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mir-17-3p对LIpUS诱导下多孔材料内成骨分化影响的实验研究

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miR-17-3p对LIPUS诱导下多孔材料内成骨分化影响的实验研究

作者：王子健华北理工大学

学位级别：硕士

目的低强度脉冲超声波（low-intensity pulsed ultrasound,LIpUS）是一种强度介于30～100m W/cm的高频、小范围、脉冲式的超声波,可以用于治疗骨不连,促进骨折段的愈合。目前LIpUS促进骨愈合的机制尚不明确。为了探究LIpUS促进骨愈合... 详细信息

目的低强度脉冲超声波（low-intensity pulsed ultrasound,LIpUS）是一种强度介于30～100m W/cm的高频、小范围、脉冲式的超声波,可以用于治疗骨不连,促进骨折段的愈合。目前LIpUS促进骨愈合的机制尚不明确。为了探究LIpUS促进骨愈合的分子作用机制,通过体外实验研究的方式,验证mir-17-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的抑制作用,同时证明LIpUS作用可以对MC3T3-E1细胞内mir-17-3p的表达产生影响进而影响成骨分化,进而阐明mir-17-3p对LIpUS诱导下多孔钛合金材料内MC3T3-E1细胞成骨分化的影响机制,为LIpUS应用于颌骨临界性骨缺损的临床修复治疗提供分子生物学依据,同时丰富LIpUS促进骨愈合机制的理论研究。方法 1检测mir-17-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。选取MC3T3-E1细胞系,将mir-17-3p mimics/mimics NC、mir-17-3p inhibitor/inhibitor NC分别转染到四组MC3T3-E1细胞中,培养7d,RT-q pCR检测Wnt5a、OCN、ALp的m RNA表达水平;培养21d,茜素红染色检测矿化结节数量。2检测LIpUS作用下,mir-17-3p对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。实验分为六组:LIpUS+mir-17-3p inhibitor组、mir-17-3p inhibitor组、LIpUS组、NC组、LIpUS+mir-17-3p mimics组、mir-17-3p mimics组。LIpUS辐照7d,使用RT-q pCR检测Wnt5a、OCN、ALp的m RNA表达水平;ALp定量检测试剂盒验证ALp表达水平。3检测LIpUS作用下,mir-17-3p对多孔钛合金材料内MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。将MC3T3-E1细胞培养到多孔钛合金支架上,分为四组:mimics组、mimics NC组、inhibitor组、inhibitor NC组。LIpUS辐照7d,使用RT-q pCR检测Wnt5a、OCN、ALp的m RNA表达水平;western blot检测Wnt5a、OCN、ALp对应蛋白表达水平;ALp定量检测试剂盒验证ALp表达水平。结果 1抑制mir-17-3p的表达可以显著提高MC3T3-E1细胞内成骨分化标志物的表达水平（pmir-17-3p的过表达可以抑制MC3T3-E1细胞内成骨分化标志物的表达水平（ppUS辐照下mir-17-3p的表达量显著低于对照组（ppUS的辐照可以拮抗mir-17-3p过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的抑制作用（ppUS的辐照可以协同mir-17-3p抑制对MC3T3-E1细胞成骨分化的协同作用（p3 mir-17-3p的过表达或抑制依旧可以对LIpUS辐照下多孔钛合金材料内的MC3T3-E1细胞的成骨分化产生较为显著的影响（pmir-17-3p在MC3T3-E1细胞的成骨分化中起负向调控作用。2 LIpUS辐照可以抑制mir-17-3p的表达,LIpUS可以通过下调mir-17-3p的表达来促进MC3T3-E1细胞的成骨分化。3 LIpUS的辐照在多孔钛合金材料内依旧可以通过下调mir-17-3p的表达来促进MC3T3-E1细胞的成骨分化。图11幅;表5个;参88篇。

关键词：低强度脉冲超声成骨细胞 mir-17-3p 多孔钛合金

LincRNA-p21通过靶向mir-17-3p对三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响

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天津医药 2022年第3期50卷 241-247页

作者：敖翔梁红玲詹勇涛姜明夏浩明广州医科大学附属肿瘤医院胸部(乳腺)肿瘤外科 510095

目的探讨LincRNA-p21通过靶向mir-17-3p对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞迁移和侵袭作用的影响。方法qpCR检测30例TNBC患者肿瘤组织、癌旁正常组织以及6种乳腺细胞(乳腺正常细胞MCF-10A,乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468、BT549、... 详细信息

