检索结果-南通市图书馆

mir-101-3p与膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂敏感性的关系研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验诊断学 2024年第1期28卷 76-80页

作者：崔伯阳尺宝进张赫岩刘任功刘鹏高祥佳木斯大学黑龙江佳木斯150000 佳木斯大学附属第一医院泌尿外科黑龙江佳木斯150000 齐齐哈尔市第一医院南院泌尿外科黑龙江齐齐哈尔161000

目的探究mir-101-3p与膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂敏感性的关系。方法将膀胱癌细胞分为对照组、下、上调mir-101-3p组,体外培养膀胱癌细胞。采用CCK-8实验来检测膀胱癌细胞增殖能力;通过划痕实验来检测膀胱癌细胞迁移能力;通过T... 详细信息

目的探究mir-101-3p与膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭和顺铂敏感性的关系。方法将膀胱癌细胞分为对照组、下、上调mir-101-3p组,体外培养膀胱癌细胞。采用CCK-8实验来检测膀胱癌细胞增殖能力;通过划痕实验来检测膀胱癌细胞迁移能力;通过Transwell实验来检测膀胱癌细胞侵袭能力;3组细胞分别加入不同浓度的顺铂,观察对细胞的抑制率;Western blot法测定CDK4、Akt、ICAM-1、MMp-9蛋白的表达量。结果在24 h、48 h、72 h的细胞增殖率方面,上调mir-101-3p组均低于对照组、下调mir-101-3p组,而对照组低于下调mir-101-3p组(pmir-101-3p组均少于对照组、下调mir-101-3p组,而对照组少于下调mir-101-3p组(pp-9蛋白的表达量方面,上调mir-101-3p组均低于对照组和下调mir-101-3p组(pmir-101-3p组高于对照组、下调mir-101-3p组(pmir-101-3p能够抑制CDK4、Akt、ICAM-1、MMp-9蛋白的表达,调控细胞周期,阻止膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭,提高其顺铂敏感性。

关键词： mir-101-3p 膀胱癌增殖迁移侵袭顺铂敏感性

Effects of mir-101-3p on goat granulosa cells in vitro and ovarian development in vivo via STC1

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Journal of Animal Science and Biotechnology 2021年第2期12卷 549-568页

作者： Xiaopeng An Haidong Ma Yuhan Liu Fu Li Yuxuan Song Guang Li Yueyu Bai Binyun Cao College of Animal Science and Technology Northwest A&F UniversityNo.22 Xinong RoadYanglingShaanxi 712100P.R.China College of Biological Science and Engineering Shaanxi University and TechnologyHanzhongShaanxi 723001P.R.China Henan Animal Health Supervision Institution No.91 Jingsan RoadZhengzhouHenan 450008P.R.China

Background:mirNAs act as pivotal post-transcriptional gene mediators in the regulation of diverse biological processes,including proliferation,development and apoptosis.Our previous study has showed that mir-101-3p is differentially expressed in dairy goat ovaries compared single with multiple litters.The objective of this research was to explore the potential function and molecular mechanism of mir-101-3p via its target STC1 in goat ovarian growth and development.Results:cDNA libraries were constructed using goat granulosa cells transfected with mir-101-3p mimics and negative control by RNA-sequencing.In total,142 differentially expressed unigenes(DEGs)were detected between two libraries,including 78 down-regulated and 64 up-regulated genes.GO and KEGG enrichment analysis showed the potential impacts of DEGs on ovarian development.STC1 was singled out from DEGs for further research owing to it regulates reproductive-related processes.In vitro,bioinformatics analysis and 3′-UTR assays confirmed that STC1 was a target of mir-101-3p.ELISA was performed to detect the estrogen(E2)and progesterone(p4)levels.CCK8,EdU and flow cytometry assays were performed to detect the proliferation and apoptosis of granulosa cells.Results showed that mir-101-3p regulated STAR,CYp19A1,CYp11A1 and 3β-HSD steroid hormone synthesis-associated genes by STC1 depletion,thus promoted E2 and p4 secretions.mir-101-3p also affected the key protein pI3K,pTEN,AKT and mTOR in pI3K-AKT pathway by STC1,thereby suppressing proliferation and promoting apoptosis of granulosa cells.In vivo,the distribution and expression levels of mir-101-3p in mouse ovaries were determined through fluorescence in situ hybridisation(FISH).Immunohistochemistry results showed that STC1 expression was suppressed in mouse ovaries in mir-101-3p-agonist and siRNA-STC1 groups.Small and stunted ovarian fragments,decreased numbers of follicles at diverse stages were observed using Hematoxylin-eosin(HE)staining,thereby showing unusual ovarian development after mir-101-3p overexp

