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mir-143/145基因多态性与大动脉粥样硬化型卒中遗传易感性的关系

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中国脑血管病杂志 2018年第9期15卷 449-454页

作者：谷蒙蒙肖露露张治中王猛猛刘新峰南京医科大学金陵临床医学院(南京军区南京总医院)神经内科 210002

目的探讨mir-143/145的编码基因启动子区域rs4705342多态性与中国汉族人群大动脉粥样硬化型(LAA)卒中的关系。方法基于南京卒中注册系统,连续纳入了2013年8月至2016年12月于南京军区南京总医院神经内科就诊的1 066例LAA卒中患者,同期纳... 详细信息

目的探讨mir-143/145的编码基因启动子区域rs4705342多态性与中国汉族人群大动脉粥样硬化型(LAA)卒中的关系。方法基于南京卒中注册系统,连续纳入了2013年8月至2016年12月于南京军区南京总医院神经内科就诊的1 066例LAA卒中患者,同期纳入1 152例健康体检未患有心脑血管疾病以及动脉粥样硬化的当地成年(年龄≥18岁)汉族居民作为对照组。通过SNPscan技术对rs4705342进行基因分型。采用多因素回归分析方法分析rs4705342多态性与LAA卒中风险的相关性,并根据各风险因素进行分层分析。结果在显性模型中,携带TC/CC基因型较携带TT基因型者发生LAA卒中的风险降低(校正OR=0.79,95%CI:0.65～0.96,校正P=0.018)。分层分析显示,年龄≥60岁(OR=0.71,95%CI:0.54～0.95)、无糖尿病史(OR=0.76,95%CI:0.61～0.95)及无吸烟史(OR=0.74,95%CI:0.58～0.95)人群中,携带TC/CC基因型较携带TT基因型发生LAA卒中的风险显著降低(均Pmir-143/145编码基因启动子区域rs4705342 TC/CC基因型与中国汉族人群较低的LAA卒中的发病风险相关。

关键词：多态性单核苷酸动脉粥样硬化卒中遗传易感性 mir-143/145

mir-143/145通过靶向NFATc1抑制Th9细胞分化的研究

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miR-143/145通过靶向NFATc1抑制Th9细胞分化的研究

作者：石秋月广西医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨mi R-143/145对小鼠脾脏Th9细胞分化的调控作用以及可能的作用机制。方法:(1)利用免疫磁珠分选试剂盒从小鼠脾脏分离出初始CD4T细胞,随机设置为诱导组、对照组。加入鼠抗CD3/CD28抗体刺激,诱导组和对照组分别加入或不加入含有T... 详细信息

目的:探讨mi R-143/145对小鼠脾脏Th9细胞分化的调控作用以及可能的作用机制。方法:(1)利用免疫磁珠分选试剂盒从小鼠脾脏分离出初始CD4T细胞,随机设置为诱导组、对照组。加入鼠抗CD3/CD28抗体刺激,诱导组和对照组分别加入或不加入含有TGF-β和IL-4细胞因子的培养基,诱导3天,实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)分别检测第0、1、2、3天mi R-143/145的表达量。(2)分选后的CD4T淋巴细胞随机分为实验组和对照组,利用Roche转染试剂分别对各组细胞进行转染,其中实验组转染mi RNA-143/145模拟物或抑制物(mi R-143-3p/mi R-145-5p mimics,mi R-143-3p/mi R-145-5p inhibitors),对照组转染对照构建物(Control Construct),24h后使用q RT-PCR测定各组细胞mi RNA-143/145的转染效率。在转染后的各组细胞培养液中加入IL-4、TGF-β,诱导3天,使其向辅助性T淋巴细胞9(T helper cell 9,Th9)细胞分化。采用流式细胞术分别检测各组Th9细胞的表达比例及其凋亡情况;用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组细胞上清液IL-9含量;用q RT-PCR分别检测各组细胞IL-9的m RNA表达水平;通过CCK-8和Ed U免疫荧光染色检测对各组细胞的增殖情况。(3)利用生物信息学方法筛选出mi R-143/145的共同靶基因为活化T细胞核因子1(Nuclear factor of active T cells 1,NFATc1)。q RT-PCR检测NFATc1m RNA在Th9细胞极化过程的表达。在mi R-143/145模拟物、抑制剂或对照构建物转染各组细胞后,通过q RT-PCR和Western Blotting评估原始CD4T细胞中NFATc1 m RNA和蛋白的表达。分选后的CD4T淋巴细胞随机分为实验组和对照组,分别转染NFATc1 si RNA及si RNA阴性对照,q RT-PCR和Western Blotting分别检测NFATc1 m RNA、IL-9 m RNA和NFATc1蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液IL-9的表达量,采用流式细胞术检测Th9细胞在初始CD4T淋巴细胞的占比及细胞凋亡情况,通过CCK-8和Ed U免疫荧光染色检测细胞增殖情况。(4)使用pc DNA3.1-NFATc1过表达质粒和/或mi R-143/145模拟物转染初始CD4T细胞,TGF-β和IL-4条件下诱导3天后,Western Blotting检测NFATc1蛋白水平,ELISA法检测上清液IL-9的表达量,CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测Th9细胞占比及细胞凋亡情况。结果:(1)在Th9细胞极化过程中,mi RNA-143/145表达呈时间依赖性降低。(2)与对照组相比,转染mi RNA-143/145模拟物后CD4T细胞中mi RNA-143/145表达明显升高(P143/145模拟物明显增强了单独转染mi RNA-143或mi RNA-145模拟物对IL-9及Th9细胞的产生和诱导的抑制作用(P143和(或)mi RNA-145抑制剂后,mi RNA-143/145无明显改变,此时,Th9细胞比例及IL-9 m RNA表达无明显差别。(3)NFTAc1 m RNA在Th9细胞分化过程中的表达明显增强,呈时间依赖性上升。过表达mi RNA-143/145可以明显抑制NFTAc1 m RNA及蛋白水平,而抑制mi RNA-143/145表达出现相反的结果;此外,mi R-143和mi R-145模拟物或抑制剂共转染增强了它们对NFATc1表达的影响。用NFTAc1特异性si RNA转染CD4T细胞后,NFTAc1 m RNA及蛋白水平明显降低,此时,Th9细胞比例、IL-9 m RNA及IL-9细胞因子表达均明显降低(P143/145模拟物在一定程度上降低了pc DNA3.1-NFATc1过表达质粒上调NFTAc1蛋白的作用。共转染pc DNA3.1-NFATc1过表达质粒和mi R-143/145模拟物逆转了mi R-143/145抑制Th9细胞分化和IL-9分泌的能力。NFATc1上调也足以减弱mi R-

