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mir-139-5p靶向转化生长因子-β1抑制肝癌细胞侵袭、转移的机制

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当代医药论丛 2022年第12期20卷 1-3页

作者：林木平黄振华深圳市宝安区中心医院广东深圳518102

目的:探究mir-139-5p靶向转化生长因子-β1(TGF-β1)抑制肝癌细胞侵袭、转移的机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-pCR)法检测30例患者肝癌组织和癌旁组织中Rmir-139-5p的表达情况,采用免疫组化技术检测其肝癌组织和癌旁组... 详细信息

目的:探究mir-139-5p靶向转化生长因子-β1(TGF-β1)抑制肝癌细胞侵袭、转移的机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-pCR)法检测30例患者肝癌组织和癌旁组织中Rmir-139-5p的表达情况,采用免疫组化技术检测其肝癌组织和癌旁组织中TGF-β1的表达情况,并对检测的结果进行分析,总结mir-139-5p靶向TGF-β1抑制肝癌细胞侵袭、转移的机制。结果:30例患者肝癌组织中TGF-β1的阳性表达率为83.33%,其癌旁组织中TGF-β1的阳性表达率为13.33%,二者相比差异有统计学意义(p5)。mir-139-5p在癌旁组织中呈高表达,在肝癌组织中呈低表达,差异有统计学意义(p5)。TGF-β1在肝癌组织中呈高表达,在癌旁组织中呈低表达,差异有统计学意义(p5)。结论:mir-139-5p可能通过下调TGF-β1的表达来抑制肝癌细胞的侵袭、转移。

关键词： mir-139-5p 转化生长因子-β1 肝癌癌细胞侵袭转移

mir-139-5p对子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭的调控作用

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基因组学与应用生物学 2021年

作者：梅莉张宁芝闻柳刘勇阜阳人民医院产科阜阳人民医院产前诊断中心阜阳师范大学生物与食品工程学院

胎盘滋养细胞的生物学功能在子痫前期(pE)及其并发症中至关重要。本研究旨在揭示mi R-139-5p对子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭的调控作用。采用RT-pCR方法检测了pE患者和健康产妇的胎盘组织中转化生长因子β诱导因子1 (TGIF1)和mir-139... 详细信息

胎盘滋养细胞的生物学功能在子痫前期(pE)及其并发症中至关重要。本研究旨在揭示mi R-139-5p对子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭的调控作用。采用RT-pCR方法检测了pE患者和健康产妇的胎盘组织中转化生长因子β诱导因子1 (TGIF1)和mir-139-5p的表达。通过双重荧光素酶报告基因检测确定TGIF1和mir-139-5p之间的关系。通过CCK-8分析和Transwell分析评估人绒毛膜滋养层细胞系HTR8/SVneo细胞的增殖和侵袭。通过Western blot检测HTR8/SVneo细胞中基质金属蛋白酶-2(MMp-2)、MMp-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMp-1)的表达。结果显示，与健康对照组相比，pE患者胎盘中TGIF1的mRNA水平显著升高，而mir-139-5p的水平显著降低。当TGIF1-WT与mir-139-5p mimic共转染时，荧光素酶活性显著下降。mir-139-5p的过表达促进了细胞增殖和侵袭。mir-139-5p mimic的转染显著上调了细胞中MMp-2和MMp-9的蛋白表达，但下调了TIMp-1的蛋白表达。TGIF1的过表达逆转了mir-139-5p对细胞增殖和侵袭的促进作用。本研究证明pE患者胎盘中mir-139-5p的表达下调，而TGIF1的表达上调。此外，mir-139-5p直接靶向TGIF1来促进滋养层细胞的增殖和侵袭。

关键词：子痫前期滋养层细胞 mir-139-5p TGIF1 增殖侵袭

术前血清mir-148a-3p及mir-139-5p表达水平预测前列腺癌患者术后复发转移的价值

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重庆医科大学学报 2019年第12期44卷 1612-1616页

作者：郑奋薇蔡桂程梁美莲陈曼君陈冬花海口市第三人民医院泌尿外科

目的:探讨血清mir-148a-3p及mir-139-5p水平对前列腺癌(prostate cancer,pCa)患者术后复发转移的价值。方法:选取2015年1月1日至2017年12月31日海口市第三人民医院收治的pCa患者142例,根据其术后是否发生复发转移分为未复发转移组(n=84... 详细信息