关键词： Granulosa cells mir-101-3p Ovary STC1 Transcriptome

mir-101-3p在胃癌中的表达及其靶向STC-1基因调控pI3K/AKT信号通路对癌细胞侵袭转移和血管生成的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤防治研究 2022年第12期49卷 1223-1231页

作者：刘强孙少明王文俊大连大学附属中山医院急腹症外科大连116001 济宁医学院附属医院急腹症外科济宁272000

目的探究mir-101-3p在胃癌中的表达及其靶向STC-1基因调控pI3K/AKT信号通路对癌细胞侵袭转移、血管生成的作用机制。方法qRT-pCR检测胃癌组织及BGC-823细胞中mir-101-3p和STC-1 mRNA的表达,并分析mir-101-3p表达与患者临床病理因素的关... 详细信息

目的探究mir-101-3p在胃癌中的表达及其靶向STC-1基因调控pI3K/AKT信号通路对癌细胞侵袭转移、血管生成的作用机制。方法qRT-pCR检测胃癌组织及BGC-823细胞中mir-101-3p和STC-1 mRNA的表达,并分析mir-101-3p表达与患者临床病理因素的关系;通过LipofectamineTM 2000将mirNA模拟物和质粒分别或者联合转染细胞;TargetScanHuman预测及双荧光素酶报告验证mir-101-3p对STC-1的靶向调控关系;划痕实验、Transwell小室实验、Matrigel体外成管实验及Westernblot检测验证mir-101-3p靶向STC-1基因对癌细胞的侵袭转移和血管生成的影响及可能的机制,并通过裸鼠致瘤实验检测移植瘤的发展。结果胃癌组织中STC-1的表达水平高于正常组织。与正常胃组织和GES-1细胞相比,胃癌组织和BGC-823细胞中mir-101-3p下调,STC-1 mRNA上调,且mir-101-3p水平与STC-1水平负相关,mir-101-3p水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移显著相关(pmir-101-3p可抑制STC-1的表达,下调p-pI3K/pI3K、p-AKT/AKT、MMp-2、MMp-9、VEGF、Ang2水平,抑制肿瘤细胞的侵袭转移和血管生成,降低移植瘤体积和重量(pmir-101-3p在胃癌中表达下调,能够靶向STC-1基因调控pI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞BGC-823的侵袭转移和血管生成及体内移植瘤的进展。

关键词： mir-101-3p 斯钙素1 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B 胃癌侵袭转移血管生成

mir-101-3p通过靶向抑制斯坦尼钙调节蛋白1(STC1)促进巨噬细胞对人肝癌细胞的吞噬作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2023年第4期39卷 339-344页

作者：张静张晓张瑞杨安钢空军军医大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室陕西西安710032 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

目的探究mir-101-3p能否促进THp-1巨噬细胞对HCCLM3人肝癌细胞的吞噬作用及其机制。方法通过慢病毒包装、感染和抗性筛选,获得绿色荧光蛋白(GFp)标记并过表达mir-101-3p的HCCLM3人肝癌细胞稳转系(HCCLM3^(GFp)-mir-101-3p),同时使用... 详细信息

