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环状RNA-102958通过mir-1205/SH2D3A轴促进卵巢癌进展的研究

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中国优生与遗传杂志 2022年第9期30卷 1555-1559页

作者：王冠张惠晶王爽段丽邢焱玲王莉莉李佩玲黑龙江省医院黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院黑龙江哈尔滨150000

目的卵巢癌(OC)为全世界女性发病率最高的癌症之一。环状RNA(circRNA)稳定性高,保守性强,可作为微小RNA(mirNA)分子的“海绵”,控制mirNA下游的基因表达与突变。本研究旨在探索circ-102958在卵巢癌中的表达和对mir-1205及其下游基因SH2... 详细信息

目的卵巢癌(OC)为全世界女性发病率最高的癌症之一。环状RNA(circRNA)稳定性高,保守性强,可作为微小RNA(mirNA)分子的“海绵”,控制mirNA下游的基因表达与突变。本研究旨在探索circ-102958在卵巢癌中的表达和对mir-1205及其下游基因SH2D3A的调控关系,为卵巢癌早期诊断及治疗的临床转化提供理论基础,提高卵巢癌患者生存率。方法 CCK-8实验分组观察circ-102958/mir-1205/SH2D3A轴对卵巢癌细胞增殖能力的影响,Transwell实验分组观察circ-102958/mir-1205/SH2D3A轴对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响。结果 circ-102958表达水平和卵巢癌分期显著相关。circ-102958能够通过调节mir-1205促进SH2D3A的表达,促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。结论 circ-102958与患者恶性表型和预后有关,是潜在的癌基因。circ-102958能够通过调控mir-1205促进SH2D3A的表达,从而促进卵巢癌的进展。

关键词：卵巢癌环状RNA circ-102958 mir-1205 SH2D3A

乳腺癌circ0008234和mir-1205表达与CT征象的相关性分析

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中华内分泌外科杂志 2020年第2期14卷 100-105页

作者：赵武华张雪红徐程华樊琦玮应华保郑海澜浙江台州市第一人民医院放射科 318000

目的探讨乳腺癌circ0008234和mir-1205表达与多层螺旋CT显像的肿瘤学特点。方法选取2018年1月至2018年12月浙江台州市第一人民医院的40例乳腺癌患者作为观察组,将同期收治的40例非乳腺癌患者作为对照组,荧光定量PCR法检测所有患者circ00... 详细信息

目的探讨乳腺癌circ0008234和mir-1205表达与多层螺旋CT显像的肿瘤学特点。方法选取2018年1月至2018年12月浙江台州市第一人民医院的40例乳腺癌患者作为观察组,将同期收治的40例非乳腺癌患者作为对照组,荧光定量PCR法检测所有患者circ0008234和mir-1205表达水平。通过生物信息学方法预测circ0008234的下游靶mirNA,双荧光素酶报告分析法证实circ0008234和mir-1205的相互作用。采用多层螺旋CT对患者进行检查,观察肿块大小、形态、钙化区域、淋巴结转移及边缘,分析circ0008234和mir-1205表达水平与CT征象之间的相关性。结果观察组circ0008234表达水平高于对照组(2.23±0.86 vs 1.07±0.37)(P=0.00),但mir-1205表达水平则低于对照组(0.76±0.29 vs 1.04±0.29)(P=0.00)。观察组患者circ0008234和mir-1205表达水平在不同边缘形态及微小钙化点患者体内无显著差异,但肿块形态规则的患者circ0008234表达水平显著高于不规则患者(2.52±0.88 vs 1.91±0.74)(P=0.025),mir-1205表达水平则低于不规则患者(0.66±0.30 vs 0.86±0.25)(P=0.025)。观察组肿块直径≥2 cm患者circ0008234表达水平显著高于肿块直径mir-1205表达水平则低于肿块直径mir-1205表达水平低于无淋巴结转移患者(0.65±0.26 vs 0.85±0.30)(P=0.027)。荧光素酶检测证实mir-1205是circ0008234的直接靶点。circ0008234可负调控mir-1205的表达。结论乳腺癌CT显像与circ0008234和mir-1205表达间存在相关性,这可为乳腺癌恶变程度和预后的判断提供依据。

关键词：多层螺旋CT 乳腺癌 circ0008234 mir-1205

PVT1衍生的mir-1205通过靶向CDK3促进乳腺癌的侵袭转移

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PVT1衍生的miR-1205通过靶向CDK3促进乳腺癌的侵袭转移

