吉林省肿瘤医院2019年8月至2022年8月收治的NSCLC患者226例(NSCLC组)和健康体检者100例(对照组)为研究对象。采用实时荧光定量PCR测定并比较NSCLC组和对照组血清miR-19b、mir-744-5p水平,分析二指标与NSCLC患者不同临床病理特征的关系,采用受试者操作特征曲线分析miR-19b、mir-744-5p和二者联合检测诊断NSCLC的临床价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清miR-19b水平显著升高(3.86±1.25比1.06±0.41,t=21.87,Pmir-744-5p水平显著降低(1.80±0.48比5.75±1.69,t=32.36,PmiR-19b水平分别高于鳞状细胞癌(t=5.94,Pmir-744-5p水平分别低于鳞状细胞癌(t=8.27,PmiR-19b联合mir-744-5p检测诊断NSCLC的曲线下面积(AUC)为0.914(95%CI为0.841~0.959),敏感性和特异性分别为90.9%和84.0%,AUC显著大于miR-19b(AUC为0.824,95%CI为0.770~0.869)、mir-744-5p(AUC为0.783,95%CI为0.709~0.838)单一指标检测(Z=2.28,P=0.021;Z=2.36,P=0.017)。结论NSCLC患者血清miR-19b水平升高、mir-744-5p水平降低,血清miR-19b、mir-744-5p联合检测在NSCLC诊断中具有较高的临床价值。

关键词：癌非小细胞肺 miR-19b mir-744-5p 血清肿瘤标志物

病毒性心肌炎患者外周血心肌酶谱和mir-26b miR-19b表达变化分析及与预后的关系

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河北医学 2023年第7期29卷 1114-1120页

作者：王小芳林琳雷蕾鲁红娥雷朝刘基燕西安交通大学第二附属医院心血管内科陕西西安710000 延安大学医学院陕西延安716000

目的:探讨病毒性心肌炎患者外周血心肌酶学指标、血清微小RNA-26b(mir-26b)、微小RNA-19b(miR-19b)的变化及与患者预后结局的关系。方法:选取我院2020年11月至2022年8月收治的116例病毒性心肌炎患者作为心肌炎组、另外选取同期健康体检... 详细信息

目的:探讨病毒性心肌炎患者外周血心肌酶学指标、血清微小RNA-26b(mir-26b)、微小RNA-19b(miR-19b)的变化及与患者预后结局的关系。方法:选取我院2020年11月至2022年8月收治的116例病毒性心肌炎患者作为心肌炎组、另外选取同期健康体检的非心肌炎志愿者60例作为对照组,对比两组的心肌酶学指标、血清mir-26b、miR-19b水平,并根据患者随访6个月的预后结局进行分组,对比两组的各项一般资料及研究指标,采用Logistic回归分析影响病毒性心肌炎患者预后结局的相关指标。结果:心肌炎组患者的ALT、AST、LDH、cTnI、CK-Mb、CK、miR-19b表达水平高于对照组,差异具有统计学意义(Pmir-26b相对表达强度低于对照组,差异具有统计学意义(PbMI、性别、胸痛情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);预后不良组的收缩压、舒张压低于预后良好组,预后不良组患者的心率频率、胸闷、心肌、乏力、呼吸频率、房扑/房颤、房室传导阻滞、束支阻滞均高于预后良好组,差异具有统计学意义(Pb、CK、miR-19b表达水平高于预后良好组,差异具有统计学意义(Pmir-26b相对表达强度低于预后良好组,差异具有统计学意义(Pb增高、CK增高、miR-19b增高、mir-26b降低是心肌炎患者不良预后结局的独立危险因素(PmiR-19b表达显著增高、mir-26b表达显著降低,并且与患者不良的预后结局具有密切关系。

关键词：病毒性心肌炎心肌酶学 mir-26b miR-19b

miR-19b过表达抑制阿霉素诱导的H9c2心肌细胞凋亡

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中国免疫学杂志 2020年第17期36卷 2077-2081页

