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mir-145抑制c-Myc基因表达对鼻咽癌细胞增殖的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第5期22卷 578-583页

作者：陈红兵黄海平刘霞雷哲刘济生苏州大学基础医学与生物科学学院遗传学系江苏苏州215123 苏州大学癌症分子遗传学实验室江苏苏州215123 苏州大学附属第一医院耳鼻喉科江苏苏州215006

目的:探究mir-145影响鼻咽癌细胞增殖可能的机制。方法:采用Real-time PCR法检测鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、CNE-2Z和鼻咽部永生化上皮细胞株NP69中mir-145和c-Myc的mRNA表达水平,Western blotting法检测c-Myc的蛋白表达水平,双萤光素... 详细信息

目的:探究mir-145影响鼻咽癌细胞增殖可能的机制。方法:采用Real-time PCR法检测鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、CNE-2Z和鼻咽部永生化上皮细胞株NP69中mir-145和c-Myc的mRNA表达水平,Western blotting法检测c-Myc的蛋白表达水平,双萤光素酶报告基因实验检测mir-145与基因c-Myc的关系。分别将mir-Negative control、mir-145 mimics和siNC、si-c-Myc转染进入CNE-1细胞,采用Real-time PCR及Western blotting法检测转染效果,CCK-8法检测转染后细胞的增殖情况,以及碘化丙啶(IP)染色流式细胞术检测细胞周期情况。结果:mir-145在鼻咽癌细胞系中明显低表达。转染mir-145后明显抑制CNE-1细胞的增殖[3 d:(1.03±0.02)vs(1.21±0.02),Pmir-145可以直接作用于c-Myc的3’UTR区域,抑制c-Myc的转录和表达。c-Myc下调可明显抑制CNE-1细胞的增殖[3 d:(0.80±0.02)vs(1.02±0.01),Pmir-145通过靶向作用于c-Myc的3’UTR区来抑制鼻咽癌细胞的增殖,对更深入探索鼻咽癌的诊断和治疗有着重要意义。

关键词：鼻咽癌 mir-145 c-Myc 增殖细胞周期

基于CD40/NF-κB通路丹皮酚调控mir-145抑制小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞炎症反应

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安徽中医药大学学报 2022年第2期41卷 68-74页

作者：刘玲蒋婷婷杨宇龙施晓艳刘雅蓉吴鸿飞戴敏安徽中医药大学药学院安徽省中药研究与开发重点实验室安徽合肥230012

目的观察丹皮酚基于白细胞分化抗原CD40/核转录因子-κB(clusters of differentitation 40/nuclear factor kappa-B,CD40/NF-κB)通路调控mir-145抑制小鼠动脉粥样硬化血管巨噬细胞源性泡沫细胞炎症反应的作用机制。方法高脂饮食喂养Apo... 详细信息

目的观察丹皮酚基于白细胞分化抗原CD40/核转录因子-κB(clusters of differentitation 40/nuclear factor kappa-B,CD40/NF-κB)通路调控mir-145抑制小鼠动脉粥样硬化血管巨噬细胞源性泡沫细胞炎症反应的作用机制。方法高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠20周复制动脉粥样硬化模型,模型复制成功后,给予丹皮酚灌胃,分为正常对照组,模型组,丹皮酚中、高剂量组(200、300 mg/kg);油红O染色观察主动脉斑块病理形态;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;激光共聚焦显微镜检测主动脉蛋白CD40与CD36共定位;实时荧光定量PCR检测主动脉mir-145表达情况。氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)刺激RAW264.7细胞建立巨噬细胞源性泡沫细胞炎症模型,将mir-145模拟剂、mir-145抑制剂转染入细胞,分为空白组、模型组、丹皮酚(60μmol/L,Pae)组、mir-145模拟剂组、mir-145模拟剂+Pae组、mir-145抑制剂组、mir-145抑制剂+Pae组。油红O染色观察细胞荷脂情况,Western blot法检测蛋白CD40和核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)磷酸化水平,ELISA检测TNF-α、IL-1、IL-6水平。结果丹皮酚能显著缩小小鼠主动脉斑块面积,降低血清IL-1、IL-6、TNF-α水平,下调主动脉CD40蛋白的表达水平,上调主动脉mir-145的表达水平。丹皮酚能上调泡沫细胞mir-145的表达水平,抑制CD40、p-p65蛋白的表达,降低细胞分泌的IL-1、IL-6、TNF-α水平。结论丹皮酚通过上调小鼠mir-145的表达水平,抑制CD40/NF-κB通路,从而减轻动脉粥样硬化小鼠血管泡沫细胞的炎症反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用。

