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miR-107基因多态性及其表达与缺血性脑卒中的相关性研究

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中国免疫学杂志 2022年第13期38卷 1625-1630页

作者：黄艳云雷茗谭昙刘纯宏王艳韦叶生(指导) 百色市人民医院检验科百色533000 右江民族医学院附属医院检验科百色533000

目的:探讨miR-107基因rs2296616位点多态性与缺血性脑卒中(IS)易感性的关联性,检测IS患者和对照者miR-107的表达水平,并分析rs2296616多态性与miR-107的表达是否存在相关性。方法:收集349例IS患者和372例健康对照者,采用多重单碱基延伸... 详细信息

目的:探讨miR-107基因rs2296616位点多态性与缺血性脑卒中(IS)易感性的关联性,检测IS患者和对照者miR-107的表达水平,并分析rs2296616多态性与miR-107的表达是否存在相关性。方法:收集349例IS患者和372例健康对照者,采用多重单碱基延伸SNP分型技术和DNA测序法检rs2296616位点的多态性。利用SYBR Green实时荧光定量PCR的方法检测IS组和对照组中miR-107的表达水平,并分析miR-107基因rs2296616多态性与miR-107表达的相关性。结果:miR-107基因rs2296616位点在IS组和对照组中均存在多态性,rs2296616多态性位点在IS组和对照组中的基因型频率分布均符合HardyWeinberg遗传平衡定律(P均>0.05)。rs2296616位点多态性在IS组和对照组男、女性别间,差异无统计学意义(P均>0.05)。无论是否校正混杂因素的影响,rs2296616多态性位点的基因型、等位基因、显性模型(GG+AG vs AA)、隐性模型(GG vs AA+AG)以及超显性模型(GG+AA vs AG)的频率分布在IS组与对照组间的差异均无统计学意义(P均>0.05)。IS组患者外周血单个核细胞中miR-107的表达水平显著高于对照组(PmiR-107的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-107基因rs2296616位点多态性与IS易感性不存在关联性。IS患者外周血单个核细胞中异常增高的miR-107可能是IS诊断的潜在新型生物学标志物,但rs2296616位点多态性对miR-107的表达不具有调节性。

关键词： miR-107 基因多态性 rs2296616位点缺血性脑卒中易感性

miR-107对柯萨奇病毒B3感染细胞糖原合成酶激酶-3β蛋白及β-连环蛋白表达的影响

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微生物学通报 2022年第10期49卷 4281-4290页

作者：王秀平吴娴张慧蓉周婷徐点点姚敏邵晨邵世和江苏大学医学院江苏镇江212013 江苏大学附属医院心内科江苏镇江212001

【背景】miR-107异常表达可引起肿瘤细胞中Wnt/β-catenin信号通路主要蛋白表达发生改变,但其能否在柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)感染的人宫颈癌细胞(HeLa cells)中发挥同样作用却未见报道。【目的】探讨miR-107能否影响CVB3感... 详细信息

【背景】miR-107异常表达可引起肿瘤细胞中Wnt/β-catenin信号通路主要蛋白表达发生改变,但其能否在柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)感染的人宫颈癌细胞(HeLa cells)中发挥同样作用却未见报道。【目的】探讨miR-107能否影响CVB3感染HeLa细胞中的糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白、P-GSK-3β蛋白和β连环蛋白(β-catenin)的表达水平。【方法】体外培养HeLa细胞,感染CVB3不同时间,通过显微镜观察HeLa细胞的形态学变化、实时荧光定量PCR实验检测HeLa细胞中miR-107表达量、免疫印迹实验检测HeLa细胞中的GSK-3β、P-GSK-3β、β-catenin蛋白及病毒衣壳蛋白(VP1)的表达水平。【结果】CVB3感染HeLa细胞6 h后,细胞病变效应明显,miR-107表达量及GSK-3β、P-GSK-3β和VP1蛋白的表达水平随CVB3感染时间(0−8 h)的延长逐渐增加,而β-catenin蛋白的表达水平逐渐减少。过表达miR-107的CVB3感染6 h的HeLa细胞死亡细胞增多,GSK-3β、P-GSK-3β和VP1蛋白表达水平增加(PmiR-107的CVB3感染6 h的HeLa细胞GSK-3β、P-GSK-3β及VP1蛋白表达水平明显减少(PmiR-107异常表达可影响CVB3感染HeLa细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白和病毒衣壳蛋白的表达水平。