目的探讨LincRNA-p21通过靶向mir-17-3p对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞迁移和侵袭作用的影响。方法qpCR检测30例TNBC患者肿瘤组织、癌旁正常组织以及6种乳腺细胞(乳腺正常细胞MCF-10A,乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468、BT549、T47D)LincRNA-p21和mir-17-3p的表达。取MDA-MB-231细胞,单独过表达LincRNA-p21(实验设对照组、pcDNA3.1空白组、pcDNA-LincRNA-p21组),抑制mir-17-3p表达(实验设对照组、mir-17-3p空白组、mir-17-3p抑制剂组),过表达LincRNA-p21+抑制mir-17-3p表达(实验设对照组、mir-17-3p抑制剂组和pcDNA-LincRNA-p21+mir-17-3p inhibitor组)。CCK-8法检测MDA-MB-231细胞增殖,集落形成实验检测细胞的集落数量,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果TNBC患者组织中LincRNA-p21的表达明显低于癌旁组织(0.48±0.03 vs.1.03±0.06,t=11.714,pmir-17-3p的表达显著高于癌旁组织(2.93±0.17 vs.1.02±0.04,t=15.593,pp21表达量明显低于MCF-10A,mir-17-3p表达量高于MCF-10A(pp21或抑制mir-17-3p后,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力均明显下降。过表达LincRNA-p21的同时抑制mir-17-3p,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力出现进一步下降,且上调E-cadherin的表达,抑制Vimentin的表达(pp21通过竞争性结合mir-17-3p来抑制MDA-MB-231细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭。

关键词：三阴性乳腺癌细胞运动 RNA干扰 RNA,长链非编码 LincRNA-p21 mir-17-3p 细胞侵袭

CEA联合mir-17-3p在结肠癌中的诊断作用研究

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CEA联合miR-17-3p在结肠癌中的诊断作用研究

作者：张尚武苏州大学

学位级别：硕士

目的：研究CEA及mir-17-3p在结肠癌患者血清中的表达，并分析CEA联合mir-17-3p在结肠癌诊断中的价值。方法：随机选取2011年01月-2012年08月收治的结肠癌病人70例、慢性结肠炎病人70例，以及50例健康志愿者。通过化学分光光度仪检测其... 详细信息

目的：研究CEA及mir-17-3p在结肠癌患者血清中的表达，并分析CEA联合mir-17-3p在结肠癌诊断中的价值。方法：随机选取2011年01月-2012年08月收治的结肠癌病人70例、慢性结肠炎病人70例，以及50例健康志愿者。通过化学分光光度仪检测其血清CEA水平，并应用实时逆转录聚合酶链反应方法检测mir-17-3p的相对表达量。分析比较以上三组人群血清中CEA及mir-17-3p的表达差异，并探讨CEA、mir-17-3p及联合检测在结肠癌中的诊断价值。结果：（1）血清CEA、mir-17-3p在结肠癌病人组的表达均高于慢性结肠炎组及健康人群组（p值均p值均>0.05）;（2）在三组病人中，联合检测血清CEA及mir-17-3p诊断价值相较于单独检测CEA、mir-17-3p均明显增大，其特异度明显升高，相较于单独检测CEA、mir-17-3p有明显差异（p值均mir-17-3p有明显差异（p值均3）在三组病人中，联合检测血清CEA及mir-17-3p的阳性似然比均>20，阴性似然比均mir-17-3p在结肠癌病人血清中均有高表达，但CEA特异性较高，敏感性较低，mir-17-3p特异性较低，敏感性较高。（2）联合检测CEA、mir-17-3p提高了这两种标志物进行结肠癌诊断的敏感度、特异度。（3）联合检测CEA、mir-17-3p有可能成为临床新的结肠癌实验室诊断方法。

关键词：结肠癌 mir-17-3p CEA 联合诊断价值

mir-17-3p在寻常型银屑病患者中的表达研究

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皮肤性病诊疗学杂志 2017年第6期24卷 386-388页

作者：饶朗王晓华张娇陈永锋成都医学院第一附属医院皮肤科四川成都610500 南方医科大学皮肤病医院广东省皮肤病医院广东广州510091

目的:研究mir-17-3p在寻常型银屑病皮损及外周血中的表达情况,探讨其参与寻常型银屑病的发病机制。方法:收集寻常型银屑病患者(17例)的皮损组织和外周血及正常对照组(4例)皮肤组织和外周血,提取mirNA。采用Real-time pCR技术检测mir-17-... 详细信息