目的:探讨血清mir-148a-3p及mir-139-5p水平对前列腺癌(prostate cancer,pCa)患者术后复发转移的价值。方法:选取2015年1月1日至2017年12月31日海口市第三人民医院收治的pCa患者142例,根据其术后是否发生复发转移分为未复发转移组(n=84)和复发转移组(n=58)。检测两组术前mir-148a-3p、mir-139-5p及前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,pSA)表达水平,分析其与临床病理特征的关系。应用ROC曲线分析mir-148a-3p、mir-139-5p及pSA预测pCa术后复发转移的价值。pearson相关分析mir-148a-3p、mir-139-5p与pSA相关性。结果:复发转移组血清mir-148a-3p、mir-139-5p及pSA水平分别为(4.80±0.75)、(7.64±2.38)和(63.75±14.92)ng/mL,均高于未复发转移组的(2.15±0.36)、(3.50±0.62)和(18.72±8.60)ng/mL,差异有统计学意义(t值分别为10.648、14.715和9.804,均p=0.000)。复发转移患者血清mir-148a-3p及mir-139-5p表达水平与肿瘤分期(t=5.117,p=0.024;t=5.304,p=0.018)、Gleason评分(t=5.512,p=0.006;t=6.218,p=0.000)及pSA水平(t=10.208,p=0.000;t=13.620,p=0.000)有关联。ROC曲线分析显示,血清mir-148a-3p、mir-139-5p及pSA预测pCa术后复发转移的最佳截值分别为3.40、5.38和36.80 ng/mL,三项联合预测pCa术后复发转移的AUC(0.914,95%CI=0.858~0.972)最大,其敏感度和特异度为92.0%和83.6%。相关分析显示,复发转移患者血清mir-148a-3p、mir-139-5p水平与pSA均呈正相关(r=0.774,ppmir-148a-3p及mir-139-5p表达上调与pCa术后复发转移有关,联合pSA检测对预测pCa术后复发转移具有较高的价值。

关键词：前列腺癌 mir-148a-3p mir-139-5p 复发转移

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circ_0000212靶向mir-139-5p对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及紫杉醇敏感性的影响

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世界华人消化杂志 2021年第22期29卷 1276-1285页

作者：张惠忠张晓东黄建新金华广福肿瘤医院肝胆胰胃外科浙江省金华市321111

背景circ_0000212是一种新发现的非编码RNA,其高表达可促进结直肠癌进展.然而,circ_0000212在肝癌中的表达模式和作用仍然未知.目的探讨circ_0000212靶向mir-139-5p对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及紫杉醇敏感性的影响.方法RT-qpC... 详细信息

背景circ_0000212是一种新发现的非编码RNA,其高表达可促进结直肠癌进展.然而,circ_0000212在肝癌中的表达模式和作用仍然未知.目的探讨circ_0000212靶向mir-139-5p对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及紫杉醇敏感性的影响.方法RT-qpCR检测circ_0000212和mir-139-5p在肝癌组织、癌旁组织中的表达.pearson相关分析确定肝癌组织中circ_0000212和mir-139-5p表达的关系.双荧光素酶报告实验验证circ_0000212和mir-139-5p靶向关系.将肝癌细胞HCC9204分为对照组、干扰circ_0000212组、干扰circ_0000212+mir-139-5p抑制物组、紫杉醇组、紫杉醇+干扰circ_0000212组、紫杉醇+干扰circ_0000212+mir-139-5p抑制物组.CCK-8法检测HCC9204细胞抑制率;集落形成实验检测HCC9204细胞集落形成数;流式细胞术检测HCC9204细胞凋亡率;Transwell实验检测HCC9204细胞迁移和侵袭数.结果与癌旁组织比较,肝癌组织中circ_0000212表达水平显著升高(p5),mir-139-5p表达水平显著降低(p5).肝癌组织中circ_0000212和mir-139-5p表达呈负相关关系.circ_0000212和mir-139-5p存在直接相互作用.与对照组比较,紫杉醇组HCC9204细胞circ_0000212表达水平显著降低(p5),mir-139-5p表达水平显著升高(p5).与对照组比较,干扰circ_0000212组、紫杉醇组HCC9204细胞克隆形成数、迁移数、侵袭数显著降低(p5),抑制率、凋亡率显著升高(p5).与干扰circ_0000212组比较,干扰circ_0000212+mir-139-5p抑制物组HCC9204细胞克隆形成数、迁移数、侵袭数显著升高(p5),抑制率、凋亡率显著降低(p5).与紫杉醇组比较,紫杉醇+干扰circ_0000212组HCC9204细胞克隆形成数、迁移数、侵袭数显著降低(p5),抑制率、凋亡率显著升高(p5).与紫杉醇+干扰circ_0000212组比较,紫杉醇+干扰circ_0000212+mir-139-5p抑制物组HCC9204细胞克隆形成数、迁移数、侵袭数显著升高(p5),抑制率、凋亡率显著降低(p5).结论干扰circ_0000212通过靶向上调mir-139-5p可抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,诱导细胞凋亡,并提高其对紫杉醇的敏感性.

