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LncRNA MEG3调节mir-181b-5p/foxp1轴对非酒精性脂肪肝病小鼠的作用机制研究

中国免疫学杂志 2024年

作者：方金鸣武汉市第四医院

目的：探究长链非编码RNA母系表达基因3（LncRNA MEG3）调节mir-181b-5p/叉头框蛋白p1（foxp1）轴对非酒精性脂肪肝病（NAFLD）小鼠的作用机制。方法：以高脂饮食喂养C57bL/6J小鼠12周建立NAFLD模型，随机分为NAFLD模型组（尾静脉注射... 详细信息

目的：探究长链非编码RNA母系表达基因3（LncRNA MEG3）调节mir-181b-5p/叉头框蛋白p1（foxp1）轴对非酒精性脂肪肝病（NAFLD）小鼠的作用机制。方法：以高脂饮食喂养C57bL/6J小鼠12周建立NAFLD模型，随机分为NAFLD模型组（尾静脉注射生理盐水）、LncRNA MEG3过表达组（尾静脉注射LncRNA MEG3过表达质粒）、LncRNA MEG3过表达+mir-181b-5p mimics组（尾静脉注射LncRNA MEG3过表达质粒和mir-181b-5p mimics）、阴性对照组（尾静脉注射空载质粒和mir-181b-5p mimics阴性对照），每组10只，另选10只小鼠喂养普通饲料12周作为正常对照组（尾静脉注射生理盐水）。各组小鼠均处理2周，每周2次。采用全自动生化分析仪测量各组小鼠血清脂代谢指标三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）及肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平；测量各组小鼠肝系数；采用HE染色检测各组小鼠肝组织病理形态；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测量各组小鼠血清及肝组织炎性因子白细胞介素（IL）-6、IL-18水平；采用实时荧光定量pCR与免疫印迹法检测各组小鼠肝组织LncRNA MEG3、mir-181b-5p及foxp1表达。采用双荧光素酶报告基因实验检测小鼠肝实质细胞中LncRNA MEG3对mir-181b-5p的靶向调节与mir-181b-5p对foxp1的靶向调节。结果：与正常对照组相比，NAFLD模型组小鼠肝组织发生严重病理损伤，肝组织LncRNA MEG3表达、foxp1 mRNA及蛋白表达显著降低（p＜0.05），TG、TC、FFA、ALT及AST水平、肝系数、血清及肝组织IL-6、IL-18水平、肝组织mir-181b-5p表达显著升高（p＜0.05）。与NAFLD模型组相比，LncRNA MEG3过表达组小鼠肝组织病理损伤减轻，肝组织LncRNA MEG3表达、foxp1 mRNA及蛋白表达升高（p＜0.05），TG、TC、FFA、ALT及AST水平、肝系数、血清及肝组织IL-6和IL-18水平、肝组织mir-181b-5p表达降低（p＜0.05）；阴性对照组小鼠各指标无明显变化（p＞0.05）。与LncRNA MEG3过表达组相比，LncRNA MEG3过表达+mir-181b-5p mimics组小鼠肝组织病理损伤加重，肝组织foxp1 mRNA及蛋白表达降低（p＜0.05），TG、TC、FFA、ALT及AST水平、肝系数、血清及肝组织IL-6和IL-18水平、肝组织mir-181b-5p表达升高（p＜0.05）。肝实质细胞中LncRNA MEG3可靶向下调mir-181b-5p表达，且mir-181b-5p可靶向下调foxp1表达。结论：过表达LncRNA MEG3可通过下调mir-181b-5p而增强foxp1表达，从而改善NAFLD小鼠脂代谢，减轻炎症及肝组织损伤，最终修复其肝功能。

关键词： LncRNA MEG3 mir-181b-5p/foxp1 非酒精性脂肪肝病作用机制

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