关键词：柯萨奇病毒B3 病毒性心肌炎 miR-107 Wnt/β-catenin

沉默miR-107对乳腺癌细胞侵袭及上皮-间质转化的影响

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中国老年学杂志 2022年第4期42卷 897-901页

作者：代云峰曹春姚李昂任明魏环兵贾翠英郎尉雅李鹏辉鲍红光刘云龙张旭东潘洪明齐齐哈尔医学院附属第二医院检验科黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院心血管内五科黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院基础医学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院胸外科黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第二医院信息中心黑龙江齐齐哈尔161006

目的探究miR-107对乳腺癌细胞侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响和机制。方法利用荧光定量PCR方法分析miR-107在正常乳腺细胞及乳腺癌细胞系中的表达差异;HS578T细胞分别转染对照mirNA和miR-107抑制剂,利用划痕实验分析细胞迁移能力,用Tra... 详细信息

目的探究miR-107对乳腺癌细胞侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响和机制。方法利用荧光定量PCR方法分析miR-107在正常乳腺细胞及乳腺癌细胞系中的表达差异;HS578T细胞分别转染对照mirNA和miR-107抑制剂,利用划痕实验分析细胞迁移能力,用Transwell实验分析细胞侵袭能力,用实时荧光定量PCR方法检测细胞EMT标志物的表达水平,用蛋白质免疫印迹实验检测细胞PTEN/AKT信号通路。结果与正常乳腺细胞相比,miR-107在乳腺癌细胞株中高表达;沉默miR-107的表达抑制HS578T细胞的迁移、侵袭及EMT,促进PTEN/AKT信号通路。结论miR-107在乳腺癌细胞中高表达,沉默miR-107表达通过PTEN/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞迁移、侵袭和EMT。

关键词： miR-107 乳腺癌侵袭上皮-间质转化

miR-107靶向FGFRL1/AKT通路抑制胃癌耐药细胞迁移

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中国老年学杂志 2023年第3期43卷 705-710页

作者：蒋露张燕任伟宏河南中医药大学第一临床医学院河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院检验科河南郑州450046

目的检测胃癌敏感和耐药细胞迁移能力的强弱,探究miR-107靶向成纤维细胞生长因子受体样蛋白(FGFRL)1/蛋白激酶B(AKT)通路调节胃癌耐药细胞迁移。方法利用划痕和transwell小室实验验证胃癌敏感和耐药细胞的迁移;采用荧光定量聚合酶链反应... 详细信息

目的检测胃癌敏感和耐药细胞迁移能力的强弱,探究miR-107靶向成纤维细胞生长因子受体样蛋白(FGFRL)1/蛋白激酶B(AKT)通路调节胃癌耐药细胞迁移。方法利用划痕和transwell小室实验验证胃癌敏感和耐药细胞的迁移;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR),Western印迹检测敏感和耐药胃癌细胞中miR-107、FGFRL1/AKT通路活性及迁移相关蛋白(E-钙黏附蛋白(Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶(MMP)9)的表达;利用荧光素酶报告实验鉴定miR-107与FGFRL1之间的靶向关系;将胃癌细胞耐药株分为mimic NC组、miR-107 mimic组、NC组和siFGFRL1组,荧光定量PCR、Western印迹检测胃癌耐药细胞中FGFRL1 mRNA表达水平、FGFRL1/AKT通路活性及迁移相关蛋白表达水平;划痕和transwell小室实验测定胃癌耐药细胞迁移能力的变化。结果与胃癌敏感细胞相比,胃癌耐药细胞迁移能力更强,且miR-107呈明显低表达,FGFRL1 mRNA和蛋白水平显著高表达,AKT活性(p-AKT水平)与Vimentin、MMP9蛋白水平显著高表达,E-Cadherin蛋白水平显著低表达(均PmiR-107 mimic组、siFGFRL1组中胃癌耐药细胞中FGFRL1 mRNA和蛋白表达水平显著下调,AKT活性与Vimentin、MMP9蛋白显著下调,E-Cadherin显著上调,胃癌耐药细胞迁移能力也显著下降(均PmiR-107的下游靶标分子。结论胃癌耐药细胞迁移能力更强,miR-107通过靶向调节FGFRL1/AKT通路活性调控迁移相关蛋白的表达,进而调控胃癌耐药细胞的迁移。