关键词： circ_0000212 mir-139-5p 肝癌细胞增殖凋亡迁移侵袭紫杉醇敏感性

mir-139-5p在多形性胶质母细胞瘤中的表达与靶基因验证

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中国老年学杂志 2019年第5期39卷 1182-1185页

作者：杨晋生方军超张峰河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院神经外科河南洛阳471003

目的探索mir-139-5p在多形性胶质母细胞瘤(GBM)患者中的表达水平,预测和验证mir-139-5p的靶基因。方法利用实时定量pCR检测GBM患者和对照组脑组织中mir-139-5p的相对表达水平。选择star Base在线工具预测mir-139-5p的靶基因,通过Target ... 详细信息

目的探索mir-139-5p在多形性胶质母细胞瘤(GBM)患者中的表达水平,预测和验证mir-139-5p的靶基因。方法利用实时定量pCR检测GBM患者和对照组脑组织中mir-139-5p的相对表达水平。选择star Base在线工具预测mir-139-5p的靶基因,通过Target Scan数据库分析mir-139-5p与靶基因的结合位点,并采用萤光素酶报告实验验证。检索mirpathDB数据库分析mir-139-5p靶基因显著富集的pathways,运用mirTarget Link工具构建mir-139-5p与其靶基因之间的交互网络。结果相对于对照组,mir-139-5p在GBM患者脑组织中的表达水平显著下调。star Base预测工具取交集后得到8个靶基因,其中真核翻译起始因子4γ2(EIF4G2)为mir-139-5p靶基因之一。萤光素酶报告实验表明EIF4G2基因3’UTR区中含有明确的mir-139-5p结合位点。pathway富集分析发现靶基因显著富集于胰岛素样生长因子(IGF)-1信号通路、神经营养因子通路、趋化因子通路、T细胞受体通路、Ras信号通路和转化生长因子(TGF)-β信号通路等。结论 mir-139-5p在GBM患者中低表达,可能通过抑制靶基因EIF4G2表达参与肿瘤发生相关的过程。

关键词：多形性胶质母细胞瘤 mir-139-5p 靶基因生物信息学

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紫花牡荆素对MHCC97-H源性肝癌干样细胞性质和mir-139-5p表达的影响

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紫花牡荆素对MHCC97-H源性肝癌干样细胞性质和miR-139-5p表达的影...

