检索结果-南通市图书馆

巨噬细胞对内皮细胞系同源盒B2基因和血管内皮生长因子受体mrna及整合素ανβ3表达的影响

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中华烧伤杂志 2005年第3期21卷 199-202页

作者：刘亮刘畅张晓启明佳刘旭盛徐辉程天民第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 南京军区总医院干部肿瘤科解放军第二三四医院烧伤科第三军医大学全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室南方医科大学南方医院烧伤科

目的　体外观察巨噬细胞(M)对血管内皮细胞同源盒(HOX)B2基因mrna和血管内皮生长因子(VEGF)受体KDRmrna及整合素ανβ3表达的影响。　方法　体外培养人脐静脉血管内皮细胞系ECV304,分为(1)ECV304组; (2)ECV304 +伴刀豆球蛋白A(conA,... 详细信息

目的　体外观察巨噬细胞(M)对血管内皮细胞同源盒(HOX)B2基因mrna和血管内皮生长因子(VEGF)受体KDRmrna及整合素ανβ3表达的影响。　方法　体外培养人脐静脉血管内皮细胞系ECV304,分为(1)ECV304组; (2)ECV304 +伴刀豆球蛋白A(conA,终浓度25mg/L)组; (3)ECV304+人M系U937组:ECV304细胞中加入1×105 /mlU937细胞; (4)ECV304+U937+conA组:ECV304中加入1×105 /mlU937细胞及终浓度25mg/L的conA.反应48h后,用免疫荧光技术检测各组ECV304细胞整合素ανβ3的表达情况,并用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术检测细胞KDRmrna和HOXB2基因mrna的表达水平。　结果　ECV304组细胞的整合素ανβ3、KDRmrna及HOXB2基因mrna的表达水平分别为6. 7±1. 5、0. 633±0. 012、0. 674±0. 004。ECV304+U937+conA组细胞上述指标较ECV304组均明显上调(P0. 05).结论　被conA活化的M通过影响内皮细胞的KDRmrna、HOXB2mrna基因及整合素ανβ3的表达,来促进内皮细胞增殖、迁移及与基质黏附,从而调节血管生成。

关键词：整合素αvβ3 受体mrna 同源盒血管内皮生长因子(VEGF) B2基因 ECV304细胞基因mrna 逆转录聚合酶链反应巨噬细胞(Mφ) U937细胞 HOXB2 血管内皮细胞系伴刀豆球蛋白 conA活化 mrna基因内皮细胞增殖技术检测受体KDR

mrna差异显示技术克隆中国葡萄属野生种核糖体RNA基因

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西北植物学报 2005年第11期25卷 2163-2167页

作者：张今今王跃进西北农林科技大学园艺学院

克隆功能基因是研究植物基因结构及功能的重要途径.利用mrna差异显示技术,筛选获得了中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1在人工接种白粉菌前后差异表达基因的cDNA片段V prdrf4.经N orthern杂交验证,该片段为正调控片段,B last检索表明... 详细信息

克隆功能基因是研究植物基因结构及功能的重要途径.利用mrna差异显示技术,筛选获得了中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1在人工接种白粉菌前后差异表达基因的cDNA片段V prdrf4.经N orthern杂交验证,该片段为正调控片段,B last检索表明与真核生物核糖体RNA基因的同源性高达90%以上,G enB ank登录号为CD 347664.

关键词：核糖体 mrna基因 mrna差异显示中国葡萄属野生种

凋亡相关基因Bcl-2mrna在胃癌中的表达

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江苏医药 2006年第2期32卷 194-194页

作者：苏华陈琛陈秀玲张江兰杨燕君薄爱华张晓丽邢立强河北北方学院医学检验系 075029

Bcl—2 mrna基因是目前公认的细胞凋亡调节基因，在各种肿瘤中均有不同程度表达。本实验应用原位杂交技术对胃癌组织中Bcl-2 mrna基因的表达进行研究，探讨其在胃癌中的表达与胃癌的发生、发展以及预后的关系，为临床治疗和判断预后提... 详细信息

Bcl—2 mrna基因是目前公认的细胞凋亡调节基因，在各种肿瘤中均有不同程度表达。本实验应用原位杂交技术对胃癌组织中Bcl-2 mrna基因的表达进行研究，探讨其在胃癌中的表达与胃癌的发生、发展以及预后的关系，为临床治疗和判断预后提供依据。