关键词：胃癌耐药细胞 miR-107 成纤维细胞生长因子受体(FGFR)L1/蛋白激酶B(AKT) 迁移

miR-107靶向FoxM1对鼻咽癌细胞生长和侵袭及迁移影响

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中华肿瘤防治杂志 2020年第4期27卷 269-275页

作者：刘桂超胡学锋郭建贵吴海军佛山市第一人民医院头颈乳腺放疗科广东佛山528000

目的microRNA与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)发生发展密切相关,但miR-107在鼻咽癌中的作用机制仍不清楚。本研究检测miR-107在鼻咽癌组织中的表达水平,并初步探讨其对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭影响的分子机制。方法收集2013-... 详细信息

目的microRNA与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)发生发展密切相关,但miR-107在鼻咽癌中的作用机制仍不清楚。本研究检测miR-107在鼻咽癌组织中的表达水平,并初步探讨其对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭影响的分子机制。方法收集2013-02-02-2013-12-24于佛山市第一人民医院经病理活检确诊的86例NPC组织和42例慢性鼻咽炎组织。采用原位杂交技术检测组织中miR-107的表达。分析miR-107表达与鼻咽癌患者临床特征及5年生存率的关系。双荧光素酶实验检测miR-107和人叉头框蛋白M1(forkhead box M1,FoxM1)在鼻咽癌细胞中的相互作用。在鼻咽癌细胞系CNE-2中转染miR-107 mimics和mimics NC,并设立mock对照组,采用实时荧光定量PCR法检测FoxM1 mRNA的表达量,蛋白质印迹实验检测FoxM1蛋白的表达量。然后通过CCK8、划痕和Transwell小室法检测鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果miR-107在鼻咽癌组织中的阳性表达率(15.12%,13/86)低于慢性鼻咽炎组织(83.33%,35/42),差异有统计学意义,χ^2=96.37,PmiR-107阳性患者的5年生存率高于miR-107阴性组,χ^2=6.380,P=0.043。miR-107靶向调控FoxM1的3′UTR,降低了荧光素酶的表达活性,F=363.600,PmiR-107 mimics组FoxM1mRNA(F=267.600,PmiR-107 mimics组细胞的增殖(F=1192.000,PmiR-107在鼻咽癌患者中低表达,通过靶向抑制FoxM1的表达而抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词： miR-107 FoxM1 鼻咽癌细胞增殖细胞侵袭细胞迁移

miR-107调控肺腺癌H1299细胞放射敏感性机制的初步研究

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miR-107调控肺腺癌H1299细胞放射敏感性机制的初步研究

作者：黄毅遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:初步分析miR-107对肺腺癌H1299细胞放射敏感性的影响及调控机制,为后续研究提供理论依据。方法:1.生物信息学预测miR-107与ZEB1的相关性。2.构建放射抗拒模型H1299R细胞;通过CCK-8细胞增殖实验和克隆形成实验验证H1299R细胞的放射... 详细信息