关键词： mir-143/145 Th9细胞 IL-9 NFATc1 细胞分化

mir-143/145侧翼序列遗传变异与云南汉族人群宫颈癌的关联研究

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miR-143/145侧翼序列遗传变异与云南汉族人群宫颈癌的关联研究

作者：姜霁珂云南中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨mir-143/145侧翼序列遗传变异对云南汉族人群宫颈癌易感性的影响。方法:收集242名宫颈癌患者及249名健康人群作为对照,运用PCR-RFLP和Sna Pshot法研究mir-143/145侧翼序列rs17796757、rs353292、rs353293、rs4705342、rs1723799位点在病例组和对照组中的频率分布。通过实时荧光定量PCR检测mir-143/145在宫颈癌中的表达,运用双荧光素酶报告基因检测系统,分析mir-143/145侧翼序列rs353292位点对转录活性的影响。通过就诊时填写的中医体质分类与判定表,判断体质分型,分析宫颈癌患者中医体质分布规律。结果:rs353292 C/T多态位点CT基因型在宫颈癌组中的频率22.3%,高于其在对照组中的频率15.3%,差异具有统计学意义(CT vs.CC:校正OR=1.63,95%CI,1.03-2.58,P=0.028;CC vs.CT/TT:校正OR=1.65,95%CI,1.07-2.56,P=0.024)。rs4705342 C/T多态位点CC基因型在宫颈癌组中的频率33.2%,高于其在对照组中的频率15.7%,差异具有统计学意义(CC vs.TT:校正OR=2.88,95%CI,1.78-4.66,P0.05)。候选位点频率分布与宫颈癌临床特征有一定相关性,mir-143/145在宫颈癌组织中呈低表达,rs1723799位点TC基因型在mir-143/145中表达量更高(P=0.011、P=0.014),rs4705342位点CC基因型在mir-145的表达量更低(P=0.011)。在He La、HCT116、A549细胞系中,rs353292 C/T多态位点T等位基因荧光素酶活性低于C等位基因(P=0.004、0.019、0.04)。宫颈癌患者中湿热质、阳虚质、痰湿质为排名前三位的体质,年龄低于50岁的患者常见体质为湿热质,年龄高于50岁的患者常见体质为痰湿质和湿热质。结论:mir-143/145侧翼序列rs353292、rs4705342、rs1723799多态位点可能与宫颈癌遗传易感性相关。

关键词：宫颈癌 mir-143/145 遗传变异单核苷酸多态性

Disregulation of mir-143/145 and mir-363 in head and neck cancers

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Disregulation of miR-143/145 and miR-363 in head and neck ca...