作者：周玲利湖南师范大学

学位级别：硕士

目的:阐明紫花牡荆素(casticin,CAS)通过调控mir-139-5p的表达,从而抑制MHCC97-H源性肝癌干样细胞(liver cancer stem-like cells,LCSLCs)干性的机制。方法:1.球形成培养法从体外培养MHCC97-H细胞系获得球形成细胞用作MHCC97-H源性LCSLCs模型。分别采用流式细胞术、球形成试验、软琼脂集落形成试验、创口愈合实验、transwell小室侵袭实验、q RT-pCR和蛋白印迹分析MHCC97-H细胞和球形成细胞CD24+、CD44+、CD90+细胞百分率、自我更新能力、迁移和侵袭能力以及干细胞表面标志物CD24、CD44、CD90和干性相关因子ABCG2、Nanog、Ep CAM m RNA和蛋白表达水平。q RT-pCR检测L-02细胞、MHCC97-H细胞与LCSLCs mir-139-5p表达水平。2.分别利用mir-139-5p mimic(50 n M)或inhibitor(100 n M)转染LCSLCs操纵mir-139-5p表达水平,测定mir-139-5p对LCSLCs干性的作用。3.以DMSO为阴性(溶媒)对照、Apatinib(5.0μM)为阳性对照,用不同浓度的CAS(1.0、2.5、5.0μM)处理LCSLCs 24h以分析CAS对LCSLCs干性的影响。4.mir-139-5p mimic(50 n M)联合CAS(5.0μM)处理LCSLCs,检测两者合用对LCSLCs干性的影响。结果:1.与MHCC97-H细胞相比,MHCC97-H细胞系球形成细胞CD24+、CD44+、CD90+阳性率更高,球细胞体积更大且数量增多将近5倍,软琼脂集落数高5倍,迁移率高4倍,侵袭率高6.7倍,干细胞表面标志物CD24、CD44、CD90和干性相关因子ABCG2、Nanog、Ep CAM m RNA和蛋白表达水平更高,可以用作MHCC97-H源性LCSLCs模型;LCSLCs中mir-139-5p的表达水平显著低于其亲本细胞3.2倍和L-02细胞7倍(p5)。2.mir-139-5p mimic转染使LCSLCs mir-139-5p的表达水平增加25倍,降低球形成率3.8倍及软琼脂集落形成率4.8倍,抑制迁移率3.3倍及侵袭率5.8倍,显著下调干细胞表面标志物CD24、CD44、CD90和干性相关因子ABCG2、Nanog、Ep CAM m RNA和蛋白表达水平(p5)。3.mir-139-5p inhibitor转染使LCSLCs mir-139-5p的表达水平降低2倍,增加球形成率1.4倍及软琼脂集落形成率1.3倍,提高迁移率2.5倍及侵袭率2倍,上调干细胞表面标志物CD24、CD44、CD90和干性相关因子ABCG2、Nanog、Ep CAM m RNA和蛋白表达水平(p5)。4.CAS和Apatinib以剂量依赖性方式优先抑制来自MHCC97-H细胞系的LCSLCs增殖;CAS以剂量依赖性方式降低LCSLCs球形成率和软琼脂集落形成率,抑制迁移率和侵袭率,下调干细胞表面标志物CD24、CD44、CD90和干性相关因子ABCG2、Nanog、Ep CAM m RNA和蛋白表达水平(p5)。5.CAS以剂量依赖性方式上调LCSLCs mir-139-5p的表达水平;CAS联合mir-139-5p mimic转染能进一步降低LCSLCs球形成率和软琼脂集落形成率,抑制迁移率和侵袭率,下调干细胞表面标志物CD24、CD44、CD90和干性相关因子ABCG2、Nanog、Ep CAM m RNA和蛋白表达水平(p5)。结论:CAS通过上调mir-139-5p表达从而抑制MHCC97-H源性LCSLCs干性特征。

关键词：肝癌干样细胞干性特征肝细胞癌紫花牡荆素 mir-139-5p

mir139-5p与结肠癌细胞生物学功能的关联研究

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miR139-5p与结肠癌细胞生物学功能的关联研究

作者：朱娜娜河北医科大学

学位级别：硕士

目的：结肠癌(Colon Cancer)是常见的消化道恶性肿瘤之一,它的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,在西方国家,结肠癌的发病率位于世界第二位,而在我国,它的发生率和死亡率则位于第四位,目前结肠癌在其早期诊断、早期治疗方面取得了一定的成... 详细信息

