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LncRNA SNHG12调控mir-138-5p/hif-1α轴改善缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤的研究

中国免疫学杂志 2023年第12期39卷 2494-2500页

作者：魏宗强王琳茹胡文贤张娟子黄贤明李林李强青岛大学附属青岛市海慈医院血管外科中心青岛266033

目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)调控mir-138-5p/低氧诱导因子-1α(hif-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRN... 详细信息

目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)调控mir-138-5p/低氧诱导因子-1α(hif-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRNA SNHG12过表达组、H/R+mir-138-5p mimics组、H/R+共转染组、H/R+共转染阴性对照组,各转染组分别进行转染处理,除对照组外,其余各组给予5 h缺氧,再进行复氧1 h处理,诱导细胞模型,然后通过CCK-8实验检测各组细胞活力情况;通过流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况,比较各组细胞凋亡率;通过试剂盒测量各组细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)及炎症因子IL-6、IL-17、IL-18水平;通过实时荧光定量pCR(qRT-pCR)实验测定各组细胞mir-138-5p及hif-1αmRNA表达;通过免疫印迹实验检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及hif-1α蛋白表达。结果:与对照组相比,H/R模型组细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞hif-1αmRNA和蛋白水平、细胞caspase-9、Bax及hif-1α蛋白水平升高(p5),细胞活力、mir-138-5p水平降低(p5)。与H/R模型组、H/R+共转染组相比,H/R+LncRNA SNHG12过表达组细胞活力、细胞hif-1αmRNA及蛋白水平升高(p5),细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞caspase-9与Bax蛋白水平、mir-138-5p水平降低(p5);H/R+mir-138-5p mimics组细胞活力、细胞hif-1αmRNA及蛋白水平降低(p5),细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞cas⁃pase-9与Bax蛋白水平升高(p5)。与H/R模型组相比,H/R+共转染阴性对照组、H/R+共转染组细胞各指标水平差异无统计学意义(p>0.05)。结论:LncRNA SNHG12可通过下调mir-138-5p表达,上调hif-1α表达,抑制H/R诱导的HUVECs炎症与氧化应激,减轻细胞损伤及凋亡。

关键词： LncRNA SNHG12 mir-138-5p/hif-1α 缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤

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