目的探究mir-101-3p能否促进THp-1巨噬细胞对HCCLM3人肝癌细胞的吞噬作用及其机制。方法通过慢病毒包装、感染和抗性筛选,获得绿色荧光蛋白(GFp)标记并过表达mir-101-3p的HCCLM3人肝癌细胞稳转系(HCCLM3^(GFp)-mir-101-3p),同时使用佛波酯(pMA)诱导THp-1细胞贴壁分化为M0型巨噬细胞。将两者共培养24 h后收集细胞,运用荧光激活细胞分选法(FACS)检测巨噬细胞吞噬效率。实时定量pCR检测斯坦尼钙调节蛋白1(STC1)、钙网蛋白(CRT)的mRNA表达水平,免疫荧光染色法检测CRT的表达和分布,Western blot法检测STC1、 CRT的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验分析mir-101-3p与靶基因的靶向调控关系。结果过表达mir-101-3p促进THp-1巨噬细胞对HCCLM3肝癌细胞的吞噬作用,mir-101-3p通过靶向STC1进而上调HCCLM3细胞膜表面CRT的表达。结论 mir-101-3p通过靶向抑制STC1进而促进HCCLM3细胞膜表面CRT的表达,增强巨噬细胞对肝癌细胞的吞噬作用。

关键词： mir-101-3p 钙网蛋白(CRT) 斯坦尼钙调节蛋白1(STC1) 巨噬细胞吞噬作用

妊娠合并梅毒外周血mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达及临床意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医院感染学杂志 2023年第5期33卷 766-770页

作者：刘晓静黄卫平赵丽娜田红卫刘杰董晴夏春新李然然刘腾飞石家庄第五医院妇产科河北石家庄050000 厦门市弘爱医院妇产科福建厦门361000 石家庄第五医院儿科河北石家庄050000 石家庄第五医院内科河北石家庄050000 石家庄第五医院检验科河北石家庄050000

目的探讨妊娠合并梅毒外周血mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达及临床意义。方法选择2019年1月-2021年6月石家庄第五医院妇产科妊娠合并梅毒孕妇162例为研究组,随机选择同期40名无任何疾病健康顺产孕妇为对照组。实时荧光定量聚... 详细信息

目的探讨妊娠合并梅毒外周血mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达及临床意义。方法选择2019年1月-2021年6月石家庄第五医院妇产科妊娠合并梅毒孕妇162例为研究组,随机选择同期40名无任何疾病健康顺产孕妇为对照组。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-pCR)法检测所有孕妇外周血mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达,研究组进行梅毒抗体滴度和梅毒抗体转阴检测。结果研究组单个核细胞(pBMCs)中mir-101-3p、mir-195-5p、mir-223-3p表达高于对照组(pmir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p诊断妊娠合并梅毒的曲线下面积(AUC)分别为0.752、0.773和0.782,均具有统计学意义(ppBMCs中mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达低于>1∶4组(ppBMCs中mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达低于血清固定组(ppBMCs中mir-101-3p、mir-195-5p和mir-223-3p表达对于评估孕妇梅毒感染状态、感染滴度及驱梅治疗效果有一定价值,且不受孕周影响。

关键词：孕妇梅毒 mir-101-3p mir-195-5p mir-223-3p

mir-101-3p靶向E2F2调控黑色素瘤细胞增殖的分子机制探讨

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

天津医药 2022年第11期50卷 1121-1127页

作者：李吻吻朱智鑫韩利民焦艳林翁宗琴赵海龙遵义医科大学基础医学院病理生理学教研室 563000

目的探讨mir-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法使用GEpIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F... 详细信息

目的探讨mir-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法使用GEpIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后,分别采用pI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平;免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平;裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化。经mir-101-3p mimics处理后,采用实时荧光定量pCR(qpCR)检测MV3细胞中mir-101-3p的表达水平,同时利用qpCR和Western blot实验检测E2F2的表达水平;通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平。结果E2F2表达升高的患者预后更差(pp组相比,shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多(p3B荧光信号明显减少(ppmir-101-3p mimics处理后,MV3细胞中mir-101-3p的表达水平明显升高(ppmir-101-3p mimics组MV3细胞的活力显著降低(pmir-101-3p mimics组细胞中BrdU阳性信号明显减少(pmir-101-3p可靶向E2F2并抑制其表达,进而降低黑色素瘤细胞增殖水平。

关键词：黑色素瘤 E2F2转录因子细胞增殖 mir-101-3p

CircpIp5K1A靶向调节mir-101-3p影响结直肠癌SW480细胞生长、迁移、侵袭和凋亡的作用机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学研究与战创伤救治 2023年第8期36卷 801-807页