目的：结肠癌(Colon Cancer)是常见的消化道恶性肿瘤之一,它的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,在西方国家,结肠癌的发病率位于世界第二位,而在我国,它的发生率和死亡率则位于第四位,目前结肠癌在其早期诊断、早期治疗方面取得了一定的成效,但其预后及5年生存率仍很低。本研究通过观察mir-139-5p的表达对结肠癌细胞增殖、凋亡、细胞周期、侵袭和迁移的影响,初步探讨mir-139-5p在结肠癌发展过程中的作用,为结肠癌的早期筛查、基因的靶向治疗以及预后提供理论依据。方法：通过RT-pCR (Real-time polymerase Chain Reaction)分析了95对结肠癌和癌旁正常组织以及所有的7种人类结肠癌细胞中mir-139-5p的表达水平;采用瞬时转染的方法,将pre-mir-139-5p和pre-mir-Ctrl分别转染到结肠癌细胞株中,RT-pCR (Real-time polymerase Chain Reaction)检测其转染效率;MTT法绘制出细胞生长曲线,Transwell法检测细胞的侵袭和迁移能力,流式细胞仪对转染的结肠癌细胞株进行凋亡和细胞周期分析;最后通过Western Blot和pCR的方法验证了与细胞侵袭、迁移及细胞凋亡相关基因的表达情况。采用T-T test方法对分别转染niR-139-5p和rniR-Ctrl的结肠癌细胞的增殖、侵袭、转移、凋亡、及细胞周期方面进行检验和分析。结果：1.通过实时定量pCR分析得出,与癌旁正常组织相比,mir-139-5p在结肠癌组织中表达是明显降低的(pmir-139-5p的表达下调与结肠癌的远处转移存在着明显的关联(p=0.031)。同时与正常结肠细胞相比,在人类的7种结肠癌细胞中mir-139-5p的表达沉默或者减少。这些揭示了mir-139-5p在结肠癌中可能是一个潜在的肿瘤抑制因子。 2.细胞生物学功能方面,通过细胞活力测定(MTT)和集落形成实验,mir-139-5p在结肠癌细胞株(DLD1, HCT116, SW1116)中的表达可以明显抑制结肠癌细胞的生长(pp=0.0002,p=0.0022)和集落的形成(ppp=0.0002,p=0.0022)和集落的形成(pmir-139-5p在DLD1和SW1116中的表达可以抑制细胞的侵袭(p=0.0006,p=0.013)和迁移能力(pp=0.0088), MMp1(DLD1,p=0.0088), MMp7(DLD1p=0.0035, SW1116p=0.0031)和MMp9的表达。 4. mir-139-5p能够诱导结肠癌细胞DLD1和HCT116的凋亡(ppase-8和pARp。同时,mir-139-5p能够引起结肠癌细胞周期G0/G1期阻滞(DLD1,HCT116),通过它可以促进G0/G1期重要的调控因子p21和p27的表达而得到证实(DLD1p=0.0082, p=0.0036, HCT116p=0.025)。结论：1.mir-139-5p在结肠癌组织和结肠癌细胞中的表达明显下调。 2. mir-139-5p通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡等过程发挥类似抑癌作用;它通过调节细胞周期重要调控因子p21和p27的水平阻滞细胞周期;通过Caspase途径诱导细胞凋亡;通过调控基质金属蛋白酶,影响细胞迁移和侵袭。 3. mir-139-5p是一种新发现的在结肠癌的发生和发展中发挥着重要作用的MicroRNA,它可以抑制结肠癌细胞的增殖,细胞侵袭与转移,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。因此,mir-139-5p在结肠癌的发生和发展中可能发挥着抑癌的作用。

关键词：结肠癌微小RNA mir-139-5p 抑制细胞生物学功能

包载mir-139-5p的EpCAM适配体功能化阳离子脂质体纳米颗粒的制备及对结直肠癌靶向治疗作用的研究

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包载miR-139-5p的EpCAM适配体功能化阳离子脂质体纳米颗粒的制备...

作者：赵玉宇华东理工大学

学位级别：硕士

结直肠癌（CRC）是全球最常见的癌症之一,每年约有70万人死于CRC。约有50%的CRC患者在诊断时或治疗后复发时出现局部或远处转移。具有远处转移的CRC患者五年生存率小于10%。目前对于CRC的治疗主要是外科手术、化疗、放疗和靶向治疗。Mic... 详细信息

结直肠癌（CRC）是全球最常见的癌症之一,每年约有70万人死于CRC。约有50%的CRC患者在诊断时或治疗后复发时出现局部或远处转移。具有远处转移的CRC患者五年生存率小于10%。目前对于CRC的治疗主要是外科手术、化疗、放疗和靶向治疗。MicroRNA（mirNA）在多种生物学过程中起着至关重要的作用。mirNA作为治疗剂面临的主要挑战是它们在血浆中的快速降解、短半衰期和脱靶效应。其中,mir-139-5p被认为是在CRC中过表达的抑癌基因,有助于减缓癌症的进展。在此课题中,我们开发了一种基于阳离子脂质体的纳米粒子药物递送系统,该药物递送系统负载了 mir-139-5p（mir-139-5p-HSpC/DOTAp/Chol/DSpE-pEG2000-COOH纳米粒子,MNps）,并用上皮细胞粘附分子（EpCAM）适配体（Apt）进行了表面修饰（mir-139-5p-EpCAM Apt-HSpC/DOTAp/Chol/DSpE-pEG2000-COOH纳米粒子,MANps）,用于CRC的靶向治疗。MANps的尺寸为150.3±8.8 nm,表面电势为37.8±3.2 mV,具有圆形外观和低溶血性。MANps在体外明显抑制了 HCT116和HCT8细胞的增殖、迁移和侵袭,且对EpCAM（+）细胞具有靶向能力。NOTCH1是mir-139-5p的靶基因之一,是一种CRC促癌基因,我们的结果表明,MANps在HCT116和HCT8细胞中显著下调了 NOTCH1的mRNA水平和蛋白水平。此外,ANps在体内具有显著的EpCAM（+）肿瘤靶向性,MANps在裸鼠皮下肿瘤模型中和腹膜肿瘤模型中都明显抑制了 CRC的发展,且对裸鼠主要脏器无毒副作用。我们的结果证明MANps是能够将治疗性mir-139-5p传递至CRC肿瘤部位的有效药物递送系统。