目的:初步分析miR-107对肺腺癌H1299细胞放射敏感性的影响及调控机制,为后续研究提供理论依据。方法:1.生物信息学预测miR-107与ZEB1的相关性。2.构建放射抗拒模型H1299R细胞;通过CCK-8细胞增殖实验和克隆形成实验验证H1299R细胞的放射抗性;q PCR检测H1299R和H1299细胞中miR-107和ZEB1 mRNA的表达;Western Blot分别检测ZEB1、损伤修复蛋白及凋亡蛋白表达。3.miR-107 mimic转染实验上调H1299R细胞的miR-107;通过CCK-8和克隆形成实验检测上调miR-107后对H1299R细胞放射敏感性影响;q PCR检测上调miR-107后miR-107和ZEB1 mRNA的表达;Western Blot分别检测上调miR-107后ZEB1、ATM、p-ATM、损伤修复蛋白及凋亡蛋白表达。4.miR-107 inhibitor转染实验下调H1299细胞的miR-107;通过CCK-8和克隆形成实验检测下调miR-107后对H1299细胞放射敏感性影响;q PCR检测下调miR-107后miR-107和ZEB1 mRNA的表达;Western Blot分别检测下调miR-107后ZEB1、ATM、p-ATM、损伤修复蛋白及凋亡蛋白表达。结果:1.生物信息学分析显示miR-107与ZEB1呈负相关（P＜0.05）。2.CCK-8细胞增殖实验表明:H1299R细胞在6Gy剂量照射后,增殖能力高于H1299细胞（24h P＞0.05;48h P＜0.05;72h P＜0.05）;克隆形成实验表明:随着照射剂量的增加,H1299R和H1299克隆形成集落都有不同程度的减少,H1299R细胞2Gy的存活分数（survival fraction at 2 grey,SF2）高于H1299细胞（P＜0.05）;q PCR结果显示:miR-107在H1299R细胞中低表达（P＜0.05）,ZEB1 mRNA在H1299R细胞中高表达（P＜0.05）;Western Blot实验检测出ZEB1蛋白在H1299R细胞中高表达（P＜0.05）,在接受2Gy剂量照射后,PARP蛋白在H1299R细胞中高表达,Caspase3和cle-PARP蛋白在H1299R细胞中低表达（P＜0.05）。3.上调H1299R细胞的miR-107后,q PCR结果显示:miR-107在miR-107 mimic组高表达,ZEB1 mRNA在miR-107 mimic组低表达（P＜0.05）;CCK-8增殖实验表明:在6Gy剂量照射后,miR-107 mimic组增殖能力低于阴性对照组（24h P＜0.05;48h P＜0.05;72h P＜0.05）;克隆形成实验表明:随着照射剂量的增加,miR-107 mimic组克隆形成集落数量低于阴性对照组,miR-107 mimic组SF2小于阴性对照组（P＜0.05）;Western Blot实验表明:经过2Gy剂量照射后,相比于阴性对照,caspase3蛋白在miR-107 mimic组高表达,ZEB1、ATM、p-ATM和PARP蛋白在miR-107 mimic组低表达（P＜0.05）。4.下调H1299细胞的miR-107后,q PCR结果显示:ZEB1 mRNA在miR-107inhibitor组高表达（P＜0.05）;CCK-8增殖实验表明:在6Gy剂量照射后,miR-107inhibitor组增殖能力高于阴性对照组（24h P＜0.05;48h P＜0.05;72h P＜0.05）;克隆形成实验表明:随着照射剂量的增加,miR-107 inhibitor组克隆形成集落数量高于阴性对照组,miR-107 inhibitor组SF2大于阴性对照组（P＜0.05）;Western Blot实验表明:经过2Gy剂量照射后,相比于阴性对照,caspase3蛋白在miR-107inhibitor组低表达,ZEB1、p-ATM和PARP蛋白在miR-107 inhibitor组高表达（P＜0.05）。结论:1.miR-107可调节肺腺癌H1299细胞放射敏感性。2.电离辐射可能通过miR-107/ZEB1/ATM信号轴来介导H1299细胞的凋亡。