关键词：基因Bcl-2 mrna基因胃癌组织凋亡相关细胞凋亡调节基因原位杂交技术判断预后不同程度实验应用

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肿瘤个体化治疗的现状和前景

中华检验医学杂志 2011年第4期34卷 293-299页

作者：韩晓红马丽石远凯北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所内科 100021 北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所检验科100021 中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所内科北京协和医学院 100021

20世纪70年代以来,人类基因组研究成果斐然,肿瘤基因组学、RNA组学和蛋白质组学等基础研究向临床实践拓展,使传统经验治疗模式逐渐向依据生物标志物的个体化治疗模式转变.越来越多的临床研究证实,通过检测肿瘤患者生物标本中生物标志物... 详细信息

20世纪70年代以来,人类基因组研究成果斐然,肿瘤基因组学、RNA组学和蛋白质组学等基础研究向临床实践拓展,使传统经验治疗模式逐渐向依据生物标志物的个体化治疗模式转变.越来越多的临床研究证实,通过检测肿瘤患者生物标本中生物标志物的基因突变、基因SNP分型、mrna基因定量表达及蛋白表达状态可预测药物疗效和评价预后,指导临床个体化治疗,从而提高疗效,减轻不良反应,促进医疗资源的合理利用[1].随着个体化治疗时代的到来,诊断病理学进入了分子病理学时代,临床检测技术也随着生物标志物不同而呈现多样化.

关键词：个体化治疗肿瘤基因组学 mrna基因生物标志物人类基因组临床实践药物疗效检测技术

Cyclin D1、P16 mrna在急性白血病检测中的意义

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中华血液学杂志 2008年第11期29卷 770-772页

作者：尹列芬申政磊沈秀芬崔萌萌程丽芳佟力杨玲昆明医学院第二附属医院血液科 650101 昆明医学院第一附属医院血液科昆明医学院第三附属医院血液科

细胞周期蛋白（Cyclins）、依赖于细胞周期蛋白的激酶（Cyclin-dependent kinases，CDK）以及CDK抑制剂（Cyclin-dependent kinases inhibitors，CKI）三者活性调节的平衡是细胞正常生长增殖所必需，而任何导致Cyclins过表达或CKI失表... 详细信息

细胞周期蛋白（Cyclins）、依赖于细胞周期蛋白的激酶（Cyclin-dependent kinases，CDK）以及CDK抑制剂（Cyclin-dependent kinases inhibitors，CKI）三者活性调节的平衡是细胞正常生长增殖所必需，而任何导致Cyclins过表达或CKI失表达、失活均可能引起细胞增殖失控产生肿瘤，因而Cyclin D1及属于CKI家族的P16均被认为是潜在的肿瘤相关基因。为探讨Cyclin D1、P16 mrna基因在急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（MNC）中的表达及其临床意义，我们采用实时定量RT-PCR方法检测51例AL患者骨髓MNC中Cyelin D1、P16 mrna的表达水平并分析其临床意义及二者间的相互作用。

关键词： Cyclins mrna基因急性白血病 P16 检测 kinases 骨髓单个核细胞细胞周期蛋白

中国明对虾卵黄蛋白原mrna在卵巢和肝胰腺中的表达量研究

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中国明对虾卵黄蛋白原mRNA在卵巢和肝胰腺中的表达量研究

作者：程翔上海海洋大学

学位级别：硕士

卵黄是对虾胚胎和无节幼体早期发育主要的营养来源。卵黄磷蛋白是所有卵生雌性动物卵黄的主要成分。十足目甲壳动物的卵黄磷蛋白（vitellin,Vn）是一种高分子量的脂-糖-类胡萝卜素蛋白。卵黄磷蛋白是由其前体-卵黄蛋白原（vitellogenin... 详细信息