作者：周琦刘敏骆春艳明强(指导) 同济天佑医院心血管内科武汉461000 上海市第十人民医院心内科上海200072

目的:探讨miR-19b对阿霉素(DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响。方法:采用DOX(250 ng/ml)诱导大鼠H9c2心肌细胞,构建心肌细胞损伤模型。通过MTT检测DOX作用12、24、48 h后的细胞活力;miR-19b mimic和miR-19b inhibitor转染DOX诱导后的大... 详细信息

目的:探讨miR-19b对阿霉素(DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响。方法:采用DOX(250 ng/ml)诱导大鼠H9c2心肌细胞,构建心肌细胞损伤模型。通过MTT检测DOX作用12、24、48 h后的细胞活力;miR-19b mimic和miR-19b inhibitor转染DOX诱导后的大鼠H9c2细胞,采用RT-PCR检测转染后细胞中miR-19b的表达情况,流式细胞术检测细胞内ROS水平和线粒体膜电位水平,ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平,Western blot检测线粒体凋亡相关蛋白bad、bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、细胞色素C(Cyt-C)和p53的表达。结果:MTT结果显示DOX处理后,H9c2细胞的存活率显著降低(PmiR-19b mimic/inhibitor转染可显著上调或下调H9c2细胞中miR-19b的表达(PmiR-19b mimic组ROS水平降低,ATP水平升高(Pbad、Caspase-9、Caspase-3、Cyt-C和p53表达量降低(Pbcl-2的表达量升高(PmiR-19b inhibitor组ROS水平升高,ATP水平降低(Pbad、Caspase-9、Caspase-3、Cyt-C和p53蛋白表达升高(Pbcl-2蛋白表达降低(PmiR-19b过表达能有效缓解DOX诱导的H9c2心肌细胞线粒体凋亡。

关键词： miR-19b 阿霉素心肌细胞细胞凋亡

LINC00094靶向miR-19b对非小细胞肺癌增殖、侵袭的抑制作用及其分子机制

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肿瘤药学 2022年第6期12卷 759-766页

作者：邢加强张波辛本强临沂市肿瘤医院胸外科山东临沂276300 临沂市肿瘤医院手术室山东临沂276300

目的探讨LINC00094对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法将pcDNA3.1、pcDNA3.1-LINC00094、si-NC、si-LINC00094转染至非小细胞肺癌A549细胞中;将pcDNA3.1-LINC00094分别与mir-NC、miR-19b转染至A549细胞中,分别记为pcDNA3.1-LINC00094+mir-NC组、pcDNA3.1-LINC00094+miR-19b组。采用实时荧光定量PCR检测LINC00094和miR-19b表达水平;采用蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达水平;采用四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞术和Transwell分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测LINC00094与miR-19b的靶向关系。结果LINC00094在肺癌组织中低表达。过表达LINC00094可降低A549细胞的生存率,并抑制细胞迁移、侵袭(PmiR-19b,过表达miR-19b可逆转LINC00094对A549细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用和对细胞凋亡的促进作用。结论LINC00094可靶向抑制miR-19b的表达,从而抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词： LINC00094 miR-19b 非小细胞肺癌增殖转移

上皮性卵巢癌患者血小板中miR-19b表达的临床意义

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实用医学杂志 2020年第11期36卷 1463-1467页

作者：鄢文郭蕾郭立兵靳文广东省第二人民医院肿瘤一科广州510317 广东省第二人民医院妇科广州510317 广东省第二人民医院心血管内三科广州510317

目的探讨miR-19b在上皮性卵巢癌患者血小板中的表达及其潜在临床意义。方法收集2018年6月至2019年10月广东省第二人民医院住院治疗的上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者40例,依据国际妇产科联盟(FIGO)卵巢癌手术病理分期... 详细信息