作者：后武雷深圳大学

学位级别：硕士

乳腺癌是女性最为常见也是最为致命的癌症之一,其发病率高居各种肿瘤的首位,而死亡率也位居第二。三阴乳腺癌由于缺乏激素受体作为治疗靶标,预后往往更差。乳腺癌的早期发现、早期诊断,以及分子标志物和靶标的研究发现,成为攻克乳腺癌... 详细信息

乳腺癌是女性最为常见也是最为致命的癌症之一,其发病率高居各种肿瘤的首位,而死亡率也位居第二。三阴乳腺癌由于缺乏激素受体作为治疗靶标,预后往往更差。乳腺癌的早期发现、早期诊断,以及分子标志物和靶标的研究发现,成为攻克乳腺癌的关键。染色体8q24.21位点是人类乳腺癌癌中最常见的扩增区域,其中包含原癌基因c-MYC,lncRNA-PVT1和多种microRNA(mir),此microRNA基因簇包括mir-1204,-1205,-1206,-1207-3p,-1207-5p和-1208,它们的功能仍然不明确。利用荧光定量PCR,我们发现在包括三阴乳腺癌在内的乳腺癌恶性细胞系和发生转移的肿瘤原发组织中,mir-1205的表达水平明显上升。mir-1205模拟物(mimics)或mir-1205抑制剂(inhibitor)转染人乳腺癌细胞实验表明,mi R-1205促进三阴乳腺癌细胞等的侵袭转移。microRNA数据库分析结果提示,细胞周期蛋白依赖性激酶3(CDK3)是mir-1205靶基因,其结合位点通过荧光素酶报告基因实验证实位于CDK3的3’非翻译区(3’UTR)。进一步对乳腺癌临床样本进行分析,我们发现与mir-1205低表达的样本相比,mir-1205高表达的样本中CDK3蛋白表达明显降低。随后的挽救实验验证了mir-1205/CDK3轴促进乳腺癌的侵袭转移。对于调控机制进行研究,我们发现mir-1205/CDK3轴通过EMT信号通路促进细胞的侵袭转移,而EMT信号通路的关键转录因子Snail等的蛋白水平发生明显变化。然后的免疫共沉淀实验发现Snail与CDK3相互作用,CDK3促进Snail经泛素-蛋白酶体途径的降解。为研究mi R-1205的表达是否可能应用于乳腺癌的临床诊断,我们收集了13例正常人对照、21例乳腺癌病人血浆,成功建立了检测方法,初步结果显示乳腺癌特别是淋巴瘤转移的患者血浆中mir-1205的表达较高,但需扩大样本量进行分析。在体内实验研究中,我们构建了三阴乳腺癌细胞尾静脉转移小鼠模型,研究结果提示mir-1205敲低使三阴乳腺癌细胞的肺转移能力明显降低,但本实验观察时间不够,需再次重复。综上所述,我们发现mir-1205通过直接靶向作用抑制CDK3蛋白表达,从而削弱了CDK3介导的Snail经泛素-蛋白酶体的降解,促进三阴等乳腺癌细胞的侵袭转移。我们的研究结果有可能为乳腺癌的诊断和治疗提供潜在的生物标志物和靶点。

关键词：乳腺癌 mir-1205 CDK3 EMT Snail

circ_0081664通过靶向mir-1205调控非小细胞肺癌细胞的生长和转移

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临床肺科杂志 2021年第11期26卷 1713-1719页

作者：肖雪飞赵四林王伟符艳湖南中医药大学第一附属医院呼吸内科湖南长沙410000

目的探讨circ_0081664对非小细胞肺癌细胞生长和转移的影响及机制。方法选取2016年1月至2020年5月期间本院收治的30例非小细胞肺癌患者癌组织及相应的癌旁组织,RT-qPCR检测circ_0081664和mir-1205的表达水平;A549细胞分为si-NC组、si-ci... 详细信息

目的探讨circ_0081664对非小细胞肺癌细胞生长和转移的影响及机制。方法选取2016年1月至2020年5月期间本院收治的30例非小细胞肺癌患者癌组织及相应的癌旁组织,RT-qPCR检测circ_0081664和mir-1205的表达水平;A549细胞分为si-NC组、si-circ_0081664组、mir-NC组、mir-1205组、si-circ_0081664+anti-mir-NC组、si-circ_0081664+anti-mir-1205组。MTT检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell小室实验检测迁移和侵袭;Western blot法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ_0081664和mir-1205的靶向关系。结果肺癌组织中circ_0081664表达水平升高,mir-1205表达水平降低(Pmir-1205过表达载体后,A549细胞活性降低,Ki-67、Bcl2、MMP-2、MMP-9表达水平降低,P21、Bax表达水平升高,细胞凋亡率升高,迁移侵袭细胞数减少(Pmir-1205表达后,细胞活性升高,细胞凋亡率降低,迁移侵袭细胞数增加(Pmir-1205,抑制非小细胞肺癌细胞的生长和转移。

