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mrna差别显示技术及其在生命科学中的应用

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生理科学进展 1997年第1期28卷 19-23页

作者：徐国恒凌雁万有王晓民北京医科大学神经科学研究中心河南医科大学病理学教研室

ｍＲＮＡ表达水平的变化决定细胞的功能状态。个体发育、细胞增殖分化与凋谢、生理刺激和药物治疗等过程，都会出现ｍＲＮＡ表达水平的变化。阐明这种变化有助于揭示细胞生理过程的分子机制。新近发展起来的ｍＲＮＡ差别显示技术为此提... 详细信息

ｍＲＮＡ表达水平的变化决定细胞的功能状态。个体发育、细胞增殖分化与凋谢、生理刺激和药物治疗等过程，都会出现ｍＲＮＡ表达水平的变化。阐明这种变化有助于揭示细胞生理过程的分子机制。新近发展起来的ｍＲＮＡ差别显示技术为此提供了强有力的工具。该技术无需更多的背景资料，可快速有效地分离表达水平出现差别的基因。

关键词： mrna差别显示生命科学方法技术

mrna差别显示技术在植物发育研究中的应用

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植物学通报 2001年第1期18卷 52-57页

作者：闫桂平马凤鸣韩天富李文华东北农业大学农学系哈尔滨150030 中国农业科学院作物育种栽培研究所北京100081

mrna差别显示技术是近年发展起来的研究基因表达差异的有效方法。它不仅可比较基因表达差异、追踪已知基因的表达情况 ,而且可作为寻找特异表达基因的重要手段。本文介绍此方法在植物春化作用、光周期反应、花发育、雄性不育、成熟、衰... 详细信息

mrna差别显示技术是近年发展起来的研究基因表达差异的有效方法。它不仅可比较基因表达差异、追踪已知基因的表达情况 ,而且可作为寻找特异表达基因的重要手段。本文介绍此方法在植物春化作用、光周期反应、花发育、雄性不育、成熟、衰老、种子发育和休眠及根发育等研究领域的应用概况。

关键词： mrna差别显示植物发育应用

白菜核雄性不育两用系花蕾的mrna差别显示及其cDNA差异片段分析

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2001年第6期27卷 596-600页

作者：曹家树叶纨芝张明曾广文浙江大学蔬菜研究所浙江杭州310029

用 m RNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总 RNA进行了比较分析 .在 6种反转录模板和 2 0种差异随机引物共 12 0种组合的选择扩增中共回收了 18个 c DNA差异片段 ,对其中 6个 c DNA差异片段进行 Northern验... 详细信息

用 m RNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总 RNA进行了比较分析 .在 6种反转录模板和 2 0种差异随机引物共 12 0种组合的选择扩增中共回收了 18个 c DNA差异片段 ,对其中 6个 c DNA差异片段进行 Northern验证 ,获得了一个白菜核雄性不育两用系可育株群并在花蕾中特异表达的阳性差异片段 ,简称为 B0 30 2 - 4 .Northern验证结果表明它在不育株中的表达受到了明显的抑制 ,其长度为 4 6 3bp.经 Gen Bank BLAST查询 ,它与拟南芥第一条染色体上编码细胞色素 P4 5 0的基因 CYP86 C4核苷酸序列有 84 .3%的同源性 .

关键词：白菜核雄性不育 mrna差别显示 cDNA差别片段两用系花蕾

mrna差别显示技术及其在植物逆境胁迫研究中的应用

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种子 2007年第11期26卷 77-79页

作者：徐小万曹必好陈国菊陈清华雷建军华南农业大学生物技术研究所广东广州510642 广东省农业蔬菜研究所广州510640

mrna差别显示技术是近年发展起来的一种用于分离和克隆正常与异常细胞之间差异表达基因的PCR方法,是目前筛选差异表达基因的有效方法之一。在此,介绍了mrna差别显示技术的原理、步骤、优缺点及其发展,并着重对其在植物逆境研究中的应用... 详细信息

mrna差别显示技术是近年发展起来的一种用于分离和克隆正常与异常细胞之间差异表达基因的PCR方法,是目前筛选差异表达基因的有效方法之一。在此,介绍了mrna差别显示技术的原理、步骤、优缺点及其发展,并着重对其在植物逆境研究中的应用现状及前景做了探讨。