目的:研究mir-17-3p在寻常型银屑病皮损及外周血中的表达情况,探讨其参与寻常型银屑病的发病机制。方法:收集寻常型银屑病患者(17例)的皮损组织和外周血及正常对照组(4例)皮肤组织和外周血,提取mirNA。采用Real-time pCR技术检测mir-17-3p mirNA的表达并进行比较。免疫组化法检测寻常型银屑病皮损组织(25例)和正常皮肤组织(15例)中mir-17-3p的可能靶基因FNIp1蛋白的表达,pearson相关分析银屑病患者外周血中mir-17-3p的表达水平与患者pASI评分的相关性。结果:Real-time pCR显示mir-17-3p mirNA在寻常型银屑病患者组皮损及外周血中表达量较正常对照组均明显降低(t值分别为34.62、9.16,p值均mir-17-3p外周血中表达量与患者pASI评分呈负相关(r=-0.56,p=0.019)。寻常型银屑病患者皮损中FNIp1蛋白表达阳性率明显高于对照组(X^2=9.72,pmir-17-3p表达下调可能与银屑病的发病有关,mir-17-3p可能通过调节靶基因FNIp1参与银屑病发病。通过检测外周血中mir-17-3p的表达量可能可以评估患者病情严重程度。

关键词：寻常型银屑病 mir-17-3p FNIp1

mir-17-3p、NLR水平对多发性骨髓瘤的诊断价值

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浙江实用医学 2022年第1期27卷 33-35,57页

作者：罗林香姚建军蔡云峰浙江衢化医院浙江衢州324000

目的探讨mir-17-3p、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对多发性骨髓瘤(MM)的诊断价值。方法选取2016年10月-2017年9月在浙江衢化医院就诊的80例多发性骨髓瘤患者作为多发性骨髓瘤组,另选取同时期的80例健康体检者为健康对照组。比较两组mir... 详细信息

目的探讨mir-17-3p、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对多发性骨髓瘤(MM)的诊断价值。方法选取2016年10月-2017年9月在浙江衢化医院就诊的80例多发性骨髓瘤患者作为多发性骨髓瘤组,另选取同时期的80例健康体检者为健康对照组。比较两组mir-17-3p、NLR水平,并评估这两种指标在MM中的诊断价值。结果多发性骨髓瘤组血浆mir-17-3p、NLR水平较健康对照组增加,差异有统计学意义(pmir-17-3p及NLR诊断MM的AUC分别为0.890、0.830,灵敏度分别为71.2%、60.0%,特异度分别为97.5%、96.2%。结论mir-17-3p、NLR水平升高,对多发性骨髓瘤具有一定的诊断价值。

关键词：多发性骨髓瘤 mir-17-3p NLR 诊断

mirNA-720、mir-17-3p及mir-215-5p在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

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川北医学院学报 2021年第12期36卷 1552-1556,1560页

作者：闫薛张巍张婷师锦宁南京医科大学附属江宁医院血液科江苏南京211100

目的:探讨mirNA-720、mir-17-3p及mir-215-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及临床意义。方法:提取100例MM患者(病例组)和100名健康人群(对照组)血清RNA。实时荧光定量pCR测定血清mirNA-720、mir-17-3p及mir-215-5p表达水平,分析其表达量... 详细信息

目的:探讨mirNA-720、mir-17-3p及mir-215-5p在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及临床意义。方法:提取100例MM患者(病例组)和100名健康人群(对照组)血清RNA。实时荧光定量pCR测定血清mirNA-720、mir-17-3p及mir-215-5p表达水平,分析其表达量与临床病理特征的关系,Kaplan-Meier生存分析法分析三种不同基因相对表达量与患者预后的关系。结果:病例组血清mirNA-720、mir-17-3p相对表达量高于对照组(pmir-215-5p相对表达量低于对照组(pmir-17-3p相对表达量与ISS分期有统计学差异(pmir-215-5p相对表达量与血红蛋白水平有统计学差异(pmirNA-720高表达患者初次化疗有效率低于低表达患者(pmir-215-5p低表达患者初次化疗有效率低于高表达患者(pmirNA-720及mir-17-3p低表达和mir-215-5p高表达患者生存情况较好(pmirNA-720、mir-17-3p及mir-215-5p可能与MM密切相关,可作为MM诊断、治疗及预后的评估指标。

关键词：多发性骨髓瘤 mirNA-720 mir-17-3p mir-215-5p 预后

多发性骨髓瘤患者血浆mir-17-3p表达及其临床意义

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中华实用诊断与治疗杂志 2020年第6期34卷 596-599页

作者：刘海军王莉莉李言飞孙勇烟台市莱阳中心医院血液病科山东莱阳265200 烟台市莱阳中心医院检验科山东莱阳265200

目的探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血浆mir-17-3p的表达及其临床意义。方法90例MM患者为MM组,30例其他血液疾病患者为非MM组,30例体检健康者为对照组;采用实时荧光定量pCR法检测3组血浆mir-17-3p相对表达量,分析MM患者血浆... 详细信息