目的探讨miR-19b在上皮性卵巢癌患者血小板中的表达及其潜在临床意义。方法收集2018年6月至2019年10月广东省第二人民医院住院治疗的上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)患者40例,依据国际妇产科联盟(FIGO)卵巢癌手术病理分期分为FIGOⅠ-Ⅱ期组、FIGOⅢ-Ⅳ期组。血栓弹力图检测血小板聚集功能,流式细胞术检测血小板CD62P(P-selectin)的表达,实时荧光定量PCR法检测血小板miR-19b的表达。结果与FIGOⅠ-Ⅱ期组相比,FIGOⅢ-Ⅳ期的血小板计数、MA值、CI值、血小板CD62P阳性率和血小板miR-19b表达水平等明显升高(P≤0.001),R值、K值降低(P miR-19b表达水平分别与MA、CI、血小板计数、血小板CD62P阳性率、CA125、DVT事件呈正相关(P≤0.001),与K值呈弱负相关(r=-0.336,P=0.034),与R、Angle值无明显相关(P> 0.05)。结论晚期上皮性卵巢癌患者血小板数量增多、聚集和活性功能增强,血小板miR-19b表达上调,提示miR-19b可能参与调控了血小板的促EOC转移作用。

关键词：上皮性卵巢癌血小板 miR-19b

miR-19b通过调节线粒体功能抑制HO诱导H9c2心肌细胞凋亡

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武汉大学学报(医学版) 2023年

作者：张艳廖小婷孙菡阳张想曾彬武汉大学人民医院心内科/心血管病湖北省重点实验室/武汉大学心血管病研究所

目的：研究microRNA(mir)-19b抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡并探讨其机制。方法：使用过氧化氢(H2O2)诱导H9c2心肌细胞损伤模型，将H2O2诱导的H9c2细胞分别转染miR-19b模拟物、抑制剂及其阴性对照。大鼠H9c2心肌细胞株分为6组，对照(Contr... 详细信息

目的：研究microRNA(mir)-19b抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡并探讨其机制。方法：使用过氧化氢(H2O2)诱导H9c2心肌细胞损伤模型，将H2O2诱导的H9c2细胞分别转染miR-19b模拟物、抑制剂及其阴性对照。大鼠H9c2心肌细胞株分为6组，对照(Control)组，H2O2组，H2O2+miR-19b mimic阴性对照(NC)组，H2O2+miR-19b mimic组，H2O2+miR-19b inhibitor组，H2O2+miR-19b inhibitor NC组。采用活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激水平，JC-1法检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化，试剂盒检测细胞色素c与线粒体共定位，Western blot法检测bax、bcl-2和Cleaved caspase3和线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)及视神经萎缩蛋白1(OPA1)表达水平。结果：与Control组相比，H2O2组心肌细胞ROS(红色荧光强度)水平明显升高，MMP(JC-1绿红荧光强度比值)显著降低，细胞色素c(绿色荧光强度)释放明显增加，细胞促凋亡蛋白Cleaved caspase-3、bax、Drp1蛋白的表达上调，抗凋亡蛋白bcl-2、Mfn2、OPA1蛋白的表达均下调(PmiR-19b mimic NC组相比，miR-19b转染可显著减少ROS的生成，稳定MMP，抑制细胞色素c释放，降低Cleaved caspase-3、bax、Drp1表达水平，bcl-2、Mfn2、OPA1的表达显著上升(PmiR-19b inhibitor NC组相比，转染miR-19b抑制剂可阻断miR-19b对H2O2诱导H9c2心肌细胞的保护作用，表现为ROS生成增加，MMP降低，细胞色素c释放增加，Cleaved caspase-3、bax、Drp1的表达增加，bcl-2、Mfn2、OPA1的表达下降(PmiR-19b高表达可显著抑制H9c2细胞的氧化应激损伤，其可能与改善线粒体动力学、维持心肌细胞线粒体的动态稳定性以及调节凋亡相关蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关。

关键词： miR-19b 氧化应激线粒体心肌细胞细胞凋亡