关键词： circ_0081664 mir-1205 非小细胞肺癌增殖凋亡

CircMYBL2 facilitates hepatocellular carcinoma progression by regulating E2F1 expression

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Oncology Research 2024年第6期32卷 1129-1139页

作者： JUNZHE YI BINBIN LI XIAOMIN YIN LINGRUI LIU CAILU SONG YING ZHAO MANBO CAI HAILIN TANG DONG CHEN NING LYU State Key Laboratory of Oncology in South China Guangdong Provincial Clinical Research Center for CancerSun Yat-sen University Cancer CenterGuangzhou510060China Department of Medical Oncology The Third People’s Hospital of YongzhouYongzhou425000China Department of Radiotherapy The First Affiliated HospitalHengyang Medical SchoolUniversity of South ChinaHengyang421001China Center of Hepato-Pancreato-Biliary Surgery The First Affiliated HospitalSun Yat-sen UniversityGuangzhou510080China

Circular RNAs(circRNAs)have been recognized as pivotal regulators in tumorigenesis,yet the biological functions as well as molecular mechanisms of the majority of circRNAs in hepatocellular carcinoma(HCC)remain *** sought to unveil the expression profile and biological role of circMYBL2 in *** microarray analyses were conducted to probe the expression profile of circMYBL2 in HCC cells,and qRT‒PCR analysis was then performed in HCC cell lines and tissues,revealing significant upregulation of *** experiments were conducted to evaluate the biological function of circMYBL2 in HCC ***,bioinformatics analysis,qRT‒PCR analysis,luciferase reporter assays,and western blot analysis were employed to investigate the interplay among circMYBL2,mir-1205,and ***2 was found to exhibit marked upregulation in tumor tissues as well as HCC cell *** expression of circMYBL2 increased the proliferation and migration of HCC cells,whereas circMYBL2 knockdown elicited contrasting ***,our results indicated that circMYBL2 promoted E2F1 expression and facilitated HCC progression by sponging *** findings revealed that circMYBL2 contributed to HCC progression through the circMYBL2/mir-1205/E2F1 axis,suggesting the potential of circMYBL2 as a novel target for HCC treatment or a prognostic biomarker for HCC.

关键词： Circular RNAs circMYBL2 mir-1205 E2F1 Hepatocellular carcinoma

环状RNA hsa_circ_0081069在结直肠癌中的表达及机制研究

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徐州医科大学学报 2022年第8期42卷 547-552页

作者：王陆本王佳琦高红宋军徐州矿务集团总医院普外科江苏徐州221006 陆军军医大学西南医院普外科重庆400038 徐州医科大学消化病研究所江苏徐州221004

目的探究环状RNA hsa_circ_0081069在结直肠癌中的表达,及其调控结直肠癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织和癌旁组织中hsa_circ_0081069的表达情况。采用Transwell实验和C... 详细信息

目的探究环状RNA hsa_circ_0081069在结直肠癌中的表达,及其调控结直肠癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织和癌旁组织中hsa_circ_0081069的表达情况。采用Transwell实验和CCK8实验分别检测敲低hsa_circ_0081069对结直肠癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响。采用双荧光素酶报告实验检测hsa_circ_0081069与mir-1205的相互作用。结果与癌旁组织相比,hsa_circ_0081069在结直肠癌组织中呈高表达(Pmir-1205,沉默hsa_circ_0081069与抑制mir-1205联合作用,使结直肠癌细胞受到抑制的迁移、侵袭及增殖能力得到恢复。结论hsa_circ_0081069在结直肠癌组织和细胞中呈高表达,且通过靶向调控mir-1205促进结直肠癌的迁移、侵袭及增殖。

关键词： hsa_circ_0081069 mir-1205 结直肠癌

紫檀芪对人结直肠癌细胞生物行为的影响及作用机制研究

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中国免疫学杂志 2022年第13期38卷 1579-1584页