卵黄是对虾胚胎和无节幼体早期发育主要的营养来源。卵黄磷蛋白是所有卵生雌性动物卵黄的主要成分。十足目甲壳动物的卵黄磷蛋白（vitellin,Vn）是一种高分子量的脂-糖-类胡萝卜素蛋白。卵黄磷蛋白是由其前体-卵黄蛋白原（vitellogenin,Vg）释放到血淋巴中被卵母细胞吸收后加工（主要是糖基化）形成。卵黄蛋白原合成部位因种类不同而不同。甲壳动物的卵巢,脂肪组织和肝胰腺都可能是合成卵黄蛋白原的部位,而大多数的昆虫则主要靠脂肪体合成。近年来在对中国明对虾的研究表明:卵巢和肝胰腺都是卵黄蛋白原的合成部位,但是对中国明对虾这两种组织在不同卵巢发育阶段卵黄蛋白原合成的定量研究还很少。本实验采用敏感性和特异性都很高的实时荧光定量PCR的研究方法,测定了雌性中国明对虾在卵巢发育的5个不同时期,卵巢和肝胰腺卵黄蛋白原mrna的相对表达水平。定量分析了卵巢和肝胰腺两组织在卵巢发育过程中卵黄蛋白原mrna的表达差异。本研究结果对阐明中国明对虾的卵黄蛋白原来源及合成过程具有重要意义,进而为人工繁殖的生产实践提供基础的理论依据。通过对中国明对虾解剖观察,将卵巢分为前叶,中叶,侧叶,后叶前部和后叶后部共5个部位。分别用固定液固定然后石蜡切片,苏木精伊红染色封片后显微镜观察。根据卵巢的颜色,性腺指数,以及卵细胞直径,核径等特征进行卵巢发育分期。结果可知:卵巢发育可分为5个时期:卵原细胞增殖期、卵黄发生前期、初级卵黄发生期、次级卵黄发生期和消退期。绝大多数采样虾卵巢的5个不同部位的卵细胞特征类似,处于同一个卵巢发育时期,少数卵巢的后叶后部发育慢于其他四个部位一个时期。说明中国明对虾卵巢头胸部部分有先于腹部部分（腹叶）成熟的发育不同步现象。中国明对虾的卵巢发育分期后,采用实时荧光定量PCR的相对定量方法测定了卵巢和肝胰腺中卵黄蛋白原mrna在5个卵巢发育时期的相对表达水平。提取5个时期卵巢和肝胰腺两个组织的总RNA,设计目的基因卵黄蛋白原mrna和内标基因18S ribosomal RNA的特异性的引物,优化荧光定量PCR的扩增体系和反应条件后进行扩增,然后对卵黄蛋白原mrna表达进行相对定量分析。结果表明:在卵巢发育的5个阶段,卵巢和肝胰腺中都有卵黄蛋白原mrna表达,更进一步证明卵巢和肝胰腺都是卵黄蛋白原的合成位点。在卵巢中,从卵原细胞增殖期到初级卵黄发生期,卵黄蛋白原mrna随着卵巢发育表达量呈上升趋势,原始表达量分别为:0.04、0.23和1.03,而在次级卵黄发生期卵黄蛋白原mrna的表达量急剧减少到0.16,消退期的表达量又显著增加到1.00。初级卵黄发生期和消退期的卵黄蛋白原mrna表达量相对较高,次级卵黄发生期和卵黄发生前期表达量比较低。在肝胰腺中,从卵原细胞增殖期到次级卵黄发生期,随着卵巢的发育卵黄蛋白原mrna表达量呈上升趋势,原始表达量分别为:0.01、0.07、0.19和1.29。消退期的卵黄蛋白原mrna表达量减少到0.74。次级卵黄发生期的卵黄蛋白原mrna表达量最高,消退期次之,卵原细胞增殖期和卵黄发生前期卵黄蛋白原mrna表达量很低。卵巢和肝胰腺的表达量比较可知,除了次级卵黄发生期,其他4个时期,卵巢中的卵黄蛋白原mrna表达量都比肝胰腺多。卵原细胞增殖期,卵黄发生前期,初级卵黄发生期,消退期卵巢中的卵黄蛋白原mrna表达量分别是肝胰腺的4倍,3.2倍,5.4倍和1.3倍;而在次级卵黄发生期,肝胰腺中的表达量明显比卵巢高,前者是后者的8.2倍。在两种组织相互互补的作用下,从初级卵黄发生期到消退期,卵巢和肝胰腺中的卵黄蛋白原mrna表达量总体都保持在较高水平。

关键词：中国明对虾卵黄蛋白原 mrna基因卵巢肝胰腺

维生素D3诱导U937细胞表达CD14蛋白的方法

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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华南国防医学杂志 2005年第1期19卷 16-17,F003页

作者：陈莉龚建平王晓丽朱谨韩本立第三军医大学西南医院重庆400038 重庆医科大学附属第二医院

目的探讨维生素D3诱导的U937细胞CD14蛋白表达的方法及其对内毒素刺激的反应性。方法用(0.1μMol)VitD3 与U937细胞共同培养24h以诱导其表达CD14基因,使其产生CD14蛋白,并观察U937细胞对不同浓度LPS刺激不同时间后的反应。结果发现VitD... 详细信息