作者：刘建军王攀袁华燕吴镇江印隆宽白翔宇川北医学院附属医院普通外科南充637000

目的探究CircpIp5K1A靶向调节mir-101-3p对结直肠癌(CRC)SW480细胞生长、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法qRT-pCR检测人CRC组织、邻近正常组织、CRC细胞株SW480、正常结肠上皮细胞FHC中CircpIp5K1A、mir-101-3p水平;将si-NC、si-CircpIp5K1A、si-CircpIp5K1A+inhibitor NC、si-CircpIp5K1A+mir-101-3p inhibitor分别转染至SW480细胞并命名为si-NC组、si-CircpIp5K1A组、si-CircpIp5K1A+inhibitor NC组、si-CircpIp5K1A+mir-101-3p inhibitor组,未做任何处理的SW480细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证CircpIp5K1A与mir-101-3p的关系;qRT-pCR检测SW480细胞中CircpIp5K1A、mir-101-3p表达;CCK-8法检测SW480细胞增殖情况;流式细胞术检测SW480细胞凋亡率;Transwell检测SW480细胞侵袭、迁移数量;Western blot检测SW480细胞E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白水平;小鼠异种移植检测肿瘤生长。结果与邻近正常组织[(1.00±0.03)、(1.00±0.02)]或FHC细胞(1.00±0.00)相比,CRC组织和SW480细胞CircpIp5K1A水平[(1.85±0.21)、(1.54±0.16)]显著上调(pmir-101-3p表达[(0.31±0.02)、(0.36±0.04)]显著下调(ppIp5K1A组SW480细胞A 450值、迁移、侵袭细胞数量、CircpIp5K1A表达、N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(pmir-101-3p表达、E-cadherin蛋白水平显著升高(pmir-101-3p表达减弱了沉默CircpIp5K1A抑制SW480细胞增殖、迁移和侵袭的效果;CircpIp5K1A负向调控mir-101-3p。与NC组、慢病毒空载(LV-NC)组相比,pIp5K1A慢病毒载体(LV-pIp5K1A)组肿瘤体积、肿瘤质量显著下降(ppIp5K1A组、LV-pIp5K1A+拮抗剂对照(antiagomir)组相比较,LV-pIp5K1A+mir-101-3p拮抗剂(mir-101-3p antiagomir)组肿瘤体积、肿瘤质量显著升高(ppIp5K1A可能通过上调mir-101-3p表达来对CRC细胞SW480增殖、迁移和侵袭产生影响。

关键词： CircpIp5K1A mir-101-3p 结直肠癌增殖凋亡迁移侵袭

急性缺血性脑卒中患者外周血mir-101-3p的表达水平及临床意义初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

急性缺血性脑卒中患者外周血miR-101-3p的表达水平及临床意义初探

作者：石小芳贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨急性缺血性脑卒中患者外周血mi R-101-3p表达水平与入院时不同严重程度的神经功能缺损评分(NIHSS评分)、脑梗死体积的相关性研究。方法:本研究选取2020年9月至2023年3月在贵州医科大学附属医院住院的73名急性缺血性脑卒中患者... 详细信息