关键词：动脉粥样硬化丹皮酚 mir-145 泡沫细胞炎症反应

冠心病病人PCI术后血清mir-145和VCAM1水平与预后的关系

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中西医结合心脑血管病杂志 2022年第7期20卷 1268-1272页

作者：胡靖超卞玲上海交通大学医学院附属第九人民医院上海200011

目的探究冠心病病人行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后血清微小RNA-145(mir-145)和血管细胞间黏附分子1(VCAM1)水平与预后的关系。方法选取2014年9月—2019年9月上海交通大学医学院附属第九人民医院收治的因冠心病行PCI术病人152例,根据... 详细信息

目的探究冠心病病人行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后血清微小RNA-145(mir-145)和血管细胞间黏附分子1(VCAM1)水平与预后的关系。方法选取2014年9月—2019年9月上海交通大学医学院附属第九人民医院收治的因冠心病行PCI术病人152例,根据病人PCI术后6个月主要不良心血管事件(MACE)发生情况分为MACE发生组(66例)和MACE未发生组(86例)。收集病人一般资料,检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测两组病人血清mir-145水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测病人血清VCAM1水平。采用Pearson法分析冠心病病人PCI术后1 d血清mir-145、VCAM1水平与CRP、CK-MB、cTnI及NT-proBNP的相关性;Logistic回归模型分析PCI术后冠心病病人发生MACE的危险因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析术后1 d血清mir-145、VCAM1水平对冠心病病人PCI术后发生MACE的预测价值。结果MACE发生组与MACE未发生组的多支病变、发病至球囊扩张时间、梗死相关动脉心肌梗死溶栓试验(TIMI)分级≥2级、冠状动脉Gensini评分比较,差异均有统计学意义(Pmir-145水平均明显低于MACE未发生组,VCAM1、CRP、CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平均明显高于MACE未发生组(Pmir-145水平与CRP、CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平呈负相关(Pmir-145水平、高VCAM1水平、高CRP水平、高CK-MB水平、高cTnI水平、高NT-proBNP水平是PCI术后冠心病病人发生MACE的独立危险因素(Pmir-145、VCAM1水平联合预测冠心病病人PCI术后发生MACE的ROC曲线下面积为0.827[95%CI(0.757,0.897)],敏感度为84.80%,特异度为77.90%。结论冠心病病人行PCI术后血清mir-145表达水平明显降低,VCAM1水平明显升高,二者可用于评估PCI术后冠心病病人的预后。

关键词：冠心病冠状动脉介入治疗 mir-145 血管细胞间黏附分子1 预后

mir-145通过mTOR途径调控NSCLC A549细胞生物学特性

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中南医学科学杂志 2022年第2期50卷 179-183页

作者：李柱吴烜彭小丹王树滨北京大学深圳医院肿瘤内科广东省深圳市518000

目的探究mir-145调控非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞生物学特性及对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的影响。方法将A549细胞分为mir-145组、对照组、mir-145抗体组和对照抗体组。采用Lipofectamine;2000转染试剂盒进行质粒转染,行MTT、... 详细信息