关键词：脂质体纳米粒子 CRC 靶向治疗 mir-139-5p

mir-139-5p在乳腺上皮细胞MCF-10A中靶基因的鉴定及功能验证

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miR-139-5p在乳腺上皮细胞MCF-10A中靶基因的鉴定及功能验证

作者：金连丰东北农业大学

学位级别：硕士

每个mirNA都具有多个靶基因,因此对mirNA下游作用的靶基因进行寻找及功能研究仍是临床及科研的重要方向。而哺乳动物乳腺组织是动物体中少数的随着年龄、发情周期和繁殖状态而发生相应周期性变化器官之一。因此对人乳腺中mir-139-5p靶... 详细信息

每个mirNA都具有多个靶基因,因此对mirNA下游作用的靶基因进行寻找及功能研究仍是临床及科研的重要方向。而哺乳动物乳腺组织是动物体中少数的随着年龄、发情周期和繁殖状态而发生相应周期性变化器官之一。因此对人乳腺中mir-139-5p靶基因的鉴定及验证至关重要。研究发现mir-139与其靶基因共同作用可影响众多生物学功能,如蛋白定位、细胞周期调控以及抑制肿瘤侵袭等。众所周知,细胞周期的有序进行是生物体生长、发育及繁殖的基础,而细胞周期加快或阻滞会影响细胞增殖及迁移能力,进而至使肿瘤、癌症以及基因突变的发生。为充分研究mir-139-5p的作用和功能,其靶基因的挖掘和鉴定及初步的功能验证成为急需解决的问题。本研究将RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA Binding protein Immunoprecipitation,RIp)与新一代测序技术相结合,以MCF-10A细胞系为研究对象,鉴定与验证mir-139-5p在乳腺上皮细胞中的靶基因。先运用针对目标蛋白Ago2的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化,对结合在复合物上的RNA进行测序分析,找出成对样品中的差异峰,进而确认mir-139-5p在MCF-10A中的靶基因,并对靶基因进行KEGG和GO分析;最后运用q pCR等技术对mir-139-5p的靶基因及mir-139-5p部分功能进行验证。这些结果将为mir-139-5p在人乳腺中的功能研究提供新的参考。研究结果如下:(1)RIp-seq测序数据处理及生物信息学分析:RIp-seq测序后我们将由Negative Control组与mir-139-5p mimic组获得的peak进行比较,得到差异基因484个,这些差异基因就是mir-139-5p在MCF-10A细胞中的靶基因,这些靶基因可能是乳腺发育或乳腺进化过程中重要的基因。利用KEGG对靶基因进行通路分析,我们得到204种pathway,其中显著性通路有21条(p5),涉及到120个靶基因;在GO分析中发现,显著性GO条目448个(p5),主要涉及蛋白定位(protein localization)、细胞周期调控(regulation of cell cycle)、细胞器组成(organelle part)、结合RNA(RNA binding)和结合核酸(nucleic acid binding)等;(2)mir-139-5p靶基因的验证选取的18个靶基因在mRNA水平被mir-139-5p显著下调,表明其表达受mir-139-5p调节。选择细胞周期信号通路对mir-139-5p的靶基因进行功能验证,表明mir-139-5p能显著抑制G1/S细胞周期转变,进而抑制细胞增殖,这种调节是信号通路中多个靶基因共同作用的结果。

关键词： mir-139-5p RIp-seq技术靶基因细胞增殖