目的:探讨急性缺血性脑卒中患者外周血mi R-101-3p表达水平与入院时不同严重程度的神经功能缺损评分(NIHSS评分)、脑梗死体积的相关性研究。方法:本研究选取2020年9月至2023年3月在贵州医科大学附属医院住院的73名急性缺血性脑卒中患者资料为病例组,对照组为无急性缺血性脑卒中人员51名,进行一般基线资料分析,并对病例组与对照组进行RT-q pCR分别为73名、32名,运用RT-q pCR测定实验组与对照组血浆的mi R-101-3p表达量的关系,及各病例组亚组之间表达量的关系。急性缺血性脑卒中患者在不同治疗方式下的mi R-101-3p表达变化;分析急缺血性脑卒中患者血浆中的mi R-101-3p水平与神经功能缺损评分(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)、梗死体积关系的相关性分析。结果:(1)病例组与对照组的患者的性别(Gender)、年龄(Age)、体重指数(BMI)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、甘油三酯(TG)无统计差异(p>0.05),而在总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、脂蛋白a(LpA)、吸烟(Smoking)、饮酒(Drinking)、高血压(Hypertension)、糖尿病(Diabetes)具有差异(均为ppertension统计分析存在显著差异(p101-3p的表达水平在病例组为[0.037(0.004,0.112)]比对照组血浆的mi R-101-3p水平[1.016(0.826,1.279)]降低明显,差异有统计学意义(p=0.000)。(3)血浆的mi R-101-3p水平在组间进行性别间的两两多重比较:(1)在对照组中血浆mi R-101-3p男性表达量[1.002(0.897,1.183)]与女性表血浆达量[1.047(0.835,1.389)]无差异(p=0.732);(2)在病例组中,男性血浆的mi R-101-3p表达量[0.025(0.002,0.096)]较女性表达量[0.063(0.011,0.283)]低,统计分析有意义(p=0.001);(3)mi R-101-3p在病例组男性血浆表达量[0.025(0.002,0.096)]较对照组男性表达量[1.002(0.897,1.183)]减低,有统计学意义(p=0.000);(4)外周血浆mi R-101-3p表达水平在病例组中女性[0.063(0.011,0.283)]较对照组女性表达量[1.047(0.835,1.389)]明显减低,且有显著差异(p=0.000)。(4)以TOAST分型为依据,在病例组的各亚组分型中外周血mi R-101-3p在大动脉粥样硬化型(LAA)表达量[0.055(0.007,0.0.203)]、小动脉闭塞(SAA)[0.005(0.002,0.041)]、心源性栓塞型(CE)[0.037(0.003,0.150)]、其他原因型(SOE)[0.032(0.006,0.053)]、不明原因型(SUE)[0.174(0.012,0.339)]表达均较对照组的表达量[1.013(0.831,1.013)]呈下降趋势,且均有统计学意义(p=0.000),且组间两两多重比较,小动脉闭塞型(SAA)较动脉粥样硬化型(LAA)表达量下降差异分析有统计学意义(p=0.001)。(5)不同治疗方式分组,在病例组进行治疗前、后外周血mi R-101-3p表达对比,血管内治疗组血浆mi R-101-3p表达量[0.275(0.087,0.557)]、溶栓治疗组的外周血mi R-101-3p表达量[0.418(0.083,0.418)]均较治疗前组血浆中的mi R-101-3p表达水平[0.037(0.004,0.112)]升高,且存在有统计学差异(p=0.000),血管内治疗组与溶栓治疗组的mi R-101-3p表达量无统计学意义(p=0.707)。(6)对疾病严重程度、梗死体积观察指标进行Spearman相关性分析,结果提示,在病例组中入院神经功能缺损评分(NIHSS评分)即疾病严重程度与血浆mi R-101-3p表达水平呈负向强相关性(r=-0.631,p=0.000),梗死体积与血浆的mi R-101-3p表达量呈负向强相关性(r=-0.652,p=0.000)。结论:(1)血浆中mi R-101-3p的表达水平情况,可能反映了急性缺血性卒中患者治疗的有效性;(2)血浆中mi R-101-3p表达量可能成为急性缺血性卒中患者未来治疗评价的靶点或预后分子标志物。

关键词：急性缺血性脑卒中 mir-101-3p 神经功能缺损脑梗死体积

LncRNA GSEC通过mir-101-3p/pSpH/VEGF轴调控肝细胞癌进展的机制研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

LncRNA GSEC通过miR-101-3p/PSPH/VEGF轴调控肝细胞癌进展的机制...