作者：李志冷羽蔡涛吴雪峰贵州中医药大学第一附属医院肛肠科贵阳550001 贵州中医药大学研究生部贵阳550002

目的:探讨紫檀芪对人结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其对LncRNA ELFN1-AS1/mir-1205的调控作用。方法:体外培养结直肠癌细胞Caco-2,加入不同剂量的紫檀芪处理细胞,将正常培养的Caco-2细胞作为对照组;si-NC、si-ELFN1-AS1... 详细信息

目的:探讨紫檀芪对人结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其对LncRNA ELFN1-AS1/mir-1205的调控作用。方法:体外培养结直肠癌细胞Caco-2,加入不同剂量的紫檀芪处理细胞,将正常培养的Caco-2细胞作为对照组;si-NC、si-ELFN1-AS1分别转染至Caco-2细胞(si-NC组、si-ELFN1-AS1组),pcDNA、pcDNA-ELFN1-AS1分别转染至Caco-2细胞后加入含有紫檀芪的培养基处理细胞(紫檀芪+pcDNA组、紫檀芪+pcDNA-ELFN1-AS1组);qRT-PCR检测ELFN1-AS1、mir1205的表达量;CCK-8、平板克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验与Transwell小室分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测ELFN1-AS1与mir-1205的靶向关系。结果:与对照组相比,紫檀芪不同剂量组ELFN1-AS1的表达水平均降低(Pmir-1205表达水平均升高(Pmir-1205表达水平升高(Pmir-1205;ELFN1-AS1过表达可明显逆转紫檀芪对结直肠癌细胞生物学行为的调控作用。结论:紫檀芪可通过调控ELFN1-AS1/mir-1205从而降低结直肠癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力,并可促进细胞凋亡。

关键词：紫檀芪 LncRNA ELFN1-AS1 mir-1205 结直肠癌增殖凋亡迁移侵袭

影响转录因子JunD结合的功能性遗传变异系统发掘及其与肝癌易感性的关联研究

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影响转录因子JunD结合的功能性遗传变异系统发掘及其与肝癌易感性...

作者：石蒙北京化工大学

学位级别：硕士

转录因子JunD在肝癌发生以及发展中的作用已被报道。本研究的侧重点在于影响JunD结合的功能性遗传变异的系统挖掘,提供了完整而可靠的研究方法。首先从全基因组范围内的ChIP-chip数据出发,在84032个候选SNP中严格筛选到39个位于JunD结... 详细信息

转录因子JunD在肝癌发生以及发展中的作用已被报道。本研究的侧重点在于影响JunD结合的功能性遗传变异的系统挖掘,提供了完整而可靠的研究方法。首先从全基因组范围内的ChIP-chip数据出发,在84032个候选SNP中严格筛选到39个位于JunD结合的保守序列中并且在中国人群中突变频率大于百分之5的SNP,即最有潜力影响JunD结合的SNP,理论上不会遗漏任何有意义的SNP,使假阴性率最小化。而后通过大样本量的病例-对照研究,考察上述SNP与肝癌易感性的关联,统计结果显示rs4951541、rs2232965、rs281230、rs7820850这四个SNPp值小于0.05,即表示这些SNP与肝癌的发生有显著关联,另外计算优势比(OR)及其95%置信区间,显示rs4951541 A>C多态性为肝癌的风险型突变,rs4951541 CC基因型的个体发生肝癌的概率是rs4951541 AA基因型的个体的1.453倍;rs2232965 C>T多态性为肝癌的风险型突变,rs2232965 TT基因型的个体发生肝癌的概率是rs2232965 CC基因型的个体的2.371倍;rs281230 G>A多态性为肝癌的保护型突变,rs281230 AA基因型的个体发生肝癌的概率是rs281230 GG基因型的个体的0.577倍;rs7820850 C>T多态性为肝癌的保护型突变,rs7820850 TT和TC基因型的个体发生肝癌的概率是rs7820850 CC基因型的个体的0.683倍。这四个与肝癌易感性有显著关联的功能性SNP,极有可能是通过影响JunD结合而发挥作用的。接下来在组织样本中探索这四个SNP经由JunD介导调控的下游靶基因,发现在正常组织中rs7820850基因型与PVT1表达量最有可能有关联,所以将rs7820850作为下一步深入研究机制的对象。然后通过电泳迁移率变动分析实验在三种细胞系中证实JunD与rs7820850 C基因型结合比与T基因型结合强得多。由于rs7820850位于c-Myc与PVT1之间基因沙漠区域,所以通过染色体捕获构象技术考察rs7820850的远距离相互作用,发现与rs7820850与mir-1205转录起始位点之间存在临近的相互作用。综上,本研究发现了数个与肝癌易感性有显著关联的功能性遗传变异,并详细研究了 rs7820850的作用机制,它们或可成为新型生物标志物,为肝癌的诊断和个性化治疗提供新策略。