目的探究mir-145调控非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞生物学特性及对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的影响。方法将A549细胞分为mir-145组、对照组、mir-145抗体组和对照抗体组。采用Lipofectamine;2000转染试剂盒进行质粒转染,行MTT、细胞凋亡、细胞迁移、细胞侵袭检测,Western blotting检测分析雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、真核细胞翻译起始因子(eIF4E)、磷酸化eIF4E(p-eIF4E)、核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)、S6核糖体蛋白(S6)、磷酸化S6(p-S6)、eIF4E结合蛋白1(4E-BP)、磷酸化4E-BP(p-4E-BP)水平。结果对照组和对照抗体组细胞mir-145表达和细胞凋亡水平差异无显著性(P>0.05),但与mir-145组和mir-145抗体组比较有明显差异,其中mir-145组最高,mir-145抗体组最低(P0.05),但与mir-145组和mir-145抗体组比较有明显差异,其中mir-145组最低,mir-145抗体组最高(Pmir-145可通过mTOR途径调控NSCLC A549细胞生物学特性,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖活性、迁移能力及侵袭能力。

关键词： mir-145 mTOR途径非小细胞肺癌 A549细胞生物学特性

反复种植失败患者外周血mir-145水平变化及对纤溶酶原激活物抑制因子-1的影响

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中华全科医学 2023年第7期21卷 1143-1146,1205页

作者：杜丹杨帆贺平陈慧赵燕王静刘海鹏彭姝明郴州市第一人民医院生殖医学中心湖南郴州423000

目的探讨反复种植失败患者取卵前、胚胎移植前血清mir-145水平变化及对纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的影响。方法选取2021年1月—2022年6月湖南省郴州市第一人民医院生殖医学中心胚胎反复种植失败(RIF)患者71例为观察组,妊娠成功者... 详细信息

目的探讨反复种植失败患者取卵前、胚胎移植前血清mir-145水平变化及对纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的影响。方法选取2021年1月—2022年6月湖南省郴州市第一人民医院生殖医学中心胚胎反复种植失败(RIF)患者71例为观察组,妊娠成功者551例为对照组。分析mir-145与PAI-1相关性、mir-145与RIF的独立关系,mir-145对RIF的评估价值。结果取卵前、胚胎移植前观察组血清mir-145[(1.09±0.13)ng/mL vs.(0.98±0.14)ng/mL,F=8.419,P=0.004;(1.19±0.16)ng/mL vs.(1.01±0.18)ng/mL,F=58.184,Pmir-145与PAI-1均呈正相关关系(r=0.725,Pmir-145均与RIF独立相关(Pmir-145评估RIF的AUC值分别为0.690、0.774。结论RIF不孕症患者mir-145呈异常高表达,其可能通过靶向调节PAI-1表达降低子宫内膜容受性,参与RIF的发生过程。

关键词：反复种植失败 mir-145 纤溶酶原激活物抑制因子-1 体外受精-胚胎移植

敲减mir-145增强骨髓间充质干细胞对大鼠盆底功能障碍的修复作用

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南昌大学学报（医学版） 2022年第1期62卷 32-37页

作者：张小燕陈慧陈婧耿月华中国人民解放军联勤保障部队第九〇九医院妇产科福建漳州363000 中国人民解放军联勤保障部队第九〇九医院病理科福建漳州363000

目的探讨敲减mir-145对骨髓间充质干细胞(BMSC)修复大鼠盆底功能障碍(PFD)的影响。方法分离大鼠BMSC,并鉴定;将mir-NC或mir-145-shRNA慢病毒载体转入BMSC后,采用CCK-8法检测细胞活力。将32只大鼠按照随机对照表法分为对照组(Con)、PFD组... 详细信息

目的探讨敲减mir-145对骨髓间充质干细胞(BMSC)修复大鼠盆底功能障碍(PFD)的影响。方法分离大鼠BMSC,并鉴定;将mir-NC或mir-145-shRNA慢病毒载体转入BMSC后,采用CCK-8法检测细胞活力。将32只大鼠按照随机对照表法分为对照组(Con)、PFD组、mir-NC治疗组(mir-NC)和mir-145-shRNA治疗组(mir-145-shRNA)。通过阴道扩张法建立PFD大鼠模型,mir-NC和mir-145-shRNA组大鼠分别给予注射已转染mir-NC和mir-145-shRNA慢病毒载体的BMSC,14 d后,进行尿流动力学(膀胱容积、排尿时膀胱内压、漏尿点压)测试,并用western blot法检测各组大鼠盘底支持组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和弹性蛋白(Elastin)的表达水平。结果成功分离大鼠BMSC;与mir-NC组比较,mir-145-shRNA组BMSC的细胞活力明显增强(Pmir-NC组和mir-145-shRNA组大鼠中上述指标均增加(均Pmir-145-shRNA组优于mir-NC组(均Pmir-145能增强BMSC对大鼠盆底功能障碍的修复作用。