目的探讨维生素D3诱导的U937细胞CD14蛋白表达的方法及其对内毒素刺激的反应性。方法用(0.1μMol)VitD3 与U937细胞共同培养24h以诱导其表达CD14基因,使其产生CD14蛋白,并观察U937细胞对不同浓度LPS刺激不同时间后的反应。结果发现VitD3能稳定诱导U937细胞表达CD14 mrna基因和CD14蛋白,转型的U937/CD14细胞显著增加了对LPS刺激的敏感性,表现为低浓度LPS刺激能诱导其细胞核中NF-kB激活,指导TNF-α的mrna的转录和表达,进一步合成和释放TNF-α。结论U937细胞是研究CD14在LPS介导MO激活的理想细胞模型,维生素D3能诱导U937细胞CD14基因和蛋白的表达,并增加其对内毒素刺激的反应性。

关键词： CD14蛋白维生素D3 细胞表达 U937细胞 CD14基因内毒素刺激 TNF-a mrna基因 VitD3 LPS 蛋白表达共同培养不同时间不同浓度细胞模型反应性 24h 敏感性 4细胞细胞核低浓度激活

API_(0134)对凝血酶诱导内皮细胞表达c-sis mrna/PDGF-B链蛋白的影响

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中药药理与临床 1998年第3期14卷 13-15页

作者：王宏伟赵华月熊一力同济医科大学附属同济医院心内科

用免疫组化和原位杂交方法观察了ＡＰＩ０１３４（ＡＰＩ）对凝血酶诱导猪主动脉内皮细胞表达原癌基因ｃｓｉｓｍＲＮＡ和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ｂ链蛋白的影响。结果表明，凝血酶能诱导内皮细胞ｃｓｉｓｍＲＮＡ转录和促... 详细信息

用免疫组化和原位杂交方法观察了ＡＰＩ０１３４（ＡＰＩ）对凝血酶诱导猪主动脉内皮细胞表达原癌基因ｃｓｉｓｍＲＮＡ和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ｂ链蛋白的影响。结果表明，凝血酶能诱导内皮细胞ｃｓｉｓｍＲＮＡ转录和促进ＰＤＧＦＢ链蛋白表达，ＡＰＩ则能显著抑制凝血酶的上述诱导作用，剂量增大抑制作用增强。

关键词： API0134 内皮细胞凝血酶血小板源生长因子抗动脉粥样硬化再狭窄血管成形术免疫组织化学 c-sis mrna基因 PDGF-B链蛋白

TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应在强直性脊柱炎IL-2Rαmrna检测的应用价值

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检验医学教育 2005年第1期12卷 36-40页

作者：骆方军吕建新温州医学院检验医学院浙江温州325035

目的:利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mrna的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析。方法:用 Primer Express v2.0软件,根据GenBank提供的序列,... 详细信息

目的:利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mrna的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析。方法:用 Primer Express v2.0软件,根据GenBank提供的序列,在人IL-2Rα mrna的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA,加入已优化的一步法FQ-RT-PCR反应体系,扩增产物经凝胶电泳后切胶回收,并与pUCm-T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后,用T7RNA聚合酶转录为cRNA,作为FQ-RT-PCR系列浓度标准品。评价FQ-RT-PCR检测 IL-2Rα mrna的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA-B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2Rα mrna基因的表达水平,结合血浆可溶性白细胞介素-2受体 (sIL-2R)浓度,探讨与炎症活动的相互关系。结果:成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7～107 cells/ml,其批内CV8.4%,批间CV9.6%;扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析,证实为IL- 2Rα mrna特异性片段。对各30例HLA-B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明:与正常人对照组结果比较,HLA-B27阳性组与HLA-B27阴性组IL-2Rα mrna和sIL-2R都有明显增加(Pmrna对炎症活动评价的灵敏度为96.7%。结论:FQ-RT-PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL- 2Rα mrna与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态,可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。

关键词：实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 IL-2Rα 强直性脊柱炎 TaqMan mrna检测应用价值可溶性白细胞介素-2受体外周血单个核细胞 sIL-2R Express PCR反应体系特异性片段 RNA聚合酶 mrna基因基因表达水平扩增产物 cRNA