关键词： mrna差别显示植物逆境胁迫

棉花洞A雄性不育系花药发育的mrna差别显示

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Acta Genetica Sinica 2002年第4期29卷 359-363页

作者：侯磊肖月华李先碧王文锋罗小英裴炎西南农业大学生物技术研究中心重庆400716

应用cDNA AFLP(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)技术 ,分析了棉花洞A雄性不育和可育材料在花药发育过程中花粉发育相关基因表达的差异。结果表明 :在花药发育的相同时期 ,不育和可育花粉cDNA AFLP的谱带在单核期的差异大于减数分... 详细信息

应用cDNA AFLP(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)技术 ,分析了棉花洞A雄性不育和可育材料在花药发育过程中花粉发育相关基因表达的差异。结果表明 :在花药发育的相同时期 ,不育和可育花粉cDNA AFLP的谱带在单核期的差异大于减数分裂期。在花粉发育过程中 ,花粉发育相关基因的表达具有时空特异性。共回收了 6 4条差异cDNA片段 ,随机选择 3个片段标记为探针 ,RNA斑点杂交分析表明 ,GHA2 7具有花器官组织特异性 ,仅在花器官中表达 ;GHA2 8、GHA4 7则具有花药组织特异性且仅在可育花药中表达。序列相似性比较表明 :GHA2 7与植物ADP ribosylationfactor (ARF)基因有较高的相似性 ,而GHA2 8、GHA4

关键词：棉花花粉发育基因表达 cDNA-AFLP 洞A雄性不育系 mrna差别显示

BTH诱导水稻对稻瘟病系统获得抗性的mrna差别显示分析

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无锡轻工大学学报（食品与生物技术） 2004年第1期23卷 25-29,35页

作者：饶志明董海涛庄杰云柴荣耀李德葆郑康乐江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214036 浙江大学农业部植物病理学重点实验室浙江杭州310029 中国水稻研究所国家水稻改良中心浙江杭州310006 浙江省农业科学院植物保护研究所浙江杭州310021

运用mrna差别显示技术对水稻感病品系G71受苯并噻二唑(Benzothiadiazole,BTH)诱导3d的应答反应进行了分析,从抗病及其相关基因保守结构域设计的10个引物组合的反应中获得了11个受BTH诱导的cDNA差异片段.反向Northern鉴定其中3个为阳性片... 详细信息

运用mrna差别显示技术对水稻感病品系G71受苯并噻二唑(Benzothiadiazole,BTH)诱导3d的应答反应进行了分析,从抗病及其相关基因保守结构域设计的10个引物组合的反应中获得了11个受BTH诱导的cDNA差异片段.反向Northern鉴定其中3个为阳性片段.Northern证实G71NBS14BI2的表达确实受BTH和稻瘟病菌的诱导.RFLP分析将G71NBS14BI2定位于水稻的第11条染色体上,且该片段座落于控制水稻穗瘟部分抗性的QTL区间.