关键词：盆底功能障碍骨髓间充质干细胞弹性蛋白胶原蛋白 mir-145 动物,实验大鼠

血清mir-145、mir-150表达水平与急性心肌梗死患者PCI术后心力衰竭的关系

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国际检验医学杂志 2022年第4期43卷 414-419页

作者：杨洋徐彧袁锦霞葛婷赵艳芳东部战区总医院秦淮医疗区心血管内科江苏南京210000

目的探讨血清mir-145、mir-150表达水平与急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心力衰竭(HF)的关系。方法选择2018年12月至2020年1月该院心内科收治的137例行PCI治疗的AMI患者,55例术后发生HF的患者纳入HF组,82例未发生H... 详细信息

目的探讨血清mir-145、mir-150表达水平与急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心力衰竭(HF)的关系。方法选择2018年12月至2020年1月该院心内科收治的137例行PCI治疗的AMI患者,55例术后发生HF的患者纳入HF组,82例未发生HF的患者纳入NHF组,另选择同期68例健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清mir-145、mir-150表达水平。采用Pearson相关分析mir-145与mir-150之间相关性,以及mir-145、mir-150表达水平与心功能指标[左心室射血分数(LVEF)、左室峰射血率时间(LVTPER)、左室峰射血率(LVPER)]和心肌损伤标志物[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Mb)]的相关性。采用Logistic回归分析AMI患者PCI术后发生HF的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析相关指标对PCI术后发生HF的预测价值。结果HF组血清mir-145、mir-150表达水平、LVEF、LVPER低于NHF组和对照组,CK-MB、cTnI、Mb水平高于NHF组和对照组,LVTPER长于NHF组和对照组,差异均有统计学意义(Pmir-145与mir-150表达水平之间呈正相关(Pmir-145、mir-150表达水平与LVEF、LVPER呈正相关,与CK-MB、cTnI、Mb、LVTPER呈负相关(Pmir-145、mir-150低表达,CK-MB、cTnI水平升高是AMI患者PCI术后发生HF的危险因素(Pmir-145、mir-150对PCI术后发生HF具有一定的诊断价值,曲线下面积(AUC)分别为0.710、0.724、0.787、0.740,4项指标联合检测的AUC为0.872。结论AMI患者PCI术后血清mir-145、mir-150表达水平降低,mir-145、mir-150表达水平与患者心功能低下、心肌损伤以及HF的发生有关。

关键词： mir-145 mir-150 急性心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗心力衰竭

冠心病病人血清mir-34a、mir-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制研究

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中西医结合心脑血管病杂志 2023年第7期21卷 1266-1270页

作者：齐贵彬高建步张明磊张永杰王星彭小荷董晓双李京倡刘琳南阳市中心医院河南南阳473009

目的:探讨冠心病病人中mir-34a、mir-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制。方法:选取2018年3月—2019年5月本院收治的冠心病病人60例作为冠心病组,健康志愿者60名作为对照组。对冠状动脉造影检查结果进行Gensini评分,根据分值... 详细信息