关键词：非小细胞肺癌放射敏感性 miR-107 锌指增强子结合蛋白1 细胞共济失调毛细血管扩张突变

miR-107与原发性高血压的关联及其对血管内皮细胞功能的影响研究

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miR-107与原发性高血压的关联及其对血管内皮细胞功能的影响研究

作者：朱雯菲吉林大学

学位级别：硕士

目的:本研究拟探寻mi R-107的表达情况与高血压的关联及其对血管内皮细胞功能的影响,以期用作高血压的生物标志物;在人群水平研究mi R-107与血压及实验室检查指标的关系,在细胞层面明确mi R-107对内皮细胞生物学功能的影响,为高血压的... 详细信息

目的:本研究拟探寻mi R-107的表达情况与高血压的关联及其对血管内皮细胞功能的影响,以期用作高血压的生物标志物;在人群水平研究mi R-107与血压及实验室检查指标的关系,在细胞层面明确mi R-107对内皮细胞生物学功能的影响,为高血压的发病机制及后续靶向治疗提供理论依据。方法:选定“2012年吉林省成人慢性病及其危险因素调查”项目中确诊的高血压患者与同期体检健康人群为研究对象。通过RT-q PCR技术检测164名高血压患者和164名健康人群血清中mi R-107的表达水平,通过Logistic回归分析高血压的影响因素,通过Spearman相关性分析研究mi R-107与血压和实验室检查指标的相关性。将mi R-107 mimics/inhibitor和mi R-NC mimics/inhibitor转染入人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cell,HAEC),通过细胞增殖、迁移、凋亡和成管实验探究mi R-107对内皮细胞功能的影响。通过Target Scan网站预测mi R-107的靶基因,通过对靶基因进行基因本体论(Gene ontology,GO分析)分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析,构建蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络,寻找关键功能模块和关键基因。结果:1.人群验证结果PCR结果表明,在164名高血压患者和164名健康对照人群的血清样本中,高血压人群的mi R-107表达水平低于健康对照人群,差异具有统计学意义(P107与高血压存在关联性,可作为高血压的潜在生物标志物。2.mi R-107与血压及实验室检查指标的关系单因素分析结果显示,人群基本特征信息中体重、体质指数(body mass index,BMI)、城乡分布、教育水平、新鲜水果摄入、蛋和豆制品摄入及奶制品摄入频率在高血压和健康对照人群中存在差异(P0.05)。在临床指标的比较中,收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein cholesterol,HLD-C)、甘油三酯(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和mi R-107表达水平在高血压和健康对照人群中存在差异(P0.05)。将单因素分析中具有统计学意义的因素列入多因素logistic回归分析,结果表明mi R-107的高表达和经常摄入奶制品和为高血压的保护因素,肥胖和TG是高血压的危险因素。相关性分析结果表明:mi R-107与SBP、DBP、TC、TG呈负相关,差异具有统计学意义(P107与血管内皮细胞功能的关系和mi R-NC mimics组相比,mi R-107mimics组对HAEC的增殖、迁移、成管能力起抑制作用,差异具有统计学意义(P107 inhibitor组对血管内皮细胞的增殖、迁移、成管能力起促进作用,对其凋亡起抑制作用,差异具有统计学意义(P107的靶基因共835个,根据置信度和特异度筛选条件去除434个,对剩余401个靶基因进行GO分析,这些基因主要参与的生物学过程主要包括:蛋白磷酸化、管腔形态发生、生长等;主要参与的分子功能包括:蛋白激酶活性、泛素-偶联酶结合、分子适配器活性等;主要参与的细胞组分包括:神经突触前、细胞皮层、蛋白激酶复合物等。KEGG通路富集分析显示这些基因主要作用于乳腺癌、胞吞作用、神经退行性多发性疾病的发病途径等通路。靶基因的PPI网络中存在7个关键功能模块包括84个基因,将这84个基因于与通过Cytoscape软件筛选出的前50个关键基因进行对比,既包含在关键模块又包含在关键基因中的基因有18个,分别为:WNT16,MYB,WNT4,TNRC6B,CACNA2D1,ANK1,TPD52,SH3GL2,CDK6,CDK8,SCN1A,SCN8A,FBXW7,NPAS2,DCTN3