关键词： BTH诱导水稻稻瘟病 mrna差别显示基因定位系统获得抗性

mrna差别显示技术对肝再生调控基因的研究

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生物技术通讯 1997年第1期8卷 10-13页

作者：邱兆华贺福初军事医学科学院放射医学研究所北京100850

以正常肝和再生肝为对比材料,利用mrna差别显示技术,研究肝再生过程中基因的差别表达,旨在从基因选择性表达水平上探讨肝再生调控机理。得到4种未知肝再生相关cDNA,完成其克隆与序列分析,其一在再生肝中的表达低于正常肝,余者则高于正... 详细信息

以正常肝和再生肝为对比材料,利用mrna差别显示技术,研究肝再生过程中基因的差别表达,旨在从基因选择性表达水平上探讨肝再生调控机理。得到4种未知肝再生相关cDNA,完成其克隆与序列分析,其一在再生肝中的表达低于正常肝,余者则高于正常肝。这些序列均已在EMBL(Europe Molecular Biology Laboratory)数据库中登录,登录号分别为X95721、X95722、X95723、X97973。

关键词：肝再生调控 mrna差别显示基因克隆核苷酸序列分析

利用mrna差别显示技术分离橡胶树死皮病相关cDNA

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热带作物学报 2002年第3期23卷 36-42页

作者：黄贵修吴坤鑫陈守才华南热带农业大学农学院海南儋州571737 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室海口571101

从中国热带农业科学院橡胶树早期预测试验地采集不同品系的橡胶树胶乳和树皮组织,分别提取纯化mrna合成cDNA第一链。通过4个简并锚定引物和10个随机引物进行PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现了至少4个差异DNA片段只在健康树中... 详细信息

从中国热带农业科学院橡胶树早期预测试验地采集不同品系的橡胶树胶乳和树皮组织,分别提取纯化mrna合成cDNA第一链。通过4个简并锚定引物和10个随机引物进行PCR扩增,经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现了至少4个差异DNA片段只在健康树中表达而在死皮树中没有出现。这4个差异DNA片段分别命名为Hb1(725bp),Hb2,Hb3,Hb4。对Hb1进行了分离、纯化,经Northern杂交证实,Hb1在健康树胶乳中表达活跃,而在死皮树胶乳中表达受到强烈抑制,表明Hb1是与死皮病相关的cDNA片段。进一步将Hb1片段进行回收和克隆,并进行DNA序列分析。序列在GenBank中进行BLAST分析未发现相关同源片段。死皮病相关cDNA片段的获得,将为分离全长死皮病相关基因,搞清该基因表达调控的机理提供条件,进而为从分子水平上阐明死皮病的致病机理打下基础。

关键词： mrna差别显示技术分离巴西橡胶树死皮病

壳寡糖诱导植物抗性相关基因mrna差别显示分析

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生物技术 2004年第6期14卷 5-7页

作者：冯斌王春晗陈娅斐白雪芳杜昱光中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连116023 辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连116029 中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连116023／／辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连116029

壳寡糖是一种天然的信号分子 ,可以诱导植物产生各种防御反应。该文利用mrna显示技术 ,研究壳寡糖引起的植物抗性相关基因的变化。以 50mg/l壳寡糖喷洒的烟草叶片为材料 ,分别提取处理 8h、7d和对照的叶片总RNA ,利用一个锚定引物和三... 详细信息

壳寡糖是一种天然的信号分子 ,可以诱导植物产生各种防御反应。该文利用mrna显示技术 ,研究壳寡糖引起的植物抗性相关基因的变化。以 50mg/l壳寡糖喷洒的烟草叶片为材料 ,分别提取处理 8h、7d和对照的叶片总RNA ,利用一个锚定引物和三个随机引物组合 ,通过mrna差别显示技术共获得壳寡糖处理后发生变化的 8h差别条带 2 2条 ,7d后的差别条带为 74条。将壳寡糖处理 8h得到的 1 7条差别条带克隆到载体上后 ,进行反向Northern鉴定 ,有 6条可能为真实条带。测序结果表明 :其中一条差别片段与烟草热激蛋白 90基因具有 97%的核苷酸同源性。说明 50mg/l壳寡糖处理的烟草叶片在mrna水平上发生了明显的变化 ,烟草的热激蛋白 90基因可能参与到壳寡糖诱导的抗性信号传导通路中。

关键词：壳寡糖抗性相关基因 mrna差别显示