微小RNA-143/145基因多态性与冠心病危险因素及严重程度的相关性

第十二次全国医学遗传学学术会议

作者： Qiang Sun ianjun Zhang Qin Xu WanTao Chen Ninth People’s Hospital Shanghai Jiao Tong University School of Medicine Shanghai Research Institute of Stomatology/Shanghai Key Laboratory of Stomatology

Objective Dysregulated microRNAs(mirNAs) play an important role in many malignant tumors.However,elucidating the roles of mirNAs in cancer biology,especially in head and neck epithelial cancers,remains an ongoing process,such as carcinogenesis,invasion and metastasis.Methods and materials mirNA array screening and real-time reverse transcription-PCR were performed to identify the differential expression of mirNAs involved in different phenotype cell lines and cancer tissues.mirNAs expressions were validated in mentioned samples by real-time PCR.To assess the biological significance of mirNAs were over-expressed or down-expressed in cells followed by in vitro and in vivo functional assays. mirNAs direct targets were identified through the TargetScan database and dual luciferase reporter assays and confirmed.Results Our results showed that both mir-143 and mir-145 can negatively modulate expression of their target gene,MDM2.The mir-143/145 is post-transcriptionally activated by up-regulated p53,thereby generating a short mirNAs-MDM2-p53 feedback loop.Re-expression of these mirNAs suppresses cellular growth and triggers the apoptosis of epithelial cancer,in vitro and in vivo,by enhancing p53 activity via MDM2 turnover.The study also confirmed that mir-363 is down-regulated in HNSCC tissues with lymph node metastasis and cell lines with highly invasive capacity.We found that podoplanin(PDPN) is up-regulated in the metastatic HNSCC tissues,and ectopic over-expression of mir-363 suppressed the metastatic behaviour of HNSCC cells by directly targeting PDPN. Conclusions These findings suggest that some mirNAs,such as niR-143/145 and mir-363 are expressed abnormally.Re-expression of mir-143 and mir-145 may be a reasonable strategy for treatment of epithelial cancers.mir-363 can provide insights into the therapeutic value in reducing cancer metastasis.

关键词： microRNA mir-143/145 mir-363 head and neck cancer

来源： cnki会议评论

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中国医学科学院学报 2018年第4期40卷 510-518页

作者：陈芸罗至曾韡赖飞呀陈秋宏吕湛宋永砚川北医学院附属医院心内科四川南充637000 川北医学院临床医学系四川南充637000 川北医学院基础医学院生化教研室四川南充637000

目的探讨中国汉族人群mir-143/145基因rs353292和rs4705343多态性与冠心病(CHD)患者心血管病危险因素及严重程度的相关性。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法对380例CHD患者和163例对照者进行rs353292和rs4705343多态性分... 详细信息

目的探讨中国汉族人群mir-143/145基因rs353292和rs4705343多态性与冠心病(CHD)患者心血管病危险因素及严重程度的相关性。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法对380例CHD患者和163例对照者进行rs353292和rs4705343多态性分型。在对照组及CHD组中,比较不同基因型者之间生理生化指标的差异。在CHD组中,比较不同基因型者之间心肌梗死(MI)的发生率。结果在对照组中,rs353292位点TT基因型者血清三酰甘油(F=3.00,P=0.05)和血糖(F=9.91,Pmir-143/145调控hs-CRP基因表达,从而影响MI的发生和发展。rs4705343多态性与冠心病风险及严重程度不相关。

关键词： mir-143/145 rs353292 rs4705343 冠心病超敏C反应蛋白

MicroRNA-143/145对大鼠子宫内膜异位症的治疗作用

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温州医科大学学报 2017年第6期47卷 397-400页

作者：梁宗文赵渊项军淼张安琪余丹扬段萍温州医科大学附属第二医院育英儿童医院妇产科浙江温州325027

目的:研究microRNA(mirNA)-143/145对子宫内膜异位症(内异症)SD大鼠模型异位囊肿的治疗作用。方法:采用自体移植的方法建立大鼠内异症模型,并在病理组织学水平进行鉴定,选取18只建模成功的SD大鼠随机分为空白组(n=6)、阴性对照组(n=6)、... 详细信息

目的:研究microRNA(mirNA)-143/145对子宫内膜异位症(内异症)SD大鼠模型异位囊肿的治疗作用。方法:采用自体移植的方法建立大鼠内异症模型,并在病理组织学水平进行鉴定,选取18只建模成功的SD大鼠随机分为空白组(n=6)、阴性对照组(n=6)、mir-143/145类似物组(n=6),分别予以相应的处理,最后剖腹探查,用游标卡尺测量SD大鼠内异症模型异位囊肿的大小,比较3组间异位囊肿体积的差异,并比较3组间组织病理学的变化。结果:SD大鼠内异症建模成功率为84%;异位囊肿体积差异:治疗后空白组囊肿体积大小为(16.38±4.19)mm^3,阴性对照组为(21.14±0.51)mm^3,mir-143/145类似物组为(5.91±1.91)mm^3,空白组与阴性对照组比差异无统计学意义(P>0.05),而mir-143/145类似物组与阴性对照组比囊肿体积明显减小,差异有统计学意义(Pmir-143/145类似物组相比,腺体数量减少,腺体萎缩,间质细胞排列杂乱。结论:mir-143/145可以使内异症的异位病灶萎缩而达到治疗效果。

关键词：子宫内膜异位症 mir-143/145 大鼠治疗