关键词： miR-107 原发性高血压血管内皮细胞

静原鸡miR-107的靶基因预测及生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2020年第9期47卷 2695-2705页

作者：禹保军何金童姚婷婷吴昊樊希雅虎红红王卫振郭菊顾亚玲蔡正云辛国省张娟宁夏大学农学院银川750021 宁夏大学生命科学学院宁夏饲料工程技术研究中心银川750021

为探究miR-107在静原鸡肌肉组织肌苷酸特异性沉积过程中的调控机制,本研究利用相关生物信息学软件和数据库对静原鸡miR-107进行了靶基因预测与生物信息学分析。通过转录组测序获取静原鸡miR-107序列,进行序列比对和保守性分析;通过Targe... 详细信息

为探究miR-107在静原鸡肌肉组织肌苷酸特异性沉积过程中的调控机制,本研究利用相关生物信息学软件和数据库对静原鸡miR-107进行了靶基因预测与生物信息学分析。通过转录组测序获取静原鸡miR-107序列,进行序列比对和保守性分析;通过TargetScan、mirDB和PicTar预测结果的交集并结合mirTarbase中已证实的靶基因集合,取二者并集,采用OmicShare工具对基因集合进行GO功能富集和信号通路富集分析,并讨论HMED数据库中miR-107在不同组织和疾病中的表达水平。结果显示,miR-107序列在各物种间高度保守,miR-107调控的靶基因GO功能富集主要包括细胞过程、生物调节、代谢过程、刺激反应等生物学过程和结合、催化活性、转录调节活性等分子功能;靶基因存在于细胞的多个组分中,包括细胞器、细胞膜、含蛋白质复合物。信号转导通路显著富集于癌症中的microRNAs途径(microRNAs in cancer)、人乳头瘤病毒感染(human papillomavirus infection)、癌症中途径(pathways in cancer)、PI3K-Akt信号通路(PI3K-Akt signaling pathway)中(PmirNA-靶基因互作分析发现,miR-107主要通过与靶基因mRNA的非翻译区靶向结合抑制靶基因的表达。根据HMED数据库中miR-107在不同组织和疾病中的表达数据,发现miR-107在黑素瘤(melanoma)中的表达水平最高,在扁桃体(tonsil)和肌肉(muscle)等组织中表达水平较低。通过对静原鸡miR-107靶基因的生物信息学分析,为miR-107功能及调控机制的深入研究提供参考依据,也为进一步研究miR-107在静原鸡肌肉发育中的作用奠定基础。

关键词：静原鸡 miR-107 靶基因生物信息学

下调microRNA-107表达对人子宫内膜样腺癌Ishikawa细胞增殖迁移和侵袭的作用

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现代妇产科进展 2018年第5期27卷 330-333页

作者：章燕祝亚平鲍伟上海交通大学医学院附属第一人民医院妇产科上海200080

目的:探讨下调microRNA-107(miR-107)表达对人子宫内膜样腺癌细胞系Ishikawa增殖迁移和侵袭能力的影响及可能机制。方法:将miR-107抑制剂(miR-107 inhibitor)瞬时转染Ishikawa细胞,下调miR-107表达。实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测miR-107表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕方法检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测ER-α受体蛋白表达水平。结果:转染miR-107 inhibitor的Ishikawa细胞中miR-107表达水平显著降低,细胞的增殖迁移和侵袭能力降低,细胞中ER-a受体蛋白表达水平增高。结论:下调miR-107表达可能通过上调ER-α表达抑制Ishikawa细胞的增殖迁移和侵袭能力。

关键词：子宫内膜样腺癌微小RNA miR-107 Ishikawa细胞增殖迁移侵袭 ER-α