关键词：肝癌易感性 JunD 单核苷酸多态性 rs7820850 转录因子 mir-1205

MicroRNA-1205靶向抑制EGLN3促进鼻咽癌转移

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MicroRNA-1205靶向抑制EGLN3促进鼻咽癌转移

作者：杨茜广西医科大学

学位级别：硕士

背景:鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种鼻咽部恶性上皮肿瘤,鼻咽癌病例主要分布在东亚和东南亚国家及我国两广地区鼻咽癌在不同地域的人群发病率不同,例如在在中国华南的高风险地区,男性和女性的发病率分别为27.2/100,000和1... 详细信息

背景:鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种鼻咽部恶性上皮肿瘤,鼻咽癌病例主要分布在东亚和东南亚国家及我国两广地区鼻咽癌在不同地域的人群发病率不同,例如在在中国华南的高风险地区,男性和女性的发病率分别为27.2/100,000和11.3/100,000,而其他人群的发病率mirNAs)反应元件,特定的micro RNAs能够与之结合,从而使这些micro RNAs沉默并上调某些蛋白质的表达,其最终影响肿瘤的增殖,侵袭转移和对化疗药物的耐药性。PVT1本身可以剪接成6种不同的micro RNAs,即mir-1204,mir-1205,mir-1206,mir-1207-5p,mir-1207-3p和mir-1208,这些micro RNAs具有抑癌或促癌功能。目前针对鼻咽癌的分子标志物和靶点的研究一直是研究热点,我们发现micro RNA-1205(mir-1205)能够通过靶向抑制EGLN3蛋白表达进而促进鼻咽癌细胞的转移,我们的研究可能为鼻咽癌的治疗提供新的靶向位点和思路。目的:(1)探讨mir-1205是否影响鼻咽癌的发展进程。(2)如何寻找验证鼻咽癌中mir-1205的下游靶基因。(3)探究mir-1205及下游靶基因在鼻咽癌中作用的分子机制。方法:(1)本课题首先对鼻咽癌数据库中的数据进行分析鉴定,我们发现鼻咽癌患者癌组织标本中mir-1205的表达水平高于正常组织。随后我们采用实时荧光定量PCR检测,发现mir-1205在鼻咽癌细胞系的表达水平上升。(2)为测定mir-1205对鼻咽癌细胞系侵袭转移的影响,首先使用转染试剂将p SIF-mir1205和p CDH-mir1205-sponge质粒转染至鼻咽癌细胞系,随后进行细胞划痕实验,每个实验组于4倍物镜下按照随机原则选5个视野,拍摄各实验组对应的0h与24h细胞划痕区域,然后计算各组相对应视野的细胞划痕愈合面积。进一步测定mir-1205对鼻咽癌细胞系侵袭转移的影响,又进行Transwell实验,每个实验组设置3个复孔,迁移24h后使用结晶紫染色,随机选取5个视野于10倍物镜下拍照作图。(3)探讨mir-1205对鼻咽癌细胞系增殖的影响,mir-1205 mimics或mir-1205 inhibitor转染至鼻咽癌细胞,并采用CCK8实验和平板克隆实验检测mir-1205对细胞增殖影响。(4)探讨EGLN3是否为mir-1205的靶基因,使用三个micro RNAs数据库通过多种算法预测mir-1205靶基因,进一步对鼻咽癌数据库分析,发现鼻咽癌患者癌组织标本中EGLN3的表达水平显著低于正常组织样本。Western blot实验也提示mir-1205在鼻咽癌细胞中抑制EGLN3的蛋白表达。(5)测定EGLN3对鼻咽癌细胞系迁移的影响,构建鼻咽癌EGLN3过表达和敲低稳定细胞株,随后在稳定细胞株中进行细胞划痕。(6)进一步分析mir-1205调控EGLN3促进鼻咽癌细胞的迁移,在SUNE1和HONE1过表达EGLN3的稳定细胞株中转染p SIF-mir1205质粒,在HNE1和CNE2敲低EGLN3的稳定细胞株中转染p CDH-mir-1205 sponge质粒之后进行Transwell细胞转移实验。结果:***-1205mir-1205在鼻咽癌临床样本和鼻咽癌细胞系中表达

关键词：鼻咽癌 mir-1205 EGLN3 迁移