目的探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血浆mir-17-3p的表达及其临床意义。方法90例MM患者为MM组,30例其他血液疾病患者为非MM组,30例体检健康者为对照组;采用实时荧光定量pCR法检测3组血浆mir-17-3p相对表达量,分析MM患者血浆mir-17-3p相对表达量与临床病理特征的关系;以血浆mir-17-3p相对表达量均值3.125为临界值,将MM患者分为高表达(mir-17-3p≥3.125)组43例和低表达(mir-17-3p3.125)组47例,采用Kaplan-Meier生存分析法分析不同mir-17-3p相对表达量患者的预后情况。结果MM组血浆mir-17-3p相对表达量(3.125±0.710)高于非MM组(1.205±0.353)和对照组(1.146±0.261)(pp>0.05)。ISS分期Ⅲ期MM患者血浆mir-17-3p相对表达量(3.707±0.715)高于Ⅱ期(3.079±0.713)和Ⅰ期(2.915±0.708)患者(ppmir-17-3p相对表达量比较差异均无统计学意义(p>0.05)。高表达组患者3年总体生存率(25.6%)低于低表达组(65.9%)(pmir-17-3p表达升高,与ISS分期和患者不良预后有关,有可能成为新的MM肿瘤标志物。

关键词：多发性骨髓瘤 mir-17-3p 预后分期

血浆mir-17-3p对初诊老年多发性骨髓瘤患者总生存情况的预测价值

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国际检验医学杂志 2022年第18期43卷 2255-2259页

作者：邹永刚魏建仝陈兴超钱军河西学院附属张掖人民医院骨三科甘肃张掖734000

目的探讨血浆mir-17-3p对初诊老年多发性骨髓瘤(MM)患者总生存情况的预测价值。方法选取该院收治的80例初诊老年多发性骨髓瘤患者纳入MM组,并选择同期80例体检健康老年人为对照组,比较两组血浆mir-17-3p,血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫... 详细信息

目的探讨血浆mir-17-3p对初诊老年多发性骨髓瘤(MM)患者总生存情况的预测价值。方法选取该院收治的80例初诊老年多发性骨髓瘤患者纳入MM组,并选择同期80例体检健康老年人为对照组,比较两组血浆mir-17-3p,血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、β微球蛋白(β-MG),血浆清蛋白(ALB)水平。比较不同临床特征MM患者间mir-17-3p水平。分析MM组患者mir-17-3p水平与IgA、IgG、β-MG、ALB的相关性。对所有MM患者随访3年,根据存活状态分为存活组和死亡组,比较两组血浆mir-17-3p水平。根据MM组患者mir-17-3p平均值分为mir-17-3p高表达组和mir-17-3p低表达组,比较两组临床特征及IgA、IgG、β-MG、ALB水平,采用Kaplan-Meier生存曲线比较两组累积生存期。结果相较于对照组,MM组ALB水平更低,而mir-17-3p、IgA、IgG、β-MG水平更高(pmir-17-3p水平也有所上升(pmir-17-3p水平与ALB呈负相关,而与IgA、IgG、β-MG呈正相关(pmir-17-3p水平更高(pmir-17-3p高表达组与mir-17-3p低表达组在ISS分期的构成比、IgA、IgG、β-MG水平上比较,差异有统计学意义(pplan-Meier生存曲线分析结果显示,mir-17-3p高表达组及mir-17-3p低表达组累积生存期分别为(26.83±1.20)、(33.03±0.68)个月,两组比较,差异有统计学意义(pmir-17-3p水平显著上升,并与病情严重程度密切相关,血浆mir-17-3p高表达患者可能生存情况不佳。

关键词： mir-17-3p 血浆老年多发性骨髓瘤预后

mir-17-5p、mir-17-3p和mir-20a-5p在胃间质瘤中表达

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胃肠病学和肝病学杂志 2015年第3期24卷 270-274页

作者：肖军汪其贤朱尤庆夏冰朱晓文王新涛武汉大学中南医院消化内科湖北武汉430071

目的探讨mir-17-5p、mir-17-3p及mir-20a-5p在胃间质瘤(gastric stromal tumor,GST)中的差异表达及其与临床病理因素的关系。方法提取正常胃组织及GST组织共72例标本的总RNA,应用Real time RT-pCR方法检测mir-17-5p、mir-17-3p及mir-20a-5p的表达,用SpSS 19.0分析其与临床病理因素的关系及3个mirNA间的相关性。结果在GST中,mir-17-3p、mir-17-5p在肿瘤组织中表达较胃正常组织低(pp>0.05);mir-20a-5p表达在胃正常组织、低危组和中高危组之间均有差异表达,且随着恶性度的增加而下降(p3种mirNA的表达水平与肿瘤的侵袭、转移、年龄、肿瘤最大直径和核分裂象密切相关,而与瘤体是否破溃无关。结论 mir-17-5p、mir-17-3p、mir-20a-5p在GST中下调并相互作用可能是促进GST发生、发展因素之一。

关键词： mir-17-5p mir-17-3p mir-20a-5p 胃间质瘤实时荧光定量