目的:探讨冠心病病人中mir-34a、mir-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制。方法:选取2018年3月—2019年5月本院收治的冠心病病人60例作为冠心病组,健康志愿者60名作为对照组。对冠状动脉造影检查结果进行Gensini评分,根据分值差异将冠状动脉狭窄程度分为轻度组(90分,12例)。记录1年内心血管不良事件发生情况,并分为心血管不良事件组(13例)和非心血管不良事件组(47例)。纳入本研究后,采集次日清晨受试者外周静脉血4 mL,分离血浆,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测mir-34a、mir-145表达水平。常规培养人血管内皮细胞株,分为正常对照组、IL-6组、空载体转染组、mir-34a低表达组、mir-34a高表达组,检测沉默信息调节因子1(SIRT1)mRNA及蛋白表达水平。另将人血管内皮细胞株分为正常对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、空载体转染组、mir-145低表达组、mir-145高表达组,检测胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA及蛋白表达水平。结果:冠心病组mir-34a表达水平明显高于对照组,mir-145表达水平明显低于对照组(Pmir-34a表达水平明显高于中度组及轻度组,mir-145表达水平明显低于中度组及轻度组;中度组mir-34a表达水平明显高于轻度组,mir-145表达水平明显低于轻度组(Pmir-34a表达水平与Gensini评分呈正相关,mir-145表达水平与Gensini评分呈负相关。冠心病病人中心血管不良事件组mir-34a表达水平明显高于非心血管不良事件组,mir-145表达水平明显低于非心血管不良事件组(Pmir-34a低表达组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平明显高于IL-6组、空载体转染组,mir-34a高表达组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平明显低于IL-6组、空载体转染组(Pmir-145低表达组IGF-1R mRNA及蛋白表达水平明显低于ox-LDL组、空载体转染组,mir-145高表达组IGF-1R mRNA及蛋白表达水平明显高于ox-LDL组、空载体转染组(Pmir-34a高表达可能通过降低内皮细胞中SIRT1表达水平,减弱了SIRT1炎症抑制作用,进而促进内皮细胞炎症反应,加重冠状动脉粥样硬化程度;mir-145低表达可能通过降低内皮细胞中IGF-1表达水平,减弱了IGF-1促进一氧化氮分泌的作用,加剧高脂性损伤对冠状动脉粥样硬化的影响。

关键词：冠心病冠状动脉粥样硬化 mir-34a mir-145 机制

N-乙酰半胱氨酸基于mir-145/ADAM17通路缓解动脉粥样硬化氧化应激损伤的作用研究

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中国循证心血管医学杂志 2022年第8期14卷 951-955页

作者：樊明强丁涛杨向向甘肃医学院附属医院心血管内科 744000

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)缓解动脉粥样硬化氧化应激损伤的潜在机制。方法将24只7周龄的雄性ApoE-/-小鼠随机分为3组:正常对照组(Control),喂食未经NAC处理的正常食物(n=8);动脉粥样硬化组(AS组),喂食未经NAC处理的高脂饮食(n=8);NA... 详细信息

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)缓解动脉粥样硬化氧化应激损伤的潜在机制。方法将24只7周龄的雄性ApoE-/-小鼠随机分为3组:正常对照组(Control),喂食未经NAC处理的正常食物(n=8);动脉粥样硬化组(AS组),喂食未经NAC处理的高脂饮食(n=8);NAC处理组,喂食NAC处理(每周两次通过胃内给药50 mg/kg)的高脂饮食(n=8)。高脂饮食12周后用试剂盒检测对照组、AS组和NAC处理组中小鼠动脉的活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)水平。小鼠血管内皮细胞BEND3,按照是否使用NAC处理(终浓度为10μM NAC处理细胞24 h),分为NAC处理组和不处理组,随后使用试剂盒检测两组细胞的ROS和MDA水平。mirNA高通量测序检测NAC处理后小鼠血管内皮细胞BEND3的mirNAs表达。mirDB在线分析和遗传学方法鉴定NAC调控的通路。结果与对照组相比,AS组小鼠血管组织中MDA和ROS水平显著上升(P0.05)。与AS组相比,NAC组小鼠血管组织中MDA和ROS水平均显著下降(PmirNA高通量测序发现包括mir-145在内的多种mirNAs发生上调。在BEND3细胞中过表达mir-145后,该细胞的ROS水平降低(Pmir-145靶向ADAM17 mRNA的3’端非编码区。敲低ADAM17后,小鼠血管内皮细胞BEND3的MDA和ROS水平均显著下降(Pmir-145/ADAM17轴,降低MDA和ROS水平,缓解动脉粥样硬化氧化应激损伤。

关键词： N-乙酰半胱氨酸 mir-145 去整合素金属蛋白酶17 动脉粥样硬化氧化应激小鼠