作者：闵航武汉科技大学

学位级别：硕士

目的:长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)通过海绵吸附微小RNA(Micro RNA,mirNA)从而调控下游基因表达,构建细胞内竞争性内源性RNA(Competing endogenous RNAs,CeRNA)网络。长链非编码RNA GSEC(Gquadruplex forming sequence containing lncRNA,LncRNA GSEC)在多种癌症及疾病中异常表达,已有文献报道其在肝癌中表达上调,但其具体作用及其机制尚未阐明。本研究针对LncRNA GSEC通过mir-101-3p/pSpH/VEGF轴调控肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)进展的机制研究,阐明LncRNA GSEC和其下游基因pSpH(phosphoserine phosphatase)在肝细胞癌中的促癌机制和互作网络,为HCC的早期临床诊断和靶向治疗提供新的理论依据。方法:通过生物信息学网站构建ceRNA调控网络,通过RT-qpCR和Western blot实验验证pSpH和LncRNA GSEC在肝癌细胞与正常细胞中的表达水平,构建敲低与过表达pSpH和LncRNA GSEC的质粒,在SMMC-7721和Hep G2细胞系中分别构建敲低与过表达pSpH和LncRNA GSEC的稳转细胞系,并通过Western blot实验验证相关处理后与血管形成相关标志基因表达水平,通过基质胶血管形成实验、伤口愈合实验、Transwell基质胶实验以及集落形成实验来验证pSpH和LncRNA GSEC对肝癌细胞体外血管形成、迁移、侵袭和增殖能力的影响。通过RTqpCR实验验证mir-101-3p的内源性表达,在肝癌细胞系Hep G2和SMMC-7721中通过瞬时转染mir-101-3p的模拟物与抑制剂以及其对照组,通过Western blot实验验证相关操作后与血管形成相关标志基因表达水平,通过伤口愈合实验、Transwell基质胶实验验证mir-101-3p对肝癌细胞体外细胞迁移和侵袭能力影响。构建LncRNA GSEC与mir-101-3p结合位点、pSpH 3’UTR与mir-101-3p结合位点的野生型和突变型质粒,通过双荧光素酶报告基因(Luciferase)实验验证二者之间的结合。构建稳定敲低pSpH和LncRNA GSEC的SMMC-7721细胞系、构建在稳定敲低LncRNA GSEC基础上过表达pSpH的SMMC-7721细胞系,建立裸鼠皮下移植瘤模型,通过测量裸鼠肿瘤组织大小、体积以及免疫组化染色验证LncRNA GSEC和pSpH对肝癌细胞肿瘤发生的影响。设置回复实验在敲低LncRNA GSEC后过表达pSpH,在敲低LncRNA GSEC后转染mir-101-3p抑制剂,在过表达mir-101-3p后过表达pSpH。通过Western blot实验验证相关回复实验操作后与血管形成相关标志基因的表达变化,以及通过基质胶血管形成、伤口愈合、Transwell基质胶以及集落形成等体外实验进一步验证信号轴对肝细胞癌进展的影响。结果:通过RT-qpCR和Western blot实验,表明pSpH在肝癌细胞中表达上调,Western blot实验结果表明pSpH促进VEGF信号通路标志基因表达,基质胶血管形成实验、伤口愈合实验、Transwell基质胶实验以及集落形成实验结果表明pSpH可以促进肝癌细胞体外血管形成、迁移、侵袭和增殖能力。裸鼠皮下移植瘤实验结果表明敲低pSpH可以在体内抑制肝癌细胞的肿瘤发生。Luciferase实验结果表明pSpH 3’UTR与mir-101-3p存在结合位点。RT-qpCR实验结果表明mir-101-3p在肝癌细胞中表达下调,Western blot实验发现mir-101-3p抑制pSpH和VEGF信号通路标志基因表达,而过表达pSpH后基因表达水平得到一定回复,肝癌细胞体外实验结果表明过表达mir-101-3p抑制肝癌细胞体外血管形成、迁移、侵袭和增殖能力,而过表达pSpH则使血管形成、迁移、侵袭和增殖能力有所回复。Luciferase实验表明LncRNA GSEC与mir-101-3p存在结合位点,RT-qpCR实验结果显示LncRNA GSEC在肝癌细胞中表达上调,并且过表达mir-101-3p后LncRNA GSEC表达下调,而抑制mir-101-3p表达后LncRNA GSEC表达上调。生物信息学分析LncRNA GSEC主要定位于细胞质中。Western blot实验结果显示敲低LncRNA GSEC抑制pSpH和VEGF信号通路标志基因表达,而过表达pSpH或者抑制mir-101-3p则使相关基因表达得到部分回复。肝癌细胞体外实验结果表明敲低LncRNA GSEC后抑制肝癌细胞体外血管形成、迁移、侵袭和增殖能力,

关键词： LncRNA GSEC mir-101-3p pSpH VEGF 肝细胞癌